Bao cao vi sinh vt

Họ và tên: Nguyễn Nữ Kim Trân
MSSV: 2008160141

Nhóm: 8

GVHD: Nguyễn Thị Quỳnh Mai

BÁO CÁO THÍ NGHIỆM VI SINH VẬT HỌC BÀI 1
HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG THIẾT BỊ, DỤNG CỤ
PHÒNG THÍ NGHIỆM VI SINH VÀ QUAN SÁT TIÊU
BẢN VI SINH VẬT DƯỚI KÍNH HIỂN VI QUANG
HỌC
I.

Thực hành trang thiết bị
1.


Tủ sấy (drying oven)
Mục đích: dùng để sấy khô các dụng cụ hoặc để khử trùng theo phương pháp nhiệt khô,
thường được đốt nóng bằng điện trở, nhiệt độ có thể lên đến 200 độ C.

Cách vận hành:
Tủ sấy Ecocell


2.


Tủ cấy vô trùng (flow cabinet)
Mục đích: Bảo đảm tính vô trùng khi thao tác với VSV. Không khí trong tủ cấy vô trùng được lọc bằng

màng lọc vô trùng. Trong tủ có đèn UV (Ultra Violet) để khử trùng môi trường trong tủ cấy.

Lưu ý: trước khi thực hiện bật đèn UV từ 30- 60 phút, bên ngoài tủ phả được che lại bằng màn tối màu.

3.

Nồi hấp ( autoclave)

Mục đích: Tiêu diệt tất cả các dạng sống của VSV (tế
bào sinh dưỡng, bào tử). Nồi hấp là thiết bị bắt buộc phải
có trong PTN.


 Cách vận hành nồi hấp cơ ( tại PTN)
Bước 1: KIểm tra mực nước ở trong khoảng an toàn
Bước 2: Bật công tắc gia nhiệt trước (10- 15 phút)
Bước 3: Đặt các dụng cụ và dụng cụ chứa môi trường vào buồng hấp
Bước 4: Kiểm tra và đóng các valve xả và valve an toàn
Bước 5: Đậy nắp và vận ốc đối xứng nhau từng đôi một
Bước 6: Khi đồng hồ áp lực chỉ 0,4- 0,5kg/ cm2 thì xả khí lần một cho tới khi đồng hồ áp lực chỉ 0,1
kg/cm2 hay khi thấy luồng khí xả xuất hiện dòng khí trắng liên tục thì đóng valve xả.
Bước 7: Cho đồng hồ áp lực chỉ 1 atm hay nhiệt độ chỉ 121 độ C, tính giờ và canh 15 phút.
Bước 8: Hết giờ, mở valve xả khí từ từ, hi áp suất càng giảm thì mở valve càng lớn.
Bước 9: Khi đồng hồ áp lục chỉ 0 kg/cm2 và valve xả không còn thấy dòng khí xả màu trắng, mở nắp nồi
hấp và lấy dụng cụ chứa môi trường trong nồi hấp ra.
4. Tủ ấm ( lab incubator)
 Mục đích: Nuôi cấy VSV, duy trì được nhiệt độ ổn định (thường từ 0- 50 °C), VK thường được nuôi
cấy ở 37°C.
 Cách vận hành:

5.


II.

Kính hiển vi quang học
Mục đích: Dùng để phóng đại VSV có kích thước nhỏ. Độ phóng đại có thể từ vài chục lần đến 2000
lần.

Bao gói dụng cụ

Nguyên tắc:
Dụng cụ bao gói phải đảm bảo sạch và khô.
Bao gói phải kín và cẩn thận để sau khi khử trùng vãn bảo đảm sự vô trùng của dụng cụ
trong lớp giấy gói và lấy ra sử dụng dễ dàng.

Mục đích : ngăn ngừa VSV nhiễm vào môi trường trước và sau khi cây, tránh vỡ dụng cụ
bằng thủy tinh trong quá trình thao tác.
1/
Gói giấy đĩa Petri
Bước 1: Đặt 1 hoặc 2, 3 cái đĩa trên 1 tờ giấy hình chữ nhật đã được cắt phù hợp.
Bước 2: Ghép 2 cạnh nhỏ của hình chữ nhật cuộn mép 2-3 lần ( vừa chặt các đĩa).
Bước 3: Ấn 2 đầu mép còn lại xuống, gấp nếp hình tam giác nhọn ( như gói quà).
Bước 4: Gấp ngược 2 hình tam giác.
2/
Làm nút bông
Bước 1: Xé 1 miếng bông hình chữ nhật, gấp các rìa miếng bông vào trong cho gọn không
bị xù.






3/

4/

5/



III.

Bước 2: Cuộn chặt lại thành nút vừa khít ống nghiệm ( không quá chặt, cũng không quá
lỏng, khi nào lấy miếng bông ra phastra tiếng “ bụp” là được).
Làm nắp chụp ống nghiệm
Bước 1: cắt 1 miếng giấy hình chữ nhật khoảng 2 lần quấn xung quanh đầu ống nghiệm.
Bước 2: Gấp nếp chiều dài hình chữ nhật khoảng 1cm, sau đó quấn vào ống nghiệm ( quấn
vừa chặt), đến khi hết giấy thì bẻ 1 góc vuông ở mép dưới.
Bước 3: Gấp đầu giáy tạo thành hình tam giác ròi bẻ đầu giấy xuống để cố định nắp chụp.
Nắp chụp sau khi làm xong đảm bảo có thể lấy ra và chụp vào lại dễ dàng.
Cuốn bó ống nghiệm
Bước 1: Bó ống nghiệm thường bó với số lượng khoảng 4 hoặc 6,9 ống. Đặt ống nghiệm
cần bó trên 1 tờ giấy báo.
Bước 2: Sau đó cuốn bó ống nghiệm như cách gói bánh tét. Giữ cố định bằng 1 sợi thun.
(Trước khi cuốn bó ống nghiệm phải cuốn phần trên và phần đáy ống nghiệm lại và để dư 1
khoảng trống ở giữa, cột chặt 2 đầy cuốn bằng sợi thun.)

Quấn pipet
Bước 1: Tờ giấy báo đôi gấp lại theo chiều dài tờ giấy khoảng 3,4 lần sau đó cắt khoảng 5
cm.
Bước 2: gấp 1 đầu tờ giấy thành hình tam giác, để đầu pipet vào trong hình tam giác đó, sau
đó quấn giữ đầu pipet không làm rách giấy (giữa pipet và cạnh giấy tạo ra 1 góc 45 độ), tiếp
tục quấn cho đến đuôi của pipet, phần giấy còn dư quấn bẻ đầu xuống và giữ lại bằng sợi
thun.
Cách làm nút bông và nắp chụp bình tam giác tương tự như đối với ống nghiệm nhưng
với số luợng bông và giấy nhiều hơn.

Sử dụng kính hiển vi quan sát tiêu bản sống Vi sinh vật
Tạo tiêu bản quan sát VSV ở trạng thái sống ( quan sát VSV ở vật kính 40X)
Mẫu: Nấm men đã được giáo viên pha.
Các bước tiến hành:
Bước 1: Lấy 1 phiến kính sạch lau sạch bằng cồn 70°sau đó lau lại bằng giấy sạch.
Bước 2: Nhỏ 1 giọt nấm men sau đó nhỏ tiếp 1 giọt xanh methylen 0,1%.
Bước 3: Đậy lá kính sao cho chân của lá kính chạm vào giọt nước máu, nghiêng 1 góc 45°
và hạ lá kính xuống để không có bọt khí.
Bước 4: Đặt phiến kính lên bàn mẫu, hạ tụ quang, đóng bớt chắn sáng, đặt mắt vào quan
sát , điều chỉnh ốc chỉnh thô cho đến khi thấy ảnh VSV rồi dùng ốc chỉnh tinh vặn để xem rõ
ảnh. Dùng ốc di chuyển mẫu vật di chuyển phiến kính đế vùng muốn quan sát thị trường.
Kết quả:


Nhận xét: Có hình cầu, một số bắt màu xanh.