Nghiên cứu cây Hedyotis Dichotoma keon

Chương 2


NGHIÊN CỨU
VÀ
KẾT QUẢ





Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
22
2.1. THU HÁI VÀ XỬ LÝ MẪU
Cây An điền lưỡng phân được thu hái ở tỉnh Bình Phước. Cây đã được nhận
danh tên khoa học là Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth bởi PGS. TS. Trần Hợp,
Khoa Sinh, Đại học Khoa học Tự nhiên Thành phố Hồ Chí Minh. Cây được lưu
trong quyển lưu giữ tiêu bản thực vật, ký hiệu mẫu số US-C020, giữ tại phòng thí
nghiệm Hóa Hữu cơ, Khoa Hóa, Đại học Khoa học Tự nhiên Thành phố Hồ Chí
Minh.
15 kg cây tươi An điền lưỡng phân được rửa sạch, phơi khô, cắt nhuyễn, thu
được bột cây khô 1,64 kg.
2.2. ĐIỀU CHẾ CÁC LOẠI CAO
Bột cây khô được trích kiệt bằng etanol theo phương pháp ngâm dầm, lọc, cô
quay, thu hồi dung môi, thu được cao etanol thô 100,92 g. Cao etanol thô được trích
pha rắn trên silica gel, giải ly lần lượt bằng các đơn dung môi có độ phân cực tăng
dần: eter dầu hỏa, cloroform, etyl acetat và metanol. Quy trình điều chế và thu suất
các loại cao được trình bày trong sơ đồ 2.1 và bảng 2.1. Các cao được theo dõi bằng
sắc kí lớp mỏng được trình bày trong hình 2.1.
Bảng 2.1: Khối lượng và thu suất các loại cao thu được từ cao etanol ban đầu.

Các loại cao Ký hiệu cao Khối lượng (g) Thu suất (%)
Eter dầu hỏa E 3,21 3,18
Cloroform A C
A
3,91 3,87
Cloroform B C
B
B
5,49 5,44
Etyl acetat A A
A
5,98 5,93
Etyl acetat B A
B
0,112 0,11
Etyl acetat C A
C
8,96 8,88
Metanol M 50,83 50,37


Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
23
Sơ đồ 2.1: Quy trình điều chế các loại cao từ cây An điền lưỡng phân bằng phương
pháp trích pha rắn trên silica gel.

Ngâm trích với etanol
Lọc, cô quay thu hồi dung môi
Giải ly bằng cloroform
Cô quay thu hồi dung môi

Giải ly bằng eter dầu hỏa
Cô quay thu hồi dung môi
Giải ly bằng metanol
Cô quay thu hồi dung môi
Giải ly bằng etyl acetat
Cô quay thu hồi dung môi
Cao cloroform A (3,91 g)
Cao cloroform B (5,49 g)
Cao etyl acetat A (5,98 g)
Cao etyl acetat B (112 mg)
Cao etyl acetat C (8,96 g)
Cột còn lại
Cột bỏ
Bột cây khô (1,64 kg)
Cao etanol (100,92 g)
Cao eter dầu hỏa
(3,21 g)
Cột còn lại
Cột còn lại
Cao metanol
(50,83 g)




Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
24

(a) (b)
Hình 2.1: Sắc kí lớp mỏng các loại cao điều chế theo sơ đồ 2.1

Ghi chú:

E: cao eter dầu hỏa
C
A
: cao cloroform A
C
B
: cao cloroform B
B
M: cao metanol

A
A
: cao etyl acetat A
A
B
: cao etyl acetat B
(Hợp chất Dichoto-Ace1)
A
C
: cao etyl acetat C
Hệ dung môi giải ly: (a) cloroform : metanol (8:2)
(b) cloroform : metanol : nước (14:6:1)
Thuốc thử hiện hình: dung dịch H
2
SO
4
50%

2.3. TRÍCH LY, CÔ LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT HỮU CƠ TRONG CÂY AN
ĐIỀN LƯỠNG PHÂN
2.3.1. Sắc kí cột silica gel trên cao cloroform A của sơ đồ 2.1
Cao cloroform A (3,91 g) được sắc kí cột silica gel, giải ly bằng các hệ dung
môi có tính phân cực tăng dần từ benzen đến metanol. Dung dịch giải ly được hứng
vào các lọ (mỗi lọ 100 ml), cô quay. Chấm sắc kí lớp mỏng, các lọ có sắc kí lớp

Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
25
mỏng giống nhau được gom thành một phân đoạn. Kết quả sắc kí cột được trình bày
trong bảng 2.2.
Bảng 2.2: Kết quả sắc kí cột silica gel trên cao cloroform A của sơ đồ 2.1.
Phân
đoạn
Dung môi giải ly
Khối lượng
(mg)
Nhận xét
(Trên sắc kí lớp mỏng)
1 B 1019,4
Có một vết tròn đen, khảo
sát thu được Dichoto-Clo1.
2 B:C (99:1), B:C (98:2) 409,5 Nhiều vết. Không khảo sát.
3
B:C (95:5), B:C (90:10),
B:C (80:20), B:C (50:50)
616,7 Nhiều vết. Không khảo sát.
4
C, C:M (90:10),
C:M (80:20), M

1025,6 Nhiều vết. Không khảo sát.
Ghi chú: B: benzen C: cloroform M: metanol
Cao ở phân đoạn 1 của bảng 2.2 có dạng sáp màu vàng xanh, sắc kí lớp mỏng
có một vết tròn màu đen nên được chọn khảo sát. Tiến hành sắc kí điều chế nhiều
lần, kết tinh lại trong cloroform thu được chất rắn màu trắng, dạng bột. Hợp chất
này được ký hiệu là Dichoto-Clo1. Kết quả sắc kí lớp mỏng của hợp chất này được
trình bày trong hình 2.2.
2.3.2. Sắc kí cột silica gel trên cao cloroform B của sơ đồ 2.1
Cao cloroform B (5,49 g) được nạp vào đầu cột sắc kí, giải ly lần lượt bằng các
dung môi có độ phân cực tăng dần từ benzen, cloroform đến metanol. Dung dịch
giải ly được hứng vào các lọ, mỗi lọ 100 ml, cô quay thu hồi dung môi, chấm sắc kí
lớp mỏng. Các lọ có kết quả sắc kí lớp mỏng giống nhau được gom thành một phân
đoạn. Kết quả sắc kí cột được trình bày trong bảng 2.3.



Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
26


(a) (b)
Hình 2.2: Sắc kí lớp mỏng của các hợp chất
Dichoto-Clo1, Dichoto-Clo2, Dichoto-Clo3

Ghi chú:

C
A
: cao cloroform A
C1: Hợp chất Dichoto-Clo1

C2: Hợp chất Dichoto-Clo2
C3: Hợp chất Dichoto-Clo3

(a) Hệ dung môi giải ly: cloroform : etyl acetat (8:2)
Thuốc thử hiện hình: dung dịch H
2
SO
4
50%
(b) Hệ dung môi giải ly: etyl acetat
Thuốc thử hiện hình: dung dịch FeCl
3
/EtOH

2.3.2.1. Khảo sát phân đoạn 2 của bảng 2.3
Phân đoạn 2 của bảng 2.3 được sắc kí cột nhiều lần, sắc kí điều chế và kết tinh
lại trong cloroform thu được tinh thể hình kim, màu vàng. Hợp chất này được ký

Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
27
hiệu là Dichoto-Clo2. Kết quả sắc kí lớp mỏng của hợp chất này được trình bày
trong hình 2.2.
Bảng 2.3: Kết quả sắc kí cột silica gel trên cao cloroform B của sơ đồ 2.1.
Phân
đoạn
Dung môi giải ly
Khối lượng
(mg)
Nhận xét

(Trên sắc kí lớp mỏng)
1
B, B:C (99:1),
B:C (98:2), B:C (95:5)
319,4 Nhiều vết. Không khảo sát.
2
B:C (90:10),
B:C (80:20), B:C (50:50)
179,0
Có một vết chính. Khảo
sát thu được Dichoto-Clo2
3
C, C:M (99:1),
C:M (98:2), C:M (95:5)
2028,7
Có một vết chính. Khảo
sát thu được Dichoto-Clo3
4
C:M (90:10), C:M (80:20),
C:M (50:50), M
674,4 Nhiều vết. Không khảo sát.
Ghi chú: B: benzen C: cloroform M: metanol
2.3.2.2.
Khảo sát phân đoạn 3 của bảng 2.3
Khi cô quay thu hồi dung môi các lọ thuộc phân đoạn 3 của bảng 2.3, thấy
xuất hiện kết tủa màu trắng hơi lẫn màu xanh, khối lượng 200,3 mg. Rửa tủa nhiều
lần bằng cloroform, sau đó sắc kí cột thu được tinh thể hình kim, màu trắng. Hợp
chất này được ký hiệu là Dichoto-Clo3. Kết quả sắc kí lớp mỏng của hợp chất này
được trình bày trong hình 2.2.
2.3.3. Sắc kí cột silica gel trên cao etyl acetat A của sơ đồ 2.1

Cao etyl acetat A (5,98 g) được nạp vào đầu cột sắc kí, giải ly lần lượt bằng
các dung môi có độ phân cực tăng dần từ cloroform, etyl acetat đến metanol. Dung
dịch giải ly được hứng vào các lọ, mỗi lọ 100 ml, cô quay thu hồi dung môi, chấm
sắc kí lớp mỏng. Các lọ có kết quả sắc kí lớp mỏng giống nhau được gom thành một
phân đoạn. Kết quả sắc kí cột được trình bày trong bảng 2.4.

Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
28
Bảng 2.4: Kết quả sắc kí cột silica gel trên cao etyl acetat A của sơ đồ 2.1.
Phân
đoạn
Dung môi giải ly
Khối lượng
(mg)
Nhận xét
(Trên sắc kí lớp mỏng)
1 C 244,9 Nhiều vết. Không khảo sát.
2
C:A (99:1), C:A (98:2),
C:A (95:5)
94,7 Nhiều vết. Không khảo sát.
3 C:A (90:10), C:A (80:20) 490,6 Nhiều vết. Không khảo sát.
4 C:A (50:50) 1331,1
Có một vết màu hồng. Khảo
sát thu được Dichoto-Ace1.
5
A, A:M (98:2),
A:M (95:5), A:M (90:10)
A:M (80:20), M
1918,0 Nhiều vết. Không khảo sát.

Ghi chú: A: etyl acetat C: cloroform M: metanol
Phân đoạn 4 khi sắc kí lớp mỏng cho vết màu hồng rõ ràng nên được chọn
khảo sát tiếp. Tiến hành sắc kí cột nhiều lần phân đoạn 4, sau đó sắc kí điều chế thu
được chất rắn màu trắng dạng bột, ký hiệu là Dichoto-Ace1. Kết quả sắc kí lớp
mỏng của hợp chất này được trình bày trong hình 2.3.
2.3.4. Khảo sát cao etyl acetat B của sơ đồ 2.1
Cao etyl acetat (112 mg) thu được từ sơ đồ 2.1 là chất bột khô màu trắng. Sắc
kí lớp mỏng, hiện hình với thuốc thử H
2
SO
4
50%, cao cho thấy có một vết tròn,
màu hồng nhưng vết còn hơi bẩn.
Tiến hành sắc kí điều chế, giải ly bằng metanol, thu được chất rắn màu trắng
(20 mg), hợp chất này được đặt tên là Dichoto-Ace2. Kết quả sắc kí lớp mỏng của
hợp chất này được trình bày trong hình 2.3.



Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
29

(a) (b) (c)
Hình 2.3: Sắc kí lớp mỏng hợp chất Dichoto-Ace1,
Dichoto-Ace2, Dichoto-Ace3, Dichoto-Ace4, Dichoto-Me1.

Ghi chú:

A1: Hợp chất Dichoto-Ace1
A2: Hợp chất Dichoto-Ace2

A3: Hợp chất Dichoto-Ace3
A4: Hợp chất Dichoto-Ace4
T: Tủa bảng 2.6
M1: Hợp chất Dichoto-Me1
Hệ dung môi giải ly: (a) cloroform : metanol (8:2)
(b) cloroform : metanol : nước (80:18:2)
(c) cloroform : metanol : nước (14:6:1)
Thuốc thử hiện hình: dung dịch H
2
SO
4
50%

2.3.5. Sắc kí cột silica gel trên cao etyl acetat C của sơ đồ 2.1
Cao etyl acetat C (8,96 g) của sơ đồ 2.1 được sắc kí cột silica gel, giải ly lần
lượt bằng các dung môi có độ phân cực tăng dần từ cloroform, etyl acetat đến

Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
30
metanol. Dung dịch giải ly được hứng vào các lọ, mỗi lọ 100 ml, cô quay thu hồi
dung môi, chấm sắc kí lớp mỏng. Các lọ có kết quả sắc kí lớp mỏng giống nhau
được gom thành một phân đoạn. Kết quả sắc kí cột được trình bày trong bảng 2.5.
Bảng 2.5: Kết quả sắc kí cột silica gel trên cao etyl acetat C của sơ đồ 2.1.
Phân
đoạn
Dung môi giải ly
Khối lượng
(mg)
Nhận xét
(Trên sắc kí lớp mỏng)

1
C, C:M (99:1),
C:M (98:2), C:M (95:5)
130,0 Nhiều vết. Không khảo sát.
2 C:M (90:10), C:M (80:20) 189,7 Nhiều vết. Không khảo sát.
3 C:M (80:20) 733,8 Nhiều vết. Không khảo sát.
4 C:M (80:20), C:M (50:50) 2879,0
Nhiều vết rõ rệt, khảo sát.
5 C:M (50:50) 948,0 Khảo sát tủa trắng.
6 M 1018,2 Nhiều vết. Không khảo sát.
Ghi chú: C: cloroform M: metanol
2.3.5.1.
Khảo sát phân đoạn 4 của bảng 2.5
Sắc kí cột nhiều lần phân đoạn 4 của bảng 2.5 thu được kết tủa màu vàng. Sắc
kí lớp mỏng kết tủa này, với dung môi giải ly (cloroform:metanol:nước) (80:18:2),
hiện hình bằng dung dịch H
2
SO
4
50%, thấy một vết màu đen nhưng còn hơi dơ. Do
đó, kết tủa này được sắc kí cột silica gel pha đảo, giải ly bằng dung môi có độ phân
cực giảm dần từ hỗn hợp metanol: nước (1:3) đến metanol, thu được chất bột màu
trắng ký hiệu là Dichoto-Ace3. Kết quả sắc kí lớp mỏng của hợp chất này được
trình bày trong hình 2.3.
2.3.5.2.
Khảo sát phân đoạn 5 của bảng 2.5
Cô quay phân đoạn 5 của bảng 2.5 thấy xuất hiện kết tủa màu trắng. Rửa tủa
nhiều lần bằng metanol, sau đó sắc kí cột pha đảo tủa này, giải ly bằng metanol thu

Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả

31
được chất bột màu trắng ký hiệu là Dichoto-Ace4. Kết quả sắc kí lớp mỏng của hợp
chất này được trình bày trong hình 2.3.
2.3.6. Sắc kí cột silica gel trên cao metanol của sơ đồ 2.1
Tiến hành sắc kí cột silica gel trên cao metanol (50,83 g) của sơ đồ 2.1, giải ly
lần lượt bằng các hỗn hợp dung môi (cloroform: metanol: nước) có độ phân cực
tăng dần lần lượt theo tỉ lệ (80:18:2), (70:27:3), (14:6:1), (6:4:1). Dung dịch giải ly
được hứng vào các lọ, mỗi lọ 200 ml, cô quay thu hồi dung môi, chấm sắc kí lớp
mỏng. Các lọ có kết quả sắc kí lớp mỏng giống nhau được gom thành một phân
đoạn. Kết quả sắc kí cột được trình bày trong bảng 2.6.
Phân đoạn 4 của bảng 2.6 xuất hiện kết tủa màu trắng. Lọc tủa ra khỏi dịch
trích, rửa tủa nhiều lần bằng metanol, sau đó sắc kí cột pha đảo tủa này. Sắc kí lớp
mỏng pha đảo trên tủa này thấy có nhiều vết, trong đó có một vết tròn màu hồng rõ.
Vì vậy, tiến hành sắc kí cột pha đảo trên tủa này, giải ly bằng dung môi có độ phân
cực giảm dần từ hỗn hợp metanol: nước (1:3) đến metanol, thu được chất bột màu
trắng ký hiệu là Dichoto-Me1.
Bảng 2.6: Kết quả sắc cột silicagel trên cao metanol của sơ đồ 2.1.
Phân
đoạn
Dung môi giải ly
Khối lượng
(g)
Nhận xét
(Trên sắc kí lớp mỏng)
1 C:M:H (80:18:2) 1,99 Vết rõ rệt. Khảo sát sau
2 C:M:H (80:18:2) 1,98 Vết rõ rệt. Khảo sát sau
3 C:M:H (80:18:2) 3,45 Vết rõ rệt. Khảo sát sau
4 C:M:H (70:27:3) 5,35
Xuất hiện tủa trắng. Khảo
sát thu được Dichoto-Me1.

5 C:M:H (70:27:3) 9,65 Vết rõ rệt. Khảo sát sau
6
C:M:H (70:27:3), (14:6:1)
C:M:H (6:4:1)
12,40 Vệt dài. Không khảo sát.
Ghi chú: C: cloroform M: metanol H: nước

Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
32
2.4. KHẢO SÁT CẤU TRÚC HÓA HỌC CÁC HỢP CHẤT CÔ LẬP ĐƯỢC
2.4.1. Khảo sát cấu trúc hóa học của hợp chất Dichoto-Clo1
Hợp chất Dichoto-Clo1 thu được từ cao cloroform A có các đặc điểm sau:
• Chất bột màu trắng.
• Nhiệt độ nóng chảy: 138
o
C (kết tinh trong cloroform).
• Sắc kí lớp mỏng: giải ly bằng hệ dung môi cloroform : etyl acetat (8:2), thuốc
thử hiện hình là dung dịch acid H
2
SO
4
50%, sấy bản cho một vết màu đen với giá
trị R
f
= 0,41 (hình 2.2).
• Phổ MS (phụ lục 1.1): phổ đồ cho mũi ion phân tử với m/z = 412 [M]
+
, tương
ứng với công thức phân tử C
29

H
48
O (M = 412).
• Phổ
1
H-NMR (CDCl
3
, 500 MHz) (phụ lục 1.2) và so sánh với tài liệu tham
khảo
[26]
, (δ ppm): 5,16 (1H, dd, J = 15,0 Hz, J = 8,5 Hz, H22); 5,16 (1H, brs, H7);
5,03 (1H, dd, J = 15,0 Hz, J = 9,0 Hz, H23); 3,59 (1H, m, H3); 2,34 (1H, t, J = 7,5
Hz, H9); 1,02 (3H, d, J = 6,5 Hz, H21); 0,85 (3H, d, J = 6,5 Hz, H27); 0,81 (3H, t,
J = 7,0 Hz, H29); 0,80 (3H, d, J = 7,0 Hz, H26); 0,80 (3H, s, H19); 0,55 (3H, s,
H18).
• Phổ
13
C-NMR (CDCl
3
, 125 MHz) kết hợp với phổ DEPT (phụ lục 1.3, 1.4) và
so sánh với tài liệu tham khảo
[26]
, (δ ppm): hợp chất có 29 carbon với độ dịch
chuyển hóa học trình bày trong bảng 2.7.
Biện luận cấu trúc
• Phổ
1
H-NMR: hợp chất có 3 proton vinyl H7, H22 và H23. Trong đó H22 và
H23 ở ghép trans với nhau với hằng số ghép J
trans

= 15,0 Hz.
• Phổ
13
C-NMR và DEPT có bốn mũi cộng hưởng với độ dịch chuyển hóa học
lần lượt là (δ ppm): 139,6 (>C=); 138,2 (=CH-); 129,5 (=CH-); 117,5 (=CH-). Vậy
hợp chất Dichoto-Clo1 chứa hai nối đôi trong phân tử.
H
và
H
H


Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
33
Bảng 2.7: So sánh phổ
1
H và
13
C-NMR của hợp chất Dichoto-Clo1 với hợp chất
(22E)-5
α
-stigmasta-7,22-dien-3
β
-ol (spinasterol).
Dichoto-Clo1
(CDCl
3
, δ ppm)
Spinasterol
[26]

(CDCl
3
, δ ppm)
Vị
trí
Loại
carbon
1
H (J, Hz)
13
C
1
H (J, Hz)
13
C
1 -CH
2
- 37,2 37,2
2 -CH
2
- 31,5 31,6
3 O-CH< 3,59 (m) 71,1 3,60 (m) 71,1
4 -CH
2
- 38,0 38,1
5 >CH- 40,3 40,4
6 -CH
2
- 29,7 29,7
7 =CH- 5,16 (brs) 117,5 5,16 (brs) 117,5

8 >C= 139,6 139,6
9 >CH- 2,34 (t; 7,5 Hz) 49,5 2,34 (t; 7,5 Hz) 49,6
10 >C< 34,3 34,3
11 -CH
2
- 21,6 21,6
12 -CH
2
- 39,5 39,6
13 >C< 43,3 43,3
14 >CH- 55,2 55,2
15 -CH
2
- 23,0 23,1
16 -CH
2
- 28,5 28,5
17 >CH- 56,0 56,0
18 -CH
3
0,55 (s) 12,1 0,55 (s) 12,1
19 -CH
3
0,80 (s) 14,1 0,80 (s) 13,1
20 >CH- 40,8 40,8
21 -CH
3
1,02 (d; 6,5 Hz) 21,1 1,03 (d; 6,5 Hz) 21,3
22 =CH- 5,16 (dd;15,0; 8,5 Hz) 138,2 5,16 (dd;15,4; 8,5 Hz) 138,2
23 =CH- 5,03 (dd; 15,0; 9,0 Hz) 129,5 5,03 (dd; 15,0; 9,0 Hz) 129,5

24 >CH- 51,3 51,3
25 >CH- 32,0 32,0
26 -CH
3
0,80 (d; 7,0 Hz) 19,0 0,80 (d; 6,2 Hz) 19,0
27 -CH
3
0,85 (d; 6,5 Hz) 21,4 0,85 (d; 6,2 Hz) 21,4
28 -CH
2
- 25,4 25,5
29 -CH
3
0,81 (t; 7,0 Hz) 12,25 0,81 (t; 7,4 Hz) 12,3

Hedyotis dichotoma Koen.ex Roth Nghiên cứu và kết quả
34
• So sánh các số liệu phổ
1
H và
13
C-NMR của hợp chất Dichoto-Clo1 với hợp
chất (22E)-5
α
-stigmasta-7,22-dien-3
β
-ol (spinasterol)
[26]
trình bày trong bảng 2.7
thấy có sự tương đồng.

Do vậy, Dichoto-Clo1 được đề nghị là 22(E)-5
α
-stigmasta-7,22-dien-3
β
-ol
(spinasterol).
HO
H
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14 15
16
17
18
19
20
21
22
23

24
25
26
27
28
29

(22E)-5
α
-Stigmasta-7,22-dien-3
β
-ol
(Dichoto-Clo1)
2.4.2. Khảo sát cấu trúc hóa học của hợp chất Dichoto-Clo2
Hợp chất Dichoto-Clo2 thu được từ cao cloroform B có các đặc điểm sau:
• Tinh thể hình kim màu vàng.
• Nhiệt độ nóng chảy: 148
o
C (kết tinh trong cloroform).
• Sắc kí lớp mỏng: giải ly bằng dung môi etyl acetat, thuốc thử hiện hình là dung
dịch FeCl
3
/EtOH, sấy bản cho một vết màu xanh với giá trị R
f
= 0,55 (hình 2.2).
• Phổ MS (phụ lục 2.1): phổ đồ cho mũi ion phân tử với m/z = 168 [M]
+
, tương
ứng với công thức phân tử C
8

H
8
O
4
(M = 168).
• Phổ
1
H-NMR (CDCl
3
, 500 MHz) (phụ lục 2.2), (δ ppm): 5,85 (2H, s, H3 và
H6); 3,82 (2x3H, s, 2 nhóm -OCH
3
).
• Phổ
13
C-NMR (CDCl
3
, 125 MHz) kết hợp với phổ DEPT (phụ lục 2.3, 2.4), (δ
ppm): 186,9 (>C=O, C1 và C4); 157,4 (=C-O-, C2 và C5); 107,4 (=CH-, C3 và C6);
56,5 (2 nhóm -OCH
3
).