Nghiên cứu Y học
Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013
ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ NUÔI CẤY PHÔI VÀ CHUYỂN PHÔI NGÀY 5
Vũ Đình Tuân*, Hoàng Thị Bích Tuyền*, Lý Thái Lộc*.
TÓM TẮT
Đặt vấn đề: Nuôi cấy phôi và chuyển phôi ngày 5 (blastocyst) là xu hướng phát triển chung của các trung
tâm hỗ trợ sinh sản trên thế giới vì nó phù hợp sinh lý tự nhiên và giúp lựa chọn theo tự nhiên những phôi có
chất lượng tốt để tăng tỷ lệ làm tổ.
Mục tiêu nghiên cứu: Đánh giá kết quả việc thực hiện nuôi cấy phôi và chuyển phôi ngày 5 (tươi và đông)
tại trung tâm IVF – BV Hùng Vương.
Phương pháp nghiên cứu: mô tả cắt ngang.
Kết quả: Có 89 cas thỏa điểu kiện thực hiện nuôi cấy phôi đến ngày 5. Tỷ lệ phôi phát triển khi nuôi cấy đến
ngày 6 (phôi hữu dụng) có sự khác biệt so với ngày 5 (58,5% vs. 69,0%, p = 0,0039). Có 30 cas đủ điều kiện
chuyển phôi tươi, và có 27 cas chuyển phôi đông. Tỷ lệ có thai lần lượt là 43,3% vs. 51,9%; và tỷ lệ làm tổ theo
thứ tự là 33,3% vs 37,0%,
Kết luận: Việc thực hiện nuôi cấy phôi đến giai đoạn phôi nang và chuyển phôi ngày 5 đã giúp cho những
cặp vợ chồng thực hiện ICSI đạt kết quả khả quan với chất lượng phôi tốt và giảm thiểu tỷ lệ đa thai (đặc biệt tam
thai) vì chỉ chuyển tối đa 2 phôi. Đặc biệt, việc nuôi cấy phôi tiếp tục đến ngày 6 nên được khuyến khích và việc
chuyển phôi đông ngày 5 là một xu hướng mà hiện nay nhiều trung tâm IVF trên thế giới đang thực hiện và
trung tâm IVF Hùng Vương đang ngày càng khẳng định đi đúng hướng.
Từ khóa: phôi nang, ngày 5, ngày 6, chuyển phôi tươi, chuyển phôi đông, tỷ lệ có thai, tỷ lệ làm tổ.
ABSTRACT
RESULTS OF EMBRYO CULTURE AND TRANSFER ON DAY 5
Vu Dinh Tuan, Hoang Thi Bich Tuyen, Ly Thai Loc
* Y Hoc TP. Ho Chi Minh * Vol. 17 ‐ Supplement of No 2 ‐ 2013: 28 ‐ 34
Background: embryo culture and transfer on day 5 (blastocyst) is the general trend of assisted reproduction
centers in the world because it coincides to the natural physiological as well as help the natural selection of good
embryos to increase the implantation rate.
Objectives: Evaluation of the implementation of embryo culture and embryo transfer on day 5 (fresh and
frozen) at IVF center ‐ Hung Vuong Hospital.
Methods: cross‐sectional descriptive.
Results: There are 89 cases eligible for perform embryo culture to day 5. The rate of embryo development to
blastocyst (useful embryos) when cultured continue to day 6 is different compared to day 5 (69.0% vs. 58.5%,
respectively, p = 0.0039). There are 30 cases eligible for fresh embryo transfer there are 27 cases for frozen
transfer. The pregnancy rate was 43.3% vs. 51.9%, respectively and implantation rates in the order 33.3% vs.
37.0%.
Conclusions: The implementation of embryo culture to the blastocyst stage and embryo transfer day 5 has
helped couples perform ICSI achieved positive results with good quality embryos and reduce the rate of multiple
pregnancies (especially triple pregnant) because only a maximum of two embryos transferred. In particular,
*: Bệnh viện Hùng Vương
Tác giả liên lạc: BS Vũ Đình Tuân
ĐT: 0903199464
Email:
28 Hội Nghị Việt Pháp Châu Á Thái Bình Dương lần XII Ngày 16‐17 Tháng 5 Năm 2013
Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013
Nghiên cứu Y học
embryo culture to day 6 should be encouraged and the transfer of embryos frozen day 5 is a current trend that
many IVF centers around the world are doing and Hung Vuong IVF center is increasingly confirmed the right
direction.
Key words: blastocyst, day 5, day 6, fresh embryo transfer, frozen embryo transfer, pregnant rate,
implantation rate.
mức độ phân mảnh, sự xuất hiện sớm giai đoạn
ĐẶT VẤN ĐỀ
nén của phôi vào ngày 3, độ đồng đều của phôi
Điều trị hiếm muộn bằng kỹ thuật thụ tinh
bào, độ mịn của bào tương, thời điểm đánh giá
trong ống nghiệm đã được ứng dụng rộng rãi
phôi, đặc điểm phân mảnh bào tương (phân
trong nhiều thập kỷ qua trên thế giới. Phác đồ
mảnh tập trung, phân mảnh rời rạc), trạng thái
điều trị ngày càng hiệu quả hơn với số lượng
nhân của mỗi phôi bào, sự phân bố về mặt
nang noãn vừa phải và chất lượng nang tối ưu.
không gian của phôi bào, mức độ nén của phôi
Tỷ lệ thụ tinh cao, chất lượng phôi tốt đạt được
bào... Nhưng do hạn chế về thời gian đầu triển
nhiều và đặc biệt là hệ thống nuôi cấy phôi ngày
khai, nên chúng tôi chỉ mới tập trung căn cứ vào
càng hoàn thiện đã cho phép một số trung tâm
các đặc điểm đánh giá chất lượng phôi ngày 3
nuôi cấy phôi tiếp đến ngày 5 thậm chí ngày 6(5).
theo đánh giá đồng thuận Alpha, để lựa chọn
Phôi ở giai đoạn này được gọi là phôi nang. Tỷ
phôi sao cho đạt hiệu quả tối ưu nhất khi phát
lệ phôi phát triển tiếp đến giai đoạn phôi nang
triển phôi đến ngày 5.
đạt gần 66% với tỷ lệ làm tổ trên 50%(4,5).
Ứng dụng hệ thống nuôi cấy phôi nang,
bệnh nhân đạt được những kết quả như:
Phôi được lựa chọn có khả năng làm tổ cao.
Chuyển ít phôi nên hạn chế khả năng đa
thai.
Tỷ lệ trẻ sinh sống từ chuyển phôi nang cao
hơn 1,35 lần so với chuyển phôi ở giai đoạn phôi
sớm.
Nhưng bên cạnh đó, bệnh nhân phải chấp
nhận số phôi dư trữ đông ít vì một tỷ lệ khá cao
số phôi không thể tiếp tục phát triển đến giai
đoạn phôi nang.
Nghiên cứu của chúng tôi đặt ra vấn đề ở
đây là liệu hệ thống nuôi cấy phôi hiện nay
(ngày 3) tại trung tâm chúng tôi có thể vẫn áp
dụng cho hệ thống nuôi cấy phôi đến giai đoạn
phôi nang (ngày 5). Nếu như chúng ta có thể
nuôi cấy thành công và hiệu quả thì sẽ dễ dàng
chọn lựa phôi để chuyển vì những phôi phát
triển được đến giai đoạn này thì khả năng làm tổ
cao, giúp tăng tỷ lệ có thai và cũng tránh tỷ lệ đa
thai do g 1AB
2BB
2BC
3BB
4AA
4AB
4BB
5AA
6AA
32 Hội Nghị Việt Pháp Châu Á Thái Bình Dương lần XII Ngày 16‐17 Tháng 5 Năm 2013
Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013
ĐỐI TƯỢNG ‐ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Phương pháp
Mô tả cắt ngang.
Đối tượng
Tất cả những ca thực hiện IVF vào ngày chọc
hút trứng, số lượng trứng thu nhận được từ 10
trứng trở lên, tuổi người vợ (hoặc Donor) dưới
40 tuổi, đồng ý tham gia thực hiện và có ít nhất 4
phôi tốt vào ngày 3.
Nghiên cứu Y học
Thông số
Tổng số ca nuôi cấy phôi N5
Tổng số ca chuyển phôi N5
Nội mạc tử cung (X ± SD)
Tuổi trung bình BN (X ± SD)
Số phôi chuyển (X ± SD)
Chất lượng phôi chuyển (X ± SD)
Tươi
89
30
9,8 ± 1,5
31,1 ± 4,0
1,96 ± 0,50
0,86 ± 0,74
Đông
27
10,2 ± 1,7
31,7 ± 4,2
2,0 ± 0,33
1,0 ± 0,74
* Ghi chú: chất lượng phôi chuyển là tỷ lệ số phôi tốt
ngày 5 trên tổng số phôi chuyển.
Tiêu chuẩn loại trừ
Không đạt những tiêu chuẩn trên hoặc
không đồng ý tham gia.
Thời gian: từ ngày 1/1/2012 đến 31/12/2012.
* Tiến hành
Làm các bước tương tự quy trình chọc hút
trứng (bắt đầu lúc 8g sáng), ICSI 4‐5g sau và
nuôi cấy trứng sau chích ICSI.
Chuẩn bị đĩa cấy (từ ngày 3 đến ngày 5): Vào
sáng ngày 3 (68g ± 1), tiến hành kiểm tra phôi và
quyết định chuyển phôi hoặc nuôi cấy tiếp đến
blastocyst. Đối với những cas nuôi cấy tiếp đến
blastocyst, chúng tôi chia đều 2 nhóm, ½ số phôi
hữu dụng được đông vào ngày 3, ½ còn lại sẽ
được nuôi cấy tiếp. Tiến hành tạo đĩa cấy với
môi trường G2 plus (hệ thống giọt nuôi cấy nhỏ
có phủ dầu). Sau khi để đĩa môi trường trong tủ
ủ tối thiểu 2 tiếng cho cân bằng trước khi được
sử dụng cho việc nuôi cấy phôi, tiến hành
chuyển phôi từ môi trường G1 plus sang môi
trường G2 plus.
Vào sáng ngày 5 (116g ± 1), tiến hành đánh
giá phôi và quyết định số lượng phôi chuyển và
phôi đông (nếu có).
Đối với những phôi không/chưa phát triển
thành blastocyst, chúng tôi tiến hành chuyển
phôi vào đĩa môi trường G2 plus mới nuôi tiếp
đến ngày 6 và tiến hành đánh giá vào sáng ngày
6 (vẫn có thể tiến hành chuyển hoặc đông phôi
vào ngày này nếu có phôi blastocyst).
KẾT QUẢ
Bảng 1: Đặc điểm bệnh nhân
Chuyên Đề Sức Khỏe Sinh Sản – Nhi Sơ Sinh
Bảng 2: Bảng kết quả các cas thực hiện ICSI và nuôi
cấy phôi đến ngày 5. Tỷ lệ làm tổ và tỷ lệ có thai sau
chuyển phôi ngày 5 (tươi và đông).
Các biến
Tươi
Đông
Số trứng MII thu được
16,5 ± 5,1
(trung bình)
Số trứng thụ tinh (tỷ lệ %) 13,1± 4,5 (78,5)
Số phôi hữu dụng N3
12,1 ± 4,3 (73,5)
(tỷ lệ %)
Số phôi nuôi cấy N5 (tỷ lệ %) 5,8 ± 2,1 (48,1)
Số phôi phát triển đến N5 3,4 ± 1,8 (58,5)
(tỷ lệ %)
Số phôi tốt N5 (tỷ lệ %)
1,3 ± 1,1 (37,5)
Số phôi hữu dụng N6
4,0 ± 1,8 (69,0) p = 0,0039
(tỷ lệ %)
Số phôi tốt N6 (tỷ lệ %)
1,8 ± 1,2 (43,7) p = 0,104
Tỷ lệ có thai (%)
43,3 (*)
51,9 (**)
Tỷ lệ làm tổ (%)
33,3
37,0
* 2 ca có thai CP tươi được thực hiện khi nuôi cấy phôi tiếp
tục đến ngày 6 do ngày 5 phôi chưa phát triển đến giai
đoạn blastocyst.
** 2 ca có thai CP đông được thực hiện khi đông phôi N6
và rã phôi trước 2‐3g.
BÀN LUẬN
Trước hết, tôi xin nhấn mạnh rằng đây là
một nghiên cứu mô tả cắt ngang, nên không có
so sánh giữa chuyển phôi tươi và phôi đông
ngày 5 vì hai nhóm bệnh nhân không có cùng
33
Nghiên cứu Y học
Y Học TP. Hồ Chí Minh * Tập 17 * Phụ bản của Số 2 * 2013
những vấn đề để so sánh. Chúng tôi chỉ muốn
đưa ra những kết quả mà chúng tôi ghi nhận
được khi làm nghiên cứu để có một cái nhìn về
việc nuôi cấy phôi đến giai đoạn blastocyst và
chuyển phôi ngày 5.
Vấn đề nuôi cấy phôi đến ngày 5 đã và đang
thực hiện ở rất nhiều trung tâm trên thế giới. Ở
trung tâm chúng tôi đã bắt đầu triển khai từ quý
4 năm 2011 và hiện đang dần đi vào ổn định về
tỷ lệ có phôi blastocyst hình thành vào ngày 5
(58,5%) tương đương với hầu hết các trung tâm
khác và có sự khác biệt nếu nuôi cấy phôi tiếp
tục đến ngày 6 (69,0%, p=0,0039). Mặc dù tỷ lệ
phôi tốt vào ngày 6 không có sự khác biệt so với
ngày 5 nhưng nhìn vào bảng kết quả (bảng 2) ta
cũng thấy có tăng về số lượng và tỷ lệ. Do vậy,
việc nuôi cấy phôi tiếp tục đến ngày 6 cho thấy
có sự khác biệt về số phôi blastocyst hữu dụng
cho chuyển hoặc đông phôi. Đây là một kết quả
thống kê chúng tôi nhận thấy khi thực hiện. Do
vậy, có nên chăng nuôi cấy tiếp và chuyển phôi
ngày 6 nếu như chưa có phôi hữu dụng vào
ngày 5?
Chúng tôi thống kê tỷ lệ có thai chuyển phôi
tươi và chuyển phôi đông, điều đáng ngạc nhiên
là tỷ lệ có thai chuyển phôi đông cao hơn
chuyển phôi tươi (bảng 2), điều này cũng phù
hơp với một nghiên cứu mới đây của tác giả
Bruce và cs (năm 2011). Điều này cho thấy việc
đông phôi hiện nay tại trung tâm chúng tôi đang
rất ổn định và giúp chúng tôi mạnh dạn hơn
trong quy trình đông và rã phôi ngày 5. Nhưng
do số liệu của chúng tôi còn hơi thấp nên cần có
thời gian để đưa ra một kết luận chính xác.
KẾT LUẬN
Việc thực hiện nuôi cấy phôi đến giai đoạn
blastocyst và chuyển phôi ngày 5 đã giúp cho
những cặp vợ chồng thực hiện ICSI đạt kết quả
khả quan với chất lượng phôi tốt và giảm thiểu
tỷ lệ đa thai (đặc biệt tam thai) vì chỉ chuyển tối
đa 2 phôi. Đặc biệt, việc nuôi cấy phôi tiếp tục
đến ngày 6 nên được khuyến khích và việc
chuyển phôi đông ngày 5 là một xu hướng mà
hiện nay nhiều trung tâm IVF trên thế giới đang
thực hiện và trung tâm IVF Hùng Vương đang
ngày càng khẳng định đi đúng theo xu hướng
chung.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Alfarawati S, Fragouli E, Colls P, Stevens J, Gutiérrez‐Mateo
C, Schoolcraft WB, Katz‐Jaffe MG, Wells D. (2011). ”The
relationship between blastocyst morphology, chromosomal
abnormality and embryo gender.”Fertil Steril 2011
Feb;95(2):520‐4..
Bruce S, Shapiro MD,et al. (2011). ”Evidence of impaired
endometrial receptivity after ovarian stimulation for in vitro
fertilization: a prospective randomized trial comparing fresh
and frozen–thawed embryo transfer in normal
responders.”Fertility and Sterility_ Vol. 96, No. 2, August
2011.
Gardner DK, Lane M. (1998). ”Culture of viable human
blastocyst in defined sequential serum‐free media.”European
Society for Human Reproduction and Embryology Human
Reproduction;13 Suppl 3:148‐59; discussion 160..
Gardner DK, Surrey E, Minjarez D, Leitz A, Stevens
J, Schoolcraft WB. (2004).”Single blastocyst transfer: a
prospective randomized trial.”Fertil Steril; 81(3):551‐555
Glujovsky D, Blake D, Farquhar C, Bardach A. (2012).
”Cleavage stage versus blastocyst stage embryo transfer in
assisted reproductive technology.”Cochrane Database Syst
Rev; 11;7:CD002118.
IVF Blastocyst Pictures & Blastocyst Stage Embryo Grading
Photos
&
Images.
www.advancedfertility.com/blastocystimages..
Papanikolaou EG and al.”Live birth rate is significantly
higher after blastocyst transfer than after cleavage‐stage
embryo transfer when at least four embryos are available on
day 3 of embryo culture. A randomized prospective
study.”Hum Reprod. 2005 Nov;20(11):3198‐203.
34 Hội Nghị Việt Pháp Châu Á Thái Bình Dương lần XII Ngày 16‐17 Tháng 5 Năm 2013