Bộ giáo dục và đào tạo
trờng đại học nông nghiệp hà nội
----------
----------
trần huy toản
I U TRA, XC NH B NH VIÊM PH I ð A PHƯƠNG
DO MYCOPLASMA HYOPNEUMONIAE VÀ M T S
VI KHU N
C NG PHÁT KHÁC GÂY RA CHO L N TRÊN ð A BÀN
THÀNH PH
H I PHÒNG. XU T BI N PHP PHềNG TR
Luận văn thạc sĩ nông nghiệp
Chuyên ng nh : THú Y
MÃ số
: 60.62.50
Ngời hớng dẫn khoa học: ts. nguyễn bá hiên
Hà Nội - 2009
L I CAM ðOAN
Tơi xin cam đoan r ng:
- Các k t qu nghiên c u trong lu n văn là trung th c, khách quan và chưa
ai công b trong b t kỳ cơng trình nghiên c u nào khác.
- M i s giúp ñ cho vi c th c hi n lu n văn ñã ñư c c m ơn và các
thơng tin trích d n trong lu n văn ñã ñ c ch rõ ngu n g c.
Hà N i, tháng 09 năm 2009
Tác gi lu n văn
Tr n Huy To n
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………i
L I C M ƠN
ð hồn thành đư c đ tài nghiên c u, tơi đã nh n đư c s giúp ñ ch
b o, hư ng d n t n tình c a các t p th và các nhân. Cho phép tơi đư c t
lịng bi t ơn và c m ơn chân thành sâu s c t i:
Ban Giám hi u Tr ng ð i h c Nông nghi p Hà N i, Khoa Sau ð i
h c, Khoa Thú y, Vi n Thú y Qu c Gia, Chi c c thú y thành ph H i Phịng,
các th y cơ giáo đã giúp đ , t o đi u ki n đ tơi h c t p, ti p thu nâng cao
ki n th c c a chương trình h c.
Các th y cơ giáo b môn Vi sinh v t - Truy n nhi m Khoa Thú y
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i; các ñ ng nghi p t i Vi n Thú y Qu c
gia, Chi c c Thú y thành ph H i Phòng, Tr m Thú y các huy n Vĩnh B o;
Th y Nguyên; Ki n Th y và qu n Ki n An.
Tr c ti p là th y hư ng d n TS. Nguy n Bá Hiên – Trư ng B môn Vi
sinh v t – Truy n nhi m ñã hư ng d n, ch b o nhi t tình và t o m i ñi u ki n
thu n l i ñ tôi th c hi n ñư c ñ tài nghiên c u và hoàn thành lu n văn t t
nghi p.
Nhân d p hoàn thành lu n văn, cho phép tơi đư c g i l i c m ơn sâu
s c t i gia đình, ng i thân cùng b n bè ñã ñ ng viên giúp ñ tơi vư t qua m i
khó khăn trong su t quá trình h c t p, nghiên c u và th c hi n ñ tài.
M t l n n a tơi xin đư c bày t lịng bi t ơn, c m ơn chân thành nh t
t i nh ng t p th và cá nhân ñã t o đi u ki n giúp đ tơi hồn thành chương
trình h c t p./.
Hà N i, tháng 9 năm 2009
Tr n Huy To n
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………ii
M CL C
L i cam ñoan
i
L i c m ơn
ii
M cl c
iii
Danh m c các ch vi t t t
vi
Danh m c b ng
vii
Danh m c đ th
viii
1.
M ð U
1
1.1
Tính c p thi t c a ñ tài
1
1.2
M c tiêu nghiên c u c a ñ tài
4
1.3
Ý nghĩa khoa h c và th c ti n c a ñ tài
4
2.
T NG QUAN TÀI LI U
5
2.1
L ch s nghiên c u v b nh viêm ph i
2.2
Khái quát v Mycoplasma
2.3
Vi khu n Pasteurella multocida và b nh do vi khu n gây ra
2.4
Vi khu n actinobacillus pleuropneumoniae và b nh viêm ph i do
l n do Mycoplasma
5
9
vi khu n gây ra
18
27
2.5
Vi khu n Streptococcus và b nh do vi khu n gây ra
l n
2.6
Gi i ph u ñ i th , vi th c a ph i l n
3.
37
ð I TƯ NG, ð A ðI M, N I DUNG, PHƯƠNG PHÁP
38
NGHIÊN C U
40
3.1
ð i tư ng nghiên c u
40
3.2
ð a ñi m, vùng nghiên c u
40
3.3
N i dung nghiên c u
40
3.4
Phương pháp nghiên c u
41
4 . K T QU NGHIÊN C U – TH O LU N
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………iii
46
4.1.
Hi n tr ng b nh suy n l n trên ñ a bàn huy n th y nguyên, vĩnh
b o, ki n th y và qu n ki n an thành ph h i phòng
46
4.1.1
Hi n tr ng d ch viêm ph i ñ a phương trên ñ a bàn nghiên c u
47
4.1.2
T l m c b nh và t l t vong theo l a tu i.
49
4.1.3
T l l n m c b nh và t l t vong xác ñ nh theo m t ñ chu ng nuôi.
50
4.1.4
T l l n m c b nh và t l t vong theo tháng ñi u tra (theo mùa).
51
4.1.5
K t qu xác ñ nh t l l n m c b nh, và t l t vong xét theo
ñi u ki n v sinh chu ng ni.
4.1.6
52
Xác đ nh t l m c b nh và t l t vong c a l n m c b nh theo
phương th c chăn nuôi
52
4.2
Nh ng bi u hi n lâm sàng c a l n b nh
54
4.3
Xác ñ nh s có m t c a vi khu n Mycoplasma trên l n m c d ch
viêm ph i ñ a phương
m t s cơ s t i thành ph h i phòng
b ng ph n ng elisa
56
4.4.
K t qu phân l p Mycoplasma m t s vi khu n c ng phát
57
4.5
K t qu th ñ c l c c a nh ng loài vi khu n phân l p ñư c trên
chu t nh t tr ng
4.6
61
K t qu gây b nh trên l n thí nghi m b ng các ch ng vi khu n
phân l p ñư c
62
4.6.1
Thí nghi m 1
62
4.6.2
Thí nghi m 2: T k t qu thí nghi m 1, chúng tơi ti n hành th c
hi n thí nghi m 2.
63
4.7
Gi i ph u ñ i th b nh viêm ph i
l n do Mycoplasma
4.8
64
K t qu th kháng sinh ñ i v i các ch ng các vi khu n sau khi
phân l p đư c
4.9
66
Phịng tr b nh viêm ph i đ a phương t i h i phòng
71
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………iv
4.9.1
Bi n pháp phịng tr h i ch ng hơ h p c a l n
71
4.9.2
ði u tr b nh ñư ng hô h p c a l n
74
5.
K T LU N VÀ ð NGH
77
5.1
K t lu n
77
5.2
Ki n ngh
79
TÀI LI U THAM KH O
80
PH L C
85
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………v
DANH M C CÁC CH
Ký hi u
DNA
ELISA
GP
VI T T T
Ti ng Vi t
Ti ng Anh
Deoxyribonucleic acid
Axit deoxyribonucleic
Enzyme Linked Immunosorbent
Ph n ng h p ph mi n d ch liên
Assay
k t v i enzyme
Glycoprotein
RNA
Ribonucleic acid
Axit ribonucleic
RNP
Ribonucleprotein
Ph c h p protein và RNA
VPðP
Viêm ph i ñ a phương
M
Mycoplasma
P
Pasteurella
A
Actinobacillus
H
Haemophilus
MC
M nc m
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………vi
DANH M C B NG
STT
4.1
Tên b ng
Trang
T l l n nhi m b nh viêm ph i trên ñ a bàn huy n th y Nguyên,
Vĩnh B o, Ki n Th y và qu n Ki n An – thành ph H i Phòng.
4.2
48
T l l n m c b nh viêm ph i ñ a phương và t l t vong xét theo
l u tu i.
49
4.3
T l l n m c b nh và t l t vong xét theo m t đ chu ng ni
50
4.4
T l m c b nh theo tháng ñi u tra:
51
4.5
T l m c b nh và t l t vong xét theo ñi u ki n v sinh chu ng
nuôi
52
4.6
T l m c b nh và t l t vong xét theo phương th c chăn nuôi
53
4.7
Nh ng bi u hi n lâm sàng c a l n b nh
54
4.8
K t qu xác ñ nh s có m t c a Mycoplasma sp
l n m c b nh
viêm ph i ñ a phương t i m t s cơ s t i thành ph H i Phòng
b ng ph n ng ELISA
4.9
56
T ng h p k t qu phân l p vi khu n gây b nh viêm ph i t i các
ñơn v
58
4.10 K t qu ki m tra ñ c l c c a vi khu n phân l p ñư c
61
4.11 Gây b nh trên l n thí nghi m
63
4.12 K t qu th kháng sinh ñ v i các ch ng vi khu n phân l p ñư c
67
4.13 K t qu ñi u tr h i ch ng hô h p c a l n
75
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………vii
DANH M C ð
STT
TH
Tên đ th
Trang
4.1
Hình so sánh t l l n m c b nh gi a các huy n ,qu n.
48
4.2
L n có bi u hi n th khó và ho
55
4.3
L n ch y nư c mũi nhi u, ho
55
4.4
Hình s lưu hành c a vi khu n Mycoplasma trong l n b nh t i
m t s đ a phương c a thành ph H i Phịng.
4.5
57
Hình so sánh các vi khu n gây b nh viêm ph i phân l p ñư c
t ph i l n m c b nh t i m t s ñ a phương c a thành ph H i
Phòng.
4.6
4.7
60
Hi n tư ng lịng khí qu n ch a tương d ch l n b t khí, b gan hóa
64
nh ph i l n b viêm ñ i s ng các thùy
65
4.8
Hi n tư ng ph i l n b nh c hóa
65
4.9
Hi n tư ng ph i l n b nh c hóa
66
4.10 Hình so sánh s m n c m c a m t s kháng sinh ñ i v i các
ch ng vi khu n phân l p.
4.11
nh s m n c m c a vi khu n v i kháng sinh
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………viii
68
71
1. M
1.1
ð U
Tính c p thi t c a đ tài
ð đưa chăn ni tr thành ngành s n xu t hàng hố đáp ng nhu c u
th t, s a, tr ng, nh t là th t l n xu t kh u. Trong nh ng năm g n ñây Nhà nư c,
B Nông nghi p và Phát tri n nơng thơn đã cho nh p các gi ng gia súc, gia
c m có năng su t và ch t lư ng cao t các nư c có n n chăn ni phát tri n
nh m m c đích nâng cao s n lư ng và ch t lư ng s n ph m.
Trong các v t ni thì nuôi l n là lo i v t nuôi mang l i hi u qu kinh
t khá cao, chính vì v y trong nh ng năm qua, ngành chăn nuôi l n nư c ta
ñã ñ t nhi u thành t u l n, xu th chun mơn hố s n xu t, chăn nuôi trong
trang tr i t p trung ngày càng ph bi n. Th t l n là ngu n th c ph m chính
trong b a ăn hàng ngày c a m i ngư i dân, s n ph m th t l n ph n l n là ñ
ñáp ng nhu c u trong nư c và m t ph n dành cho xu t kh u, l n cũng là
ngu n cung c p phân h u cơ cho thâm canh tăng năng su t cây tr ng.
Tuy nhiên trong chăn nuôi, mu n thu đư c l i nhu n cao thì ngồi các
v n đ v con gi ng, cơng tác dinh dư ng thì cơng tác thú y là v n ñ c p
thi t, quy t ñ nh ñ n thành công trong chăn nuôi.
Vi c áp d ng các ti n b khoa h c k thu t vào th c ti n s n xu t ñã giúp
chúng ta x lý và kh ng ch b nh d ch. M t khác khi m c s ng c a ngư i dân
tăng lên thì nhu c u v s d ng th c ph m s ch ñang là v n ñ mà xã h i quan
tâm, do đó mà ngành chăn ni nói chung và nh t là chăn ni l n nói riêng ph i
t o ra s lư ng nhi u nhưng ph i có ch t lư ng s n ph m t t, vi c đó địi h i
ph i có nh ng bi n pháp h p lý ñ ñáp ng v i nhu c u phát tri n c a xã h i.
Trong nh ng năm g n ñây, ngành thú y đã có m t s thành t u m i góp
ph n phịng ch ng d ch b nh, b o v ñàn l n. Tuy nhiên, t ng lúc t ng nơi khi
mà ñi u ki n sinh thái không thu n l i, m t s d ch b nh v n x y ra gây nh ng
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………1
thi t h i ñáng k cho ñàn l n, ñ c bi t là l n con trư c và sau cai s a vì l n
giai đo n này v a thay ñ i ñi u ki n sinh lý v a d n thích nghi v i ñi u ki n
s ng m i nên r t d m c b nh. Có r t nhi u các lo i b nh khác nhau
l n,
trong đó ph i k ñ n các b nh v ñư ng hô h p như: Ho th truy n nhi m,
viêm ph i, viêm ph qu n, viêm teo mũi truy n nhi m,… ðây là nh ng b nh
ñáng quan tâm nh t trong giai ño n hi n nay c a ngành chăn nuôi l n.
Trong nh ng b nh truy n nhi m
l n thì b nh viêm ph i
l n do
Mycoplasma là b nh gây thi t h i kinh t r t l n cho ngành chăn ni l n.
B i vì b nh lây lan nhanh tác ñ ng kéo dài ñ i v i cơ th l n, t o ñi u ki n
thu n l i cho m t s vi khu n khác k phát. M m b nh t n t i r t lâu trong cơ
th l n cũng như ngồi mơi trư ng làm vi c phịng tr r t khó khăn, khi l n b
nhi m b nh, chi phí đi u tr l n, th i gian và li u trình đi u tr kéo dài, đ ng
th i còn làm gi m kh năng tăng tr ng cũng như nh hư ng ñ n hi u qu kinh
t trong chăn nuôi l n.
Cho t i nay
ph i
Vi t Nam, đã có nhi u cơng trình nghiên c u v b nh viêm
l n do Mycoplasma, tuy nhiên nh ng nghiên c u này m i ch t p trung
vào tình hình d ch t và phác ñ phòng tr b nh chung còn vi c nghiên c u
t ng đ a phương c th thì ít.
H i Phịng chưa có nghiên c u nào v b nh
viêm ph i ñ a phương do Mycoplasma và m t s vi khu n c ng phát gây ra.
H i Phòng là thành ph lo i m t c p qu c gia, là m t trong nh ng t nh,
thành ph n m trong vùng nguyên li u ph c v cho nhu c u tiêu dùng và xu t
kh u th t l n c a khu v c ð ng b ng châu th sông H ng. Th c hi n Ngh
quy t 13 ð ng b thành ph , H i Phịng đang đ y nhanh ti n trình chuy n
d ch cơ c u kinh t nh m cơng nghi p hố hi n đ i hố nơng nghi p nơng
thơn. Trong đó ngành chăn ni thì chăn ni l n nói riêng đư c coi là ngành
s n xu t hàng hoá quan tr ng nh t và ñư c chú tr ng ñ u tư phát tri n không
ng ng c v s lư ng và ch t lư ng (t ng ñàn l n hi n nay kho ng trên
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………2
535.000 con, v i nhi u gi ng nh p ngo i và lai cho năng su t và ch t lư ng
th t t t), bên c nh s phát tri n chăn nuôi l n t p trung trang tr i thì chăn ni
nh l t i các h gia đình v i quy mơ 1-2 nái và 05-40 l n th t cũng r t phát
tri n. Tuy nhiên d ch b nh ñ i v i ñàn l n cũng gia tăng.
ðư ng hô h p là cơ quan thư ng xuyên ti p xúc v i mơi trư ng bên
ngồi nên d b nhi m các vi sinh v t gây b nh như virus, vi khu n, kí sinh
trùng. M t trong nh ng nhân t quan tr ng nh t là vi khu n Mycoplasma gây
b nh viêm ph i ñ a phương cho l n (Enzootic Pneumonia).
B nh ñã xu t hi n và gây thi t h i kinh t r t l n cho các tr i chăn nuôi
l n t p trung c a nhà nư c và h p tác xã trên ñ a bàn thành ph t nh ng năm
1960, ñ c bi t là các tr i l n gi ng như Tràng Du , Thành Tơ, Xn Sơn…
Sau khi xố b bao c p, các tr i l n t p trung c a h p tác xã b gi i th ,
chăn nuôi h gia đình phát tri n, đàn l n t h p tác xã ñư c phân tán v các h
chăn ni, theo con đư ng đó b nh Viêm ph i ñ a phương ñã len l i và phát tri n,
thư ng xuyên gây tác h i cho ñàn l n c a các ñ a phương, ñ c bi t các vùng
chuyên chăn nuôi l n nái.
Trong th i gian qua, tuy chưa có s đi u tra ñ y ñ v b nh nhưng theo
báo cáo c a Tr m Thú y các huy n, qu n trên ñ a bàn thành ph , m i năm có
hàng ch c ngàn l n
giai đo n trư c và sau cai s a b m c b nh viêm đư ng
hơ h p khơng rõ ngun nhân, trong ñó có hàng ngàn con ch t b nh, ñây là
m t trong nh ng nguyên nhân gây thi t h i n ng n cho s n xu t chăn ni
trên đ a bàn thành ph .
Qua đó th y thi t h i v kinh t do l n m c viêm ph i là r t l n.
Xu t phát t th c ti n s n xu t, nh m m c đích hi u k hơn v b nh này,
cũng như nh hư ng c a nó t i chăn ni l n. ðư c s phân cơng c a Vi n sau
đ i h c, Khoa Thú y, B môn Vi sinh v t – Truy n nhi m Trư ng ð i h c
Nông nghi p Hà N i, dư i s hư ng d n c a th y giáo TS. Nguy n Bá Hiên
chúng tôi ti n hành nghiên c u ñ tài:
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………3
“ði u tra, xác ñ nh b nh viêm ph i ñ a phương do Mycoplasma
hyopneumoniae và m t s vi khu n c ng phát khác gây ra cho l n trên đ a
bàn thành ph H i Phịng. ð xu t bi n pháp phòng tr ".
1.2
M c tiêu nghiên c u c a ñ tài
- Xác ñ nh rõ ñ c ñi m lâm sàng và b nh tích c a l n m c b nh viêm
ph i ñ a phương.
- Xác ñ nh ñư c m t s vi khu n c ng phát tham gia vào q trình b nh
và đ c l c c a chúng.
- Trên cơ s k t qu kháng sinh ñ thu ñư c s ñưa ra phác ñ đi u tr
và phịng b nh đư ng hơ h p c a l n t i H i Phòng.
1.3
Ý nghĩa khoa h c và th c ti n c a đ tài
ðây là cơng trình nghiên c u tương ñ i ñ y ñ v :
ð c ñi m b nh lý, các bi n ñ i lâm sàng, cũng như gi i ph u b nh lý
c a ph i l n m c b nh. ð ng th i nghiên c u m t s vi khu n c ng phát gây
b nh viêm ph i ñ a phương t i H i Phịng. Nó cung c p nh ng s li u khoa
h c, th c ti n, nh ng thông tin quan tr ng giúp các nhà thú y ch n đốn s m
và đưa ra bi n pháp phòng tr h p lý, h n ch thi t h i trong chăn nuôi.
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………4
2. T NG QUAN TÀI LI U
2.1
L ch s nghiên c u v b nh viêm ph i
l n do Mycoplasma
2.1.1 Tình hình nghiên c u trên th gi i
ðư ng hô h p là cơ quan thư ng xuyên ti p xúc v i mơi trư ng bên
ngồi nên d b nhi m các vi sinh v t gây b nh như virus, vi khu n, kí sinh
trùng. M t trong nh ng nhân t quan tr ng nh t là vi khu n Mycoplasma gây
b nh viêm ph i ñ a phương cho l n (Enzootic Pneumonia).
Theo Ross (1986) [44] n u ch có Mycoplasma thì tri u ch ng lâm sàng
không xu t hi n, ch khi có s tham gia c a các vi khu n c ng phát như
Pasteurella và Bordetella bronchiseptica tri u ch ng c a b nh m i bi u hi n
rõ ràng.
Mycoplasma ñ ơc phát hi n ñ u tiên vào năm 1898
bị b viêm ph i
và đư c đ t tên là M.nyeoides.
Sau 25 năm ngư i ta phát hi n ra nhi u vi khu n gi ng Mycoplasma
nên ñ t tên là PPLO (Pleuropneumonia -Like Orgasnisms ).
B nh l n ñ u tiên ñư c phát hi n th y
nư c ð c, sau đó th y
Anh,
Th y ði n và g i tên b nh là d ch viêm ph i ñ a phương. Trư c khi tìm ra
ngun nhân gây b nh, đã có r t nhi u quan ñi m khác nhau c a các tác gi
v nguyên nhân gây b nh. Ngày ñ u b nh xu t hi n, m t s tác gi cho r ng:
B nh suy n l n là do m t lồi virus nào đó khơng qua màng l c gây ra và t t
c các hư ng nghiên c u khi đó t p trung vào nguyên nhân do virus.
Nh ng năm 50 c a th k XX các nhà khoa h c
các nư c Anh,
Canada, M , Th y ði n ñã ñi sâu vào nghiên c u ñ ng lo t nhưng theo
hư ng là do virus gây nên b nh, k t qu thu đư c khơng đ ng nh t, trong q
trình nghiên c u h đã tìm th y Mycoplasma trong b nh ph m nhưng l i cho
r ng vi khu n này ch là vi khu n th phát, thư ng nhi m vào các b nh tích
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………5
c a ph i khi l n m c b nh và che l p căn b nh trong môi trư ng t bào và
khơng có t bào dùng đ phân l p m m b nh. Cho t i lúc này ngư i ta v n
cho r ng có m t lo i virus nào ñ y gây nên b nh mà chưa tìm ra đư c.
Cũng trong nh ng năm 50 m t s tác gi ñã nghiên c u ñư c m t s
ñ c trưng c a m m b nh là:
- M m b nh cũng m n c m v i m t s thu c kháng sinh.
- Tính kháng ngun c a nó không phù h p v i b n ch t c a virus.
T i năm 1963 m t s tác gi ñã nghiên c u
Anh và cho k t qu ñ u
tiên v căn b nh. H ñã ñ nh b nh ph m ph i l n b viêm khơng ch a căn
b nh th phát đem ti n hành nuôi c y và cho k t qu là m t vi sinh v t đa
hình thái, trong mơi trư ng t bào ph i l n, khi gây b nh thí nghi m th y l n
khơng m c b nh viêm ph i. ð i v i mơi trư ng khơng có t bào g m: 10%
dung d ch ñ m Hanks, 20% huy t thanh l n vô ho t (l y t l n không m c
d ch viêm ph i ñ a phương) và 0,5% latbunin thu phân, 0,01% chi t xu t
Mendifco, 200 ñơn v Penicillin trong 1ml môi trư ng, k t qu là v n có th
ni c y đư c, t đó h cho r ng: Vi khu n mà h phân l p đư c có hư ng
thu c nhóm Mycoplasma là nguyên nhân gây nên viêm ph i, nhưng h chưa
ch ng minh ñư c vi khu n Mycoplasma này có phát tri n đư c trong mơi
trư ng đ c hay khơng nên h chưa có k t qu chính xác.
Năm 1965, đã phân l p đư c vi khu n gây b nh tương t
M trong
môi trư ng khơng có t bào, năm 1964 đã quan sát đư c s hình thành khu n
l c Mycoplasma trên mơi trư ng đ c mà h ni c y. Trong mơi trư ng d ch
th khơng có t bào ñã ñư c ki m tra là tinh khi t h th y trên mơi trư ng
hình thành nh ng khu n l c hình c u như Mycoplasma. Khi tiêm canh khu n
trong môi trư ng d ch th
tích đi n hình
l n c y chuy n th 7 cho l n, h đã tìm th y b nh
ph i, gi ng như b nh tích đã đư c mơ t theo quan đi m
ngun nhân bewenhj là do virus.
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………6
Cũng th i gian này, h ñã quan sát ñư c s
hình thành khu n l c
Mycoplasma trong mơi trư ng ñ c c y Mycoplasma mà h phân l p đư c.
M t khác cịn l y khu n l c Mycoplasma tiêm cho l n th y l n m c b nh và
h k t lu n r ng: “Vi khu n đã hình thành khu n l c là nguyên nhân gây ra
b nh D ch viêm ph i ñ a phương và ñ t tên là M.Suipneumoniae ”
Năm 1986, Papageogia ñã ti n hành nghiên c u v m t vi sinh v t h c
c a m m b nh, tác gi ñã ch ng minh đư c vai trị ch y u c a Mycoplasma.
Canh khu n trên môi trư ng d ch th ñem tiêm cho l n con t 10 -21 ngày tu i
ñã gây ñư c b nh, khi m khám th y đư c b nh tích viêm khí qu n ph i ho c
viêm ph i thùy
hình thành u h t
các thùy tim, thùy ñ nh, viêm ngo i tâm m c c p tính, v i s
màng cơ tim và b nh tích viêm ngo i tâm m c. T đó v sau
đã có r t nhi u cơng trình nghiên c u ti p theo nh m sáng t thêm v b nh này.
Như v y sau r t nhi u cơng trình nghiên c u c a các nhà khoa h c trên
th gi i, cu i cùng đã xác đ nh đư c chính xác nguyên nhân gây b nh D ch
viêm ph i ñ a phương (thư ng g i là suy n) c a l n là Mycoplasma
hyopneumoniae.(M. Hyopneumoniae).
2.1.2 M t s nghiên c u trong nư c
Vi t Nam, b nh ñư c phát hi n ñ u tiên năm 1953
m t vài tr i
gi ng (Phan ðình ð , Tr nh Văn Th nh, 1958 [4]), ñ n năm 1962, b nh ñã lan
kh p các t nh, cho ñ n nay b nh phát tri n r t r ng. T l
m cao, có tr i l n
có t i 80% l n m c b nh (tr i Máy Trai - H i Phịng). Có tr i do nh p l n ñã
b suy n nên c ñàn b lây ñã ph i di t h t (tr i C u Nguy n,Thái Bình).
Nhi u tr i chăn ni qu c doanh đàn l n cũng b nhi m n ng: Tr i Thành Tơ
- H i Phịng, tr i An Khánh - Hà ðông.
B nh VPðP
Vi t Nam còn g i là b nh Suy n l n ñã x y ra t năm
1958 t i các cơ s gi ng l n c a nhà nư c (Nguy n Ng c Nhiên – 1997 [8]).
Theo tác gi , khác v i các nư c phát nư c phát tri n
Vi t Nam do ñi u ki n
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………7
chăm sóc và v sinh kém, vai trị c a các vi khu n c ng phát là r t l n. L n b
b nh và ch t ch y u do s k t h p c a M.Hyopneumoniae v i các lo i vi
khu n khác, ñ c bi t là Pasteurella multocida, Streptococcus sp.,
Staphylococcus sp. và Klebsiella.
Theo Nguy n Ng c Nhiên (1997) [16] tri u ch ng c a b nh là: B nh
phát ra ñ t ng t, l n
rũ, tách kh i ñàn, ñ ng riêng r ho c n m m t ch ,
nh p th tăng t 60 – 100 – 200 l n/phút, lúc ñ u ho ng n và nh . B nh ti n
tri n d n, l n ngày càng khó th : ng i d ng hai chân trư c há m m ra ñ th
và th th b ng, niêm m c m t, mũi, mi ng thâm tím l i do thi u O2. Thân
nhi t < 400C và ch s t cao khi có vi khu n c ng phát. L n ch t nhi u
ñàn
m i m c b nh l n ñ u. Trư ng h p b nh kéo dài chuy n sang th mãn tính
v i đ c đi m: Ho kéo dài trong vài tu n ho c vài tháng, ho khan, khó th , có
khi co gi t t ng cơn, nôn m a. L n b nh ñ ng m t ch lưng cong lên, c
vươn dài ra, ñ u mõm cúi xu ng ñ t ñ ho cho ñ n khi long ñ m thì cơn ho
m i d ng, thư ng ho vào lúc sáng s m và chi u t i, hay khi th i ti t thay ñ i,
sau khi v n ñ ng ho c sau khi ăn. L n con thư ng m c b nh
th mãn tính,
kém ăn, b ăn, g y y u, ñi l i ch m ch p, siêu v o, lông xù, ch m l n. L n v
béo và l n ñ c gi ng thư ng m c b nh
th nh v lâm sàng m c dù sau khi
m khám v n th y b nh tích c a b nh viêm ph i ñ a phương.
Năm 2005, Cù H u Phú và c ng s (Vi n Thú y Qu c gia) [11] ñã
phân l p ñư c t các m u b nh ph m c a l n m c b nh VPðP
m t s t nh
phía B c các lo i vi khu n sau: P.Multocida, Bordetelia bronchiseptica,
A.Pleuropneumoniae, Streptococcus suis, Haemophylus parasuis. Trong đó
có vi khu n P.Multocida và A.Pleuropneumoniae phân l p đư c có đ c l c
cao v i chu t b ch và l n làm cơ s cho vi c ch autovacin phòng b nh
đư ng hơ h p trên cho l n.
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………8
2.2
Khái qt v Mycoplasma
2.2.1 Hình thái
Mycoplasma là m t nhóm vi sinh v t nh , khơng di đ ng, khơng sinh nha
bào, trong c u trúc khơng có thành t bào mà ch có màng nguyên sinh ch t.
Hi n nay, ngư i ta coi Mycoplasma sp là m t vi sinh v t có kích thư c nh nh t
có kh năng t n t i đ c l p.
Hai ñ c ñi m khác bi t gi a Mycoplasma và các lo i vi khu n khác là
kích thư c genome và thành ph n các bazơ nitơ c a DNA. Mycoplasma có c
DNA và RNA, trong t t c cơ th s ng t do, Mycoplasma mang b gen nh
nh t (kho ng 600 Kb) và có ít nh t hơn 300 gen. T ng thành ph n Guanine và
Cytosine trong DNA th p,
m t s loài t l G+C th p hơn 25 mol % và t l
đó phân b khơng đ u trên b gen, có vùng r t cao l i có vùng r t th p.
Hình thái c a Mycoplasma r t ña d ng (hình thoi, hình g y ng n ho c
hình c u), nó thay đ i tuỳ thu c vào tu i canh trùng và l thu c r t nhi u vào
các y u t môi trư ng.
Mycoplasma khơng b t màu Gram, r t khó nhu m vì d bi n d ng qua
các bư c nhu m, có th quan sát Mycoplasma b ng kính hi n vi t quang n n
đen ho c kính hi n vi ph n pha nhưng cho k t qu khơng ch c ch n và do đó
r t ít có ý nghĩa trong cơng tác ch n đốn phịng thí nghi m.
Ph n l n Mycoplasma s ng t do, nó ch s ng và phát tri n m nh
m t
s v t ch c th (d i thích nghi h p).
2.2.2 Phân lo i
Theo Bergey (1985) [20], có 9 lồi Mycoplasma gây b nh cho đ ng v t
Trong phân lo i h c Mycoplasma thu c l p Mollicutes (molli nghĩa là
m m, cutes nghĩa là da, v b c).
S lồi Mycoplasma thì nhi u nhưng vì chúng khơng có thành t bào
nên chúng khơng phát tri n phong phú ñư c. Cho ñ n nay ñã phân l p ñư c
hơn 100 loài gây b nh cho ngư i và ñ ng v t.
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………9
H th ng phân lo i c a Mollicutes như sau:
L p
Mollicutes
B
Mycoplasma tales
H
Mycoplasma taceas
Gi ng
Acholepkesmaceae
Spiropkesuatereac Acholepkesmaceae
Mycoplasma
Spirophasma
ureaphasma
Acholephosma
M t s lo i gây b nh cho ngư i.
M.hoministyp1: gây b nh cho ngư i.
M.hoministyp2: phân l p
ñư ng sinh d c ti t ni u
M.salivarium: phân l p đư c
đư ng hơ h p trên.
M.fermentoins: phân l p ñư c
b ph n sinh d c
đàn ơng.
đàn ơng.
M.pneumonioe: tác nhân gây viêm ph i khơng đi n hình.
M.oralne ho c M.pharyngis phân l p đư c
khí qu n.
Các lồi gây b nh cho ñ ng v t như:
M.Mycoides, M. agalactia, M.Bovigienitalium, M. canis, M.Caculosum,
M.Hyorhinis. M.Arthritidis.
- M.Hysoynouniae: gây viêm kh p c p
l n 10 tu n tu i và
- M.Hyorhinis: gây viêm màng seraus, viêm kh p mãn tính
l n l n.
l n3đ n
10 tu n tu i.
M.Hyopneumoniae: gây b nh viêm ph i
l n.
Kh năng gây b nh c a M.Hyopneumoniae: Gây b nh viêm ph i tiên
phát đi n hình
l n (suy n l n). Các tri u ch ng c a b nh là s t nh , ho
khan, khó th và ñau ng c. Xét nghi m th y s lư ng b ch c u tăng, t c ñ
l ng máu nhanh. B nh x y ra
m i l a tu i c a l n nhưng ch y u
l n con.
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………10
2.2.3 ð c tính ni c y
Ni c y Mycoplasma r t khó vì nó địi h i ch t lư ng môi trư ng khá
cao, khu n l c c a nó có hình tr ng p n p. Mycoplasma có th ni c y đư c
trên nh ng mơi trư ng có ho c khơng có t bào s ng, trên phơi gà.
-
mơi trư ng khơng có t bào: Mycoplasma địi h i nh ng ch t dinh
dư ng ñ c bi t như huy t thanh ng a ch a, chi t xu t men… Nhi u lo i
Mycoplasma k khí ho c hi u khí tuy t đ i nhưng v n có lo i k khí tuỳ ti n.
Nhi t đ t t nh t ñ Mycoplasma phát tri n t 35-370C v i pH t 7,0-7,8.
- Trên mơi trư ng th ch:Chúng có th t o nên nh ng khu n l c tròn,
nh bé nuôi lâu khu n l c s l n d n b m t có c u t o h t, gi a có màu vàng
xung quanh trong (gi ng hình tr ng p n p).
- Trên mơi trư ng th ch máu: Mycoplasma gây b nh cho ngư i có th
làm dung huy t th ch máu.
- Trong môi trư ng d ch th : Mycoplasma làm v n đ c mơi trư ng và
t o thành k t t a.
Hình d ng c a khu n l c tương đ i gi ng nhau do đó khơng th d a
vào nó mà phân bi t các Mycoplasma khác.
2.2.4 ð c đi m sinh hố
- Hai đ c ñi m khác b êt gi a Mycoplasma và các lo i vi khu n khác là
kích thư c genome và thành ph n các bazơ nitơ c a DNA. Mycoplasma có c
DNA và RNA. T ng thành ph n Guanine và Cytosine trong DNA th p,
m t
s loài t l G+C th p hơn 25 mol % và t l đó phân b khơng đ u trên b
gen, có vùng r t cao l i có vùng r t th p.
- Thành t bào c a Mycoplasma chưa hoàn ch nh do đó hình d ng thay
đ i. Mycoplasma có l p v m ng r t m m d o có th ví như màng ngun
tương c a các vi khu n khác. Dư i kính hi n vi đi n t có th quan sát th y
màng nguyên tương là d ng h t ho c d ng lư i v i các Ribosom.
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………11
- Quá trình lên men c a Mycoplasma r t ph c t p và l thu c vào môi trư ng.
- Ngư i ta quan sát th y hi n tư ng n y ch i. Trong các t bào
nuôi h u h t các Mycoplasma phát tri n trên b m t c a t bào.
2.2.5 Kh năng ñ kháng
- Mycoplasma tương ñ i b n v ng khi dùng phương pháp đơng băng.
Trong huy t thanh Mycoplasma có th t n t i
560C sau gi .
- Mycoplasma d b phá hu khi b siêu âm và d b tiêu di t b i dung
d ch có pH acid ho c ki m cao. T t c các lồi Mycoplasma đ kháng v i
penicillin. Mycoplasma b tiêu di t
nhi t ñ 45-550C trong 15 phút. Chúng
m n c m v i s khô c n, v i tia t ngo i và nh ng ch t sát trùng.
2.2.6 Các lo i kháng nguyên
B ng phương pháp hoá h c và s c ký, ngư i ta tách ñư c
Mycoplasma nh ng thành ph n hoá h c mang tính ch t khác nhau. M i thành
ph n hố h c có kh năng tham gia vào m t ph n ng huy t thanh nh t ñ nh.
Do đó đ ch n đốn chính xác b nh b ng các huy t thanh h c, ngư i ta
thư ng dùng các y u t chi t xu t ñ c bi t, ví d : Ph n ng k t h p b th
ngư i ta dùng các y u t tri t xu t là lipid;
ph n ng k t t a trong th ch
dùng các y u t chi t xu t là polysaccarid. (Vũ Th Bình (2003)[1] – B mơn
vi sinh v t trư ng ð i h c y Hà N i).
2.2.7 B nh viêm ph i
l n do Mycoplasma gây ra
+ Mycoplasma hyopneumoniae
Bình thư ng M.Hyopneumoniae cư trú
ph i l n, khi th i ti t thay ñ i
ho c khi ñi u ki n v sinh kém, m t đ ni q ch t khi s c đ kháng gi m
thì M.Hyopneumoniae tăng ñ c l c gây b nh. B nh s tr m tr ng hơn khi có
m t các vi khu n gây b nh khác như: Pasteurella, Streptococcus,
Staphylococcus, E.coli, Salmonella. (Trương Văn Dung và c ng s (2002) [3]).
Ngày nay, ngư i ta cho r ng b nh do M.Hyopneumoniae s tr m tr ng
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………12
hơn khi k t h p v i m t Adenovius .M.Hyopneumoniae đư c tìm th y ch
y u
trong ng khí qu n, ph qu n ph i c a l n. Chúng xâm nh p vào đư ng
hơ h p trên, dính ch t vào h th ng lơng rung đư ng hơ h p làm vi khu n k
phát d xâm nh p.
Khi nhi m M.Hyopneumoniae s
làm thúc ñ y quá trình nhi m
Pasteurella, PRRS và ngư c l i. M t s nghiên c u các nhà khoa h c M
cho r ng:
l n nhi m Mycoplasma trư c thì cũng làm tăng đ m n c m v i
PRRS. Theo Ross C.W(1986) [44], n u ch có Mycoplasma thì tri u ch ng
lâm sàng khơng xu t hi n. Ch khi có s tham gia c a Pasteurella và Bordetella
bronchiseptica thì tri u ch ng m i bi u hi n rõ ràng.
2.2.7.1 Cơ ch sinh b nh
- M.Hyopneumoniae xâm nhi m vào đư ng hơ h p trên c a l n
- M.Hyopneumoniae t n cơng vào h th ng lơng rung đư ng hơ h p
- M.Hyopnemoniae làm gi m ch c năng c a h th ng lơng rung
- H th ng phịng v b suy y u, các vi sinh v t gây b nh và t n công
làm b nh thêm tr m tr ng.
2.2.7.2 S lây lan và d ch t h c
- Mycoplasma lây qua ti p xúc tr c ti p: Nh t chung l n kho v i l n
b nhi m b nh, t l n m sang l n con.
- Trong thiên nhiên ch có loài l n m c b nh suy n do M.Hyopneumonia.
- M i l a tu i l n ñ u m c, nh t là l n con t 2-5 tháng tu i.
- Khi th i ti t thay ñ i l n d m c b nh hơn, chu ng tr i m th p, v
sinh kém b nh d phát sinh.
- Mùa xn và mùa đơng t l m c b nh cao hơn các mùa khác.
- B nh lây ch y u t l n sang l n,
nh ng tr i chăn ni khơng có
b nh, cách ly t t v n có th nhi m. ( Nguy n Vĩnh Phư c (1976) [14] ).
M.Kobosch,1999 ñã ki m tra trên 4.000 ph i l n th y 67% ph i l n b
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………13
viêm, 80% m c b nh do M.Hyopneumoniae.
- Vi c lây truy n M.Hyopneumoniae ch y u qua ti p xúc tr c ti p l n
m ho, th , h t hơi truy n m m b nh sang l n kho , l n mang trùng cũng làm
gây b nh. B nh thư ng kéo dài khó d p t t và tiêu di t, do l n m kh i nhưng
v n mang trùng.
- B nh lây lan m nh
các ñàn nh p n i, nh ng l n chưa b nhi m thì t
l ch t cao hơn.
2.2.7.3 Tri u ch ng
Sau khi nhi m M.Hyopneumoniae t 7 đ n 20 ngày thì tri u ch ng đ u
tiên là h t hơi, ho, khó th . Ho và khó th là tri u ch ng ñi n hình và kéo dài.
B nh bi u hi n dư i 3 th
* Th c p tính
L n ăn kém, ch m ch p, da xanh ho c nh t nh t, thân nhi t bình
thư ng ho c hơi cao m t chút (39-39.50C).
H t hơi, ho t ng h i lâu ñ ñ y d ch bài ti t
sâu đư ng hơ h p,
thư ng ho lúc th i ti t l nh, lúc v n ñ ng. Khi ho con v t m t m i, hi n tư ng
ho ch kéo dài vài tu n sau đó gi m.
- L n th khó, th nhanh và nhi u, th khò khè, th t 60-150 l n
/phút, há h c m m ñ th , th như chó ng i, th d c b ng thóp l i đ th .
-T n s hơ h p tăng lên, bí ti u ti n, khi nghe vùng ph i có nhi u vùng
hơ h p im l ng.
-Ki m tra máu: H ng c u tăng, b ch c u tăng m nh, s tăng b ch c u
ñ làm nhi m v tiêu di t m m b nh - ð i th c bào.
Khi m c b nh th này l n hay ch t, nh t là l n có đ tu i t sơ sinh ñ n
2 tháng tu i. Th c p tính ít th y ch th y nh ng ñàn l n d m c b nh.
* Th á c p tính
Thư ng g p
l n lai, l n con theo m , l n m .
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………14
Tri u ch ng gi ng như
th c p tính nhưng nh hơn, ho và khó th
v n là tri u ch ng đi n hình c a l n khi m c b nh
* Th mãn tính:Thư ng n i ti p t th
th này.
n tính hay hai th trên sang.
L n th t hay m c th này.
Ho, ho t ng ti ng m t hay t ng h i, ti ng ho như khơng có c m giác
b t kh i c h ng.
Khó th , t n s hơ h p tăng, nhi t đ tăng. B nh
th này kéo dài, l n
g y rõ r t, ăn kém, d k phát các vi sinh v t gây b nh khác, t l ch t th p,
thư ng ch t do c ng phát, trong ñi u ki n nuôi dư ng kém b nh d chuy n
sang th c p tính.
* Th
n tính.
Thư ng th y
l n ñ c gi ng, l n v béo. Các tri u ch ng
th này
không xu t hi n rõ, th nh tho ng ho, th i gian nuôi l n kéo dài, l n m c
th
này ít b ch t. (Nguy n Ng c Nhiên (1997) [8]).
2.2.7.4 B nh tích
- B nh tích t p trung
b máy hơ h p và h ch ph i.
Sau khi nhi m vài ngày, b nh tích đ u tiên là viêm ph i thùy, t thùy tim
sang thùy nh n, thư ng viêm ph n rìa th p c a ph i. Ph i xu t hi n nh ng ch m
ñ ho c xám b ng h t ñ u xanh, to d n r i t p trung thành t ng vùng r ng l n.
- Khi ch p X Quang th y b nh lan t trư c ra sau, theo m t quy lu t
nh t ñ nh: B nh tích đ i x ng gi a hai bên lá ph i, ranh gi i rõ gi a các vùng
viêm ho c không viêm.
- Khi m khám th y: Ch ph i viêm c ng l i, màu xám nh t hay đ
như màu m n chín, m t ph i bóng láng, bên trong có ch a ch t keo nên g i là
viêm ph i kính.
Khi b viêm n ng ph i c ng, đ c l i như b gan hoá lúc này khi c t ph i
ch cịn m t ít d ch l n b t. Ph i b nh c hoá, ñ c màu tro, ph i ch c l i, bi u
Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………15
hi n gan hoá, lúc này c t mi ng ph i th xu ng nư c th y ph i chìm.
- V vi th : Khi b nh c hố, th y ph qu n có nhi u b ch c u đơn nhân
trung tính. N u viêm màng ph i thì màng ph i dày nên.
- H ch lâm ba sưng to g p 2-5 l n, ch a nhi u nư c màu tro, t máu.
- Khi ghép v i t huy t trùng thì ph i b t máu, có nhi u vùng gan hố
phía sau ph i, ho i t bã ñ u.
- Khi ghép v i Streptococcus thì ph i viêm có l n m .
- N u ghép v i Bacterium thì cu ng ph i viêm có m , m t ng c c hôi
và tanh, màu tro. (Trương Văn Dung và c ng s (2002) [3]).
2.2.7.5 Phòng và tr b nh
2.2.7.5.1 Phòng b nh
ð phòng b nh hi n nay ngư i ta đã th c hi n quy trình v sinh thú y
và phòng b nh b ng vaccine:
- Phòng b nh b ng vaccine
Vaccine ñư c s d ng t i các cơ s chăn ni
đây là Respisure phịng
b nh suy n cho l n th t tiêm mũi 1 vào 8 – 10 ngày tu i và mũi 2 vào lúc 2
tháng tu i. Tuy nhiên vaccine phòng b nh suy n cho l n m i ch ñư c s
d ng trong các trang tr i, còn các h chăn nuôi k c chăn nuôi t p trung cũng
khơng tiêm phịng vì v y v n là ngu n ti m n d ch b nh nguy hi m.
- V sinh thú y
* ð i v i nh ng vùng và tr i chưa có l n b nh
+ Th c hi n phương châm không nh p l n t ngoài vào. N u c n thi t
ph i nh p thì ch n nh ng vùng, tr i t trư c chưa b nhi m b nh; mua l n ph i
có s giám sát và c p gi y ki m d ch v n chuy n ñ ng v t c a cơ quan thú y,
ki m tra k tình tr ng s c kh e khi mua l n; khi ñem l n v ph i cách ly ñúng
quy ñ nh và theo dõi, khi không phát hi n tri u ch ng b nh m i cho nh p đàn.
+ Phịng b nh ñ nh kỳ, n u phát hi n l n có tri u ch ng ho, th thì có th
Trư ng ð i h c Nơng nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ………………………16