Nghiên cứu một số tác dụng dược lý của dịch chiết cây Hoàn ngọc

Nghiên cứu một số tác dụng dược lý của dịch chiết
cây hoàn ngọc

Đề tài sinh viên NCKH
Chuyên ngành: Hóa sinh

Thực hiện: Sinh viên Phùng Thị Hồng Lưỡng
Hướng dẫn: PGS.TS. Lương Thị Hồng Vân



Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Đặt vấn đề
Gốc tự do (GTD) l một trong những nguyờn nhõn
gõy ra sự lóo húa v rất nhiều cỏc loại bệnh nh:
ung th, viờm khớp, tim mạch, ỏi thỏo ờng,
nhiễm ộc
Cỏc GTD có thể c loi b nh cỏc cht hoỏ hc
c bit c gi chung l cỏc cht chng oxy hoỏ
(COXH), chỳng có nhiều trong các loại rau, củ,
quả và một số cây thuốc.
Cây HN vốn đợc dân gian sử dụng nh một cây
thuốc có khả năng chữa rất nhiều bệnh khác
nhau. Nhng một số tác dụng thực của chúng nh
chống oxy hóa, ức chế một số vi khuẩn còn
cha đợc chứng minh một cách đầy đủ.

Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Mục tiêu nghiên cứu
1. Xác định hm lợng một số chất có tác dụng
chống oxy hóa trong cây Hon ngọc

2. Xác định khả năng kháng một số vi khuẩn
có hại của dịch chiết từ lá v rễ cây Hon
ngọc .
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Tæng quan tµi liÖu
1. Giới thiệu chung về cây Ho
à
n Ngọc

2. Gốc tự do v
à
nguyên nhân h
ì
nh th
à
nh
gốc tự do

3. Một số hƣớng giải quyết gốc tự do

4. Đại cƣơng về c
á
c chất chống oxy ho
á
5. Đặc điểm của một số chất chống oxy ho
á

thƣờng đƣợc d
ù

ng trong dƣợc phẩm.
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU
 §èi tîng nghiên cøu
Mét sè bé phËn cña c©y
HN ®îc nghiªn cøu gåm
cã:
+ Lá cây HN

+ RÔ cây HN

Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
PHNG PHP, VT LIU NGHIấN CU
1. Phng phỏp nghiờn cứu
:

Sử dụng phng phỏp thực
nghiệm, phõn tớch, mụ tả, so
sỏnh các mẫu độc lập và so
với đối chứng.

2. Vt liu nghiờn cứu
Sử dụng 2 chủng vi khuẩn l
Escherichia. coli ( E.coli )
v Bacillus. subtilis (B.
Subtilis) để thử hoạt tính
kháng sinh của lá và rễ cây
hoàn ngọc.

Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn

3. Hoá chất:
Gồm cỏc hoỏ chất chính nh:
NaCl, Pepton, petrol ete, bubfer, ethanol, kali hidroxid, Natri
ascobat, methanol, - tocopherol, ascobic acid chuẩn gốc

4. Thiết bị nghiờn cứu:
+ Mỏy cực phổ
+ Mỏy sắc ký lỏng hiệu cao năng (HPLC)
+ Tủ ấm nuụi vi khuẩn
+ Buồng nuôi cấy vi khuẩn
+ Cân phân tích
+ Nồi khử trùng ớt
+ Và một số thiết bị mỏy múc khỏc
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
HÖ thèng m¸y cùc
phæ
HÖ thèng m¸y s¾c ký
láng hiÖu cao n¨ng
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn


Kỹ thuật tiến hnh


Kỹ thuật thu dịch chiết từ lá, rễ cây HN.
Kỹ thuật xác định hoạt tính kháng khuẩn
của dịch chiết từ cây HN.
Kỹ thuật xác định hàm lợng vitamin E
bằng máy sắc ký lỏng hiệu cao năng.
Kỹ thuật xác định hm lợng vitamin C

bằng máy cực phổ.
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Kết quả nghiên cứu
1. Hm lợng một số chất COXH trong cõy HN








Hm lợng vitamin C trong cỏc mẫu dịch chiết
(mg/kg khụ)

Biểu đồ hàm lợng vitamin C trong các mẫu dịch chiết
42.0854
0.8888
4.6478
0.0717
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45

Lá tơi Lá khô Rễ tơi Rễ khô
Tên mẫu
Hm lợng VTM C (mg/kg khô)
Hm lợng
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn


BiÎ u ®å hµm l- î ng VTM E trong c¸ c mÉu dÞch chiÕt

53.0729
0
0
13.3977
0
10
20
30
40
50
60
L¸ t- ¬i
RÔ t-¬i
RÔ kh«
L¸ kh«
MÉu

Hµm
l- î ng
VTM
E(mg/

kg
kh«
Hµm l- î ng
Hàm lîng vitamin E trong c¸c mÉu dÞch chiÕt
(mg/kg kh«)
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
2. Kết quả thử tác dụng kháng khuẩn
nh chụp một mẫu thí
nghiệm thử hoạt tớnh khỏng
khuẩn sau 30 giờ nuôi cấy.
Mẫu đối chứng (gia)
Cỏc mẫu thử dịch chiết
cõy HN ở cỏc nồng ộ khỏc
nhau (xung quanh)
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
2.1. So sánh khả năng kháng khuẩn của các
mẫu dịch chiết cây HN giữa hai loài vi khuẩn






Kh nng khỏng khun ca dịch chit lỏ ti hon
ngc (chit bng nc ct) trờn hai loi vi khun
0.733
0.333
0.867
0.433
1.333

0.533
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
d(cm)
0,125 0,25 0,5
Nồng độ (g/ml)

Vi khuẩn B. subtilis .
Vi khuẩn E. coli
Biểu đồ so sánh khả năng kháng khuẩn
của
dịch chiết lá tơi cây HN chiết bằng nớc
cất
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Kh nng khỏng khuẩn của dịch chiết lỏ ti HN
(chiết bằng NaCl 0.9%) trờn hai loi vi khuẩn
Biểu đồ so sánh khả năng kháng khuẩn của dịch chiết
lá tơi cây HN chiết bằng NaCl 0.9 %
d (cm)
0.433
0.533
0.5
0.6
0.9

0.833
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
0,125 0,25 0,5
Nồng độ (g/ml)

Vi khuẩn B. subtilis
Vi khuẩn E. coli
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Kh nng khỏng khuẩn của dịch chiết rễ ti
(chiết bằng nớc cất) trờn hai loi vi khuẩn






Biểu đồ so sánh khả năng kháng khuẩn của dịch chiết
rễ tơi cây HN chiết bằng nớc cất
0.533
0.567
0.733

0.7
0.967
0.767
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
d(cm)
0,125 0,25 0,5
Nồng độ (g/ml)


Vi khuẩn B. subtilis .
Vi khuẩn E. coli . i
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Kh nng khỏng khuẩn của dịch chiết rễ
ti
(chiết bằng NaCl 0.9%) trờn hai loi vi khuẩn

Biểu đồ so sánh khả năng kháng khuẩn của dịch chiết
rễ tơi cây HN chiết bằng NaCl 0.9%
0.7
0.533
1
0.733
1.033
0.677
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
d(cm)
0,125 0,25 0,5
Nồng độ (g/ml)

Vi khuẩn B. subtilis .
Vi khuẩn E. coli .
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Hoạt tính kháng vi khuẩn B. subtilis của dịch
chiết lá và rễ tơi cây HN chiết bằng nớc cất
2.2. So sánh khả năng kháng khuẩn của các mẫu
dịch chiết cây HN thử trên B. subtilis
0

0.2
0.4
0.6
0.8
1
d (cm)
Biểu đồ so sá nh hoạ t tính kháng vi khuẩn B.subtilis
của dịch chiết lá và rễ t- ơi cây HN chiết bằng n- ớ c cất
HLT
HRT
0.125
0.25
0.5
Nồng độ(g/ml)
0.733
0.533
0.867
0.733
1.333
0.967
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Ho¹t tÝnh kh¸ng vi khuÈn B. subtilis cña dÞch
chiÕt l¸ vµ rÔ t¬i c©y HN chiÕt b»ng NaCl
0.9%
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1

d (cm)
BiÓu ®å so s¸nh ho¹ t tÝnh kh¸ng vi khuÈn B.subtilis
cña dÞch chiÕt l¸ vµ rÔ t- ¬i c©y HN chiÕt b»ng NaCl
0.9%
NLT
NRT
0.125
0.25
0.5
Nång ®é(g/ml)
0.433
0.7
0.5
1
0.9
1.033
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Hoạt tính kháng vi khuẩn E. coli của dịch chiết lá
và rễ tơi cây HN chiết bằng nớc cất
2.3. So sánh khả năng kháng khuẩn của các mẫu
dịch chiết cây HN thử trên E. coli

0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
d (cm)
Biểu đồ so sá nh hoạ t tính kháng vi khuẩn E.coli của

dịch chiết lá và rễ t- ơi cây HN chiết bằng n- ớ c cất
HLT
HRT
0.125
0.25
0.5
Nồng độ(g/ml)
0.333
0.567
0.433
0.7
0.533
0.767
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Ho¹t tÝnh kh¸ng vi khuÈn E. coli cña dÞch
chiÕt l¸ vµ rÔ t¬i c©y HN chiÕt b»ng NaCl
0.9%
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
d (cm)
BiÓu ®å so s¸ nh ho¹ t tÝnh kh¸ng vi khuÈn E.coli cña
dÞch chiÕt l¸ vµ rÔ t- ¬i c©y HN chiÕt b»ng NaCl 0.9%
NLT
NRT
0.125
0.25

0.5
Nång ®é(g/ml)
0.533
0.533
67
0.6
0.677
0.833
0.733
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Ho¹t tÝnh kh¸ng vi khuÈn B.subtilis cña dÞch
chiÕt l¸ t¬i c©y HN gi÷a hai dung m«i kh¸c nhau
3.4. So s¸nh ho¹t tÝnh kh¸ng khuÈn cña c¸c mÉu dÞch
chiÕt khi chiÕt ë c¸c dung m«i kh¸c nhau
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
1.4
d (cm)
BiÓu ®å so s¸ nh ho¹ t tÝnh kh¸ ng vi khuÈn B.subtilis cña dÞch
chiÕt l¸ t- ¬i c©y HN gi÷a hai dung m«i kh¸ c nhau
n-í c cÊt
NaCl 0.9%
0.733
0.433
0.867

0.5
1.333
0.9
Nång ®é(g/ml)
0.125
0.25
0.5
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Ho¹t tÝnh kh¸ng vi khuÈn B.subtilis cña dÞch
chiÕt rÔ t¬i c©y HN gi÷a hai dung m«i kh¸c
nhau
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
d (cm)
BiÓu ®å so s¸ nh ho¹ t tÝnh kh¸ng vi khuÈn B.subtilis cña
dÞch chiÕt rÔ t- ¬i c©y HN gi÷a hai dung m«i kh¸c nhau
n- í c cÊt
NaCl 0.9%
0.533
0.7
0.733
1
0.967
1.033
Nång ®é(g/ml)

0.125
0.25
0.5
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn
Ho¹t tÝnh kh¸ng vi khuÈn E. coli cña dÞch
chiÕt l¸ t¬i c©y HN gi÷a hai dung m«i kh¸c
nhau
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
d (cm)
BiÓu ®å so s¸ nh ho¹ t tÝnh kh¸ng vi khuÈn E.coli cña dÞch
chiÕt l¸ t- ¬i c©y HN gi÷a hai dung m«i kh¸c nhau
n- í c cÊt
NaCl 0.9%
0.333
0.533
0.433
0.6
0.533
0.833
Nång ®é(g/ml)
0.125
0.25
0.5
Tài liệu chia sẻ tại: wWw.SinhHoc.edu.vn

Ho¹t tÝnh kh¸ng vi khuÈn E. coli cña dÞch
chiÕt rÔ t¬i c©y HN gi÷a hai dung m«i kh¸c
nhau
0
0.2
0.4
0.6
0.8
1
1.2
d (cm)
BiÓu ®å so s¸ nh ho¹ t tÝnh kh¸ng vi khuÈn E.coli cña dÞch
chiÕt rÔ t- ¬i c©y HN gi÷a hai dung m«i kh¸c nhau
n- í c cÊt
NaCl 0.9%
0.576
0.533
0.7
0.677
0.767
0.733
Nång ®é(g/ml)
0.125
0.25
0.5
Ti liu chia s ti: wWw.SinhHoc.edu.vn
Nhận xét chung
Các kết quả nghiên cứu của chúng tôi cho thấy:
+ Các bộ phận của cây HN có tác dụng d-
ợc lý rõ ràng bởi nó có khả năng ức chế các vi

khuẩn gây bệnh và nó có chứa một số chất
COXH.
+ Hàm lợng các chất COXH trong lá khá
cao nhng trong rễ thì rất ít.
+ Cũng từ nghiên cứu của chúng tôi cho
thấy cây HN chỉ có tác dụng dợc lý tốt khi
còn tơi. Khi đã sấy khô thì tác dụng của nó
giảm một cách rõ rệt, thậm chí không còn
tác dụng.