tiêu luận thụ tinh trứng bò trong ống nghiệm

CÁC GIAI ĐOẠN CỦA QUÁ TRÌNH THỤ TINH TRỨNG
BÒ TRONG ỐNG NGHIỆM
sv: Nguyễn hữu Hội
ĐẠI HỌC THÀNH TÂY
KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC

MỤC LỤC
A- Giới thiệu thế nào là thụ tinh trong ống
nghiệm
B- Nội dung
I- Điều kiện xảy ra các quá trình thụ tinh
II- Các quá trình
C- Kết quả

A- Khái niệm
Thụ tinh trong
nghiệm (In vitro
fertilization):
Là phương pháp cho giao
tử đực(tinh trùng) và
giao tử cái (trứng) gặp
nhau và thụ tinh bên
ngoài cơ thể, sau đó
chuyển hợp tử hoặc
phôi vào buồng tử cung
mẹ

B- Nội dung
I- Điều kiện xảy ra các quá trình thụ tinh
1- Trứng đã thành thục

2- Tinh trùng đã kiện toàn năng lực thụ tinh
3 – môi trường và các thiết bị hỗ trợ
II- Các quá trình
1- Tinh trùng xuyên qua lớp tế bào vành phóng xạ
2- tương tác của tinh trùng với màng trong suốt
3- tinh trùng gắn vào vùng trong suốt
4- phản ứng thế đỉnh
5- tinh trùng xuyên qua màng trong suốt
6-sự dung hợp của giao tử đực và cái

I- Điều kiện xảy ra các quá trình thụ tinh
1- Trứng thành thục
- Thu buồng trứng
-
Bảo vệ và vận
chuyển buồng trứng
-
Hút trứng từ các
nang
-
Rửa và chọn lọc
trứng
-
Nuôi thành thục trứng
trong ống nhiệm
-
Sự thành thục của
trứng

Thu trứng

-
Thu buồng trứng: thu ngay khi con vật đã chết .
Mổ cố định buồng trứng lấy kéo cắt buồng trứng
-
Bảo vệ và vận chuyển buồng trứng: buồng trứng
được rửa 3-4 lần trong dung dịch nước muối
sinh lí có bổ sung kháng sinh và bảo quản trong
môi trường PBS, nhiệt độ khống chế 30-
35
0
C,thời gian chuyển về phòng thí nghiệm 2-4
giờ
-
Hút trứng từ các nang: dùng bơm tiêm hoặc máy
hút chuyên dụng có kích thước lỗ kim 18G hút
các nang(d=2-6mm) và các bước tiếp theo làm
trong tủ vô trùng

Rửa và chọn lọc trứng
dịch nang trứng hút ra
có lẫn trứng và các tế
bào nang trứng được
bơm vào đĩa Petri.
Đưa đĩa vào kinh hiển
vi soi nổi ( có độ
phóng đại 40 đến 100
lần) trứng được gắp
ra bằng Pipet thủy
tinh rửa vài lần trong
môi trường DPDS

hoặc các môi trường
thích hợp.

Sự thành thục của trứng
-
Sự thành thục của nhân
+ Hình thái
+ Sinh lí, sinh hóa
+ Sự ổn định ở trạng thái Metaphase II
(ổn định phân bào)
-
Sự thành thục của nguyên sinh chất
-
Sự thành thục của màng trứng
-
Nuôi thành thục trứng trong ống nhiệm
-
Đánh giá sự thành thục của trứng bò

Sự thành thục của nhân
- Hình thái: tan biến màng nhân, các nhiêm sắc thể đặc
lại, xuất hiện thể cực thứ nhất, và nhiễm sắc thể ở
trạng thái Metaphase II và được duy trì đến khi tinh
trùng xâm nhập
-
Sinh lí, sinh hóa:
+ sự hoạt hóa thành thục của trứng do yếu tố
MPF( maturation promoting factor )
+ progesterone kích thích sản sinh ra MPF
+ MPF thúc đẩy sự phân bào, đặc lại của nhiễm

sắc thể , phát triển của nhân, xuất hiện thoi phân bào,
không đặc hiệu

Sinh lí, sinh hóa
+ MPF là một phức hợp
proteinbao gồm sự liên hợp
của một số cycline và một
protein kanise p34(kiểm soát
phân bào)
+ các quá trình như sự lớn lên
màng sinh chất , biệt hóa của
ti thể, tổng hợp , tích lũy noãn
hoàng, ARN thông tin, biến
mất các hạt trung tâm, hoàn
tất trước khi xảy sự phục hồi
phân bào ở trứng(mức AMP
vòng trong trứng tăng ức chế
phân bào)

Sự ổn định ở trạng thái Metaphase II
(ổn định phân bào)
+ Sự hoạt hóa trứng phụ thuộc
đồng thời vào các quá trình
phosphoryl-dephosphoryl hóa
mà quá trình này bị ức chế bởi
6-DMAP (6-dimethyl-
aminopurine)
+ quá trình tổng hợp protein bị ức
chế bởi puromicine. → Hai
chất này đặc lại NST giảm sự

phân bào của trứng

Sự thành thục của nguyên sinh chất
Sự chuyển các hạt vỏ
(cortical granule)
theo hướng từ bộ
máy golgi đến
màng bào trương
của trứng. Những
hạt này có chứa
ovoperoxidase giảm
thiểu thụ tinh đa
trùng(cố định trên
màng bào trương)

Sự thành thục của màng trứng
•
Điều kiện cần thiết để màng
trong suốt có thể nhận biết đặc
hiệu tinh trùng đã kiện toàn
năng lực thụ tinh của loài
•
Vùng trong suốt gồm 95% của 3
glycoprotein được tổ chức sợi
dài hợp nhất là ZP1,ZP2,ZP3,
ZP3 và ZP2 hợp thành các sợi,
ZP1 bắc cầu , chỉ có ZP3 là
được tinh trùng nhận biết và
phát ra phản ứng thế đỉnh, ZP2
can thiệp khi xảy ra sự thụ tinh

cố định đầu tinh trùng