BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN
10TCN TIÊU CHUẨN NGÀNH
10 TCN 8902006
QUY TRÌNH KIỂM NGHIỆM
VACXIN PHÓ THƯƠNG HÀN LỢN NHƯỢC ĐỘC
10 TCN 8902006
Hà Nội 2006
TIÊU CHUẨN NGÀNH 10 TCN 890
2006
QUY TRÌNH KIỂM NGHIỆM
VACXIN PHÓ THƯƠNG HÀN LỢN NHƯỢC ĐỘC
(Ban hành kèm theo Quyết định số /QĐBNNKHCN
ngày tháng 12 năm 2006 của Bộ trưởng Bộ Nông nghiệp và Phát triển nông
thôn)
Phạm vi áp dụng:
Quy trình này áp dụng cho việc kiểm nghiệm vacxin nhược độc chế từ các chủng
vi khuẩn Salmonella cholerae suis dạng đông khô.
1. Mẫu:
Theo 10 TCN 160 – 92 “Vacxin thú y Quy trình lấy mẫu và sử dụng mẫu trong
kiểm nghiệm”.
2. Kiểm tra thuần khiết:
2.1. Theo 10 TCN 16192 “Vacxin thú y Quy trình kiểm tra thuần khiết”.
2.2. Vacxin được kiểm tra trên các môi trường đặc biệt Mac Conkey, Kligler Iron
Agar (KIA), ủ 370C trong 72 giờ, chỉ có vi khuẩn Salmonella cholerae suis. Có ngưng kết
với Acriflavin 1/5000 (Phản ứng lên bông).
3. Kiểm tra an toàn:
3.1. Phương pháp trọng tài:
Tiêm vào dưới da hoặc xoang bụng cho 3 lợn cai sữa (mẫn cảm, chưa tiêm vacxin
phó thương hàn lợn) trọng lượng 20 – 30kg/con, mỗi con 10 liều vacxin quy định. Tất cả
lợn phải khoẻ mạnh sau thời gian 7 – 10 ngày theo dõi.
2
10 TCN 8902006
3.2. Phương pháp thay thế:
Tiêm dưới da cho ít nhất 5 chuột lang có trọng lượng 350 – 400g/con, mỗi con 2
liều vacxin quy định. Tất cả chuột phải khoẻ mạnh sau thời gian 7 – 10 ngày theo dõi.
4. Kiểm tra hiệu lực:
Vacxin được kiểm tra theo 1 trong các phương pháp sau:
4.1. Phương pháp đếm số vi trùng:
Dùng phương pháp đếm số vi trùng trên đĩa thạch Brain Heart Agar (BHA). Số
lượng vi trùng phải không thấp hơn 2,5 x 109 đơn vị khuẩn lạc (CFU) trong 1 liều
Vacxin. Nếu số lượng vi trùng không đạt 2,5 x 10 9CFU/liều thì vacxin được kiểm
nghiệm trên động vật.
4.2. Phương pháp trọng tài:
5 chuột lang trọng lượng 350 – 400g/con, mỗi con được tiêm 1/5 liều vacxin ghi
trên nhãn (0,5 x 109CFU) vào dưới da. 21 ngày sau khi tiêm vacxin, 5 chuột miễn dịch
cùng với 2 chuột đối chứng được thử thách với chủng phó thương hàn lợn cường độc
tương ứng với liều 1MLD vào dưới da. Trong 3 tuần theo dõi, chuột đối chứng phải chết
hết trong khi đó chuột miễn dịch phải sống ít nhất 3 con.
CFU: Colony Form Unit – Đơn vị khuẩn lạc
MLD: Minimum Lethal Dose Liều nhỏ nhất gây chết hết động vật thí nghiệm.
KT. BỘ TRƯỞNG
THỨ TRƯỞNG
3