Quy trình cấy truyền phôi cho bò
Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (2.51 MB, 27 trang )
Bài thuyết trình:
Công nghệ sinh học động vật
Chủ đê: Quy trình cấy truyền phôi bo
GVHD: Nguyễn Thị Kim Cúc
Nhóm 2:
Huỳnh Hữu Đính
Nguyễn Thị Bích Mai
Nguyễn Thị Ngọc Lam
Nguyễn Thị Như Hoa
Lê Văn Sanh
Nội dung
1.
2.
3.
Lịch sử nghiên cứu
1.1
Trên thế giới
1.2
Ở Việt Nam
Cơ sở khoa học và ý nghĩa thực tiễn
2.1
Cơ sở khoa học
2.2
Ý nghĩa thực tiễn
Kim hoa
Quy trình cấy truyền phôi bo nhân tạo
3.1
Chọn bo cho phôi và gây động dục hàng loạt
3.2
Gây rụng trứng nhiều ở bo cho phôi
3.3
Thụ tinh nhân tạo
3.4
Thu phôi, chọn lọc phôi
3.5
Chọn bo nhân phôi và gây động dục đồng pha
3.6
Cấy truyền phôi
3.7
Kiểm tra và chăm sóc bo mang thai
3.8
Đàn bê năng suất cao được sinh ra
Ngọc Lam
Hữu Đính
Bích Mai
Tài liệu tham khảo
Văn Sanh (NT)
1.
Lịch sử nghiên cứu
1.1 Trên thế giới
Năm
1890, thí nghiệm đầu tiên về cấy truyền
phôi thành công trên thỏ bởi Walter Heap. Ông
là người sáng lập ra công nghệ cấy truyền phôi.
1932,
cấy truyền phôi thành công trên dê bởi
Warwick và Berry.
1970, thành công trong công việc bảo quản phôi
đông lạnh.
1972,
cấy truyền phôi trên bo bởi Willmut và
Rowson.
1982, vi phẫu thuật thành công trong phong thí
nghiệm (theo Vlahov, 1987).
1992, bằng kĩ thuật cloning
từ một phôi bo đã
cho ra 5 phôi (Viện INRA Pháp, 1992).
1.2 Ở Việt Nam
Năm 1978, trung tâm khoa học tự nhiên và công nghệ
quốc gia đã có một bộ phận bắt đầu nghiên cứu cấy
truyền phôi thỏ.
Năm 1980, nghiên cứu cấy truyền phôi bo. Tháng 91989, Viện chăn nuôi bộ môn cấy truyền phôi được
thành lập.
Năm 1986, Con bê đầu tiên ở nước ta ra đời từ cấy
truyền phôi.
2. Cơ sở khoa học và ý nghĩa thực tiễn
2.1 Cơ sở khoa học
Phôi có thể coi là 1 cơ thể độc lập ở giai đoạn đầu của quá trình phát
triển.
Nếu chuyển phôi vào cơ thể khác có trạng thái sinh lí sinh dục phù hợp
với trạng thái của cá thể cho phôi thì nó vẫn sống và phát triển bình
thường ( sự phù hợp đó gợi là sự đồng pha).
Sử dụng các chế phẩm sinh học chứa hoocmon có thể điều khiển sinh
sản của vật nuôi theo ý muốn.
2.2 Ý nghĩa thực tiễn
Tăng số đời con của những bo cái có tiềm năng di truyền vượt trội.
Tăng tốc độ kiểm tra đời sau, nâng cao cường độ chọn lọc.
Giảm khoảng cách thế hệ.
Tạo bê sinh đôi thúc đẩy nhanh sự phát triển của các ngành khoa học
khác như: sinh lý, di truyền học.
Hạn chế một số dịch bệnh và nâng cao khả năng chống chịu bệnh, khả
năng thích nghi cho con vật ở môi trường mới.
3. Quy trình cấy truyền phôi bo
Sơ đồ quy trình
Chọn bo cho phôi và gây động
Chọn bo nhận phôi
dục.
Gây rụng trứng nhiều ở bo cho
Gây động dục cho bo nhận phôi
phôi
Cấy truyền phôi vào bo nhận
Thụ tinh nhân tạo
phôi
Thu hoạch phôi
Bo nhận phôi có chửa
Bo cho phôi trở lại bình thường
Đàn con sinh ra mang đặc tính di truyền
của bo cho phôi
3.1) Chọn bo cho trứng và gây động dục
Bo khỏe mạnh, không bệnh tật về đường sinh sản.
Khả năng sinh sản tốt,quá trình sinh sản bình thường.
Bo cái năng suất cao về một hoặc một vài tính trạng mong muốn
và các tính trạng đó phải được di truyền cho thế hệ sau.
Chu kì động dục bình thường, biểu hiện chu kì rõ ràng.
3.2) Gây rụng trứng nhiều ở bo cho phôi
Đưa hoocmon PMSG vào bo bằng dụng cụ chuyên
dụng.
Sau 5 ngày, tiếp tục tiêm hoocmon estradiol.
Ngày 10 và 13 rút kill made và tiêm FSH.
3.3) Thụ tinh
3.3.1 Thu trứng
Phương pháp thu trứng: Thu trứng bằng phương pháp Ovum Pick
Up (OPU)
* Cách tiến hành:
- Cho bo vào giá cố định, lấy hết phân ra, rửa sạch, sát khuẩn
âm hộ và khu vực xung quanh.
- Đưa đầu do vào bên trong âm đạo để xác đinh vị trí các cơ
quan.
- Hút dịch nang trứng.
- Lọc thu tế bào trứng.
3.3.1 Thu trứng
Soi tìm trứng.
Phân loại và chọn lọc trứng
Trứng loại A
Trứng loại B
Trứng loại C
3.3.1 Thu trứng
Nuôi chín tế bào trứng
3.3.2) Hoạt hóa tinh trùng
- Thu tinh: thu tinh trùng bằng
phương pháp nhảy giả.
- Hoạt hóa tinh trùng
Tinh trùng được hoạt hoá theo phương pháp 90% percoll.
Ly tâm lần 1
Ly tâm lần 1
6
Pha loãng đến nồng độ là 6,25x10 tinh trùng/ml
3.3.3) Thụ tinh
Môi trường thụ tinh INRA< IVF-1 và IVF-2 có bổ sung 1μM
hypotaurine, 20μM penicillamine và heparin vơi các nồng độ
khác nhau.
TB trứng sau khi nuôi 20 giờ lấy ra khỏi tủ nuôi cấy, sau đó để
tiến hành thụ tinh.
Rửa trứng đã thụ tinh 3 lần trong môi trường nuôi trứng chín.
Đặt đĩa đã có trứng thụ tinh vào tủ ấm có nhiệt độ 38 0C với 5%
C02 trong 48h.
3.3.4) Nuôi phôi
Chuẩn bị hai đĩa mỗi đĩa 2,5ml môi trường
CR1aa 5% CS, phủ 2 ml dầu khoáng vi
lượng.
Một đĩa nuôi phôi.
Nuôi phôi.
Cho cả 3 đĩa trên vào tủ ấm CO2 khoảng 2
giờ trước khi chuyển phôi vào nuôi.
Nuôi phôi
3.4) Thu hoạch phôi, chọn lọc phôi
Phôi sau khi thụ tinh được loại bỏ trứng không thụ tinh
Quan sát và sàng lọc các phôi không thụ tinh, phôi kém chất lượng và phôi thụ tinh có chất lượng tốt.
3.5) Chọn bo nhận phôi và gây động dục đồng pha với bo nhận phôi
Bo khỏe mạnh, không có bệnh tật về đường sinh sản, sinh sản tốt-tạo tỷ lệ
đậu phôi cao khi đưa phôi vào cơ thể, không cần năng suất cao.
Sự đồng pha: trạng thái sinh lý sinh dục của bo nhận phôi phù hợp với
trạng thái sinh lý sinh dục của bo cho phôi hoặc phù hợp với tuổi phôi.
Gây động dục đồng pha là quá trình kích thích cho cái nhận phôi động dục
đúng vào thời điểm động dục của cái cho phôi.
3.6) Cấy truyền phôi (ET- embryo transfer)
Là quá trình đưa phôi được tạo ra từ cá thể bo mẹ cho phôi vào
cá thể bo mẹ khác (Bo nhận phôi).
Dùng phương pháp cấy truyền phôi bằng cọng rạ để cấy truyền
phôi vào bo nhận.
3.6 Cấy truyền phôi
3.7) Kiểm tra, chăm sóc bo mang thai
a. Chăm sóc bo mang thai
Bo cái chửa cần được ăn uống đầy đủ.
Thức ăn chủ yếu là cỏ xanh, phụ phế phẩm trồng trọt và công nghiệp như rơm, vỏ thân cây bắp, đọt mía , thân
các loại cây họ đậu, cám, rỉ mật …
b. Đỡ đẻ cho bo
Thời gian mang thai trung bình của bo là 280-285 ngày.
Đỡ đẻ cho bo: Trong trường hợp bo đẻ bình thường (thai thuận) không cần can thiệp hoặc chỉ cần hỗ trợ cho bo
cái bằng cách dùng tay kéo nhẹ thai ra. Trường hợp đẻ khó phải gọi cán bộ thú y can thiệp kịp thời.
3.8 Đàn bê năng suất cao được sinh ra
