Tóm tắt luận án Tiến sĩ Hóa học: Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của loài Trichosanthes baviensis Gagnep. (Qua lâu Ba Vì), Trichosanthes anguina L. (Dưa núi)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO

VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC
VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM

HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ
-----------------------------

Hồng Thị Yến

NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH
SINH HỌC CỦA LỒI Trichosanthes baviensis Gagnep. (QUA
LÂU BA VÌ), Trichosanthes anguina L. (DƯA NÚI) VÀ
Trichosanthes kirilowii Maxim. (QUA LÂU NHÂN)

Chuyên ngành: Hóa Hữu cơ
Mã số

: 9.44.01.14

TĨM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC

Hà Nội - 2019


25

Cơng trình được hồn thành tại: Học Viện Khoa học và Công nghệ - Viện
Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam

Người hướng dẫn khoa học 1: GS. VS. Châu Văn Minh

Người hướng dẫn khoa học 2: TS. Nguyễn Xuân Nhiệm

Phản biện 1:
Phản biện 2:
Phản biện 3:

Luận án sẽ được bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án tiến sĩ cấp Học viện,
họp tại Học Viện Khoa học và Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học và
Công nghệ Việt Nam vào hồi
giờ
, ngày tháng năm 2019.

Có thể tìm hiểu luận án tại:
- Thư viện Học Viện Khoa học và Công nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học và
Công nghệ Việt Nam.
- Thư viện Quốc gia Việt Nam.

DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ
1. Nguyen Xuan Nhiem, Hoang Thi Yen, Bui Thi Thuy Luyen, Bui
Huu Tai, Pham Van Hoan, Nguyen Phuong Thao, Hoang Le
Tuan Anh, Ninh Khac Ban, Phan Van Kiem, Chau Van Minh,
Jang Hoon Kim, Jeon Mi Ni and Young Ho Kim. Chemical
components from the leaves of Trichosanthes baviensis and their
tyrosinase inhibitory activity. Bulletin of the Korean chemical
society, 2015, 36 (2), 703-706.
2. Nguyen Xuan Nhiem, Hoang Thi Yen, Phan Van Kiem, Chau
Van Minh, Bui Huu Tai, Hoang Le Tuan Anh, SeonJu Park,
Nanyoung Kim, and Seung Hyun Kim. 1H and 13C NMR
assignments of tricanguinas A -B, coumarin monoterpenes from
Trichosanthes anguina L. Magnetic Resonance in Chemistry,

2014, 53(2), 178-180.
3. Chau Van Minh, Nguyen Xuan Nhiem, Hoang Thi Yen, Phan Van
Kiem, Bui Huu Tai, Hoang Le Tuan Anh, Truong Thi Thu Hien,
SeonJu Park, Nanyoung Kim, and Seung Hyun Kim. Chemical
constituents of Trichosanthes kirilowii and their cytotoxic
activities. Archives of Pharmacal Research, 2015, 38(8), 14431448.
4. Hoang Thi Yen, Hoang Le Tuan Anh, Duong Thi Hai Yen, Pham
Hai Yen, Duong Thi Dung, Do Thi Ha, Phan Van Kiem, Chau
Van Minh, Nguyen Xuan Nhiem. Phenolic glycosides from
Trichosanthes baviensis. Journal of Medicinal Materials, 2014,
19(5), 283-287.
5. Hoang Thi Yen, Hoang Le Tuan Anh, Dan Thi Thuy Hang, Pham
Hai Yen, Pham Thi Trang Tho, Do Thi Ha, Phan Van Kiem,
Chau Van Minh, Nguyen Xuan Nhiem. Megastigmane glycosides
from Trichosanthes anguina L.. Journal of Medicinal Materials,
2014, 19(5), 299-303.


24

1

với IC50 tương ứng là 4,1 và 6,5 µM, mạnh tương đương
mitoxantrone (IC50 tương ứng là 3,1 và 8,4 µM). Trên dòng tế bào A549, hợp chất TK5 thể hiện hoạt tính ức chế sự phát triển rất mạnh
với IC50 là 2,7 µM, mạnh hơn cả mitoxantrone (IC50 là 7,2 µM). Hợp
chất TK1, TK6 và TK8 thể hiện hoạt tính ức chế yếu hơn với IC50
trong khoảng 14,7-49,4 µM. Các hợp chất TK2 và TK3 thể hiện
hoạt tính yếu với dịng tế bào A-549 và HT-29. Hợp chất TK4 khơng
thể hiện hoạt tính ở nồng độ thử nghiệm.

MỞ ĐẦU
Việt Nam có vị trí địa lý nằm trong vùng khí hậu nhiệt đới
gió mùa, địa hình nhiều đồi núi chia cắt nên điều kiện khí hậu cũng
rất đa dạng, có nhiều tiểu vùng khí hậu khá đặc trưng. Những yếu tố
trên đã tạo nên những điều kiện sinh thái, những thảm thực vật nhiệt
đới rậm, ẩm, thường xanh, hoặc thưa, nửa rụng lá và cả các thảm
thực vật mang tính cận nhiệt đới ở các khu vực núi cao.
Theo ước tính của các nhà thực vật Việt Nam, nước ta có
khoảng 12.000 lồi, trong đó có khoảng 1/3 trên tổng số loài được
nhân dân dùng làm thuốc. Rất nhiều loài trong số đó từ xa xưa đến
nay đã được sử dụng trong y học cổ truyền và các mục đích khác
phục vụ đời sống của con người như mật nhân Eurycoma longifolia,
bạc hà Mentha arvensis, khổ qua Momordica charantia, ngũ da bì
hương Acanthopanax trifoliatus, đương quy Angelica sinensis, sâm
Ngọc Linh Panax vietnamensis, thìa canh Gymnema sylvestre,… đã
trở nên rất quen thuộc.
Ngồi sự phong phú về thành phần chủng loại, nguồn dược
liệu Việt Nam cịn có giá trị to lớn trong việc điều trị các căn bệnh
khác nhau trong dân gian. Các cây thuốc được sử dụng dưới hình
thức độc vị hay phối hợp với nhau tạo nên các bài thuốc cổ phương,
đang tồn tại phát triển đến ngày nay. Ngoài ra, hàng trăm cây thuốc
đã được khoa học y - dược hiện đại chứng minh về giá trị chữa bệnh
của chúng.
Trong vài thập kỉ qua, y học cổ truyền đã cung cấp cho thuốc
Tây với hơn 40% tổng các loại thuốc. Do đó, các nghiên cứu đã tập
trung vào việc đánh giá khoa học của các loại thuốc truyền thống có
nguồn gốc thực vật. Trong số các loài thực vật kể trên, nhiều loài
thuộc chi Qua lâu (Trichosanthes) được trồng rộng rãi và nhiều loài
mọc tự nhiên ở nước ta và các nước trong khu vực. Trong dân gian,
một số loài thuộc chi Qua lâu được sử dụng làm rau ăn, một số loài

được sử dụng làm thuốc chữa bệnh như: làm thuốc giải nhiệt, lợi tiểu,
lợi sữa, giảm đường huyết hoặc chữa bệnh ngoài da, chữa bệnh đau
đầu. Nhằm mục đích nghiên cứu làm rõ thành phần hóa học và hoạt

KIẾN NGHỊ
Từ các kết quả nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh
học của các lồi T. baviensis, T. anguina và T. kirilowii nhận thấy:
Các hợp chất triterpenoid TB6 phân lập từ T. baviensis thể hiện
hoạt tính ức chế mạnh với enzym tyrosinase. Do vậy, cần có những
nghiên cứu sâu về tác dụng làm trắng da của hợp chất này.
Hợp chất TK7 phân lập từ T. kirilowii thể hiện hoạt tính ức chế
sự phát triển 2 dịng tế bào HT-29 và OVCAR. Vì vậy, cần có thêm
các nghiên cứu sâu hơn ở cấp độ in vivo.

NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN
1. Lần đầu tiên nghiên cứu về thành phần hóa học và hoạt tính sinh
học của ba loài T. baviensis, T. anguina, T. kirilowii ở Việt Nam.
2. Đã phân lập và xác định cấu trúc hóa học của 4 hợp chất mới và 26
hợp chất đã biết từ ba loài T. baviensis, T. anguina, T. kirilowii. Các
hợp chất mới được đặt tên là: 9,26-epoxymultiflorenol (TB1),
tricanguina A (TA1), tricanguina B (TA2), trichobenzolignan (TK1).
3. Lần đầu tiên các hợp chất phân lập được từ loài T. baviensis được
đánh giá hoạt tính ức chế enzyme tyrosinase.


2

23

tính sinh học của một số lồi thuộc chi Qua lâu (Trichosanthes), tôi

đã lựa chọn tên luận án: ‘‘Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt
tính sinh học của lồi Trichosanthes baviensis Gagnep. (Qua lâu
Ba Vì), Trichosanthes anguina L. (Dưa núi) và Trichosanthes
kirilowii Maxim. (Qua lâu nhân)”.
Mục tiêu của luận án:
Xác định thành phần hóa học chủ yếu của ba loài T. baviensis,
T. anguina và T. kirilowii ở Việt Nam.
Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư và hoạt tính ức chế
enzym tyrosinase của các hợp chất phân lập được để tìm kiếm hợp
chất có hoạt tính sinh học.
Nội dung luận án bao gồm:
1. Phân lập các hợp chất từ ba loài thuộc chi Trichosanthes
bằng các phương pháp sắc ký.
2. Xác định cấu trúc hoá học các hợp chất phân lập được bằng
các phương pháp hoá lý.
3. Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư và hoạt tính ức
chế enzym tyrosinase của các chất phân lập được.
Bố cục của luận án
- Phần mở đầu: 2 trang (1 → 2).
- Tổng quan: 26 trang (3→ 28).
- Thực nghiệm và kết quả: 22 trang (30 → 51).
- Thảo luận kết quả: 65 trang (52 → 116).
- Kết luận: 2 trang (118, 119).
- Tài liệu tham khảo: 86 tài liệu.

 5 hợp chất đã biết lần đầu tiên phân lập từ chi Trichosanthes:
kaemferol 3-O-β-D-glucopyranoside (1→3) O-β-D-glucopyranoside
(TA7), corchoionoside B (TA3), icariside B5 (TA4) và (3R,9S) 3,9dihydroxymegastigman-5-ene 9-O-β-D-glucopyranoside (TA5),
isopentyl 1-O-β-D-glucopyranoside (TA8); 1 hợp chất đã biết:
icariside B1 (TA6).

3. Đã phân lập và xác định được cấu trúc hóa học của 8 hợp chất từ
loài T. kirilowii (TK1-TK8), cụ thể:
 1 hợp chất mới: trichobenzolignan (hợp chất lignan) (TK1)
 3 hợp chất đã biết lần đầu tiên phân lập từ chi Trichosanthes,
arvenin I (TK8), ligballinol (TK2) và ehletianol C (TK4); 4 hợp
chất đã biết: (-)-pinoresinol (TK3), luteolin-7-O-glucoside (TK5),
chrysoeriol-7-O-β-D-glucoside (TK6) và 10α-cucurbita-5,24-dien3β-ol (TK7).
4. Đã nghiên cứu hoạt tính ức chế enzym tyrosinase của các hợp chất
phân lập được từ loài T. baviensis. Kết quả cho thấy, hợp chất TB6
thể hiện hoạt tính ức chế enzym tyrosinase rất mạnh với IC50 là 3,9 ±
1,5 µM. Các hợp chất TB3, TB4 và TB10 thể hiện hoạt tính mạnh
với IC50 tương ứng là 6,9 ± 2,2, 9,5 ± 3,1, 9,3 ± 2,1 µM. Các hợp chất
TB1, TB2, TB5, TB7, TB8 và TB9 thể hiện hoạt tính tương đối với
IC50 tương ứng là 14,5 ± 3,4, 11,4 ± 2,8, 10,3 ± 2,5, 11,5 ± 4,1, 16,7
± 2,1, 10,1 ± 3,1 µM. Đây là lần đầu tiên các hợp chất phân lập từ
loài T. baviensis được nghiên cứu hoạt tính ức chế enzym tyrosinase.
5. Đã nghiên cứu hoạt tính ức chế enzym tyrosinase của các hợp chất
phân lập được từ loài T. anguina. Kết quả cho thấy hợp chất TA7 có
hoạt tính ức chế mạnh hơn cả chất đối chứng dương kojic acid (IC50
là 14,6 ± 3,3 µM) với IC50 là 8,5±3,3 µM. Các hợp chất từ TA1 đến
TA6 thể hiện hoạt tính yếu hơn với giá trị IC50 trong khoảng 21,3 đến
46,7 µM. Hợp chất TA8 khơng thể hiện hoạt tính ở nồng độ nghiên
cứu.
6. Đã tiến hành đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư người A549, HT-29, OVCAR và MCF-7 của 8 hợp chất (TK1 -TK8). Hợp
chất triterpenoid TK7 thể hiện hoạt tính ức chế sự phát triển các tế
bào ung thư mạnh nhất, đặc biệt là 2 dòng tế bào HT-29 và OVCAR

CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN
Bao gồm phần tổng quan về các nghiên cứu trong nước và quốc
tế về thành phần hóa học và hoạt tính sinh học của các lồi thuộc chi

Trichosanthes.
1.1. Giới thiệu về chi Trichosanthes
1.1.1. Đặc điểm thực vật của chi Trichosanthes
Chi Qua lâu (Trichosanthes) là một chi lớn trong họ Bầu bí
(Cucurbitaceae), bao gồm khoảng 100 lồi và đang được các nhà


22

3

Các hợp chất trên đã được đánh giá khả năng ức chế sự phát
triển một số dòng tế bào ung thư người bao gồm: tế bào ung thư phổi
A-549, tế bào ung thư ruột kết HT-29, tế bào ung thư buồng trứng
OVCAR và tế bào ung thư vú MCF-7. Hợp chất mitoxantrone, một
hợp chất chống ung thư được sử dụng để so sánh.
Kết quả nghiên cứu cho thấy, hợp chất triterpenoid TK7 thể
hiện hoạt tính ức chế sự phát triển các tế bào ung thư mạnh nhất, đặc
biệt là 2 dòng tế bào HT-29 và OVCAR với IC50 tương ứng là 4,1 và
6,5 µM, tương đương mitoxantrone (IC50 tương ứng là 3,1 và 8,4
µM). Trên dịng tế bào A-549, hợp chất TK5 thể hiện hoạt tính ức
chế sự phát triển rất mạnh với IC50 là 2,7 µM, mạnh hơn cả
mitoxantrone (IC50 là 7,2 µM). Hợp chất TK1, TK6 và TK8 thể hiện
hoạt tính ức chế yếu hơn với IC50 trong khoảng 14,7-49,4 µM. Các
hợp chất TK2 và TK3 thể hiện hoạt tính yếu với dịng tế bào A-549
và HT-29. Hợp chất TK4 khơng thể hiện hoạt tính ở nồng độ thử
nghiệm phù hợp với kết quả đã công bố [86].

khoa học trên thế giới rất quan tâm. Theo thống kê và mơ tả sơ bộ
của GS. Phạm Hồng Hộ, Việt Nam có khoảng 12 lồi Trichosanthes

trong đó có 2 lồi đặc hữu của Việt Nam là qua lâu Ba Vì (T.
baviensis) và qua lâu Pierre (T. pierrei) [1].
1.1.2. Tình hình sử dụng trong y học cổ truyền các loài thuộc chi
Trichosanthes.
Một số loài trong chi Qua lâu (T. ovigera Blume, T.
cucumerina L.) đã được trồng rộng rãi và sử dụng quả làm rau ăn.
Nhiều loài đã được dùng trong dân gian làm thuốc giải nhiệt, lợi tiểu,
lợi sữa, giảm đường huyết, chữa bệnh ngồi da, bệnh đau đầu, ...
1.1.3. Tình hình nghiên cứu về thành phần hóa học của chi
Trichosanthes
Trong những năm gần đây, cũng đã có nhiều nghiên cứu về
thành phần hóa học và hoạt tính sinh học một số lồi thuộc chi
Trichosanthes. Theo những cơng trình đã được cơng bố cho thấy,
thành phần hóa học của chi Trichosanthes, bao gồm các nhóm chất
chính như: triterpenoid, steroid, flavonoid, lignan, các hợp chất có
nitơ và một số hợp chất khác. Trong đó lớp chất triterpenoid, đặc biệt
là các hợp chất khung cucurbitane là các hợp chất khá phổ biến trong
các loài thuộc chi Trichosanthes đã được nghiên cứu. Các nghiên cứu
thành phần hóa học chủ yếu tập trung ở 8 loài: T. anguina, T.
cucumerina, T. cucumeroides, T. dioica, T. fructus, T. kirilowii, , T.
pericarpium và T. tricuspidata. Chi tiết các tổng quan về thành phần
hóa học xem ở Luận án.
1.1.3.1. Các hợp chất triterpenoid
Theo các cơng trình đã cơng bố, có 64 hợp chất triterpenoid
1-64 đã phân lập được từ bốn loài T. cucumerina, T. kirilowii, T.
tricuspidata, và T. anguina.
1.1.3.2. Các hợp chất steroid
Theo các cơng trình đã cơng bố, có 26 hợp chất steroid 65-90
đã phân lập được từ bốn loài T. dioica, T. kirilowii, T. rosthornii và T.
tricuspidata.

KẾT LUẬN
1. Đã phân lập và xác định được cấu trúc hóa học của 14 hợp chất
(TB1-TB14) từ lồi T. baviensis, cụ thể:
 1 hợp chất mới: 9,26-epoxymultiflorenol (triterpene) (TB1).
 8 hợp chất đã biết lần đầu tiên phân lập từ chi Trichosanthes:
β-amyrin acetate (TB2), lup-20(29)-en-3β-ol (TB6), ergosta-6,22dien-3β,5α,8α-triol (TB3), nicotiflorin (TB12), (+)-lyoniresinol 9'-Oβ-D-glucopyranoside
(TB7),
(-)-lyoniresinol
9'-O-β-Dglucopyranoside (TB8), demethoxybergenin (TB9), icariside F2
(TB11); 5 hợp chất đã biết: spinasterol (TB4), 4α,14α-dimethyl9,19-cyclo-5α,9β-ergost-24(28)-en-3β-ol (TB5), bergenin (TB10),
(6S,9S)-roseoside (TB13) và thymidine (TB14).
2. Đã phân lập và xác định được cấu trúc hóa học của 8 hợp chất từ
lồi T. anguina (TA1-TA8), cụ thể:
 2 hợp chất mới: tricanguina A (TA1) và tricanguina B (TA2)
(dẫn xuất coumarin).


4

21

1.1.3.3. Các hợp chất flavonoid
Theo các cơng trình đã cơng bố, có 20 hợp chất flavonoid
91-110 đã phân lập được từ 2 loài T. kirilowii và T. pericarpium.
1.1.3.4. Các hợp chất lignan
Theo các cơng trình đã cơng bố, có 5 hợp chất lignan 110114 đã phân lập được từ loài T. kirilowii.
1.1.3.5. Các hợp chất có chứa nitơ
Theo các cơng trình đã cơng bố, có 17 hợp chất có chứa nitơ
115-131 đã phân lập được từ loài T. kirilowii.

1.1.4. Hoạt tính sinh học của chi Trichosanthes
Các nghiên cứu trên thế giới chủ yếu tập trung vào 8 loài
thuộc chi Trichosanthes và cho thấy các hợp chất phân lập từ các lồi
thuộc chi Trichosanthes có hoạt tính mạnh. Một số hoạt tính đáng
quan tâm như gây độc tế bào ung thư, kháng viêm, kháng khuẩn,
kháng nấm, chống oxy hố …trong đó, nổi bật là hoạt tính gây độc tế
bào ung thư với khả năng ức chế mạnh trên nhiều dòng tế bào ung
thư khác nhau.
1.1.4.1. Hoạt tính gây độc tế bào ung thư
1.1.4.2. Hoạt tính kháng viêm
1.1.4.3. Tác dụng chống oxy hóa
1.1.4.4. Tác dụng kháng khuẩn và kháng nấm
Chi tiết các tổng quan về hoạt tính sinh học xem ở Luận án.
1.1.5. Tình hình nghiên cứu về chi Trichosanthes ở Việt Nam
Theo các tài liệu đã công bố, chi Trichosanthes ở Việt Nam có
2 lồi là T. kirilowii và T. tricuspidata đã được nghiên cứu về thành
phần hóa học và hoạt tính sinh học.
1.2. Giới thiệu về lồi T. baviensis, T. anguina và T. kirilowii
1.2.1. Loài T. baviensis
1.2.2. Loài T. anguina
1.2.3. Lồi T. kirilowii

triển vọng ứng dụng trong ngành cơng nghiệp mỹ phẩm, bảo vệ da
khỏi những tác nhân bên ngoài mơi trường. Các kết quả nghiên cứu
sẽ góp phần đưa đến cơ hội ứng dụng trong sản xuất thuốc điều trị
những căn bệnh có liên quan về rối loạn sắc tố da.
3.2.2. Hoạt tính gây độc tế bào ung thư của các hợp chất phân lập được
từ loài T. kirilowii
Theo các nghiên cứu trước đây, các hợp chất phân lập từ lồi
T. kirilowii thể hiện nhiều hoạt tính lý thú đặc biệt là hoạt tính gây

độc tế bào ung thư. Các nghiên cứu trên dòng tế bào ung thư đã công
bố bao gồm: A-549, SK-OV-3, SK-MEL-2, XF-498, HCT-15, UO31, CCRF-CEM, SR, NCI-H460, NCI-H522, HCT-116, U251,
OVCAR-3, OVCAR-6, SN12C, SK-Mel-2, B16F1, ung thư vú (SRBR-3, MCF-7, T47D và MDA-MB-435), ung thư ruột kết (Caco-2)
[4], [14], [37]. Trong số các hợp chất được phân lập từ loài T.
kirilowii, hợp chất karounidiol (45) thể hiện hoạt tính mạnh trên rất
nhiều dịng ung thư như ức chế ung thư biểu mô tế bào thận (UO-31
với IC50 là 1,98 μM), bệnh bạch cầu (CCRF-CEM với giá trị IC50
1,63 μM; SR (CRL-2262) với giá trị IC50 1,75 μM), ung thư phổi (A549 với giá trị IC50 1,76 μM; NCI-H460 với giá trị IC50 1,91 μM,
NCI-H522 với giá trị IC50 3,56 μM), ung thư đại tràng (HCT-116 với
giá trị IC50 2,01 μM), ung thư thần kinh trung ương (U251 với giá trị
IC50 2,02 μM), ung thư buồng trứng (OVCAR-3 với giá trị IC50 1,79
μM; OVCAR-6 với giá trị IC50 2,06 μM) và ung thư thận (SN12C với
giá trị IC50 2,36 μM) [14]. Theo một công bố khác, hợp chất isoetin
5'-methyl ether (93) phân lập được năm 2007 đã thể khả năng ức chế
các dòng tế bào ung thư phổi A-549, ung thư da ác tính SK-Mel-2 và
tế bào ung thư chuột ác tính B16F1 với giá trị IC50 lần lượt là 0,92,
8,00, 7,23 µg/mL [29]
Trong số các hợp chất phân lập (TK1-TK8) từ loài T.
kirilowii, trichobenzolignan (TK1) là hợp chất mới, ligballinol
(TK2), ehletianol C (TK4) và arvenin I (TK8) lần đầu tiên được
phân lập từ loài này. Các tra cứu về các hợp chất TK6, TK7 và TK8
cho thấy chưa có đánh giá nào về tác dụng gây độc tế bào ung thư.


20

5

Nghiên cứu của Khan và các cộng sự vào 2005 đã phân lập
được tám hợp chất cycloartane triterpenoid và tiến hành thử hoạt tính

ức chế enzym tyrosinase. Kết qủa cho thấy bảy trong số tám chất có
khả năng ức chế tốt hơn chất đối chứng kojic acid (IC50 =
16,67±0,52); một chất có hoạt tính rất mạnh, IC50 = 1,32 ± 0,37 [84].
Năm 2014, Khan và các cộng sự đã phân lập được chất βamyrin acetate (TB2) từ quả của loài Madhuca latifolia và tiến hành
thử hoạt tính ức chế enzym tyrosinase. Kết qủa cho giá trị IC50 =
23,12±0,07 [85]. Trong một công bố của Park và các cộng sự năm
2017, hợp phần bergenin trong một số mỹ phẩm có khả năng ức chế
sự phát triển của enzym tyrosinase.
Từ kết quả nghiên cứu về thành phần hóa học của lồi T.
Baviensis-một loài đặc hữu tại Việt Nam, cho thấy tất cả các hợp chất
đều thể hiện hoạt tính ức chế mạnh enzym tyrosinase. Các hợp chất
nghiên cứu có hoạt tính ức chế mạnh hơn cả chất đối chứng dương
kojic acid (IC50 là 14,6 ± 3,3 µM). Cụ thể: hợp chất TB6 thể hiện
hoạt tính ức chế enzym tyrosinase mạnh nhất với IC50 là 3,9 ± 1,5
µM. Các hợp chất TB3, TB4 và TB10 thể hiện hoạt tính yếu hơn với
IC50 tương ứng là 6,9 ± 2,2, 9,5 ± 3,1, 9,3 ± 2,1 µM. Các hợp chất
TB1, TB2, TB5, TB7, TB8 và TB9 thể hiện hoạt tính yếu nhất với
IC50 tương ứng là 14,5 ± 3,4, 11,4 ± 2,8, 10,3 ± 2,5, 11,5 ± 4,1, 16,7
± 2,1, 10,1 ± 3,1 µM. Đây là lần đầu tiên các hợp chất phân lập từ
loài T. baviensis được nghiên cứu hoạt tính ức chế enzym tyrosinase.
Kết quả nghiên cứu về hoạt tính ức chế enzym tyrosinase của
các hợp chất phân lập được từ loài T. anguina, cho thấy hợp chất
TA7 có hoạt tính ức chế mạnh hơn cả chất đối chứng dương kojic
acid (IC50 là 14,6 ± 3,3 µM) với IC50 là 8,5±3,3 µM. Các hợp chất từ
TA1 đến TA6 thể hiện hoạt tính yếu hơn với giá trị IC50 trong
khoảng 21,3 đến 46,7 µM. Hợp chất TA8 khơng thể hiện hoạt tính ở
nồng độ nghiên cứu.
Các hợp chất phân lập được từ loài T. baviensis đã thể hiện
hoạt tính ức chế enzym tyrosinase mạnh sẽ gợi mở hướng nghiên
cứu, cơ chế tác dụng hoạt tính ức chế enzym tyrosinase của lồi T.

baviensis. Vì thế cần thiết có các nghiên cứu in vivo nhằm nâng cao

CHƯƠNG 2. THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ
2.1. Đối tượng nghiên cứu
Thân lá T. baviensis được thu tại Ba Vì, Hà Nội, Việt Nam
(mẫu tiêu bản NCCT-TB1109); thân lá T. anguina được thu tại Hịa
Bình, Việt Nam (mẫu tiêu bản NCCT-TA1308); rễ củ T. kirilowii
được thu tại Hịa Bình, Việt Nam (mẫu tiêu bản NCCT-TK1209).
Tên khoa học của 3 mẫu được giám định bởi PGS. TS. Ninh Khắc
Bản, Viện Hóa sinh biển, Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt
Nam. Cả 3 mẫu tiêu bản được lưu trữ tại Viện Hóa sinh biển, Viện
Hàn lâm Khoa học và Cơng nghệ Việt Nam.
2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.1. Phương pháp phân lập các hợp chất
2.2.1.1. Sắc ký lớp mỏng (TLC)
2.2.1.2. Sắc ký cột (CC)
2.2.1.3. Tinh chế các hợp chất
2.2.2. Phương pháp xác định cấu trúc
Cấu trúc hóa học của các hợp chất được xác định trên cơ sở
sử dụng các phép xác định thông số vật lý và các phương pháp đo
phổ bằng các thiết bị hiện đại đồng thời kết hợp với phân tích và tra
cứu tài liệu tham khảo.
2.2.2.1. Phổ khối lượng phân giải cao (HR-ESI-MS)
2.2.2.2. Phổ cộng hưởng từ nhân (NMR)
2.2.2.3. Phổ lưỡng sắc tròn (CD)
2.2.2.4. Độ quay cực ([α])
2.2.3. Phương pháp xác định hoạt tính sinh học
2.2.3.1. Phương pháp đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư
2.2.3.2. Phương pháp đánh giá hoạt tính ức chế enzym tyrosinase
2.3. Phân lập các hợp chất

2.3.1. Các hợp chất phân lập từ loài T. baviensis


6

19

Hình 2.2. Sơ đồ phân lập các hợp chất từ loài T. baviensis

2.3.2. Các hợp chất phân lập từ loài T. anguina

Hình 3.65. Cấu trúc hóa học 8 hợp chất được phân lập từ lồi T. kirilowii

Hình 1.3. Sơ đồ phân lập các hợp chất từ loài T. anguina

3.2. Hoạt tính của các hợp chất phân lập được
3.2.1. Hoạt tính ức chế enzym tyrosinase của các hợp chất phân lập
được từ T. baviensis và T. anguina.
Các vấn đề về sắc tố da thường gây nhiều áp lực về mặt thẩm
mỹ, đặc biệt là đối với phụ nữ. Ức chế enzym tyrosinase có thể làm
hạn chế việc sản sinh quá nhiều các sắc tố melanin từ đó giúp điều trị
các rối loạn liên quan đến tăng sắc tố da. Việc nghiên cứu, điều chế
các sản phẩm từ thiên nhiên có tác dụng ức chế enzym này có ý
nghĩa lớn trong khoa học y dược và mỹ phẩm. Thành phần của những
sản phẩm này thường chứa một số hợp chất chính như flavonoid,
phenolic, polyphenolic, chalcol, stilbene và kojic acid [82]. Tuy
nhiên một số hợp chất phenolic như hydroquinone và artbutin thường
có mặt trong các sản phẩm làm trắng da hiện nay không an tồn và ít
hiệu quả khi sử dụng [83].

18

7
2.3.3. Các hợp chất phân lập từ lồi T. kirilowii

Hình2.4. Sơ đồ phân lập các hợp chất từ loài T. kirilowii

2.4. Thông số vật lý và dữ liệu phổ của các hợp chất đã phân lập
được
2.5. Kết quả đánh giá hoạt tính sinh học của các hợp chất
2.5.1. Hoạt tính ức chế enzym tyrosinase của các hợp chất phân lập
được từ T. baviensis và T. anguina.
Bảng 2.1. Kết quả đánh giá hoạt tính ức chế enzym tyrosinase của TB1-TB10

Hình 3.64. Cấu trúc hóa học 8 hợp chất được phân lập từ loài T. anguina

Hợp chất
TB1
TB2
TB3
TB4
TB5
TB6
TB7
TB8
TB9
TB10
Kojic acid

IC50 (μM)
14,5 ± 3,4
11,4 ± 2,8
6,9 ± 2,2
9,5 ± 3,1
10,3 ± 2,5
3,9 ± 1,5
11,5 ± 4,1
16,7 ± 2,1
10,1 ± 3,1
9,3 ± 2,1
14,6 ± 3,3


8

17

Bảng 2.2. Kết quả đánh giá hoạt tính ức chế enzym tyrosinase của TA1-TA8

Hợp chất
TA1
TA2
TA3
TA4
TA5
TA6
TA7
TA8
Kojic acid

IC50 (μM)
21,3 ± 2,8
36,8±2,6
33,9±3,1
42,2±3,6
46,7±2,0
22,7±1,4
8,5±3,3
>100
14,6 ± 3,3

2.5.2. Hoạt tính gây độc tế bào ung thư của các hợp chất phân lập được
từ T. kirilowii
Bảng 2.3. Kết quả đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư của
TK1-TK8
IC50 (µM)
Hợp chất
A-549
HT-29
OVCAR MCF-7
36,4
16,2
21,6
26,5
TK1
>100
45,5
>100
>100

TK2
52,4
60,9
>100
>100
TK3
>100
>100
>100
>100
TK4
2,7
16,0
14,5
32,7
TK5
21,1
40,7
32,1
15,8
TK6
11,3
4,1
6,5
17,3
TK7
17,0
49,4
14,7
42,8

TK8
3,1
8,4
10,3
Mitoxantrone 7,2

3. Danh sách các hợp chất phân lập từ các lồi thuộc chi
Trichosanthes
Tổng số có 30 hợp chất đã được phân lập từ 3 loài T.
baviensis, T. anguina và T. kirilowii, trong đó có:
30

29
20

27

25

17

18

11

28

14
1
10

3

5

OH

8

O

26

HO

AcO
24

23

HO

TB1

TB4

HO

TB2

HO

OH

TB5

TB3

HO

TB6

H3CO

H3CO

OH
OH

OH

OGlc

OGlc

OH

HO

HO

OCH3

OCH3

O

OH
R

H
OH
H
O

H3CO

OCH3
OH TB7

H3CO

OCH3
OH TB8

HO
O

TB 9 R=H
TB10 R=OMe

Hình 3.63. Cấu trúc hóa học 14 hợp chất được phân lập từ loài T.
baviensis


16

9

Tương tác HMBC giữa H-7 (δH 5,46) và C-1 (δC 134,2)/ C-2/C6 (δC 128,2)/ C-3' (δC 131,5)/ C-4' (δC 161,0); giữa H-2/H-6 (δH 7,16)
và C-1 (δC 134,2)/ C-4 (δC 158,5)/ C-7 (δC 88,7) gợi ý vị trí của nhóm
p-hydroxyphenyl tại C-7. Tương tác HMBC giữa H-7' (δH 6,54) và C1' (δC 129,5)/ C-2' (δC 123,7)/ C-6' (δC 128,7)/ C-8' (δC 127,0)/ C-9'
(δC 63,9) gợi ý vị trí liên kết đơi tại C-7'/C-8' và nhóm hydroxy tại C9'. Cấu hình của liên kết đôi tại C-7'/C-8' được xác định là E dựa trên
hằng số tương tác giữa H-7' và H-8', JH-7′-H-8′ = 16,0 Hz. Hằng số
tương tác giữa H-7 và H-8 lớn (JH-7-H-8 = 6,0 Hz) đã xác định hai
proton tại C-7 và C-8 ở vị trí trans. Để khẳng định chính xác cấu
hình tuyệt đối của TK1 tại C-7 và C-8, phổ CD đã được đo và so
sánh với phổ CD của hợp chất có cấu tương tự. Cụ thể, hiệu ứng
Cotton âm tại bước sóng λ = 244 nm (Δε: -4,3) và hiệu ứng Cotton
dương tại bước sóng λ = 222 nm (Δε: +2,6) trên phổ CD của hợp chất
TK1 cho phép xác định tuyết đối cấu hình tại C-7 và C-8 là 7R và 8S
bằng cách so sánh với phổ CD của hợp chất cupressoside B (hiệu ứng
Cotton âm tại bước sóng λ = 238 nm và hiệu ứng Cotton dương tại
bước sóng λ = 221 nm) [75]. Dựa vào các bằng chứng phổ nêu trên
và so sánh với tài liệu tham khảo, cấu trúc mới của hợp chất TK1
được xác định và đặt tên là trichobenzolignan.

CHƯƠNG 3. THẢO LUẬN KẾT QUẢ
3.1. Xác định cấu trúc của các hợp chất phân lập được
3.1.1. Xác định cấu trúc của các hợp chất phân lập được từ loài T.
baviensis

3.1.1.1. Hợp chất TB1: 9,26-epoxymultiflorenol (mới)

Hình 3.49. Các tương tác HMBC chính của TK1

Hình 3.1. Cấu trúc hóa học của TB1 và hợp chất tham khảo TB1a
Hợp chất TB1 thu được ở dạng rắn không màu. Trên phổ
HR-ESI-MS của TB1 xuất hiện pic ion giả phân tử tại m/z 463,3536
[M+Na]+ (tính tốn lí thuyết cho cơng thức [C30H48O2Na]+, 463,3547)
cho phép kết luận công thức phân tử của TB1 được xác định là
C30H48O2. Phổ 1H-NMR của TB1 xuất hiện tín hiệu của một proton
olefin tại δH 5,25 (1H, dd, J = 2,4, 4,8 Hz); một proton oxymethine tại
δH 3,21 (1H, dd, J = 5,4, 9,0 Hz); hai proton oxymethylene tại δH 3,25
(1H, d, J = 7,8 Hz) và 4,52 (1H, d, J = 7,8 Hz); và bảy nhóm methyl tại
δH 0,84 (3H, s), 0,90 (3H, s), 0,93 (3H, s), 0,94 (3H, s), 0,95 (6H, s) và
1,02 (3H, s). Phổ 13C-NMR của hợp chất TB1 xuất hiện tín hiệu cộng
hưởng của 30 carbon, bao gồm: tám carbon không liên kết trực tiếp với
hydro tại δC 28,8, 32,2, 38,4, 39,0, 40,3, 49,0, 85,8 và 143,7; bốn
carbon methine tại δC 45,1, 45,5, 79,3 và 113,3; mười một carbon
methylene tại δC 22,0, 23,5, 27,2, 30,3, 30,8, 33,3, 34,6, 36,1, 36,2,
36,3 và 78,1; và bảy carbon methyl tại δC 14,5, 15,4, 19,7, 28,3, 29,1,
31,7 và 33,5. Từ những phân tích dữ liệu phổ 1H, 13C-NMR có thể dự
đốn hợp chất TB1 là một triterpene khung multiflorane, tương tự hợp
chất multiflorenol (TB1a) [56], ngoại trừ đóng vịng qua cầu oxy tại C9/C-26. Các tương tác HMBC từ H-23 (δH 1,02)/H-24 (δH 0,93) tới C-3


10

15

(δC 79,3)/ C-4 (δC 39,0)/ C-5 (δC 45,1) gợi ý vị trí của nhóm hydroxy

tại C-3 và 2 nhóm methyl tại C-4. Cấu hình β của nhóm hydroxy tại C3 được xác định dựa trên hằng số tương tác, JH-2β/H-3 = 9,0 Hz, JH-2α/H-3
= 5,4 Hz và so sánh độ dịch chuyển hóa học trên phổ 13C-NMR của C3 (δC 79,3), C-4 (δC 39,0) của hợp chất TB1 với hợp chất 3βhydroxyolean-12-en-28-oic acid [C-3 (δC 78,8), C-4 (δC 38,9)] và hợp
chất 3α-hydroxyolean-12-en-28-oic acid [C-3 (δC 76,2), C-4 (δC 37,2) ]
[57]. Tương tác HMBC giữa H-25 (δH 0,90) và C-1 (δC 30,8)/ C-5 (δC
45,1)/ C-9 (δC 85,8)/ C-10 (δC 38,4); giữa H-28 (δH 0,94) và C-16 (δC
34,6)/ C-18 (δC 45,5)/ C-22 (δC 36,2) gợi ý vị trí nhóm methyl tại C-10
và C-17. Tương tác HMBC giữa H-29 (δH 0,95) và C-21 (δC 33,3)/ C30 (δC 31,7); giữa H-30 và C-19 (δC 36,1)/ C-29 (δC 33,5) gợi ý 2
nhóm methyl tại C-20. Tương tác HMBC giữa H-26 (δH 3,25/ 4,52) và
C-8 (δC 143,7)/ C-9 (δC 85,8)/ C-13 (δC 40,3)/ C-14 (δC 49,0)/ C-15 (δC
22,0) gợi ý vị trí của liên kết đơi tại C-7/C-8 và cầu oxy tại C-9/C-26.
Trên phổ NOESY thấy xuất hiện tương tác Hβ-6 (δH 2,07) với H-24 (δH
0,93) và H-25 (δH 0,90), H-25 (δH 0,90) tương tác với Ha-26 (δH 3,25),
Hb-26 (δH 4,52) tương tác với H-18 (δH 1,55) và H-28 (δH 0,94) xác
định được cấu hình β tại vị trí H-24, Me-10, Me-14, H-18 và Me-28.
Tương tác NOESY giữa H-23 (δH 1,02) với H-3 (δH 3,21) và H-5 (δH
1,47), Hα-15 (δH 1,87) với H-27 (δH 0,84) cho phép xác định cấu hình
của H-3, Me(23)-4, H-5 và Me-13 là α. Dựa vào các dữ liệu phổ trên,
cấu trúc của hợp chất TB1 được xác định. Đây là hợp chất mới và
được xác định là 9,26-epoxymultiflorenol.

thơm thế para AA′BB′ tại δH 6,73 (2H, d, J = 8,0 Hz) và 7,16 (2H, d,
J = 8,0 Hz); ba proton thơm hệ ABX tại δH 6,72 (1H, d, J = 8,0 Hz),
7,20 (1H, d, J = 8,0 Hz) và 7,34 (1H, s); hai proton olefin tại δH 6,20
(1H, dt, J = 6,0, 16,0 Hz) và 6,54 (1H, d, J = 16,0 Hz). Phổ 13C-NMR
của hợp chất TK1 xuất hiện tín hiệu cộng hưởng của 18 carbon, bao
gồm: năm carbon không liên kết trực tiếp với hydro tại δC 129,5,
131,5, 134,2, 158,5, và 161,0; mười một carbon methine tại δC 54,7,
88,7, 110,0, 116,3 (2C), 123,8, 127,0, 128,2 (2C), 128,7, 132,0; và
hai carbon oxymethylene tại δC 63,9 và 65,1. Từ những phân tích số
liệu phổ 1H và 13C-NMR của TK1 cho thấy cấu trúc của TK1 có

khung là dihydrobenzofuran, giống với cupressoside B (TK1a) [75]
ngoại trừ sự vắng mặt của nhóm propyl tại C-1' và 1 đơn vị đường tại
C-4.
Bảng 3.20. Số liệu phổ NMR của TK1 và phần cấu trúc tham khảo
C
δCa,#
δCa,b
δHa,c (mult., J = Hz)
1
128,6
134,2
2, 6
127,9
128,2
7,16 (d, 8,0)
3, 5
117,8
116,3
6,73 (d, 8,0)
4
158,7
158,5
7
87,9
88,7
5,46 (d, 6,0)
8
55,2
54,7
3,43 (m)

9
65,3
65,1
3,80 (m)
1'
135,7
129,5
2'
125,9
123,7
7,34 (s)
3'
137,7
131,5
4'
159,4
161,0
5'
109,8
110,0
6,72 (d, 8,0)
6'
129,7
128,7
7,20 (d, 8,0)
7'
132,0
6,54 (d, 16,0)
8'
127,0

6,20 (dt, 6,0, 16,0)
9'
63,9
4,18 (d, 6,0)
a

Hình 3.2. Các tương tác HMBC, COSY và NOE chính của TB1

Đo trong CD3OD, b100 MHz, c400 MHz, #δC của cupressoside B
(TK1a)[75]


14

11

Hiệu ứng Cotton dương tại bước sóng λ = 278 nm (Δε: + 8.05)
trên phổ CD của hợp chất TA1 cho phép xác định tuyết đối cấu hình
tại C-3’ là R bằng cách so sánh với phổ CD của hợp chất (S)-3methylhexane-2,5-dione (hiệu ứng Cotton âm tại λ = 280 nm) [69].
Dựa vào các dữ liệu phổ trên, cấu trúc của hợp chất TA1 được xác
định. Đây là hợp chất mới và được đặt tên là tricanguina A.

Bảng 3.1. Số liệu phổ NMR của hợp chất TB1

Hình 3.25. Phổ CD của TA1
3.1.3. Xác định cấu trúc của các hợp chất phân lập được từ loài T.
kirilowii
3.1.3.1. Hợp chất TK1: trichobenzolignan (mới)
HO

GlcO

4
1
7

O

O

4'

8

1'
3'

9

7'
9'

OH
TK1

OH

OH

OH

TK1a

Hình 3.48. Cấu trúc hóa học của TK1 và hợp chất tham khảo
Hợp chất TK1 thu được ở dạng bột vơ định hình màu trắng.
Trên phổ HR-EI-MS của TK1 xuất hiện pic ion giả phân tử tại m/z
321,1098 (tính tốn lí thuyết cho cơng thức [C18H18O4Na]+,
321,1103) cho phép kết luận công thức phân tử của TK1 là C18H18O4.
Phổ 1H-NMR của TK1 xuất hiện tín hiệu của bốn proton thuộc vịng

C
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20

21
22
23
24
25
26
27
28
29
30

δCa,b δHa,c (mult., J = Hz)
30,8
1,43 (m)/1,63 (m)
27,2
1,65 (m)
79,3
3,21 (dd, 5,4, 9,0)
39,0
45,1
1,47 (m)
23,5
2,07 (ddd, 2,4, 10,8, 18,0)/2,16 (dt, 4,8, 18,0)
113,3
5,25 (dd, 2,4, 4,8)
143,7
85,8
38,4
30,3
1,55 (m)/1,79 (dd, 4,2, 6,0)

36,3
1,45 (m)/1,56 (m)
40,3
49,0
22,0
1,25 (m)/1,87 (ddd, 4,2, 7,8, 14,4)
34,6
1,17 (m)/1,53 (m)
32,2
45,5
1,55 (m)
36,1
1,16 (dd, 10,2, 13,8)/1,32 (dd, 6,0, 13,8)
28,8
33,3
1,24 (m)/1,43 (m)
36,2
0,87 (m)/1,43 (m)
28,3
1,02 (s)
15,4
0,93 (s)
14,5
0,90 (s)
78,1
3,25 (d, 7,8)/4,52 (d, 7,8)
19,7
0,84 (s)
29,1
0,94 (s)

33,5
0,95 (s)
31,7
0,95 (s)
a
Đo trong CDCl3, b150 MHz, c600 MHz


12

13

3.1.2. Xác định cấu trúc của các hợp chất phân lập được từ loài T.
anguina

trên, chứng tỏ TA1 được cấu tạo bởi một đơn vị 6,7-dimethoxy-8hydroxycoumarin và một monoterpene.

3.1.2.1. Hợp chất TA1: tricanguina A (mới)

Hình 3.23. Cấu trúc hóa học của TA1 và hợp chất tham khảo
Hợp chất TA1 thu được ở dạng bột không màu. Trên phổ
HR-ESI-MS của TA1 xuất hiện pic ion giả phân tử tại m/z 389,1578
[M+H]+ (tính tốn lí thuyết cho cơng thức [C21H25O7]+, 389,1595)
cho phép kết luận công thức phân tử của TA1 là C21H24O7. Phổ 1HNMR của TA1 xuất hiện tín hiệu của ba proton olefin tại δH 6,16
(1H, s), 6,35 (1H, d, J = 9,6 Hz); 7,89 (1H, d, J = 9,6 Hz); một
proton thơm tại δH 7,00 (1H, s); hai nhóm methoxy tại δH 3,89 (3H, s)
và 3,99 (3H, s); hai nhóm methyl tại δH 1,90 (3H, s) và 2,09 (3H, s);
một nhóm methyl tại δH 1,15 (3H, d, J = 6,4 Hz). Phổ 13C-NMR của
hợp chất TA1 xuất hiện tín hiệu cộng hưởng của 21 carbon, bao gồm:
ba carbon carbonyl tại δC 162,8, 200,7 và 211,6; sáu carbon không

liên kết trực tiếp với hydro tại δC 116,5, 141,8, 144,0, 145,7, 151,4, và
157,4; năm carbon methine tại δC 38,7, 105,9, 115,7, 124,3, và 146,0;
hai carbon methylene tại δC 48,5 và 77,7; và 5 carbon methyl tại δC
16,8, 21,0, 28,0, 57,0 và 62,6. Phân tích số liệu phổ 1H và 13C-NMR
của hợp chất TA1 cho thấy cấu trúc của hợp chất này giống với của
hợp chất 6,7-dimethoxy-8-(2,3-dihydroxy-3-methylbutoxy) coumarin
(TA1a) [68] ngoại trừ sự xuất hiện thêm tín hiệu của một
monoterpene tại C-8.
Tương tác HMBC giữa H-4 và C-2/C-3/C-5/C-9/C-10; hằng số
tương tác JH-2/H-3 = 9,6 Hz chứng tỏ sự có mặt của vịng courmarin
với liên kết đơi tại C-3/C-4. Thêm vào đó, tương tác HMBC từ hai
nhóm methoxy (δH 3,89 và 3,99) đến C-6 (δC 151,4)/ C-7 (δC 141,8)
gợi ý vị trí của hai nhóm methoxy tại C-6 và C-7. Từ các bằng chứng

Hình 3.24. Các tương tác HMBC và COSY chính của TA1
Bảng 3.12. Số liệu phổ NMR của hợp chất TA1
C
δCa,b
δHa,c (mult., J = Hz)
2
162,8
3
115,7
6,35 (d, 9,6)
4
146,0
7,89 (d, 9,6)
5
105,9
7,00 (s)

6
151,4
7
141,8
8
145,7
9
144,0
10
116,5
6-OCH3 57,0
3,89 (s)
7-OCH3 62,6
3,99 (s)
1'
77,7
4,98 (s)
2'
211,6
3'
38,7
3,25 (m)
4'
48,5
2,62 (dd, 4,4, 17,6)
3,00 (dd, 9,2, 17,6)
5'
200,7
6'
124,3

6,16 (s)
7'
157,4
8'
28,0
1,90 (s)
9'
21,0
2,09 (s)
10'
16,8
1,15 (d, 6,4)
a
Đo trong CD3OD, b100 MHz, c400 MHz