Nghiên cứu tạo cây đậu tương chuyển gen mang cấu trúc biểu hiện gen mã hóa kháng nguyên bề mặt của Virus H5N1 phục vụ sản xuất Vacxin thực vật

Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
HӜI NGHӎ KHOA HӐC VÀ CÔNG NGHӊ YHӜI NGHӎ KHOA HӐC VÀ CÔNG NGHӊ Y DƯӦCDƯӦC
CÁC TӌNH MIӄN NÚI PHÍA BҲCCÁC TӌNH MIӄN NÚI PHÍA BҲC
NGHIÊN CӬU TҤO CÂY ĐҰU TƯƠNG CHUYӆN GEN NGHIÊN CӬU TҤO CÂY ĐҰU TƯƠNG CHUYӆN GEN
MANG CҨU TRÚC BIӆU HIӊN GEN MÃ HOÁ KHÁNGMANG CҨU TRÚC BIӆU HIӊN GEN MÃ HOÁ KHÁNG
NGUYÊN Bӄ MҺT CӪA VIRUS H5N1 PHӨC VӨ SҦN NGUYÊN Bӄ MҺT CӪA VIRUS H5N1 PHӨC VӨ SҦN
XUҨT VACXIN THӴC VҰTXUҨT VACXIN THӴC VҰT
Ngưӡi thӵc hiӋn: NguyӉn Thu HiӅnNgưӡi thӵc hiӋn: NguyӉn Thu HiӅn
Bӝ môn Sinh hӑc Bӝ môn Sinh hӑc
Thái Nguyên 6/1/2012Thái Nguyên 6/1/2012
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
MӢ ĐҪUMӢ ĐҪU
HiӋnHiӋn naynay dӏchdӏch bӋnhbӋnh xҧyxҧy rara ngàyngày càngcàng nhiӅunhiӅu vàvà đangđang làlà mӕimӕi đeđe
doҥdoҥ lӟnlӟn đӃnđӃn cuӝccuӝc sӕngsӕng cӫacӫa concon ngưӡingưӡi TrongTrong đóđó cúmcúm giagia cҫmcҫm
đangđang trӣtrӣ thànhthành mӕimӕi nguynguy cơcơ lӟnlӟn ӣӣ hҫuhҫu hӃthӃt cáccác nưӟcnưӟc đһcđһc biӋtbiӋt làlà
cáccác quӕcquӕc giagia ӣӣ ChâuChâu áá vàvà ChâuChâu phiphi CúmCúm giagia cҫmcҫm làlà mӝtmӝt loҥiloҥi
bӋnhbӋnh truyӅntruyӅn nhiӉmnhiӉm cҩpcҩp tínhtính dodo nhómnhóm virusvirus cúmcúm AA gâygây nênnên gâygây
chocho cáccác loàiloài giagia cҫm,chim,thuӹcҫm,chim,thuӹ cҫmcҫm vàvà cócó thӇthӇ xâmxâm nhiӉmnhiӉm ӣӣ
mӝtmӝt sӕsӕ loàiloài đӝngđӝng vұtvұt cócó vúvú vàvà ӣӣ ngưӡingưӡi
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
H5N1 cã thÓ nhiÔm tõ gia cÇm sang ng-êi víi c¸c triÖu
chøng l©m sµng rÊt trÇm träng vµ g©y ra nhiÒu ca tö
vong.
Cúm A/H5N1
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
Virus cúm có tính chҩt đһc
biӋt:
- Bӝ gen phân cҳt sҹn
thành 8 phân đoҥn khác
nhau
-Hai gen thuӝc phân đoҥn

4 và 6 mã hóa cho hai
kháng nguyên quan trong
nhҩt trên bӅ mһt cӫaviruslà
- Hemagglutinin(HA)
- Neuraminidase(NA)
Virus cúm A/H5N1
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
Đӕi vӟi dӏch cúm trên ngưӡi, nghiên cӭu
phát triӇn vaccine không nhӳng ngăn
ngӯa làm giҧm đưӧc bӋnh ӣ gia cҫm, mà
còn khӕng chӃ nguӗn truyӅn lây cӫa loҥi
virus nguy hiӇm này sang ngưӡi.
* Vacxin nhưӧc đӝc (attenuated vaccine)
* Vacxin bҩt hoҥt (inactivated vaccine)
* Vacxin thӃ hӋ mӟi:
- vacxin tái tә hӧp (recombination
vaccine)
- vacxin thӵc vұt (plant-base vaccine),
PHÒNG CHӔNGPHÒNG CHӔNG
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
Ưu điƯu điӇӇm:m:

Là loҥLà loҥi vacxin di vacxin dưӟưӟi đơn i đơn vӏvӏ, , sҧn xusҧn xuҩҩt trong ht trong hӋ Ӌ ththӕӕng thng thӵӵc c
vvұұt.t.
 DDӉ Ӊ ssӱ dөӱ dөngng: : đưa đưa vàvào cơ tho cơ thӇ Ӈ theo đtheo đưӡưӡng tiêu ng tiêu hóhóa. a.
 DDӉ Ӊ sҧn xusҧn xuҩҩt kht khӕӕi li lưӧưӧng lng lӟӟnn, , giá giá thành thҩp.thành thҩp.
 TíTính nh әәn đn đӏӏnh caonh cao, , ddӉ Ӊ bҧo quҧnbҧo quҧn, , ddӉ Ӊ ssӱ dөӱ dөng ng và và kinh tkinh tӃ Ӄ
cao.cao.
 Đӝ Đӝ an an toàtoàn caon cao, , íít t bӏ bӏ nhinhiӉӉm vm vӟӟi i cácác c tátác nhân gây bc nhân gây bӋӋnh nh
cӫcӫa đa đӝӝng vng vұұt t và và ngngưӡưӡi.i.

 Có Có ththӇ Ӈ không ckhông cҫҫn tinh n tinh sҥsҥch như ch như cácác c loҥloҥi vacxin i vacxin khákhác.c.
VACXIN THVACXIN THӴӴC VC VҰҰTT
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
MӨC TIÊUMӨC TIÊU
 Tҥo cây đұu tương chuyӇn gen mang cҩu trúc biӇu Tҥo cây đұu tương chuyӇn gen mang cҩu trúc biӇu
hiӋn gen mã hóa kháng nguyên bӅ mһt cӫa virut hiӋn gen mã hóa kháng nguyên bӅ mһt cӫa virut
H5N1H5N1
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
VҰT LIӊU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CӬUVҰT LIӊU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CӬU
 Giӕng đұu tương ĐTGiӕng đұu tương ĐT12 12 do Trung tâm Nghiên cӭu Phát triӇn do Trung tâm Nghiên cӭu Phát triӇn
cây đұu đӛ, ViӋn cây lương thӵc và cây thӵc phҭm cung cҩp.cây đұu đӛ, ViӋn cây lương thӵc và cây thӵc phҭm cung cҩp.
 ChӫChӫng vi khung vi khuҭҭnn A.tumefaciens A.tumefaciens EHAEHA105 105 chӭa vector pBetachӭa vector pBeta
PhasoPhaso HA do ViӋn công nghӋ sinh hӑc cung cHA do ViӋn công nghӋ sinh hӑc cung cҩҩp.p.
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
QUY TRÌNH CHUYӆN GENQUY TRÌNH CHUYӆN GEN
Hҥt đұu tương Hҥt sau khӱ trùng 3
ngày
Gây nhiӉm 40¶ Cҧm ӭng tҥo chӗi
trên SIM50/5d
Chӑn lӑc trên SIM-
Km100/4 tuҫn
Kéo dài chӗi trên SEM-
Km50/ 4 tuҫn
Ra rӉ trên RM /2
tuҫn
Ra cây trên
cát/trҩu
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
KӃt quҧ chuyӇn các cҩu trúc HA1 vào nách lá KӃt quҧ chuyӇn các cҩu trúc HA1 vào nách lá
mҫm giӕng đұu tương ĐT12mҫm giӕng đұu tương ĐT12

LôTNLôTN Sӕ mүu biӃn Sӕ mүu biӃn
nҥpnҥp
Sӕ mүu tҥo Sӕ mүu tҥo
chӗichӗi
Sӕ chӗi kéo Sӕ chӗi kéo
dàidài
Sӕ chӗi ra Sӕ chӗi ra
rӉrӉ
Sӕ cây Sӕ cây
sӕng trên sӕng trên
giá thӇgiá thӇ
11
250250 8080 3030 1616 1212
22
220220 7070 2525 2525 1010
33
180180 5555 2020 1414 1010
TәngTәng 650650 205205 6565 4545 3232
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
KӃt quҧ chuyӇn các cҩu trúc HAKӃt quҧ chuyӇn các cҩu trúc HA1 1 vào nách lá vào nách lá
mҫm giӕng đұu tương ĐTmҫm giӕng đұu tương ĐT1212
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
KӃt quҧ kiӇm tra cây chuyӇn gen HA bҵng phҧn ӭng PCRKӃt quҧ kiӇm tra cây chuyӇn gen HA bҵng phҧn ӭng PCR
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
KӂT LUҰNKӂT LUҰN
SӱSӱ dөngdөng phươngphương pháppháp chuyӇnchuyӇn gengen thôngthông quaqua náchnách lálá
mҫmmҫm nhӡnhӡ vivi khuҭnkhuҭn AA tumefacientumefacien,, bưӟcbưӟc đҫuđҫu đãđã thuthu
đưӧcđưӧc 88 dòngdòng câycây TT00 mangmang gengen HAHA ĐâyĐây làlà tiӅntiӅn đӅđӅ
quanquan trongtrong chocho viӋcviӋc tҥotҥo đưӧcđưӧc cáccác dòngdòng đұuđұu tươngtương
mangmang gengen mãmã hoáhoá chocho cáccác khángkháng nguyênnguyên cӫacӫa virusvirus

HH55NN11 làmlàm vacinevacine ănăn đӵơcđӵơc chocho giagia cҫmcҫm phòngphòng chӕngchӕng
bӋnhbӋnh HH55NN11 ӣӣ ViӋtViӋt NamNam
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
Các dòng đұu tương chuyӇn gen thӃ hӋ TCác dòng đұu tương chuyӇn gen thӃ hӋ T00
Tài liӋu chia sҿ tҥi: wWw.SinhHoc.edu.vn
Thanks for your attention!!!