Xử lý các tình huống đối với máy GC và GC-MS

Xử lý các tình huống đối với máy GC và GC­MS
BioMedia
Vấn đề hay gặp phải trong sắc ký khí và sắc ký khí ghép nối khối phổ (GC và GCMS) là  
các peak ma.
Chúng ta thường nghĩ rằng chúng ta có thể xử lý được hiện tượng mà GCMS hay gặp là  
các peak (đỉnh sắc ký) khơng phân tích gây nhiễu. Các peak ma này có hình dạng và  
kích cỡ khác nhau, có thể  khiến người phân tích bị  nhầm lẫn với tín hiệu của mẫu, và  
thường phải đặt ra câu hỏi là: Peak tìm thấy và xác định được này có thật sự  là của 
mẫu hay khơng?!

Cần lưu ý rằng khí phân tích bằng GC, thường sử dụng các dung mơi chiết khá mạnh,  
do khả  năng đó nên kể  các bề  mặt vật liệu cũng có thể  bị  ăn mịn. Thậm chí các tạp  
chất từ  khơng khí trong phịng thí nghiệm cũng có thể  bị  hấp thụ  vào trong dung mơi. 
Khi bơm mẫu, ai cũng mong rằng trong đó chỉ có mẫu thơi nhưng thực tế chúng ta bơm  
cả các thứ khác cùng vào với nó.
Những  ảnh hưởng này có thể  có nồng độ  rất lớn, gây  ảnh hưởng tới kết quả. Đơi khi 
các nhiễu gây ra khơng quan sát được khi phân tích mục tiêu sử dụng chế độ SIM hoặc 
MS/MS. Nhưng đơi khi có thể nó lại gây ra nhiều vấn đề  hoặc các vấn đề tiềm ẩn ảnh  
hưởng đến kết luận cuối cùng.
Các ngun nhân phổ biến gây ra nhiễu:


1. Khí mang bị nhiễm bẩn
Cần đảm bảo rằng khi lắp đặt một hẹ thống mới vào chu trình của phịng thí nghiệm , 
các màng lọc,  ống nối phải sạch và phẳng. Nếu lắp máy GC đầu tiên cho phịng thí  
nghiệm cần phải được người được đào tạo thwcjhieenj. Nếu các dây nối chưa được 
dùng bao giờ thì cần sử dụng trước trong vịng 15 phút. Thường dây dẫn khí được làm 
sạch khi vận chuyển.
Nên kiểm tra lại thơng số  và cuối cùng khi đặt một thiết bị  GC hay GCMS, cần làm rõ 
với nhà cung cấp về u cầu chất lượng của dịng khí đầu vào. Thay thế các bộ lọc một 
cách thường xun, theo dõi sự thay đổi màu của các bộ chỉ thị (cảnh báo).

2. Cột bị rị rỉ
Đây là lỗi thường gặp trong GC và GCMS. Chủ  yếu quan sát được khi đường nền bị 
tăng ở cuối của chu trình nhiệt độ. Khi phân tích với MS, thường quan sát thấy đỉnh m/z  
207 và 281 khi sử  dụng loại cột khơng phân cực. Điều quan trọng là sử  dụng các cột  
tn thủ theo đúng hướng dẫn.
Cách làm giảm thiểu rị rỉ cột:
­ Bằng cách đưa nhóm thơm vào giai đoạn tạo polysiloxane để cải thiện độ bền của nó 
ở nhiệt độ cao hơn.
­ Bằng cách kết nối các pha và gắn nó lên bề mặt của cột phủ silica
­ Bằng cách giảm sự  có mặt của oxy, nước và các loại hoạt chất khác có trong khí 
mang
­ Hiệu chuẩn lại cột để loại bỏ khí oxy trong cột trước khi sử dụng
Chuẩn bị cột để sử dụng:
­ Kết nối cột với đầu bơm mẫu và đầu dị, kiểm tra độ rị rỉ tại đó
­ Rửa cột bằng khí mang để loại bỏ khí oxy
­ Gia nhiệt cột sắc ký từ từ để tối đa hóa nhiệt độ hoạt động của cột và giữ ở đó

3. Septum bị rị rỉ
Một lỗi phổ biến khác đó là rị rỉ septum (vách ngăn – đệm cao su silicon), lỗi này có thể 
gây ra lặp lại đỉnh sắc ký và dễ bị xác định trong khối phổ MS thành các peak m/z 221,  
m/z 355, m/z 429. Hiện tượng rị rỉ  này có thể  gặp tại septum của cổng bơm mẫu , và  
cũng có thể trong septum của lọ đựng mẫu đặc biệt trong việc lưu trữ các lọ mà septum  
đã bị  chọc thủng (đã dùng). Những hạt nhỏ  của septum có thể  thốt ra và làm lặp lại 
peak.


Phải đảm bảo sử dụng septum và đồ thủy tinh sạch.

4. Các vấn đề khi bơm mẫu 

  Tạp chất có thể gây nhiễu trong đầu bơm mẫu đã được gia nhiệt.
Cần đảm bảo bạn đã cài đặt các điều kiện và đồ  tiêu hao tốt nhất có thể  cho mỗi lần  
tiêm mẫu. Thực ra, việc lựa chọn các phụ  kiện tiêm mẫu chính xác khá khó vì có rất 
nhiều thơng số và nhiều lựa chọn. Cũng giống như dây nối (dây chia dịng) cũng có thể 
nhiễm bẩn và gây peak ma.
Nguồn bài: 
Biên dịch: BioMedia Việt Nam

/>