PNT GPB Y3 CÁC KỸ THUẬT MÔ BỆNH HỌC CĂN BẢN

Mục tiêu
— Liệt kê các khâu trong quy trình làm tiêu
bản giải phẫu bệnh và nêu ý nghĩa của
từng khâu.
— Liệt kê các bước của khâu xử lý mô.
— Liệt kê các bước của khâu nhuộm. Nêu sự
khác biệt giữa nhuộm thường quy và
nhuộm đặc biệt.


Kỹ thuật mô bệnh học
— là kỹ thuật mô học
— sử dụng nhằm mục tiêu chẩn đoán bệnh


Quy trình

Cắt lọc
bệnh
phẩm

Cố định
(khử
canxi
nếu
cần)

Xử lý
mô

Cắt
mỏng

Nhuộm

Dán
lamen



1. Cắt lọc và cố định bệnh phẩm
— Bệnh phẩm:
— Mẫu mô
— Cơ quan


1. Cắt lọc và cố định bệnh phẩm
— Cố định
— Giữ nguyên hình thái tế bào – mô
— Bảo tồn cấu trúc phân tử của tế bào – mô
(đặc biệt là protein)
— Giúp chẩn đoán đúng bệnh lý
— Thực hiện thành công kỹ thuật hóa mô miễn

dịch về sau khi cần thiết
è QUAN TRỌNG trong toàn bộ quy trình


1. Cắt lọc và cố định bệnh phẩm
— Phương pháp cố định

— Vật lý
— Hóa học


1. Cắt lọc và cố định bệnh phẩm
— Dung dịch formol trung tính 10% (pH #
6.8)
— Formaldehyde 40% (HCHO) 100ml
— nước cất 900ml
— sodium phosphat monobasic (NaH2PO4)

4g
— sodium phosphat dibasic (Na2HPO4) 6,5g


1. Cắt lọc và cố định bệnh phẩm
— Dung dịch formol trung tính 10% (pH #
6.8)
— Rẻ tiền
— Tính ổn định
— Làm cứng mô, ít gây co rút
— Phù hợp với hầu hết các phương pháp

nhuộm đặc biệt sau này


1. Cắt lọc và cố định bệnh phẩm
— Cố định tốt
— Độ dày mẫu mô : không quá 5 mm
— Thể tích dung dịch cố định = 20 lần thể

tích mẫu mô
— Thời gian 12 – 24 giờ
— Nhiệt độ phòng


Cố định trễ


Cố định không đạt yêu cầu




2. Khử canxi
— Khi bệnh phẩm có chứa muối canxi như
— Xương
— Sụn
— Răng
— Một số loại u khác
— Giúp cho quá trình cắt mỏng dễ dàng


2. Khử canxi
— Các dung dịch khử canxi
— acid nitric 5% (HNO3)
— acid formic 6% (HCOOH)
— acid trichloroacetic 28% (C2Cl3HO2)
— acid chlohydric 4-8% (HCl)
—…

2. Khử canxi
— Lấy hết canxi
— Không làm hư mẫu mô
— Không ảnh hưởng đến chất lượng các khâu
tiếp sau đó



2. Khử canxi
— Cắt lọc bệnh phẩm à mảnh dày 4 – 5 mm
— Cố định bằng formol 10%
— Lọ chứa dung dịch acid với thể tích = 100
lần thể tích mẫu mô cần khử canxi trong 24 ngày
— Kiểm tra khử canxi bằng 1 kim nhọn đâm
xuyên qua mẫu mô
— Trung hòa acid : rửa dưới vòi nước chảy 4
– 12 giờ
— Cho vào dung dịch cố định



3. Xử lý mô



3. Xử lý mô


4. Đúc blốc paraffin

— Định hướng mẫu mô trong blốc paraffin