Bài thuyết trình Tiêu chuẩn hiện hành để kiểm nghiệm Vibrio

Tiêu chu n hi n hành đ ki m nghi m ẩ ệ ể ể ệ Vibrio
1. Gi i thi u chungớ ệ

Vibrio  ộ ọ Vibrionaceae ộ Vibrionales ớ Gammaproteobacteria 
Proteobacteria.

  ẩ ẩ

  !"ộ

# $%&ỵ

#'"ử

()  *+,-- ./01ể ở ị

23'/'3456-'34*
7
8+3"'3'$

9:    +; ")    :  ẩ ệ ả ủ ở ự ẩ ừ ộ ậ ể
Gi ng ố Vibrio g m 4 loàithu c tác nhân gây b nh cho ng i ồ ộ ệ ườ
g m:ồ

V. Cholerae

V. Parahaemolyticus

V. Vulnificus

V. Alginolyticus


Vibrio parahaemolyticus:Vibrio cholerae;    ả ệ ườ ộ

Vibrio vulnificus ; :"  <:+  " -" ể ơ ể ươ ở ặ ệ
   : =2     6 ướ ể ứ ẩ ệ ứ ễ ẩ ườ ả
'+ : +)=ả ạ
V. cholerae V. parahaemolyticus V. vulnificus V. alginolyticus
-
(  "6-'34ả ứ
-
2  " ưở ượ ườ
" >7ở
"
/
-
?3-3-"'3
-
9'3-3"6'34
-
9+3 '"'3ượ
-
# 33ử
-
/;  "  ể ưở ườ ứ
@01./)  "ể ượ
  AB!@1=ườ ứ
-
(  "6-'34ả ứ
-

()  "" ể ượ ở
7>
"
/
-
(  ?*9/4ả ứ
-
# 33ử
-
#+3'"'3
-
#' ơ
-
2 "  ưở ườ ứ
B1 +" ứ ườ
 !@1=ứ
-
#+3
'"'3
-
# ưở
 "ượ
 ;ườ
+"ứ
 ;B!@1ườ
=
-
#+3
'"'3
-

()  ể ượ
" ườ
 +!@1=ứ
2. Quy trình phân tích
2.1 Tăng sinh ch n l cọ ọ

Vibrio '     )  ' "    3" +    !1ưở ườ ứ
 ./ "    ườ ợ V. cholera V. alginolyticus : V. vulnificus; 
/"'3"  ườ ợ V. parahaemolyticus.

C  D":" 3"3+   0Eẫ ỏ ướ ủ ở
"
/"!BF7> =ờ

C D":"G(H:%  3"3+ : ")ẫ ứ ướ
-     0Eậ ẫ ủ ở
"
/"!BF7> =ờ
2.2 Phân l pậ

" 2/I8 0EỬ ườ ở
@
/"!BF77 =ờ

/    ' 28? )=ẩ ạ ặ ư ườ ạ

0EỦ
@
/ '" +3"  ';=ể ướ ử ệ

Khuẩn lạc
V.Cholerae và V.Alginolyticus
Khuẩn lạc
V.Parahaemolyticus và V.Vulnificus
- Đường kính 2 – 3 mm
- Màu vàng
- Láng, hơi phẳng
- Tâm đục và xung quanh khuẩn lạc có quầng trắng đục.
- Đường kính 3 – 4 mm
- Màu từ xanh đến xanh dương
2.3 Th nghi m sinh hóaử ệ
K t lu n th nghi m sinh hóa c a ế ậ ử ệ ủ V. cholera
  ử ệ ả
5.( 4
9"'3 
?* 
9/ 4
2? 
J-" 4
C"'3 4
8"'3 4
56-'3 4
2$ ư
@1 4
01 4
A1 
B1 
!@1 
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Quan sát tính di đ ng và hình thái c a vi khu n trên kính hi n viộ ủ ẩ ể


K')- $ : : $>@L=ướ ể ở ậ

 +< D-  - +"=ậ ả ộ ộ ạ

2+D
o
9 $ !D *"    :"    ' &   !   +  $  + $  ẫ ướ ỏ ọ ậ ỏ
3++=8"+  ++$ ::  - 3" ả ự ể ẩ ả ộ ữ
    +: =ườ ẳ ừ ườ
o
9$7D. ! + - +$ ! )+ )=.+:ỏ ọ ị ỏ ọ ả
  : '  " -  =ẩ ả ẩ ẽ ị ạ ộ ữ
o
8"+ +$ :+ 3:  -  '" =ả ể ẩ ả ộ ư ổ
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m kh năng lên men đ ngử ệ ả ườ

 ườ DPhenol red broth base pH 7.4

  ỉ ị Dđ phenolỏ   ':*- A=Bỏ ể ướ

#   +3Dể ệ ả lactosesucrosemannose

I ' :"   %ổ ườ ườ ử

8;: 0Eủ
@
/"!BF7@ờ

Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m kh năng lên men đ ngử ệ ả ườ
•
M))- :"'-   :' ự ổ ỉ ị ơ
/5
7
 "   "=ạ ượ ẫ ạ
•
#+< Dả

(  4D  :=ả ứ ườ ể

(  D ; =ả ứ ườ ỏ
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m Decarboxylaseử ệ

HN3 "6'3 -" # "  " ; "6  -   " ạ ạ ủ ạ
-:/5
7
=

 ườ DDecarboxylase Basal Medium

 ỉ ịDBromothymol purple pH 6.0:%   *O=7FA=B   ể ổ ừ
:$

#  Dể ệ ADHLDC.

* %  ử ườ


I '- ")P  0Eổ ủ
@
/"!+>=
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m Decarboxylaseử ệ

#+< Dả

C  $/5ườ ụ
7
' *  ổ ổ ỉ
 =ị

C ":ườ
MT tr c khi c yướ ấ
( - $ứ ươ
( $ứ
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m kh năng sinh Indolử ệ ả

C D2"ườ

2 D#":Q'ử

/"+33 +J-"ể

>>=OỦ
@
/"7>ờ


#+< Dả
4I+   ặ ườ ỏ
I+   ;:  ;-"8"+ ặ ườ ủ ử
C3; J-" "=ủ ạ
Chủng VSV MT canh trypton
Thu c th Kovac’số ử
Pứ dương tính Pứ âm tính
37
o
C / 24h
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m kh năng sinh Hử ệ ả
2
S
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m kh năng sinh Hử ệ ả
2
S

HN-3'P"-'3-"#  ' 6G)'  ;-  ổ ợ ẽ ự ể ứ ư
R'3'3":;$*
7
8=

 ườ D

2 +D#J?28Jạ

2  D8JC(J?ạ ứ


MS3DI8?

/:"   0Eườ ủ
@
/"7>F>B " +E+ =ờ ặ
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m kh năng sinh Hử ệ ả
2
S
Kết quả:
(+) Môi trường xuất hiện màu
đen do H
2
S tạo tủa đen với sulfide
trong môi trường.
(-)Môi trường không có sự xuất
hiện hay chuyển màu đen.
(+)ĐC
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m ử ệ 

L) '  -  3N"6-'3 8=HN<   3Nị ự ệ ệ ủ ở ọ ủ ệ
""3"6-'3" +    +$=ỗ ệ ử ủ

ửDp – phenylenediamine.

/+ +  7>F>B =ạ ủ ờ

2+ +3"!"7)Dụ


.G :"33FF333-3--""-3!1-%<3-ọ
+ '+ ;=ọ

. +': F"333-3"63!1:TF"!1"ỏ ọ
3"=
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m Oxidaseử ệ
Kết quả:
(+) Xuất hiện màu xanh dương đậm do có sự
hiện diện của cytochrom khử trong tế bào làm
thuốc thử oxy hóa thành indolphenol.
(-) Không xuất hiện màu xanh dương.
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m ONPGử ệ

/)#+3"'3  "+" "3NUF"'-'3=HNổ ợ ạ
6G) "'3:33'3;:V:  "'3:""+"=ủ ậ ể

  ườ D ONPG broth 0.6% o – nitrophenyl – D – galactopyranoside "
-- .ị
7
*(5
>
!C=

# % : 0Eử ườ ủ
@
/"7> =ờ
Th nghi m sinh hóa:ử ệ
Th nghi m ONPGử ệ

Kết quả:
(+) Xuất hiện màu vàng trong dịch cấy do quá trình thủy phân phóng thích o – nitrophenol có màu vàng.
(-) Không xuất hiện màu vàng.
9"'3
/ 8ủ
75.(" ( 4ứ ( ứ
qua đêmủ
37
o
C
C: