Khảo sát hóa học phân đoạn có tác dụng bảo vệ gan của cây vằng sẻ Jasminum subtriplinerve Blume.
















JASMINUM SUBTRIPLINERVE BLUME.






Chuyên ngành: HÓA 
 60 44 31







1. TS. 
2. TS. 





-  2012
LỜI CẢM ƠN


Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Hồ Thị Cẩm Hoài, Bộ môn Hóa
lý - Khoa Hóa học trường Đại học khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh. TS Huỳnh
Ngọc Thụy, Bộ môn Dược Liệu – Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp.HCM, những
người thầy đã tận tình theo dõi, chỉ bảo, giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện luận
văn này. Tôi đã học tập được rất nhiều kinh nghiệm cũng như kiến thức khoa học
và phương pháp làm việc.
Xin chân thành cảm ơn chân thành đến các Thầy, Cô bộ môn Hóa lý và
Khoa Hóa trường Đại học khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh đã giúp đỡ tôi trong
quá trình học tập và thực hiện luận văn tốt nghiệp này.
Tôi xin gửi lời biết ơn chân thành đến các Thầy, Cô trong Bộ môn Dược
Liệu – Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp.HCM đã tạo điều kiện cho tôi thực hiện
luận văn này.
Xin cảm ơn các bạn Ngân, Thiên Hương, Hoán, các em trong phòng Hóa lý
hữu cơ, Hóa Phân tích đã tạo điều kiện cho tôi trong quá trình thực hiện đề tài.

Con xin gửi lời biết ơn đến Bố Mẹ, người đã sinh thành, dưỡng dục cho con
có được ngày hôm nay và mai sau. Em xin cảm ơn các anh, chi của em đã động
viên và giúp đỡ em.
Cảm ơn em, người vợ yêu thương của anh, đã luôn ở bên và động viên anh
hoàn thành tốt luận văn này.
Xin cảm ơn Trường THPT Trần Đại Nghĩa đã tạo điều kiện tốt nhất cho tôi
học tập và làm việc.
Xin cảm ơn và gửi lời chúc sức khỏe đến tất cả mọi người.

Phan Hồng Sơn









ii
MỤC LỤC
Trang

L
MỤC LỤC ii
 iv
 v
 vii
MỞ ĐẦU viii

CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN

1.1 CHI JASMINUM ( CHI NHÀI HAY LÀI) 2

1.2 CÂY VẰNG SẺ JASMINUM SUBTRIPLINERVE BLUME 2
1.2.1  3
1.2.2  3
1.2.3     Jasminum subtriplinerve Blume  ác cây
cùng chi 4
1.2.4 
 6
1.2.5 v 9
1.3 MÔ HÌNH GAN NHIỄM ĐỘC TRONG THỬ NGHIỆM IN VIVO 17
1.3.1 
4
17

1.3.2 Mô hình in vitro và in vivo 18
1.4 CHẤT CHUẨN 19

CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM

2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 22
2.1.1  22

iii
2.1.2 Thú  22
2.1.3   23
2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24
2.2.1 Qui trình trích ly 24

2.2.2  các  25
2.2.3 Qui trình tác 31
2.2.4  
CCl
4
(in vivo) 36

CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN

3.1 KẾT QUẢ KHẢO SÁT IN VITRO 43
3.1.1  43
3.1.2   47
3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ NHẬN DANH CÁC HỢP CHẤT 47
3.2.1  VS3.1 47
3.2.2  49
3.2.3  51
3.2.4  56
3.3 KẾT QUẢ KHẢO SÁT IN VIVO 57
3.3.1 
4
57
3.3.2  58

CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ

4.1 KẾT LUẬN 62
4.2 ĐỀ NGHỊ 64
 65
 71
 72

iv
- 
******
13
C-NMR: 
1
H-NMR: 
Ac: Aceton
ALT: Alanin aminotransferase
BuOH: Butanol
CYP: Cytochrome P450
DMSO: Dimetylsulfoxid
DPPH: 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl
EA: Etyl axetat
Ed: 
EDTA: Etylendiamintetraaxetic axit
EtOH: Etanol
GOT: Glutamat Oxaloaxetat Transaminase
GPT: Glutamat pyruvat transaminase
GSH: 
HPLC: High-performance liquid chromatography
HMBC: Heteronuclear multiple-bond correlation spectroscopy
HSQC: Heteronuclear single-quantum correlation spectroscopy
IC: 
LDH: Lactat dehydrogenase
MeOH: Metanol
MS: Mass spectroscopy
NAD: Nicotinamid adenin dinucleotid
NADPH: Nicotinamid adenin dinucleotid photphat

NO: Nitric oxit
OD: Optical Density
SRB: Sulforhodamine B
SKBM: 
SKC: 
TLG: 



v
 CÁC NG
*****
 So sánh  Jasminum subtriplinerve
Blume chi Jasminum 5
         Jasminum subtriplinerve
Blume và cây lá ngón Gelsemium elegans Benth 5
1.3  
Jasminum subtriplinerve Blume 9
 
Jasminum subtriplinerve Blume 10
  Jasminum subtriplinerve Blume
 11
 
Raphanus sativa 


           Jasminum
subtriplinerve Blume 13
 IC
50


bào      Jasminum subtriplinerve Blume trên 3
-G2, RD, LU 16
       i hóa c    
Jasminum subtriplinerve Blume
DPPH

17
 K  các cao trích ly      Jasminum
subtriplinerve Blume 24
  27
 P      

     
Jasminum subtriplinerve Blume 43
  

etyl axetat

44

vi
       do NO

     
Jasminum subtriplinerve Blume 45
   

etyl axetat . 46
 Gi

H
 axit 3,4-dihidroxibenzoic 49
 
13
à 
 axit 3,4-dihidroxibenzoic 49
  
C
 axit gallic và  VS3.2 50
  
H
axit gallic . 51
 
13
  VS3.3 và verbascosid 53
 -  VS3.3 và verbascosid 54
  

  
cao EA 56
 
4
 58
.13  cao etyl axetat  59

vii
 CÁC 
*****
Hình 1.1  Jasminum subtriplinerve Blume 
Ca 4
Hình 1.2 Hoa  . 20
Hình 2.1  . 22
Hình 2.2 P

. 26
Hình 2.3 Các  . 38
Hình 2.4  . 39
Hình 3.1  . 48
Hình 3.2  . 50
Hình 3.3  . 52
Hình 3.4  . 55
Hình 3.5 


olyphenol . 56


 CÁC 
*****
 ly trích các cao v Jasminum subtriplinerve Blume 25
 Quy trình  

. 27
 NO

30
  . 32
   VS3 . 32
 VS3.A . 33
SVS3.B . 34
c VS3.G . 35




viii
MỞ ĐẦU

 


                c gia




   
i 
T
 
 i hoá

              
flavonoid, antocyanosid        
i 
 

 



   


m Jasminum subtriplinerve Blume,

  
            - Jasminum subtriplinerve
Blume.

ix
MỤC TIÊU ĐỀ TÀI

 Jasminum

subtriplinerve Blume etyl axetat
Netyl axetat có ý ng
v
etyl axetat 
Khảo sát hóa học phân đoạn có tác dụng bảo
vệ gan của cây vằng sẻ - Jasminum subtriplinerve Blume.

- Trích ly các cao   cây .
-  
 các DPPH

và 

.
- C   cao
etyl axetat.
- 
DPPH

 
- Ketyl axetat 

4
(in vivo)
silymarin.



1






 1:




2
1.1 CHI JASMINUM ( CHI NHÀI HAY LÀI)

Chi Jasminum OleaceaeLamiales,
Magnoliopsida, ngành MagnoliophytaPlantae.
Cây thu, có khi leo, cao 0.5 - 
xoè ra. 

 [13].


 


 
         fomic-axetic-benzoic-linalyl, este
anthranylic metyl và indol.   
các loài   Jasminum c       
  [52].
Hoa và 
  c
.

1.2 JASMINUM SUBTRIPLINERVE BLUME [13]

 Jasminum subtriplinerve Blume.
regnum): Plantae
Ngành (division): Magnoliophyta
class): Magnoliopsida
ordo): Lamiales
familia): Oleaceae
Chi (genius): Jasminum
Loài (species): Jasminum subtriplinerve


3
Tên  
.
Theo dân gian c 


1  [1],[13]

Jasminum subtriplinerve 
khu 
Nam.
, 

 - - Ðà
 m.

y và qua
 






[1],[13]

Jasminum subtriplinerve  , 
        -20 m     

 
-7.5 - hía trên



4
,  ài 

3 - 12 mm.
-
-
- 
5 -  -8 mm, khi
.


(a) (b) (c)

(d) (e) (f)
 Jasminum subtriplinerve Blume 

): Lá - (d): Lá - t sau  Hoa



 Jasminum subtriplinerve Blume 
cùng chi

Do   Jasminum
nên  b.    khác  vào
các  . Xem b1



5
 Jasminum subtriplinerve Blume 
Jasminum [7],[14].

J. subtriplinerve
Blume.
J.anastomosans
Wall.
J. longisetum
Gagn.
J. undulatum
Ker.
J. lang
Gagn.

Thân
Cành con kéo dài,



Cành con có


Cành con kéo


Cành con kéo

không có lông.

Lá





Hình mác tù,


Hình tam giác,


Hình trái xoan,
òn hình



Hình trái xoan

nêm, láng


Gân lá



3 gân chính


3-













 7-9
hoa.
1-

cành.








Ngoài gón Gelsemium elegans Benth (

 Jasminum subtriplinerve Blume 
vào   :

  và cây lá ngón [14]:

 Jasminum
subtriplinerve Blume.
Lá ngón

Gelsemium elegans Benth.
Lá


4-7 cm.
lông, hìn
         
mép lá nguyên, dài 7-12 cm.
Hoa

- 
vàng.








6
1 




  - 




t chính là: terpenoid, glycosid
d[6-7].
,  [32] 
 glycosid . phân tích HPLC

môi metanol,  
terpen glycosid (1-6).


 epi- Anatoliosid (1) Chevangin A (2)


Chevangin B (3) 6-epi-Chevangin B (4)


7

Chevangin C (5) Chevangin D (6)

           -epi-Anatoliosid (1) và
Chevangin A (2).          -epi-
Anatoliosid       -     -  
C 
Chevangin B (3), 6-epi-Chevangin B (4) và Chevangin C (5). 
 Chevangin D (6).
-2008 nhóm  
 bài báo [8-11],[28] 
etyl ax, 
là Rutin (7), Astragalin (8) và Isoquercitrin (9). (  1.3) và 5  
phenyletanoid glycosid là Verbascosid (10), Isoverbascosid (11), Apioverbascosid

(12), Isooleoverbascosid (13)  -O-Menthiafoloyl-verbascosid (14)  
(14)  


Rutin (7) Astragalin (8) Isoquercitrin (9)


8

-O-Menthiafoloyl-verbascosid (14)


9
Cùng trong 
HCM rong cao ete 
Jasminum subtriplinerve Blume

ete Jasminum
subtriplinerve Blume. [14]


Cao trích
Triterpen
Lupeol
 
Betulin
Axit Betulinic
Cloroform
Axit 3-


-Axetyl oleanolic
 
Axit Oleanolic
Steroid

-Sitosterol
Daucosterol
Cloroform
Alcol
Dotriacontanol
Ete  

1.2.5 T v

1

 
          .    
  

[1-2].
  
  terpenoi      d    
,  
 b
vàng da hay  [1],[13],[15].





10


  [13]. 

17].
-
-
 


 Jasminum
subtriplinerve Blume.





[6-7]
Tác

kháng
viêm







1ml/con

Cao etanol 40
o








Tác

kháng
viêm
mãn
tính



1ml/con







viêm mãn tính

Có tác d


  [17]
           , do   
 
 



11
1.2.5.3   
 


Jasminum subtriplinerve Blume):

            
 

Salmonella typhi
  

 1.5.

   Jasminum subtriplinerve   






-7]
Achromobacter
Staphylococcus aureus 
Staphylococcus albus
Streptococcus epidermidis
Streptococcus haemolyticus 
Pseudomonas aeruginosa
Klebsiella
Shigella sonnei
Shigella shigae
Shigella dysenteriae
Escherichia coli
Alkaligens faecalis
Bacillus subtilis
Bacillus mycoides
Candida albicans
Salmonella typhi (in vivo)
K. TN
B
K. TN
K. TN
B
E
E
E
K. TN
K. TN
E
E

K. TN
K. TN
K. TN
K. TN
B
B
B
C
B
D
K. TN
D
B
B
D
D
E
E
E
A
    



12
Các k  , ,
 in vitro 
           tan máu  Streptococcus
haemolyticus, Achromobacter, Streptococcus albus Staphyloccoccus
aureus và Streplococcus epidermidis         

 Bacillus subtilis, Bacillus mycoides 
Candida albicans [6-7].
Ngoài ra, 
           Shigella dysenteriae,
Shigella shigae và Salmonella typhi [6-7].
          
 
flavonoid           
 Staphyloccoccus aureus và Streplococcus haemolyticus   n
              
syringin [6].
Trong   còn d
sunfamid

 [32] 
DPPH


Raphanus sativa  ghi
 trong b6:

             B.subtilis và
P.fluorescens.
DPPH

-epi-
Chevangin C.


13



50
là 0.6 ppm.


Raphanus sativa DPPH


Jasminum subtriplinerve Blume [32]




1

2

3

4

5

6
Bacillus subtilis
(µg/spot)
10.0
5.0
25.0

30.0
25.0
5.0
Pseudomonas fluorescens
(µg/spot)
5.0
5.0
25.0
30.0
25.0
50
Root growth inhibition:
Raphanus sativa (EC
50
ppm)
5.0
33.0
0.6
32.0
28.0
32.0
Reduction of DPPH radical
(µg/spot)



12.3
50.0
12.3
1: Anatolioside A: 6"-epi- 2: Chevangin A 3: Chevangin B

4: 6-epi-Chevangin B 5: Chevangin C 6: Chevangin D


2008, 
Minh 
8].
kháng vi si  
Gram (-) là E.coli và P.aeruginosaGram
(+) là B.subtilis và S.aureus    A.niger và F.oxysporum  
men C.albicans và S.cerevisiae. Các k  :
- 
 - 
-            P.aeruginosa và
C.albicans


14
- ng pháp  
E.coli, B.subtilis 
-            

-            u   
 
- S.cerevisiae 

Các cao: Etyl axetat  -1, cloroform SB2, etyl axetat
  có         Staphylococcus aureus; Các cao
-
Aspergillus niger [14]. 
 i [6-7]   [17].

1.2.5.4 


             




1.2.5.5 


               



o



15




1.2.5.6 

2].
              
 

              

 ete  cloroform,
etyl axetat, butanol, etanol, metanol và cao  
nhau. 
              

-


IC
50
IC
50

20

SA2, SB1--G2 và RD,

-

