Tải bản đầy đủ (.pdf) (26 trang)

các phương pháp định danh và định lượng trong HPLC

Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (150.42 KB, 26 trang )

CAC PHệễNG PHAP
ẹềNH DANH VAỉ
ẹềNH LệễẽNG
TRONG SAẫC KY KH
TS NGUYEN BA HOAỉI ANH
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH
☯SẮC KÝ NGUYÊN THỦY CHỈ LÀ PHƯƠNG PHÁP TÁCH,
NÓ KHÔNG GIÚP CHÚNG TA NHẬN DANH CỤ THỂ
TỪNG CHẤT.
☯TUY NHIÊN KHI KẾT NỐI VỚI CÁC ĐẦU DÒ THÍCH
HP NÓ CHO PHÉP CHÚNG TA ĐO TÍN HIỆU CỦA MỘT
CHẤT ĐI RA KHỎI CỘT TÁCH
☯THÔNG QUA VIỆC GHI NHẬN TÍN HIỆU GIÚP CHÚNG
TA CÓ THỂ NHẬN DANH MỘT HP CHẤT NÀO ĐÓ
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH
☯NHƯ VẬY VỀ CĂN BẢN QUÁ TRÌNH NHẬN DANH CHỦ YẾU
DỰA TRÊN 2 YẾU TỐ :
 THỜI GIAN LƯU : DO MỖI CHẤT ĐỀU CÓ TƯƠNG TÁC
KHÁC NHAU GIỮA PHA TĨNH VÀ PHA ĐỘNG NÊN THỜI GIAN
LƯU CỦA MỖI HP CHẤT SẼ KHÁC NHAU ÍT HAY NHIỀU.
ĐỘ CHỌN LỌC CỦA DETECTOR : CÓ NHỮNG LOẠI
DETECTOR ÍT CHỌN LỌC NHƯ FID, TCD NHƯNG CŨNG CÓ
NHỮNG DETECTOR CÓ ĐỘ CHỌN LỌC CAO CHO NHỮNG
NHÓM CHẤT NHẤT ĐỊNH NHƯ FPD, ECD …. DỰA TRÊN TÍNH
CHẤT NÀY CHÚNG TA CÓ THỂ XÁC ĐỊNH CHỌN LỌC VÀ
CHÍNH XÁC HƠN NHỮNG HP CHẤT CÓ THỜI GIAN LƯU
TRÙNG NHAU
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH
MỘT SỐ DETECTOR CÓ ĐỘ CHỌN LỌC RẤT CAO NHƯ AAS,
ĐIỆN HÓA CHO PHÉP XÁC ĐỊNH RẤT CHỌN LỌC CÁC HP
CHẤT NHƯ CÁC HP CHẤT ORGANO KIM LOẠI … NHƯNG


LẠI BỊ GIỚI HẠN BỞI SỐ LƯNG CÁC HP CHẤT.
CÁC DETECTOR CHO BIẾT CẤU TRÚC CỦA HP CHẤT
NHƯ MS, NMR RẤT HỮU HIỆU TRONG VIỆC ĐỊNH DANH
CŨNG NHƯ XÁC NHẬN LẠI CÁC HP CHẤT. THƯỜNG CÁC
DETECTOR NÀY CÓ ĐỘ CHÍNH XÁC CAO NHẤT TRONG VIỆC
ĐỊNH DANH
TUY NHIÊN CÁC DETECTOR NÀY RẤT ĐẮT TIỀN VÀ CŨNG
RẤT DỄ BỊ NHIỄM BẨN
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH
ĐỂ ĐỊNH DANH VỚI CÁC ĐẦU DÒ THÔNG THƯỜNG TRƯỚC HẾT
CẦN TÁCH HP CHẤT CẦN XÁC ĐỊNH RA KHỎI CÁC CHẤT KHÁC
(DỰA VÀO THỜI GIAN LƯU).
SAU ĐÓ CẦN XÁC NHẬN LẠI THỜI GIAN LƯU VỚI CHẤT CHUẨN.
THỜI GIAN LƯU CỦA MẪU VÀ CHUẨN PHẢI GIỐNG NHAU KHI
THAY ĐỔI:
-CHIỀU DÀI CỘT SẮC KÝ
-THÀNH PHẦN PHA TĨNH CỦA CỘT (TỪ RẤT PHÂN CỰC ĐẾN RẤT
KHÔNG PHÂN CỰC)
-NẾU THÀNH PHẦN MẪU QUÁ PHỨC TẠP CẦN XÁC NHẬN LẠI
BẰNG CÁC ĐẦU DÒ CHO BIẾT THÔNG TIN CẤU TRÚC NHƯ MS
TRƯỜNG HP SỬ DỤNG CÁC ĐẦU DÒ CÓ ĐỘ CHỌN LỌC CAO CÓ
THỂ GIẢM THIỂU SAI SỐ DO ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT KHÁC
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH
☯ VẤN ĐỀ THƯỜNG GẶP PHẢI TRONG VIỆC ĐỊNH DANH LÀ
CÁC HP CHẤT CÓ THỜI GIAN LƯU TRÙNG NHAU DẪN ĐẾN
KHÔNG PHÂN BIỆT ĐƯC CÁC CHẤT.
☯CÁCH GIẢI QUYẾT :
THAY ĐỔI CHƯƠNG TRÌNH CHẠY BAO GỒM:
- THAY ĐỔI CHƯƠNG TRÌNH NHIỆT ĐỘ : LÒ CỘT, INJECTOR
- THAY ĐỔI CHƯƠNG TRÌNH TỐC ĐỘ KHÍ : TỪ ĐẲNG DÒNG

QUA CHƯƠNG TRÌNH HÓA TỐC ĐỘ DÒNG …
THAY ĐỔI CỘT :
- ĐỔI SANG CỘT CÓ KÍCH THƯỚC DÀI HƠN (CÙNG PHA TĨNH)
- ĐỔI SANG CỘT CÓ ĐỘ PHÂN CỰC KHÁC CỘT HIỆN DÙNG
- ĐỔI SANG CỘT CÓ CƠ CHẾ KHÁC (HẤP PHỤ …)
24.50 25.00 25.50 26.00 26.50 27.00 27.50 28.00 28.50 29.00 29.50
Time
0
100
%
0
100
%
u03d1401 Voltage SIR 6 Channels EI+
321.8936
2.04e8
u03j0101 Voltage SIR 6 Channels EI+
321.8936
6.30e8
2,3,7,8-
T
4
CDD
2,3,7,8-
T
4
CDD
DB-5 column
Rtx-Dioxin column
CAÙC PHÖÔNG PHAÙP ÑÒNH DANH

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH
THAY ĐỔI CỘT (TT) :
- NỐI HAI HOẶC NHIỀU CỘT CÓ ĐỘ PHÂN CỰC KHÁC NHAU ĐỂ
TĂNG KHẢ NĂNG TÁCH
XỬ LÝ MẪU TRƯỚC KHI PHÂN TÍCH :
- XỬ LÝ MẪU BẰNG PHƯƠNG PHÁP THÍCH HP ĐỂ LOẠI BỎ
CÁC TẠP CHẤT ẢNH HƯỞNG :
+ CHIẾT LỎNG LỎNG
+ CHIẾT RẮN LỎNG (SPE)
+ VI CHIẾT PHA RẮN (SMPE)
- DỰA VÀO TÍNH CHẤT HÓA LÝ CỦA CHẤT CẦN PHÂN TÍCH ĐỂ
TẠO DẪN XUẤT THÀNH NHỮNG HP CHẤT CÓ NHIỆT ĐỘ SÔI,
ĐỘ PHÂN CỰC … KHÁC NHƯ SILAN HÓA, CHLOR HÓA …
Isothermal
col ~ 0.8 m x 0.1mm x 0.1μm
Temperatur programmed
col ~ 25m x 0.25mm x 0.25 μm
Moving
Cold trap typ 4 Hz
(ZOEX patented)
Trappola
4 sec
Conventional col
unpolar
Fast short column
polar
CAÙC PHÖÔNG PHAÙP ÑÒNH DANH
Components
in moving
cooled trap

Components
released
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH
KHI SỬ DỤNG ĐẦU DÒ MS ĐỂ ĐỊNH DANH CẦN LƯU Ý :
- MẶC DÙ ĐẦU DÒ CHO BIẾT CẤU TRÚC CỦA CHẤT NHƯNG
NẾU CÓ HAI CHẤT TRỞ LÊN ĐI VÀO CÙNG LÚC THÌ KHÔNG
THỂ SỬ DỤNG PHỔ CHUẨN ĐỂ SO SÁNH
- KHI NÀY PHẢI DỰA TRÊN CÁC PHÂN MẢNH ĐẶC TRƯNG ĐỂ
XÁC NHẬN LẠI CHẤT
-KHI ĐỊNH DANH CẦN SỬ DỤNG CHẾ ĐỘ FULL-SCAN ĐỂ CÓ
ĐƯC THÔNG TIN ĐẦY ĐỦ HƠN VỀ CHẤT
-QUÁ TRÌNH XỬ LÝ MẪU ĐÓNG VAI TRÒ RẤT QUAN TRỌNG
TRONG VIỆC THU ĐƯC PHỔ RÕ RÀNG VÀ GIÚP ĐỊNH DANH
CHÍNH XÁC.
-TRONG NHỮNG TRƯỜNG HP NGHI NGỜ CÓ THỂ DÙNG MS
NHIỀU LẦN ĐỂ XÁC NHẬN LẠI
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH
☯ VIỆC ĐỊNH DANH MỘT CHẤT TRÊN PHẦN MỀM ĐƯC THỰC
HIỆN BẰNG CÁCH NHẬP THỜI GIAN LƯU CỦA CHẤT CHUẨN
VÀO PHƯƠNG PHÁP CHẠY.
☯THỜI GIAN LƯU NÀY CHỈ CÓ Ý NGHĨA VỚI MỘT ĐIỀU KIỆN
CHẠY MẪU NHẤT ĐỊNH (CỘT, CHƯƠNG TRÌNH NHIỆT ĐỘ, TỐC
ĐỘ DÒNG…) NẾU CÁC THÔNG SỐ CHẠY MẪU THAY ĐỔI SẼ
DẪN ĐẾN NHẬN DANH SAI
☯CÁC THÔNG SỐ SỬ DỤNG ĐỂ NHẬN BIẾT 1 PEAK NHƯ
WIDTH, SLOPE … CŨNG ẢNH HƯỞNG ĐẾN VIỆC XÁC NHẬN TÍN
HIỆU LÀ NHIỄU NỀN HAY LÀ PEAK.
☯NGOÀI RA DO THỜI GIAN LƯU GIỮA CÁC LẦN CHẠY SẼ
KHÁC NHAU CHÚT ÍT NÊN CŨNG CẦN THÔNG BÁO CHO
CHƯƠNG TRÌNH XỬ LÝ VỀ KHOẢNG BIẾN ĐỘNG CHO PHÉP

CỦA THỜI GIAN LƯU
CAÙC PHÖÔNG PHAÙP ÑÒNH DANH
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
☯CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG CHÍNH TRONG SẮC KÝ
BAO GỒM :
PHƯƠNG PHÁP TÍNH TỈ LỆ PHẦN TRĂM CÁC CHẤT (AREA
NORMALIZATION) :
-ĐÂY LÀ PHƯƠNG PHÁP TÍNH THÀNH PHẦN PHẦN TRĂM CỦA
CÁC CHẤT HIỆN DIỆN TRONG MẪU, DỰA TRÊN TỈ LỆ DIỆN
TÍCH CỦA CÁC CHẤT VỚI NHAU.
-THƯỜNG SỬ DỤNG TRONG TÍNH TỈ LỆ PHẦN TRĂM CỦA CÁC
MẪU RẤT NHIỀU THÀNH PHẦN NHƯ TINH DẦU, DỊCH CHIẾT
THIÊN NHIÊN … VÀ KHÔNG CẦN BIẾT NỒNG ĐỘ CHÍNH XÁC
CỦA MỖI CHẤT
-ƯU ĐIỂM LÀ DỄ SỬ DỤNG VÌ KHÔNG CẦN CHẤT CHUẨN
NHƯNG ĐỘ CHÍNH XÁC KHÔNG CAO. ÍT DÙNG TRONG PHÂN
TÍCH ĐỊNH LƯNG
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
PHƯƠNG PHÁP TÍNH TỈ LỆ PHẦN TRĂM CÓ HIỆU CHUẨN
(CORRECTED AREA NORMALIZATION) :
-ĐÂY LÀ PHƯƠNG PHÁP BIẾN THỂ CỦA PHƯƠNG PHÁP TÍNH TỈ
LỆ PHẦN TRĂM CÁC CHẤT .
-CHO PHÉP CHÚNG TA XÁC ĐỊNH TỈ LỆ PHẦN TRĂM CỦA MỘT
NHÓM CHẤT QUAN TÂM .
-PHẢI DỰNG ĐƯỜNG CHUẨN CHO CÁC CHẤT QUAN TÂM
NHƯNG ĐƠN VỊ CỦA NỒNG ĐỘ LÀ TỈ LỆ PHẦN TRĂM CÁC
CHẤT
-PHƯƠNG PHÁP HỮU HIỆU KHI CHỈ QUAN TÂM ĐẾN TỈ LỆ MỘT
SỐ CHẤT NÀO ĐÓ NHƯ TỈ LỆ CÁC ĐỒNG PHÂN, CÁC

HYDROCACBON GẦN GIỐNG NHAU
-TRONG THỰC TẾ HAY SỬ DỤNG TRONG DẦU KHÍ ĐỂ TÍNH
THÀNH PHẦN % CỦA CÁC KHÍ ĐỐT NHƯ ETHAN, PROPAN, N-
BUTAN, ISO-BUTAN …
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
PHƯƠNG PHÁP NGOẠI CHUẨN (EXTERNAL STANDARD) :
-ĐÂY LÀ PHƯƠNG PHÁP CHO PHÉP XÁC ĐỊNH CHÍNH XÁC NỒNG
ĐỘ CỦA CHẤT QUAN TÂM .
-ĐƠN VỊ CỦA NỒNG ĐỘ CÓ THỂ LÀ mg/L, ug/l, ppm, ppb … .
-PHẢI LẬP ĐƯỜNG CHUẨN CHO CÁC CHẤT CẦN QUAN TÂM. MỖI
CHẤT CÓ 1 ĐƯỜNG CHUẨN RIÊNG (CHIỀU CAO HOẶC DIỆN TÍCH
PEAK THEO NỒNG ĐỘ) VÀ KHÔNG LIÊN HỆ VỚI NHAU (KHÁC VỚI
PHƯƠNG PHÁP TỈ LỆ PHẦN TRĂM CÓ HIỆU CHUẨN LÀ TỔNG
THÀNH PHẦN % CỦA CÁC CHẤT QUAN TÂM SẼ PHẢI LÀ 100%)
-DO MỖI CHẤT CẦN MỘT ĐƯỜNG CHUẨN RIÊNG LẺ NÊN NẾU
KHÔNG CÓ CHẤT CHUẨN CỦA CHẤT PHÂN TÍCH SẼ KHÔNG SỬ
DỤNG ĐƯC.
-ĐỂ GIẢI QUYẾT KHÓ KHĂN NÀY NGƯỜI TA CŨNG CÓ THỂ SỬ
DỤNG NHỮNG CHẤT CÓ CẤU TRÚC VÀ TÍNH CHẤT RẤT GẦN VỚI
TÍNH CHẤT CỦA CHẤT CẦN PHÂN TÍCH ĐỂ DỰNG ĐƯỜNG CHUẨN
THAY CHO CHẤT PHÂN TÍCH
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
VÍ DỤ VỀ SẮC KÝ ĐỒ VÀ ĐƯỜNG CHUẨN
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
PHƯƠNG PHÁP NGOẠI CHUẨN (EXTERNAL STANDARD) (TT):
-NHƯC ĐIỂM CỦA PHƯƠNG PHÁP LÀ KHI TIÊM MẪU BẰNG TAY,
THỂ TÍCH TIÊM MẪU GIỮA CÁC LẦN SẼ KHÁC NHAU NHIỀU.
-THÔNG THƯỜNG GIỮA CÁC LẦN TIÊM MẪU BẰNG TAY, GIÁ TRỊ
CÓ THỂ KHÁC NHAU TỪ VÀI CHỤC ĐẾN VÀI TRĂM %.
-ĐIỀU NÀY LÀM CHO ĐƯỜNG CHUẨN TRỞ NÊN KHÔNG TUYẾN

TÍNH, SAI SỐ CỦA KẾT QUẢ THU ĐƯC SẼ RẤT LỚN
-ĐỂ KHẮC PHỤC THÔNG THƯỜNG NGƯỜI TA SỬ DỤNG BỘ TIÊM
MẪU TỰ ĐỘNG KHI DÙNG PHƯƠNG PHÁP NGOẠI CHUẨN.
-SAI SỐ VỚI BỘ TIÊM MẪU TỰ ĐỘNG NHỎ HƠN 5% VÀ THƯỜNG
TRONG KHOẢNG 2- 3%.
-TUY NHIÊN KHÔNG PHẢI MÁY GC NÀO CŨNG ĐƯC TRANG BỊ BỘ
TIÊM MẪU TỰ ĐỘNG NÊN ĐỂ KHẮC PHỤC NHƯC ĐIỂM TRÊN,
PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN ĐÃ ĐƯC ỨNG DỤNG
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN (INTERNAL STANDARD) :
-ĐÂY LÀ PHƯƠNG PHÁP CHO PHÉP XÁC ĐỊNH CHÍNH XÁC NỒNG
ĐỘ CỦA CHẤT QUAN TÂM MÀ KHÔNG BỊ ẢNH HƯỞNG ĐÁNG KỂ
BỞI THỂ TÍCH MẪU GIỮA CÁC LẦN TIÊM.
-ĐƠN VỊ CỦA NỒNG ĐỘ CÓ THỂ LÀ mg/L, ug/l, ppm, ppb … .
-ĐỂ THỰC HIỆN CẦN TÌM MỘT CHẤT CÓ TÍNH CHẤT HÓA LÝ VÀ
CẤU TRÚC TƯƠNG TỰ VỚI CÁC CHẤT CẦN XÁC ĐỊNH, TRONG
NHIỀU TRƯỜNG HP SỬ DỤNG ĐỒNG VỊ DETERIUM CỦA HYDRO
THAY THẾ CHO CÁC NGUYÊN TỬ HYDRO TRONG PHÂN TỬ CHẤT
CẦN XÁC ĐỊNH (KHI CẦN CÓ TÍNH CHẤT RẤT GẦN NHAU)
-CHẤT NÀY ĐƯC GỌI LÀ CHẤT NỘI CHUẨN VÀ ĐƯC THÊM VÀO
TẤT CẢ CÁC DUNG DỊCH (MẪU, CHUẨN) VỚI NỒNG ĐỘ NHƯ NHAU.
-KHI TIÊM MẪU VÀ DỰNG ĐƯỜNG CHUẨN NGƯỜI TA BIỂU DIỄN TỈ
LỆ DIỆN TÍCH (HOẶC CHIỀU CAO) CỦA CHẤT PHÂN TÍCH VỚI
CHẤT NỘI CHUẨN THEO NỒNG ĐỘ C THAY VÌ BIỂU DIỄN TRỰC
TIẾP DIỆN TÍCH HAY CHIỀU CAO CỦA CHẤT PHÂN TÍCH
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN (INTERNAL STANDARD) (TT) :
-TRONG MỖI DUNG DỊCH TỈ LỆ NỒNG ĐỘ GIỮA CHẤT PHÂN TÍCH
VÀ NỘI CHUẨN LÀ HẰNG SỐ
-VÌ VẬY TỈ LỆ GIỮA CHIỀU CAO HAY DIỆN TÍCH PEAK CỦA 2 CHẤT

NÀY Ở CÁC THỂ TÍCH KHÁC NHAU VẪN LÀ HẰNG SỐ
-ĐIỀU NÀY GIÚP KHI BƠM MẪU, THỂ TÍCH MẪU VÀO CỘT CÓ THỂ
KHÁC NHAU NHƯNG TỈ LỆ DIỆN TÍCH HOẶC CHIỀU CAO VẪN
KHÔNG BỊ ẢNH HƯỞNG.
-TRÊN THỰC TẾ KHI THỂ TÍCH THAY ĐỔI NHIỀU TỈ LỆ NÀY CŨNG
THAY ĐỔI DÙ KHÔNG NHIỀU NÊN VIỆC BƠM MẪU LẶP LẠI CÀNG
CAO CÀNG TỐT.
-THỰC TẾ RẤT KHÓ TÌM RA CÁC CHẤT CÓ TÍNH CHẤT HOÀN TOÀN
GIỒNG NHAU NÊN CÁC ĐỒNG ĐẲNG LIÊN TIẾP HOẶC ĐỒNG PHÂN
HAY ĐƯC SỬ DỤNG
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN (INTERNAL STANDARD) (TT) :
-TRƯỜNG HP PHÂN TÍCH NHIỀU HP CHẤT CÓ TÍNH CHẤT KHÁC
NHAU TRONG CÙNG MỘT LẦN TIÊM MẪU CÓ THỂ SỬ DỤNG NHIỀU
CHẤT NỘI CHUẨN KHÁC NHAU.
-DO CHẤT NỘI CHUẨN THƯỜNG CÓ NỒNG ĐỘ CỐ ĐỊNH NÊN TỈ LỆ
NỒNG ĐỘ TRONG DÃY CHUẨN TỪ DUNG DỊCH THẤP NHẤT ĐẾN
CAO NHẤT CẦN TÍNH TOÁN LÀM SAO ĐỂ :
+ TỈ LỆ NỒNG ĐỘ GIỮA CHẤT XÁC ĐỊNH VÀ NỘI CHUẨN
KHÔNG KHÁC NHAU QUÁ NHIỀU
+ TỈ LỆ NÀY VẪN NẰM TRONG KHOẢNG THAY ĐỔI TUYẾN
TÍNH CỦA DIỆN TÍCH HOẶC CHIỀU CAO CỦA CHẤT PHÂN TÍCH VÀ
CHẤT NỘI CHUẨN THEO NỒNG ĐỘ
-ĐỂ NÂNG CAO ĐỘ ĐÚNG VÀ CHÍNH XÁC, NGAY CẢ KHI DÙNG
PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN NGƯỜI TA VẪN CÓ KHUYNH HƯỚNG
DÙNG BỘ TIÊM MẪU TỰ ĐỘNG
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
PHƯƠNG PHÁP THÊM CHUẨN (STANDARD ADDITION) :
-TRONG THỰC TẾ NỀN CỦA MẪU RẤT PHỨC TẠP. THÀNH PHẦN
CỦA MẪU CÓ THỂ LÀM CHO TÍN HIỆU CỦA CÙNG NỒNG ĐỘ CHẤT

SẼ LỚN HƠN HOẶC NHỎ HƠN ĐIỀU KIỆN CỦA DUNG DỊCH CHUẨN
-ĐIỀU NÀY DẪN ĐẾN KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CÓ THỂ KHÔNG ĐÚNG,
VÀ RẤT KHÓ PHÁT HIỆN.
-KHI TIẾN HÀNH XỬ LÝ MẪU, ĐỂ KIỂM TRA ĐỘ THU HỒI NGƯỜI TA
THƯỜNG THÊM DUNG DỊCH CHUẨN VÀO MẪU TRƯỚC KHI XỬ LÝ
(SPIKE)
-NẾU VIỆC XÁC ĐỊNH GẶP SAI SỐ SẼ DẪN ĐẾN ĐÁNH GIÁ SAI VỀ
QUI TRÌNH XỬ LÝ MẪU.
-KHI QUI TRÌNH XỬ LÝ MẪU CÓ HIỆU SUẤT THU HỒI KHÔNG LỚN
LẮM VIỆC XÁC ĐỊNH BẰNG ĐƯỜNG CHUẨN SẼ GÂY SAI SỐ LỚN.
CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯNG
PHƯƠNG PHÁP THÊM CHUẨN (STANDARD ADDITION) (TT):
-ĐỂ KHẮC PHỤC NGƯỜI TA SỬ DỤNG PHƯƠNG PHÁP THÊM CHUẨN
-NGUYÊN TẮC CỦA PHƯƠNG PHÁP :
+ MẪU KHÔNG THÊM DUNG DỊCH CHUẨN (S1 – C THÊM =
0), VÀ ÍT NHẤT 2 MẪU (VÍ DỤ S2 VỚI C THÊM = 1, S3 VỚI C THÊM =
2) ĐÃ ĐƯC THÊM NHỮNG LƯNG CHÍNH XÁC, ĐÃ BIẾT TRƯỚC
CỦA DUNG DỊCH CHUẨN ĐƯC ĐEM ĐI XỬ LÝ MẪU.
+ QUI TRÌNH XỬ LÝ MẪU PHẢI THỰC HIỆN GIỐNG HỆT
NHAU CHO CẢ 3 MẪU.
+ SAU KHI ĐÃ XỬ LÝ, 3 MẪU ĐƯC TIÊM VÀO MÁY GC VÀ
TÍN HIỆU ĐƯC GHI NHẬN.
+ LẬP ĐỒ THỊ CHUẨN VỚI TRỤC TUNG LÀ DIỆN TÍCH HOẶC
CHIỀU CAO (NẾU DÙNG NỘI CHUẨN SẼ LÀ TỈ LỆ DIỆN TÍCH HOẶC
TỈ LỆ CHIỀU CAO) VÀ TRỤC HOÀNH LÀ C THÊM
STANDARD ADDITION METHOD
0
5000
10000
15000

-1 -0.5 0 0.5 1 1.5 2 2.5
C THEM
PEAK - ARE
A
CAÙC PHÖÔNG PHAÙP ÑÒNH LÖÔÏNG

×