CHƯƠNG 1:
LỜI MỞ ĐẦU
1.1. Đặt vấn đề
!"#$%&'()
*+,-./#0!12"+3&'4056
2.2%7#8$*9!&:;<+&88<;=
"- > ? %. 28$ # ; @ % @A$
)26B/2"C+DE
!- 7 F! - ? D! ( ( 45$ 02 !G$
,&<EHE-!*>8*#-+E
&<"D&%$5*'40!1262H=;C$F!
F"-B*B5&<&'-?D!;H20#
I2!-7@<B,
DE$4>!-7J<+D!&&B2K
&H2BBD4L?ME<!H@%%C$
=@0BD>B %CB*8-@D!-!N*FO
BM$!-P-!/$N/$&<QB2M&G"-$8E
(45B40*'RGBSB E$B4>-/&T*2
&5&E-%$??U@25H&=$25H@I
D4-&5$DB4B &5@!-JE$N?-5
&8&5E$N@DG*VE&5<
?W&#!-424=?8"+?>@-RGBSB E$
;E6*8<+D!,.BBD()4L?M
#!124C$!H@%,.-HEN&*
JDX2%/B#%D-#!12
&&'4L?M<8-BYN486Z8$[
\
F$S$0.$HE$Z+JDX2X<
!"3;$=%C@0BD>B ]^_&T!-E&'-
?MG>BD!`P4H@D$@0BDHEN$E/
%VHE,-?M"+22=065&#
2+ ) 4=$ + a2 *. >$ > !12$ HE & #
)B E$BD4L?M--H4CB$B"1$
B52E-'!5>/%8G4C28&7!`P
4H@DHEN*5,GB#$&%=P4H
B 4 &T B & &' *> C &% = P 4H 4 C
Bacillus thuringiensis]^_%2=P4HB4%%<
&72 &= BHE N B &=B 2+ )&' <
)*>C
X 5EB`;CJ=P4H4C^/BD
&02 @0 5 *' # !12 = P 4H 4 C Bacillus
thuringiensis ]^_ * # 4K ; C$ E / BD "72 5
*'DEBW`:!<"%"(B<!.!-!>D
S B EE/ &< “phân tích chế phẩm Bacillus thuringiensis” &'
>DI2HE?>&';S"725*'B!.
!-!#"72#!12
1.2. Mục đích
bHE?>!.!-!-&5*'40!12J=P
4H4C^%&8E/3/5*'J&
E"+N2
O
cHG&*'d4=@LBacillus thuringiensis#
!12
cb-&D;0/?D4H8J#!12^
e
CHƯƠNG 2:
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1. Thuốc trừ sâu sinh học Bt
2.1.1. Lịch sử
&/B(2fgh$@-C4)-!&T!-
D 2 * B "1 HE@D I2 B &: /* Bacillus
bombycis&%B(2i$+YC)ZK*^*
&T!-D*B"1E/*4H-26 BYZ
0B&:/*Bacillus thuringiensis]B#9*^_&%&#
"0,# "jbb$)&T !-D<J^"k 4
/<*4H"-4H$4H"$4H%2+P
&%B"1^&T&'#8=P4H4L?M+
D!6<$26&+D=P4H4C^
*&/&'!-DB(2ih8X ^0@64B
Cl4m$"+S2E/HHE -#&
J 2 4= 4H .l4m& /!H * ! B"1
n
Bacillus thuringiensis$ C &% * Bacillus sotto X(2 i$ ^? o
)ZK$S25E26@2S6$2=B
"1"k 4 . 7+Y$% 4KP 4H528$C *
"1ThuringX(2ig$#!12^&T&'/K,
>J?E<CB+D4C$)&T!-D
<J^%"0("k428$405,#!12
%2*'&=BGd&&7(D*>?D4HB26
!d -?M/<*4H8<@ +Y6
<BY"G "-ZT-&%/nh*4H8
@a2-J^$&% @N2@-*4H
8%6DX2DE=P4HPB"1^&T#2!
*)=P4H4C/#V6
XBD?Y*2=P4H$DE)&T-24=
PB"1^p!BD =JHE&7 8-=HE
"-4H=@+"-4H$=*F"-4H&MH$
4H=*-$=+"-4HQqDX2$#!12^]Bacillus
thuringiensis_ &T &' / K P (2 ig.\h#!12^
!"1B&&T"#;0=!`GD2B
&N&=B24=4H8G/&N4H$@2
9$4H-2$4H.$4H8@+$4H&R-*C40!12.
28 % / ) "- < o^ O\hhhr$shhhrt ^
bEOnr$u@?8@$u@R?8?+&:
s
Hình 2.1. Sản phẩm Bt trên thị trường
2.1.2. Phân loại
%2P 4H 4C$ % N= B 4B ] Bacillus
thuringiensis_$!d?DB,DB-*84H4H=*-$
4H.$4H$4H"$4H(8!QR%<*8= Bacillus
thuringiensis / ) # o Bacilus thuringiensis B
vm"74E!$856?8@LB7$#@#
??&:$?YP5Y2C8"Bacillus thuringiensis
B4*44]/"-"_856?87+o?
8 ; */ 2 ^**4 44 ^* B 4*44$
!]oe_=&'+6<?8?$@52
Q?YP2w$5YN
Bacillus thuringiensisB"4"]/"-^"$*$^
4!!*4$^*_$856?8@LB7+o?
&'8;*/2Bacillus thuringiensis Berliner$B"4"$
E!oOO@=&'+<?8@52
$4,E<!Y$??&:?YP5Y@!?!
4H"$4H.$4HB<*84H"-8$2B
g
HE(-Bacillus thuringiensisB24$856?8@L
B 7 +o? &' 8 ; */ 2 ^**4
thuringiensis BerlinerB24$4E!ff@=&'+
?8@"+B@52$?YP5Y@
!?!82$HE(-$HE0$HE+D!Bacillus
thuringiensisB]/"-xEfnh_$?Y&7P@C-
K"HE$$HE
2.1.3. Tính an toàn của thuốc sinh học Bt
R-40!12^&'4L?MT/#$#2&#\y
d40*')=P4H/)#B,
(2iihRE%G&:D-*+Y%J
&GR-!REG:"+06-*4B "-
eh(2&'4L?MT/#$F
S25E065JF4K"A)E2+)
]z$iiftxR*"tiin_{7P(2is&#(2iif
8{|D%G5fh40!12B4^&T&'&("k"72
&8H}%.\h40!12"04-&HEJ
r~B<GJ40!12B4^B&T"•&I
€{+N82=E72J40!12^)$&
B % . 4= "- : - 4 B "+ J &G "-•
]lR$\hhh_
2.1.3.1. Sức khỏe con người
f
R-/KB<GJ=P4HB4^.
eh(2&TK2I"+S25E?5D06
BD(H$"-2D2*H24E/L]xR*"*$
iin_ RM ^0 BD x+ ) "| ]‚ zB2* +
E‚oz_&T7",&--&=B 2G-
!^&T&'L6*<*'.z4*E
Xm"]z_$-?>-B<+=P4H624=)
&8CJ"|5E€{#;0LD2/f)2w
E(2^.28B`nE$B-E"-
Q"+HE K@DS X,) ( 2^ƒE
OE*/M`"+@&Ea2@D•.
,$62K!HL!%@!HJE@6?B?8?E
]&<"D!`GD2_]z$iis_
2.1.3.2. Ảnh hưởng đến môi trường
X 2 B D 4 - &5 X 2 ! ^N8
.&=@<&5B&'!H*8B?8@5&BS%"+
%"0(?E7:52;2E"+@<
B,&<"D&5$B@!HJE%"!.?
-4-2:)$?-&J‚R-E/&T#
,/K&* !I2&<-06JHEN^
&=B4B &5B-*+Y"-&'2*%G
+D!{#;05E$F"+HE06@5*'&=
B-4B &5"+!0*&G5+JF$ 2GE
0"-4B E&'L*k^B*<*'.<4B
>#%70E&<"DNC>5E"+%4>
i
E&d;7B4B &5,--&N%E/
*D > B ^ B - &N % E/ *D > B E< =
]B4>$iin_$V"+;4-5E4>"-@D
,--&NNHE^BHE"+E7^]
B4>$iis_
2.1.3.3. Động vật và côn trùng
R-LD2#/%$$*$A$-$#$"|
+B25E!^"+HE,06%8
RV528I$&=V"+HE06
&#-*+Y%G:&B (24=*B
@C-K]z$iis_X(2iii$%2@--B<06
%8J8!5PHE+^YJ*@2 Monarch
^--E&THE2=;H2B*8B<,J2>
B ^%7HE&=B4B "+?DE/$,
/K&HE5E+^HE06"+&-"7&=
B;7@2Monarch/-&NXw*>/K'!-
,-"C{|BR?&T5!,+&7
HE?>;-S&--J/1B<06J+^
&=B;7@2 MonarchC&&#"#* I$#-
=*.28$!^&'@7DBN&5!
8!5B/K!`GD2V/-&N
5E2C2 &8!5&<"+HE06%8/&N
2.1.3.4. Tính an toàn của cây trồng được bảo vệ bởi Bt được chứng
minh nhờ các đặc tính sau
h
cRHEN&' @0BD@6^"+% &= )B
"+S25E?5DJ4>?K
c>//G]B<*.>B>!12_SHEN^
*/M
cR-!RE"+%&=-4B "+J
&G$8P-*+Y%;DVBB J&G
cRE$-2"BHEN^"+S25EJ
2+)
2.1.4. Ứng dụng của chế phẩm Bt
2.1.4.1. Diệt sâu bệnh
XEE-#!124C!`P4H8HEN
B+40@0;0&T&'"E#"G$K?M&7E#?-=
P4H-C$&%=P4HB4
Bacillus thuringiensis]C9*
^_&'?YT5,(2&HE-"C&T%
5<=9&7!H* !B"1EP2+)J</
#BEBCS2,J^%!dHE@D2B"0B
J:H8G-J^&=B-%2+Y2$
ES2"#2NP,J!H* !-"„ ?E<#!
4>!-7282…J+D4CD&8$&:@D*
+D&T26,<2(#4K*BD!-7=
P4H4C^D*2/2@4 !-J^44
!H* !6DX2BN;kP,JEI28-
J-d'!2%!d?D4H.&=B24=*+Y
;C*5#ZTLD28G?D4HJhJ^
44B"4"!H* !%7S;0-2$&%iƒh
J%8G?Dihohhy&=B4H.E*4**B4H"
;tgƒhJ%D;0?Dfhoihy&=B4H"*tsƒh
J%8G?Dnhoshy&=B4H@+2hƒhJ%
D;0?Dhhy&=B4H8R!*
2.1.4.2. Cây trồng Bt
RHEN^*+M?D4H@D>B 25&<"-
2C"0(02D82Y2B(40*'*.>6
/5!@-"?H4=(*/%B?DG&5
-*802&-"7RYB"„ -+D!G
'!$+D"-+Y^%7&2*85<*'G
*)
•
X,*'GJHEN^
•
();0*k4H@D
•
024L?M=P4H
•
&'*' <.
•
R0D&<"D-4B %G
•
X+KG&=mycotoxin†&=%7HE#4FB
)
•
‡0*kG"-+Y]lˆx_RHEX+^"-+Y@#
&d
2.1.4.3. Ngoài ra vi khuẩn Bt còn được dùng để diệt lăng quăng
x%2-"C8D4RxBP/K
+ #!12B 4PJ B khuẩn Bacillus thuringiensis
4@4!4*444E!?D*(;(
NNXoD4RxY-4>
BP/K+2*8#!12B4CPJB
"1%-?M?DP&'*(;(<&<"D4=
\
"-R3\hh#!12E$B-"0Ohhhhh
&N%7@0BD&'2"B>%?DG"A8*(
;(
8#!124CKB"1E%-?M?D*(;(
<&<"D4="-$PY&C&#
"/8
{^BK(BJ*(;($&5
JB"14…HEJB?D*(;(
/#$-!-7^9x„$RH}&T"724-
&'?4=5E#?8#&'*(;(x-@D
!-!*4L?M#!12B4%!^0=-"
B>>/%2w44=
^%7#&'2C*8*(;(2w)V2w
E<@D4=5E#$B/2TX ^0$4=p$E*8@D2
B/2TX!]*!_$@DB/2TR"E
2.2. Vi khuẩn bacillus thuringiensis
2.2.1 Đặc điểm vi khuẩn Bacillus thuringensis (Bt)
Bacillus thuringiensis**B"1&5&7S&'!H* !6
BY$ZKqDX24=fn2W&5$@Y !6
X$X2$X2Z$-^S$0.$ ‰/$X
^S&T!H* !&'i\hJ^**4B&:&722c$S
;$@L"+!SR3%\inJ4=&%%7S
`$-!&+$S"2R-J^**4%7&'!H*8
*Bacillus thuringiensis]^_
O
^%-2W&5$&5B)$@Y$NQS?8
7]2,&:&72;C&7!H*8^*
!M_5&?8*-J^!H* !%?87S
-!&+$24=SB24=J%7B-S?8
"-^*>"14@L#"G"+@9@$2
?.]"+2522"1E@I+BN$"GO]o_s
Š2$%!J/22"+?E$#@&K/…B#!P
w$K7&%"0(?D4H^!-7&<
"DD&n]o_enRG'!5\i]o_OhR^L?8
SB*$SK?$\†$sŠ2
S\\"1Bacillus thuringensis
e
S\O{1*8B"1Bacillus thuringensis
62w#@B"1%2@LSKB2
7&S;0-2
S\e#@B"1^B7]E4*_B@L]4!_
2.2.2. Đặc điểm tinh thể độc và cơ chế tác động của vi khuẩn Bacillus
thuringiensis.
2.2.2.1. Đặc điểm tinh thể độc
>B.#-&?D+Y)-&%e*8&
=oX&=?$`C*7&E4*El$Ell$E
lll$El#*-J^%2:<<&=R.
n
46HE@D+YG*-RE"-RE&'
e*!GREl$ll$lll$l
cREl)d'!-!SHE@D+
Y@-B1E
cREll87?8S-!HE@D+Y@
-B1EB+Y@\-G?MREllHE@D
*Lymantria dispa$REll^*B!2
cREllld'!7?8S$HE@D+
Y@-KColeoptera
cREld'!07?8SBS-!$3
HE@D+Y@\-Diptera.
S\nPansy peacock
s
S\sDiaethria
S\gHelicoverpa armigera
g
S\fLymantria dispa
S\i^-Kcoleoptera
S\h^\-Diptera
f
X(2 inn$ R E B R uv ‹24 - &&'@05
!%*/; &#&GJB"17&J^%
?8S$S;0-2$S-!2@05!B%&
GB5<*8+Y$#2OhyC*'"+J#
@{22E*:Œ4&AS&=@92?"G
7B&=!7&7&5@<B,6D&$%
C*'!HL*nhhh&.BB"+!0@LV%
7&;-S@0;0#&7*H^4…258G?
7&@@#?8:!HjR5Œ2?E?\hyBL
8%7*2258GJ7&
S\^L^B7&
^05%CJ77&%<*8?
2$ &% % *8 % 3 *D 5 * ? *2 B ?
4!7%K*'"-*nE/=R$X$$
~$X`KiE/="-"+%R-!H
L%"=*'*S%&G`*8%!HL*'AS
i
"+%&G7@<B,BD&4B&=6
?8`$•87 B.thuringensis sotto 6snR4)
BW`8G"-?8"-4…25&Go
X8&=]!_$`&'C*!4!*!v>5
&HE*2*82*/;>!HJE!4!*!?W&#+
Y #X8 & = ]@_ $` C * 8& = @<
D$F%"=*'!HL5!ghg]
−
_fnhn!F6\hR
BW`8GRF-&*/+Y*206BDd
'!ˆX+RF`%-&6B&=$
4 " &= !- BU @7@S ,$ F %H2
a2BE#.B2-&&#-.;*2E&d;-S
&d 5 B *2 + Y 2 # oX8 & =
]22_$ ` C *& = RF% "=
*'!H L5! \hh]o_\hhh$ % 2 4= ?2> ?$
$2W02B-4-B&:@D258*>n!F
6shhR6*/
2.1.2.2. Cơ chế tác động
\h
S\\R.#-&J7&&=B4H
{&'!*/*-HE$!&=??874…?D
,*84H85&-&J7*/+Y*5
!K8!-&&7S**2*D&)B2DRM
7*4"4H8(!0-7<&=$?-?MJ
2*82/-?J4H$<&=@
,!HLA%8G&
R-&=E@-2B2B2$8-*w`&7
0EB$*24H2C$P(B#"(
7]
−
_g)I2?H@*DH-#@'@S"(
!F$7&T5D8'@S,4H@20
x4=#@@-)$@#&d$-5@/0E2
]/4H&H_*2(G521{*B&TK2
({c2-B@8E#*E/HHE/*D&)
BHI2?H>E&d-&J7!MB
<E#=R•8@S)$"BB,$#
!]•g$h_B.7"+%.#0&$74…BU*2
a2&2-D'5E!d@#/I2$4H%2$@20Q
EB E<)'!"7&BU$24=*4H%
.#>0&$P($!&)02=$42)
5&&)/%&'!MNR-&B %BF"+
@&"(!07*?5!!4&B ]8
&G'!"!Ž\_&T*225G&J7B"1
\
S\OH#?F&P=P4H^
\\
CHƯƠNG 3:
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
PHÂN TÍCH CHẾ PHẨM Bt
\O
3.1. Phân tích định lượng tổng số bào tử Bacillus thuringiensis trong
chế phẩm
3.1.1. Nguyên tắc
/2+)&:$2wB4B :2w@L&K/4…
!-72"1*8Z#24="1*8%7G4=*'
B4B 2w&.B7GJ?/K•&72J
!.!-!E*"+!-D2-B4B #:-
20-,.
L ?M !. !-!  8 &[$  4= "1 *8 / 2+
)84"J#"G6D&OgR•R\ed4=
@LBacillus:2*2W#!12"72D2&'G
P4="1*8&'P-&[+5E6-N&!*T
3.1.2. Môi trường và hóa chất
x+)+5E$!g$h•h$\%!4
Bảng 3.1. Thành phần môi trường nuôi cấy
Thành phần Khối lượng
R522 n
! h
XR* n
n]
−
_\h
X5 hhh2*
o
R522
o
o
XR*
o
!
o
X5
o
X~
oR*
\e
3.1.3. Thiết bị, dụng cụ
3.1.3.1. Thiết bị
L?M -#@$ ?M M J!` LD2 B4+
)BM74
o
J5EB4B
o
XN5!-!*>
o
J52$%7?ESD&6OgR
o
J*8
o
x-E*9
o
x-E"1*8
o
x-E&!
o
RH!HG$%"0(HG-&#h$2
o
{G7B;C
o
`B4%
o
^7&<D$%7?ESD&6enR•RBfhR
\n