Sự vận chuyển IAA và IBA được xác định bằng phương pháp đánh dấu đồng vị ở trụ hạ diệp cây arabidopsis

Sự vận chuyển IAA và IBA được xác định bằng phương pháp đánh dấu
đồng vị ở trụ hạ diệp cây Arabidopsis

Phạm Thị Phương


NỘI DUNG

1.
2.
3.
4.
5.

Tổng quan
Đối tượng nghiên cứu
Mục đích thí nghiệm
Kết quả thí nghiệm
Kết luận


1. TỔNG QUAN

Fig 1: Structure of IAA and IBA.
/>

3
3
Fig 2: Possible metabolic pathways of [ H] IBA and [ H] IAA. (Woodward and Bartel, 2005)

Fig 3: Transport of IAA and IBA.
Sourse: />

Các hợp chất đánh dấu đồng vị

[13C8, 15N1] IBA
[ 2H4] IAA
 [13C1] IBA
 [13C6] IAA


2. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU

Giống hoang dại Arabidopsis thaliana.
Các giống đột biến: ibr1 ibr3 ibr10 và
nakr1

Môi trường MS

Fig 4: Arabidopsis thaliana
Sourse: />

3. MỤC ĐÍCH THÍ NGHIỆM

 Đánh giá sự vận chuyển của IAA và IBA ở trụ hạ diệp cây
Arabidopsis.


4. KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM

4.1. Định lượng sự vận chuyển Auxin bằng phương pháp đánh dấu đồng vị.


Fig 5: Summary of the experimental procedures (Marx and Djerassi, 1968)

A: Donor agar blocks containing 10

-5

M[

13

C6] IAA or [

13

C1] IBA were placed on top of 6-mm Arabidopsis hypocotyl sections. After 5 h, the hypocotyl sections were

cut horizontally into halves. Samples containing upper half-hypocotyl sections (1) and containing lower half-hypocotyl sections plus receivers (2) were collected and
extracted with known amounts of [2H4]IAA and [13C8,15N1]IBA added as internal standards.


Fig 5: Summary of the experimental procedures (Marx and Djerassi, 1968)

B: Chromatographic results of samples labeled by [

13

C6] IAA.. From top to bottom: unlabeled endogenous IAA, [

13

2
C6] IAA from donor block and [ H4]IAA internal sta


Fig 5: Summary of the experimental procedures (Marx and Djerassi, 1968)

C: Chromatographic results of samples labeled by [

13

C1]]IBA. From top to bottom: unlabeled
13
13
2
13
13
15
endogenous IAA, [ C1] IAA derived from [ C1]IBA, [ H4]IAA internal standard, unlabeled endogenous IBA, [ C1]IBA from donor block, and [ C8, N1]IBA intern
standard.


4. KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM

4.2. Sự vận chuyển [

13

13
C6] IAA và [ C1] IBA tự do ở trụ hạ diệp cây Arabidopsis


Fig 6: Polar auxin transport and quantification of free [ 13C6]IAA, [13C1]IBA, and [13C1]IAA derived from [13C1]IBA in wild-type Arabidopsis hypocotyls after 5-h transport
periods.


Fig 7: Polar auxin transport and quantification of free [ 13C6]IAA, [13C1]IBA, and [13C1]IAA derived from [13C1]IBA in wild-type and nakr1 mutant Arabidopsis hypocotyls
after 5-h transport periods.


4. KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM

4.3. Sự vận chuyển [

13

13
C6] IAA và [ C1]IBA tự do ở trụ hạ diệp cây Arabidopsis

đột biến ibr1 ibr3 ibr10.


Fig 8: Polar auxin transport and quantification of free [ 13C6]IAA, [13C1]IBA, and [13C1]IAA derived from [13C1]IBA in wild-type and ibr1 ibr3 ibr10 mutant Arabidopsis
hypocotyls after 5-h transport periods.


4. KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM

4.4. Sự vận chuyển và trao đổi chất [
Arabidopsis

13

13
C6] IAA và [ C1] IBA ở trụ hạ diệp cây


Fig 9: Quantification of free [13C6]IAA, free [13C1]IBA, and the ester- or amide-linked conjugates they formed in wild-type Arabidopsis hypocotyls after 5-h transport
periods.


5. KẾT LUẬN
Bằng phương pháp đánh dấu đồng vị và phân tích GC–MS, ta có thể định lượng IAA và IBA nội sinh
hay ngoại sinh được vận chuyển.

Sự vận chuyển hữu cực của IBA thấp hơn nhiều so với IAA ở trụ hạ diệp cây Arabidopsis. NPA ức chế
sự vận chuyển của IAA nhưng không ức chế sự vận chuyển của IBA.

Sự vận chuyển của IBA tự do không phụ thuộc vào sự chuyển IBA thành IAA.
IAA liên kết amide là phức hợp chính của IAA ngoại sinh trong khi IAA tự do là dạng chính của auxin
vận chuyển. Bên cạnh đó, IBA liên kết ester là phức hợp chính của IBA ngoại sinh, IBA liên kết ester
hay một phần nhỏ IBA tự do được vận chuyển xuống dưới.

 Do đó, IAA và IBA có cơ chế vận chuyển riêng.


TÀI LIỆU THAM KHẢO
Xing Liu, Lana Barkawi, Gary Gardner, and Jerry D. Cohen (2012) Transport of Indole-3-Butyric Acid and

Indole-3-Acetic Acid in Arabidopsis Hypocotyls Using Stable Isotope Labeling. Plant Physiology, Vol.
158, pp. 1988–2000.

Woodward AW, Bartel B (2005) Auxin: regulation, action, and interaction. Ann Bot (Lond) 95: 707–735.
Yang T, Davies P (1999) Promotion of stem elongation by indole-3-butyric acid in intact plants of Pisum
sativum L. Plant Growth Regul 27: 157–160.

Bialek K, Cohen JD (1989) Quantitation of indoleacetic acid conjugates in bean seeds by direct tissue
hydrolysis. Plant Physiol 90: 398–400.

 /> />

CẢM ƠN THẦY VÀ CÁC BẠN
ĐÃ LẮNG NGHE!