THU NHẬN − CỐ ĐỊNH GLUCOAMYLASE VÀ PECTINASE BẰNG KĨ THUẬT CLEA

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM
TP.HCM
Khoa: CÔNG NGHỆ SINH HỌC

THU NHẬN − CỐ ĐỊNH GLUCOAMYLASE
VÀ PECTINASE BẰNG KĨ THUẬT CLEA
Môn: CÔNG NGHỆ ENZYME
GV: Đỗ Thị Hiền


Nhóm 2


GIỚI THIỆU
•

Enzyme glucoamylase và
p pectinase ứng dụng trong
c−công nghiệp sản xuất nước
éép trái cây
Glucoamylase thủy phân tinh
bột làm tăng hàm lượng
đường
Pectinase làm giảm độ đục
cũng như giảm sự lắng cặn
trong sản phẩm.


Đặt vấn đề
Có sự khác nhau giữa
enzyme cố định đã

qua tinh sạch và chưa
qua tinh sạch???


Phương pháp
• Thu nhận enzyme glucoamylase và
pectinase từ môi trường nuôi cấy
Aspergillus niger


PHƯƠNG PHÁP CỐ ĐỊNH
 100 ml dịch enzyme  Bổ sung ethanol
96 độ với tỉ lệ 2:1  khuấy đều  ủ 15
phút.
 Bổ sung tác nhân liên kết glutaraldehyde 
cố định với thời gian và nhiệt độ khác
nhau  lọc hút chân không  thu tủa  rửa
lại bằng nước cất  xác định hoạt tính.


KẾT QUẢ
• Điều kiện cố định enzyme glucoamylase từ
dịch enzyme nuôi cấy: 7% glutaraldehyde,
5oC trong 2 giờ (với hiệu suất cố định
enzyme: 37,85%, hiệu suất cố định protein:
45,06%).


Glucoamylase cố định dưới kính hiển vi điện
tử quét

KẾT QUẢ
• Điều kiện cố định pectinase từ dịch enzyme
nuôi cấy: 10% glutaraldehyde, 5 độ C trong
2 giờ (với hiệu suất cố định enzyme:
57,61%, hiệu suất cố định protein: 66,67%)


Pectinase cố định dưới kính hiển vi điện tử
quét


KẾT QUẢ
1. Khả năng tái sử dụng
• ETM và ETN đều giữ được hoạt
tính ban đầu trong 4 lần đầu sử
dụng
• Hoạt tính giảm dần từ lần thứ 5
• Đến lần sử dụng thứ 8, ETN giữ
được 70% hoạt tính ban đầu, ETM
chỉ giữ được 50% hoạt tính ban
đầu


KẾT QUẢ
2. Khả năng chịu pH
• Tại pH = 2, glucoamylase cố định
từ ETM chỉ còn giữ được 18%
hoạt tính, glucoamylase cố định từ

ETN vẫn giữ được 54% hoạt tính.
• Tại pH = 8, ETM giữ được dưới
20% hoạt tính, ETH cố định vẫn
còn giữ được 40% hoạt tính.


KẾT QUẢ
3. Khả năng chịu nhiệt
• Ở 80oC, glucoamylase từ ETM
chỉ giữ được 20% hoạt tính,
glucoamylase từ ETN vẫn còn
giữ được trên 50% hoạt tính.
• Ở 60oC pectinase từ ETM chỉ
còn giữ được 32% hoạt tính,
pectinase từ ETH vẫn giữ được
41% hoạt tính


KẾT LUẬN
• Với điều kiện và phương pháp cố định
như nhau, enzyme cố định chưa qua tinh
sạch có khả năng tái sử dụng và ổn định
trong pH, nhiệt độ khắc nghiệt tốt hơn
enzyme cố định đã qua
tinh sạch.


KẾT LUẬN
• Kĩ thuật CLEA hiệu quả hơn đối với nguồn
enzyme chưa trải qua quá trình tinh sạch.

Làm nổi bật lên đặc điểm quan trọng của
kĩ thuật CLEA là kết hợp quá trình tủa và
cố định vào cùng một bước, bỏ qua bước
tinh sạch, làm tăng hiệu quả cố định
enzyme.