BAI DICH CAC PHUONG PHAP SAC KY

BÀI DỊCH TIẾNG ANH MÔN : CÁC PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ
TRONG HÓA HỌC.
HỌC VIÊN : CAO THỊ HẢI YẾN
LỚP CAO HỌC 18 HÓA HỮU CƠ.
2.4. Phương pháp hiện đại khai thác các hợp chất hoạt động từ
nguyên liệu và các sản phẩm từ biển.
Tiền xử lý mẫu là một trong những bước tốn nhiều thời gian nhất của
các phân tích quá trình và cũng là một trong những việc quan trọng nhất.
Thực vật chứa nhiều các hoạt tính sinh học các hợp chất và quan trọng là để
chiết xuất tất cả trong số đó là tốt nhất, ngắn và hiệu quả so với việc sử
dụng dung mơi tối thiểu. Thích hợp với khai thác kỹ thuật cũng như được
giá rẻ và đơn giản [5,6]. Quan trọng là khả năng phục hồi cao, thấp, khả
năng tái phát hiện giới hạn, và tự động hóa [7]. Khai thác rắn lỏng là một
trong những cách lâu đời nhất của chất rắn mẫu tiền xử lý [5]. Khai thác và
phân đoạn chiết xuất cũng là một phương pháp quan trọng trong sự cô lập
của các nhóm hợp chất hoặc các chất đơn giản từ nguyên liệu thực vật.
2.4.1 Phương pháp khai thác trong bộ máy Soxhlet.
Khai thác trong bộ máy Soxhlet đã đượccoi là kỹ thuật hàng đầu chủ
yếu được sử dụng trong 1 thời gian dài và vẫn được coi là một kỹ thuật tiêu
chuẩn và tài liệu tham khảo chính cho các phương pháp lọc khác được so
sánh [5].
Mẫu được đặt trong một chủ thimble và trong khi hoạt động liên tục
đầy với phần mới của dung mơi từ bình chưng cất. Khi chất lỏng đạt tới
tràn mức, hút aspirates chất tan của chủ thimble và unloads nó trở lại
vào bình chưng cất, tiến hành phân tích tách ra thành chất lỏng số lượng lớn.
Cáchoạt động được lặp đi lặp lại cho đến khi khai thác hoàn toàn đạt được
[5,6].
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

1

Các dung mơi khác nhau có thể được sử dụng trong q trình khai
thác. Bổ sung đồng dung mơi như là một sửa đổi lần để tăng sự phân cực của
pha lỏng là có thể. Soxhlet khai thác chủ yếu phụ thuộc vào đặc tính của ma
trận và kích thước của các hạt như nội bộ khuếch tán có thể là một bước hạn
chế trong quá trình khai thác [6].
Lợi thế quan trọng nhất của kỹ thuật thông thường khai thác Soxhlet
là liên tục nhân vật. Mẫu có một số liên lạc với phần mới của các dung môi.
Sau khi kết thúc q trình khai thác, lọc khơng được u cầu. Nó cũng rất rẻ
và phương pháp đơn giản, nơi kinh nghiệm nhỏ là cần thiết. Phương pháp
này có khả năng để trích xuất hàng loạt mẫu nhiều hơn các phương pháp
khác [5]. Ngồi ra rộng cơng nghiệp ứng dụng và hiệu quả tốt hơn là những
lợi thế khai thác Soxhlet trên cuốn tiểu thuyết phương pháp khai thác [6].
Những khó khăn đáng kể nhất so với các kỹ thuật khác là dài
thời gian khai thác, thâm nhập nghèo của ma trận bằng cách dung môi, và
lớn lượng dung môi cần thiết, đó là rất tốn kém và nguyên nhân môi trường
vấn đề. Một số dung môi gần đây đã được đặt câu hỏi vì độc tính của họ.
Ngồi ra chúng tôi không thể quên rằng khai thác xảy ra trong một thời gian
dài tại các điểm sôi của dung mơi, do đó sự phân hủy nhiệt của các hợp chất
và các đồ tạo tác tạo ra có thể [5,6] Do tất cả các lợi thế và nhược điểm của
phương pháp chiết xuất Soxhlet nó là một trong những phổ biến nhất và
nhiều nhà khoa học đã cố gắng để cải thiện nó.
Đầu tiên, thay đổi tập trung vào thiết kế mới của các đơn vị cơ bản
(thimble chủ, xi phơng, ngưng tụ) những gì cải thiện ứng dụng và thu được
kết quả [5]. Ngồi ra cịn có một số thay đổi rút ngắn thời gian khai thác
bằng cách sử dụng năng lượng phụ trợ.

Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

2

Do đó dẫn đến tạo ra Soxhlet chiết áp suất cao và tập trung sự trợ giúp
của lị vi sóng (FMASE). Áp lực cao đã đạt được bằng cách đặt vắt trong nồi
hấp hoặc sử dụng siêu tới hạn dịch Soxhlet vắt [8].
FMASE cho thấy một số khác biệt so với các lị vi sóng có sự trợ giúp
kỹ thuật khai thác: được khai thác dưới áp lực bình thường, chiếu xạ là tập
trung vào mẫu, lọc là không cần thiết. Những lợi thế của kỹ thuật mà là ngắn
hơn thời gian khai thác, khả năng tự động hóa, và khai thác số lượng. Khai
thác hiệu quả và độ chính xác tốt hơn so với phương pháp truyền thống. Vẫn
còn đó giữ lợi thế của phương pháp truyền thống [8]. Ngồi ra cịn có một số
ứng dụng của siêu âm, hỗ trợ Soxhlet khai thác [9].
2.4.2 Khai thác chất lỏng siêu tới hạn.
Khai thác chất lỏng siêu tới hạn (Lâm trường) là một trong những kỹ
thuật thành công nhất. siêu tới hạn nhà nước được thực hiện khi nhiệt độ và
áp suất của một chất trên giá trị của nó rất quan trọng. Trong điều kiện siêu
tới hạn, chất lỏng có đặc tính cả hai chất lỏng và khí những gì làm cho khai
thác nhanh hơn và hiệu quả hơn. nhiều chất lỏng siêu tới hạn đã được sử
dụng, chẳng hạn như freons, ammonia, dung môi hữu cơ, nhưng
phổ biến nhất là CO2 bởi vì nó có độc tính thấp nhất và dễ cháy. thấp
siêu tới hạn nhiệt độ của khí carbon dioxide làm cho nó hấp dẫn đối với việc
khai thác các thermolabile hợp chất [5,6]. Áp dụng một số người trong số họ
là hạn chế do tính chất khơng thuận lợi của họ đối với an tồn và xem xét
mơi trường.
Nước ở trạng thái siêu tới hạn có khả năng khai thác cao hơn đối với
các hợp chất cực, nhưng là không phù hợp với hợp chất nhiệt không ổn định
[10].
Nhiều hợp chất như phenol, alkaloids, glycosidic hợp chất kém
hịa tan trong CO2 cực thấp của nó khó khăn trong việc chiết xuất chất phân
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

3


tích cực những hạn chế chính của phương pháp. Để nâng cao hiệu quả sự
phân cực của extractant có thể được tăng lên (Ngoài ra methanol, ethanol,
pentane, acetone). Các phổ biến nhất dung mơi là methanol bởi vì nó là một
sửa đổi có hiệu quả và lên đến 20% thể trộn lẫn với CO2. Đôi khi, ethanol là
một sự lựa chọn tốt hơn trong Nutraceuticals vì độc tính thấp hơn phân cực
của chất phân tích cũng có thể được giảm (bằng hình thành các cặp phức tạp
hoặc ion) [1,10-14]. Bởi vì lâm trường với CO2 cũng chiết xuất chất béo từ
ma trận, tiếp tục dọn dẹp có thể được cần thiết để loại bỏ chất béo trước khi
phân tích.
Lâm trường quốc doanh thường được sử dụng cho khai thác nguyên
liệu thực vật tươi. Vấn đề là trình độ cao về độ ẩm, những gì có thể gây ra
những khó khăn cơ khí. Để giữ lại độ ẩm một số hóa chất như Na2SO4 hoặc
gel silica được trộn lẫn với nhà máy vật liệu [10].
Cũng rất quan trọng là quy mô nhà máy hạt. Các hạt lớn có thể kéo
dài thời gian khai thác quá trình bởi vì quá trình được kiểm soát bằng cách
khuếch tán nội bộ và bột mịn có thể tăng tốc khai thác. Tuy nhiên, vật liệu
dạng bột có thể gây ra những khó khăn trong việc giữ một tốc độ dịng chảy
thích hợp gây ra giảm sản lượng tổng các chất chiết xuất [15].
Quan trọng nhất lợi thế của kỹ thuật lâm trường quốc doanh khi so
sánh với cổ điển Soxhlet khai thác được giảm thời gian, vệ sinh và an toàn,
khả năng cho khớp nối trực tuyến với các máy dò và chromatographs, định
lượng xác định, preconcentration hiệu lực, khối lượng chuyển nhượng cao,
đầy đủ khai thác (chất lỏng siêu tới hạn có hệ số khuếch tán và độ nhớt thấp
hơn hơn so với chất lỏng dung môi). Rất quan trọng là Lâm trường cung cấp
khả năng cho chọn lọc khai thác và các chất phân đoạn từ nguyên liệu thực
vật bằng cách thao tác với áp lực và nhiệt độ. Choi et al. [16] xác nhận nó

trong so sánh carbon dioxide siêu tới hạn khai thác với chiết dung môi của
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

4


squalene và stigmasterol từ Spirodela polyrhiza. Lâm trường của squalene
(10 Mpa, 508C-608C) so sánh để khai thác Soxhlet n-hexane, nhưng
stigmasterol đã không được phát hiện theo các điều kiện. Phương pháp này
có thể dễ dàng sử dụng trong phịng thí nghiệm cho một lớn quy mơ [17].
Chất chiết xuất có ít chất phân tích khơng mong muốn có thể thu được
bằng cách thao tác cẩn thậntrong các điều kiện lâm trường quốc doanh (áp
suất, nhiệt độ, và sử dụng bổ). Tuy nhiên, khối lượng nhỏ vắt, mà chỉ chứa
một vài gram của vật liệu, là một bất lợi khi một khối lượng mẫu cao hơn là
cần thiết.
Dioxide carbon siêu tới hạn là một dung môi đầy hứa hẹn cho việc
khai thác tài nguyên thiên nhiên hợp chất, đặc biệt là thermolabile. Phịng
chống suy thối có thể được đạt được bằng cách loại bỏ ôxy từ CO2. Rõ
ràng, việc bổ sung các chất chống oxy hóa sẽ là một giải pháp hợp lý nếu
khơng có mặt hàng cơ khí để hấp thụ các oxy [18]. Ngoài ra, lâm trường
quốc doanh loại bỏ quá trình tốn nhiều thời gian tập trung và sử dụng khơng
có hoặc có tối thiểu dung mơi hữu cơ, những gì làm cho phương pháp thân
thiện với mơi trường [5,6,12,14,19].
Đó là giá trị để ý rằng đơi khi hiệu quả là cao hơn 100% được gọi
Soxhlet phương pháp thơng thường (một số chất phân tích mạnh mẽ ràng
buộc với ma trận và không đủ năng lượng tham gia trong quá trình Soxhlet
ly thân) [5].
Lâm trường với phương pháp sửa đổi lần này có hiệu quả khai thác
của coumarins từ vỏ Citrus cực đại [12], furanocoumarins và terpenoid
pentacyclic trong thân rễ Dorstenia bryoniifolia Mart. ex Miq. và vỏ rễ của

Brosimum gaudichaudii
Trécul (Họ Dâu tằm) [20].

Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

5


Ngâm dưới sonication đã tốt hơn so với Lâm trường khai thác của
coumarins Mikania glomerata lá. SF chiết xuất có chứa một mức độ cao của
chlorophyll. Ngoài ra Ngoài ra sửa đổi lần cực (EtOH) đã khơng có mặt lợi
thế đáng kể [21].
Lâm trường sửa đổi lần, và khai thác chất lỏng áp lực (PFE) với
dichloromethane
chỉ ra rằng flavanones và xanthones được lấy ra từ nguyên liệu thực vật
tương tự hoặc hơi cao hơn sản lượng thu được bằng cách khai thác rắn lỏng,
ngắn hơn nhiều giai đoạn của thời gian và với số tiền giảm dung môi [22].
Chất sinh học tích cực của tăng hạt giống hơng giống như các axit béo
khơng bão hịa và carotene được chiết xuất bởi lâm trường với lượng khí
carbon dioxide và khí propane. Dầu năng suất cao hơn so với khai thác
Soxhlet truyền thống [23].
Hiệu lực của phân cực thấp, trung bình và cao, dưới áp suất rất cao và
cực bổ đã được điều tra bởi Hamburger et al. [24]. Calendula officinalis,
Crataegus sp, và Matricaria recutita đã được sử dụng như mơ hình trong
nghiên cứu này. Khai thác sản lượng trong các điều kiện khác nhau phụ
thuộc vào mức độ lớn trên các cấu hình của Các chất chuyển hóa trung có
trong ngun liệu thực vật. Extractability của lipophilic hợp chất tăng lên
đáng kể ở áp suất cao hơn 300 bar, sản lượng của polyphenolic và
glycosides vẫn ở mức thấp ngay cả ở áp suất khoảng 700 thanh với 20%
sửa đổi lần trong dịch chiết xuất. Một loạt các ứng dụng để tách Các hoạt

chất sinh học được mô tả trong xem lại bài viết [6,7,25,26].
2.4.3 áp lực khai thác chất lỏng
Áp lực khai thác chất lỏng (PLE) cũng được biết đến như là một chiết
xuất dung môi tăng tốc (ASE), áp lực cao dung môi chiết xuất (HPSE), hoặc
khai thác chất lỏng áp lực (PFE) là một kỹ thuật sử dụng khối lượng nhỏ
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

6


dung môi thông thường ở cao nhiệt độ (2008C) trong một thời gian rất ngắn
để trích xuất các mẫu rắn. Áp lực cao hơn 200 bar để giữ cho dung mơi
trong trạng thái lỏng (dung mơi này vẫn cịn dưới điểm quan trọng của nó),
tăng nhiệt độ làm tăng tốc độ động học khai thác (quá trình giải hấp của chất
phân tích từ ma trận được nhanh hơn so với điều kiện khi dung mơi ở nhiệt
độ phịng được sử dụng), trong đó cung cấp cho an tồn và nhanh chóng
phương pháp [6,7,27,28]. ASE cho phép sử dụng phổ quát của dung môi
hoặc hỗn hợp dung môi với sự phân cực khác nhau.
PLE, mẫu với sulfate natri cát, hoặc Hydromatrix như phân tán
được đặt trong một tế bào. Tế bào khai thác được lấp đầy với dung môi và tế
bào được thiết lập cho một số giá trị, sau đó được nung nóng trong một lị
nướng đến các giá trị thiết lập. Trong suốt chu trình nung nóng, dung mơi
bơm vào và ra khỏi tế bào để duy trì áp lực và thực hiện các chu kỳ chỉ định.
Chất lỏng ra khỏi các tế bào khai thác được thu thập trong bộ sưu tập lọ.
Trước khi tải các nguyên liệu thực vật vào trong tế bào khai thác, các mẫu
thường pretreated. Đúng kích thước của mẫu cho phép khuếch tán bên phải
của chất phân tích từ mẫu chiết xuất dung mơi. Sấy khơ mẫu loại bỏ bất kỳ
độ ẩm có thể làm giảm khai thác hiệu quả. Việc khai thác lựa chọn dung mơi
phải có khả năng hịa tan các chất phân tích lãi suất, giảm thiểu coextraction
của các thành phần ma trận khác. của nó phân cực nên được cho rằng hợp

chất đích [27,29].
PLE có thể được thực hiện trong các mẫu (tĩnh và dung mơi được duy
trì trong một xác định thời gian ở áp suất và nhiệt độ không đổi) hoặc chế độ
năng động (dung môi chảy qua mẫu một cách liên tục). Bởi vì trong nhiều
trường hợp năng động, chế độ sử dụng nước như extractant, một số tác giả
có thể ưa thích để sử dụng hạn áp lực khai thác nước nóng (PHWE) để tham
khảo. Nước là nonflammable, khơng độc hại, dễ dàng có sẵn, và một dung
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

7


môi thân thiện với môi trường chấp nhận được. PHWE có và khơng có sự bổ
sung của một tỷ lệ phần trăm nhỏ của dung môi hữu cơ như vậy như ethanol
là rất phù hợp với tiêu chuẩn hóa học và kiểm sốt chất lượng
cây thuốc. Đồng thời, nó có thể được áp dụng ở quy mơ thí điểm như là một
quá trình sản xuất cho các nhà máy dược. Để biết thêm thông tin về ứng
dụng PHWE trong khai thác của các hợp chất hoạt động có thể được tìm
thấy trong các giấy tờ xét [27,29,30].
Rất quan trọng là hồn tồn tự động hóa các q trình phân tích tồn
bộ và tính chọn lọc cao nhổ răng của các hợp chất phân cực khác nhau [27].
So với khai thác cổ điển trong bộ máy Soxhlet, khai thác hoàn toàn có
thể thể đạt được trong thời gian ngắn hơn với một lượng nhỏ dung môi hữu
cơ và tốt hơn nhiều sự xâm nhập của mẫu bằng các dung môi trong PLE.
Giữ nhiệt độ cao làm giảm độ nhớt dung môi và giúp trong việc phá
vỡ trái phiếu chất phân tích ma trận. Ngồi ra khơng có bổ sung lọc là [27].
Sự phù hợp của khai thác áp lực chất lỏng (PLE) trong phân tích cây
thuốc đã được điều tra. Các chất chiết xuất từ PLE từ thảo dược đại diện có
chứa cấu trúc đa dạng các chất chuyển hóa phân cực khác nhau và khả năng
hòa tan được so sánh với các chất chiết xuất từ thu được theo Dược điển

chuyên khảo liên quan đến sản lượng có liên quan thành phần thực vật, thời
gian khai thác, và tiêu thụ dung môi. Thử nghiệm cho thấy 1-3 chu kỳ khai
thác từ 5 đến 6 phút ở nhiệt độ cao dành đầy đủ hoặc gần như đầy đủ khai
thác (thay vì nhiều giờ khai thác Soxhlet). Nó rõ rệt làm giảm khơng chỉ có
thời gian mà cịn tiêu thụ dung mơi và bảo vệ chống lại hiện vật của chiết
xuất các hợp chất ở nhiệt độ cao. Độ lặp lại của kết quả nói chung tốt hơn
[31].
Trong số khai thác trong bộ máy Soxhlet, ultrasonification, lị vi sóng
có sự trợ giúp dung môi khai thác trong hệ thống mở và gần gũi và ASE khai
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

8


thác áp lực dung môi cung cấp cho năng suất cao hơn furanocoumarins (đặc
biệt là kỵ nước) từ Pastinac sativa và trái cây officinalis Archangelica
[32,33]. Dawidowicz et al. đã tối ưu hóa điều kiện khai thác để phân tích của
rutin và isoquercitrin Sambucus nigra hoa, lá, và dâu [34].
Ông và Len [35] đã phát triển một phương pháp phân tích của
glycosides cây dược liệu bằng cách sử dụng PHWE. Các kết quả thu được
với kỹ thuật này thậm chí cịn tốt hơn so với những người thu được với chiết
Soxhlet. Nghiên cứu cho thấy rằng kỵ nước và nhiệt thành phần bất ổn định
trong cây thuốc có thể được chiết xuất bằng cách sử dụng sự kết hợp của bề
mặt và áp lực nước nóng ở nhiệt độ dưới đây của nó. điểm sơi và giảm áp
lực áp dụng.
Khả năng của chọn lọc thay đổi cho nhổ tiêu biểu nhất hương thảo các
hợp chất chống oxy hóa bằng phương tiện của một thay đổi nhỏ của nhiệt độ
được chứng minh. Thí nghiệm cho thấy rằng nó có thể được chiết xuất từ
làm giàu với các loại khác nhau polyphenol [36].
PLE đã được kiểm tra là một công nghệ thay thế cho khai thác của

carotenoid các màu xanh lá cây tảo biển Haematococcus pluvialis và
Dunaliella Salina và kavalactones Piper methysticum. Kết quả của nghiên
cứu này cho thấy rằng PLE đã so sánh khai thác hiệu quả các kỹ thuật khai
thác truyền thống, tuy nhiên yêu cầu một nửa số lượng chiết xuất dung mơi
như khai thác truyền thống, và tốn ít thời gian [37].
PLE với rượu ethyl của hợp chất trị đái tháo đường, charantin, từ trái
cây của Momordica charantia (mướp đắng) được đề xuất như là một thay thế
cho thông thường Chiết Soxhlet với dung môi độc hại như chloroform hoặc
dichloromethane [38].
PLE là hiệu quả hơn cho các nhổ răng của tecpen (terpenic rượu và
phytosterol), axit béo và vitamin E từ lá của Piper gaudichaudianum
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

9


Kunth và giảm đáng kể tổng thời gian khai thác, số lượng của dung môi,
và các thao tác của các mẫu và các dung môi trong so sánh với Soxhlet [39].
ASE đã được sử dụng trong phân tích polyphenol [40], taxanoids [41],
alkaloids [42]. Các khía cạnh khác nhau của ứng dụng của PLE sản phẩm tự
nhiên đã được thảo luận trong chương [6,7,27].
Trung áp lực khai thác rắn chất lỏng (MPSLE), được giới thiệu bởi
Nyiredy et al. [43], là một kỹ thuật khai thác dựa trên các quá trình khuếch
tán hịa tan.
MPSLE có thể được thực hiện trong một sắc ký lỏng áp suất trung
bình (MPLC) cột đầy với các pha rắn tinh bột được chiết xuất và extractant
bơm qua giường văn phòng phẩm. Khoảng cách khai thác tương đối ngắn
mặc dù tách được hiệu quả do kích thước hạt mịn của pha rắn.
Khai thác có thể được thực hiện với lưu lượng dung môi liên tục và
liên tục áp dụng áp lực. Dung môi khác nhau hoặc hỗn hợp của chúng có thể

được áp dụng.
Q trình khai thác này là đầy đủ và nhanh chóng. Hiệu quả là so sánh
với các khai thác đầy đủ phương pháp như chiết Soxhlet, nhưng ở đây là q
trình tập trung là khơng cần thiết. Ngoài ra thử nghiệm tất cả được thực hiện
chặt chẽ và tự động hệ thống với số lượng nhỏ của dung mơi hữu cơ vì vậy
nó là thân thiện với môi trường [44].
Sự lựa chọn của hệ thống dung mơi có thể được thực hiện rất hiệu quả
bằng cách phân tích HPLC.
Chuyển vị MPLC đơn giản và trực tiếp [45].
2.5. Thanh lọc chiết xuất thô mẫu chuẩn bị.
Để tối ưu hóa các tất cả các q trình khai thác và phân tích, một số
can thiệp các hợp chất có kích thước phân tử cao như chất béo, bột màu, sáp

Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

10


trình bày trong các chất chiết xuất thơ nên được loại bỏ. Mục đích tiếp theo
là preconcentration và cách ly của chất phân tích.
Để loại bỏ các chất coextracted thủ tục dọn dẹp khác nhau có được
phát triển như phân vùng chất lỏng, chất lỏng cột hoặc sắc ký hấp thụ trên
các chất hút bám cực (Florisil hay silica), và sắc ký thấm gel (GPC) [27,46].
2.5.1 Chất lỏng- chất lỏng phân vùng.
Chất lỏng, chất lỏng phân vùng (LLP) trong quá khứ đóng vai trị
quan trọng trong tiền xử lý mẫu (làm sạch, tập trung, và cô lập). LLE là dựa
vào nguyên tắc rằng khi một chất thứ ba được thêm vào một hỗn hợp của hai
chất lỏng không thể trộn lộn đang ở trạng thái cân bằng, các thành phần bổ
sung này sẽ phân chia giữa hai giai đoạn chất lỏng cho đến khi tỷ lệ nồng độ
của nó trong từng giai đoạn đạt được một giá trị nhất định. [47].

Phương pháp là chậm, yêu cầu thời gian dài, số lượng lớn các dung
mơi hữu cơ và mẫu. Một khó khăn quan trọng là hình thành nhũ tương mà
phá vỡ rất chậm và không đầy đủ [48,49]. Nhiều bước phân vùng cung cấp
khả năng thanh lọc sơ bộ mẫu, được tách ra bởi quá trình sắc ký khác nhau.
Đây là thường đạt được bằng phương pháp ngược [45].
2.5.2 Giai đoạn khai thác trong pha rắn.
Khai thác pha rắn (SPE) là một phương pháp khác để khai thác chất
lỏng lỏng cho tách, lọc và tập trung. Trong khi LLE dựa trên phân vùng của
các hợp chất giữa hai giai đoạn chất lỏng trong SPE, thay vì hai chất lỏng
khơng thể trộn lộn giai đoạn, chất phân tích được phân chia giữa rắn và lỏng
(sorption bước chất phân tích có mối quan hệ để pha rắn hơn đối với ma trận
mẫu). giữ lại các hợp chất được loại bỏ từ pha rắn bằng cách tẩy rửa với một
dung mơi thích hợp hoặc hỗn hợp dung môi với ái lực lớn hơn để phân tích
(giải hấp bước). chiết xuất chất phân tích cũng có thể được eluted từ đĩa SPE
của một chất lỏng siêu tới hạn. Sử dụng khí carbon dioxide một SF có một
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

11


số lợi thế hơn các dung môi hữu cơ chất lỏng bởi vì nó là khơng độc hại, tính
trơ hố học, và dễ dàng để loại bỏ [46,48,49]. Duy trì phổ biến nhất Các cơ
chế dựa trên van der Waals lực lượng, liên kết hydro, lưỡng cực-lưỡng cực
tương tác, và cation-anion tương tác [50,51].
SPE là thường được sử dụng để làm sạch một mẫu trước khi phân tích
sắc ký định lượng chất phân tích trong mẫu và cũng để loại bỏ các thành
phần can thiệp của ma trận phức tạp để có được một trích xuất sạch hơn có
chứa phần tinh khiết của chất thú vị [50].
Các ứng dụng của SPE là chủ yếu xác định bằng cách sử dụng
sorbents khác nhau như alumina, silica gel, silica giai đoạn hóa học ngoại

quan, trao đổi ion, và polyme.
Một số người trong số họ được sửa đổi và có thể được rất chọn lọc. Sự
phân cực của điện thoại di động giai đoạn phụ thuộc vào thành phần hóa học
của pha tĩnh và có thể thay đổi chọn lọc tách [46,49,50].
SPE có nhiều lợi thế. Hiệu lực preconcentration đầu tiên là quan trọng
đặc biệt trong phân tích dấu vết. Thơng thường khối lượng dung môi cần
thiết để rửa giải đầy đủ của các chất phân tích là nhỏ hơn nhiều so với khối
lượng mẫu ban đầu. Nồng độ các chất phân tích như vậy là đạt được [48,49].
Rất quan trọng là phân đoạn của mẫu thành các hợp chất khác nhau
hoặc các nhóm các hợp chất tẩy rửa từng phần nhỏ với một giai đoạn chất
lỏng khác nhau. Zgórka [52,53] phát triển một phương pháp mới để xác định
đồng thời các axit phenolic và furanocoumarins bằng cách sử dụng của
octadecyl và amin bậc bốn SPE-microcolumns với thay đổi của phân cực
giai đoạn di động và sức mạnh eluent. Ngồi ra, cơ thực hiện phân chia
flavonoids và các axit phenolic bằng cách sử dụng microcolumns tương tự.
SPE thủ tục với sửa đổi RP-18 chất hút bám được sử dụng cho rửa giải của
proanthocyanidins [54,55]. Các sự kết hợp của polyme phân tử in (MIPS) và
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

12


SPE là một hứa hẹn kỹ thuật cho phép khai thác có chọn lọc các chất phân
tích cụ thể từ các ma trận phức tạp (Liv). SPE là quá trình dễ dàng, nhanh
chóng, địi hỏi số lượng nhỏ mẫu và khối lượng nhỏ dung mơi và có thể
được thực hiện trực tuyến hoặc tắt dịng và có thể dễ dàng
tự động. Nó cũng hiệu quả hơn LLE và cho thấy sự phục hồi cao hơn
chất phân tích [46,48-50,56]
Một trong các thơng số quan trọng để kiểm sốt phương pháp SPE là
bước đột phá khối lượng, đại diện cho các khối lượng mẫu tối đa có thể được

áp dụng với phục hồi 100% lý thuyết, trong khi phục hồi được định nghĩa là
tỷ lệ giữa số lượng trích xuất và số tiền được áp dụng [49,57]. Tổng quan về
SPE được xuất bản bởi _Zwir-Ferenc và Biziuk [50], Camel [51], Hennion
[57], và Poole [58].
Hệ thống sắc ký tương tự như được sử dụng trong SPE có thể được áp
dụng trong kinh điển cột sắc ký lọc và phân đoạn của các chất chiết xuất từ
trong dự bị quy mô.
2.5.3 GEL thấm sắc ký
GPC, cịn được gọi là kích thước loại trừ sắc ký, đã được sử dụng để
định lượng tách các phân tử trong các dung môi dung dịch nước hoặc đệm
trên cơ sở phân tử kích thước, phân vùng, và hấp thụ.
Q trình này là hồn tồn tự động. Đây là một dọn dẹp postextraction
có hiệu quả cao phương pháp để loại bỏ nhiễu cao, trọng lượng phân tử như
chất béo, protein, và chất màu từ mẫu chiết xuất trước khi phân tích. Thủ tục
này có thể được tự động và thích hợp cho tinh chế ma trận phức tạp với một
nội dung chất lỏng cao [27,46].
Làm sạch mẫu béo là tốn thời gian, và thường được yêu cầu
hơn một bước. Trong hầu hết các trường hợp sau khi GPC giải nén có thể
được tách ra vào khác nhau các chất hút bám sử dụng các phương pháp khác
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

13


nhau sắc ký. Sự kết hợp của hai kết quả kỹ thuật để làm sạch hai chiều mạnh
mẽ bởi kích thước phân tử và phân cực. Bởi vì kích thước lớn của cột GPC,
nồng độ thu được phần nhỏ trước khi bước thứ hai là cần thiết [27,59].
Để loại bỏ các chất béo từ mẫu trong phương pháp làm sạch tại chỗ được
phát triển. Loại bỏ chấn lưu có thể đạt được bằng cách thêm sorbents như
Florisil, alumina, và silica gel để các tế bào PLE, mà giữ lại đồng khai thác

vật liệu từ trích xuất [27].
2,6. Phương pháp sắc ký và vai trị của nó trong phân tích ngun
liệu thực vật.
2.6.1 sắc ký khí.
Sắc ký khí (GC) được sử dụng chủ yếu cho phân tích dễ bay hơi,
unpolar (hydrophobe) các hợp chất như các thành phần của tinh dầu và
unpolar khác thành phần chính nó (loại khác nhau của tecpen).
Bây giờ nó thường được kết hợp với khối phổ (GC-MS). Kỹ thuật này cho
phép đo trọng lượng phân tử của hợp chất và một lần một phân tử ion đã
được xác định, nó có thể đo ion này chính xác để xác định chính xác số
lượng hydrogens, nguyên tử cacbon, oxy, và các nguyên tử khác có thể có
mặt trong phân tử. Điều này sẽ cung cấp cho một cơng thức phân tử. Một số
kỹ thuật có sẵn trong MS, trong đó có tác động điện tử được sử dụng rộng
rãi. Kỹ thuật này cung cấp cho phân mảnh tốt của phân tử và rất hữu ích cho
sáng tỏ cấu trúc như các mảnh vỡ có thể được được giao cho các nhóm chức
năng có mặt trong phân tử. Những bất lợi của điều này kỹ thuật là các ion
phân tử đôi khi vắng mặt. Mềm kỹ thuật như ion hóa hóa học (CI), ion hóa
electrospray (ESI), và bắn phá nguyên tử nhanh (FAB) phổ khối lượng ion
hóa các phân tử với ít năng lượng hơn, do đó, phân tử ion hiện nay, nhưng
với thơng tin phân mảnh ít hơn cho cấu trúc sáng tỏ mục đích. Ví dụ, kỹ
thuật GC-MS đã được sử dụng để phân tích biến động các hợp chất hiện
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

14


diện trong các loại khác nhau của-cây bạc hà piperita như tinh dầu bạc hà,
menthone, isomenthone, 1,8-cineole, limonene, và như vậy [60].
2.6.2 Sắc ký lỏng hiệu năng cao
Sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC) hiện đang phổ biến và rộng rãi

được sử dụng để phân tích và cách ly các sản phẩm tự nhiên hoạt tính sinh
học. các phân tíchđộ nhạy của kỹ thuật này, đặc biệt là khi được kết hợp với
phát hiện tia cực tím như photodiode mảng (DAD), cho phép việc mua lại
của quang phổ tia cực tím của các đỉnh tẩy rửa 190-800 nm. Tỷ lệ dòng chảy
của hệ thống này thường được 0,5-2,0 ml = min và tải mẫu ở chế độ phân
tích cho phép phát hiện và phân tách các nhà máy trích xuất các thành phần.
Với phát hiện UV DAD, thậm chí các hợp chất với tia cực tím nghèo đặc
tính có thể được phát hiện.
HPLC là một kỹ thuật có độ nhạy cao khi cùng với thư viện điện tử
tìm kiếm các hợp chất với quang phổ tia cực tím được biết đến. Phần mềm
hiện đại cho phép Quang phổ tia cực tím của các đỉnh tẩy rửa được so sánh
với quang phổ được lưu trữ điện tử, do đó cho phép nhận dạng các hợp chất
được biết đến, hữu ích, so sánh các hợp chất mới với một quang phổ tia cực
tím tương tự, có thể cho biết cấu trúc giống nhau. Nó cũng có thể tăng kích
thước của các thư viện này điện tử và nâng cao sức mạnh tìm kiếm của kỹ
thuật này. HPLC là một kỹ thuật mạnh mẽ cho dấu vân tay của chiết xuất
hoạt tính sinh học và để so sánh có thể được rút ra với sắc ký và quang phổ
tia cực tím được lưu trữ trong một thư viện điện tử. Điều này hiện đang rất
quan trọng cho việc kiểm soát chất lượng của các loại thuốc thảo dược.
Với HPLC, có thể được chạy trong chế độ hoàn toàn tự động, và
autosamplers băng chuyền, nó có thể phân tích hàng chục đến hàng trăm
mẫu. HPLC bộ máy chạy máy tính điều khiển và sắc ký có thể được lập
trình. Máy tính cũng được sử dụng cho việc lưu trữ dữ liệu sắc ký. Công
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

15


nghệ hiện đại có thể được áp dụng sorbents cột, bao gồm các sorbents tiêu
chuẩn như silica và nhôm, đảo ngược giai đoạn C8 C18, giai đoạn văn

phòng phẩm, phenyl và sorbents hiện đại như cực ngoại quan giai đoạn văn
phịng phẩm (CN-diol, aminopropyl-silica), giai đoạn văn phịng phẩm
chiral, kích thước-gel loại trừ các phương tiện truyền thông, và trao đổi ion.
Tính linh hoạt của giai đoạn văn phịng phẩm đã thực hiện HPLC một
phương pháp rất phổ biến cách ly sinh thử nghiệm hướng dẫn.
HPLC là một kỹ thuật có độ phân giải cao, với hiệu quả, nhanh chóng phân
tách. Nhất pha tĩnh được sử dụng rộng rãi là C18 (ngược pha) sắc ký, nói
chung sử dụng acetonitrile = nước hoặc nước = hỗn hợp methanol như giai
đoạn di động. Những giai đoạn di động có thể chạy trong chế độ rửa giải
Gradient, trong đó nồng độ của một dung môi đặc biệt là tăng trong một
khoảng thời gian, bắt đầu từ, ví dụ, 100% nước và tăng 100% acetonitrile
hơn 30 phút, hoặc trong chế độ rửa giải isocratic, trong đó một thành phần
khơng đổi (ví dụ, 70% acetonitrile trong nước) được duy trì trong một thiết
lập khoảng thời gian.
2.6.3 Điện di và dòng electron trong sắc ký.
Điện di đã được biết đến trong nhiều năm nhưng đạt được sự chú ý
rộng rãi khi Jorgenson và Lukacs đã chứng minh các ống thạch anh nhỏ. Kể
từ đó thời gian mao mạch điện di (CE) có được phương pháp rất phổ biến để
tách các hợp chất hoạt động.
Tách thu được bằng cách khác biệt giữa các di chuyển của chất tan
trong một điện lĩnh vực, thúc đẩy bởi hai lực lượng, di chuyển điện di và
điện thẩm thấu dòng chảy. Di cư vào khu riêng biệt là do sự khác biệt vào
mobilities điện di có liên quan đến tỷ lệ khối lượng-phí. Trong một cơng cụ
CE điển hình, chất phân tích được giới thiệu tại cực dương và được phát
hiện ở cực âm [61,62].
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

16

Các thiết bị cho CE là rất đơn giản và rẻ tiền. Một ống mao mạch điển
hình là Dài 25-75 cm và được làm bằng silica. Các máy dò được sử dụng
rộng rãi nhất cho giám sátchất chuyển hóa cây trồng là một cực tím (UV)
quang phổ [61]. CE đã được cùng cũng phổ khối thông qua một giao diện
ESI [62].
Các lớp học khác nhau của các hợp chất đã được phân tích với CE và
kết quả có thể so sánh HPLC trong khi CE cung cấp lợi thế về hiệu quả cao,
đơn giản, dung môi tiêu thụ thấp, và thời gian phân tích ngắn. CE phương
pháp cho phép sử dụng một lượng rất nhỏ của mẫu vì kích thước nhỏ của các
mao mạch. Các quan trọng là lợi thế lớn bề mặt tỷ lệ khối lượng cho phép áp
dụng điện lớn có tiềm năng trên các mao mạch [62].
Việc sử dụng của các mao mạch làm cho có thể sử dụng điện trường
rất mạnh mẽ làm giảm đáng kể thời gian cần thiết cho việc tách hiệu quả
[63]. Số lượng
CE các ứng dụng đang phát triển nhanh chóng đặc biệt là dược phẩm
phân tích khơng có độ nhạy cao nhưng sự phân ly hiệu quả thường là một
vấn đề lớn [64].
Nhược điểm bao gồm độ nhạy thấp so với HPLC và hạn chế trong
chuẩn bị quy mơ. CE có thể là một sự thay thế phân tích địi hỏi phải có hiệu
quả cao hơn hoặc độ phân giải hơn HPLC [61].
CE là một phương pháp vi phân tích cung cấp những lợi thế về tốc độ,
hiệu quả cao, chi phí thấp và đơn giản. Nó có thể được áp dụng cho việc tách
các lớp học của các hợp chất bằng cách sử dụng cùng một thiết bị khác nhau,
chỉ thay đổi thành phần của bộ đệm. CE có thể được sử dụng trên mạng với
các kỹ thuật khác như HPLC, NMR, MS. Nó cần lượng nhỏ mẫu và đệm
[65].

Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

17

Một số chế độ của CE là có sẵn, khu vực điện di mao mạch (CZE),
Micellar sắc ký điện động (MEKC), mao mạch điện di gel (CGE), mao mạch
tập trung đẳng điện (CIEF), mao mạch isotachophoresis (CITP),
electrochromatography mao mạch (CEC), và CE-nhưng nonaqueous CZE
MEKC là phổ biến nhất để phân tích phytochemical [61].
CZE, mao mạch có chứa chất điện phân chạy được treo giữa hai
hồ chứa bộ đệm và mẫu được giới thiệu vào cuối anot. Một tiềm năng lớn
áp dụng trên các mao mạch và chất di chuyển theo điện di của nó
di động. MEKC, dung dịch đệm có bề mặt (ví dụ như, sodium dodecyl
sulfate) trong một nồng độ cao hơn nồng độ quan trọng của micelle. Chất
phân tích có thể phần cứ vào mixen hình thành như một giai đoạn văn phòng
phẩm [62,63]. MEKC cũngm rất hữu ích cho kém tan trong mẫu nước [62].
Việc sử dụng gel (CGE) đã thực hiện một tác động đáng kể về phân peptide.
Crosslinked gel có thể làm việc như lưới lọc phân tử và phân biệt các chất
trên cơ sở trọng lượng phân tử (Ed). Các ứng dụng của kỹ thuật điện di
tách các hợp chất khác nhau từ vật liệu tự nhiên được mô tả trong một số
xem xét các giấy tờ [62,63,65,66].
CEC là một kỹ thuật kết hợp những lợi thế của CZE (cao hiệu quả)
HPLC (chọn lọc cao). Các chất tan được vận chuyển qua cột
dòng điện thẩm thấu (EOF) của dung môi hoặc bằng điện di động của mình,
và có ít khu vực mở rộng hơn trong LC [67,68]. Trên cơ sở của sự khác biệt
trong định dạng cột, ba chế độ của CEC có thể được phân biệt với các cột
đóng gói, với cột đá nguyên khối (silica và vật liệu polymer) và định dạng
mở-hình ống, với một giai đoạn văn phòng phẩm như một lớp phủ trên các
bức tường của một mao mạch (OT-CEC) [69].
Một thêm lợi thế của CEC là thiếu hạn chế áp lực cho phép sử dụng
các hạt nhỏ hơn trong LC. Chất tan được tách ra theo phân vùng của họ
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

18


giữa các giai đoạn di động và văn phòng phẩm và, khi được tích điện, điện
di của họ di động [64].
2.6.4 CÁC PHƯƠNG PHÁP (GC-MS, LC-MS, LC-NMR)
Nhanh chóng phát hiện các sản phẩm tự nhiên có hoạt tính sinh học
đóng một vai trị mang tính chiến lược trong điều tra phytochemical chất
chiết xuất từ thực vật thô. Hyphenated kỹ thuật như như HPLC cùng với
phát hiện UV mảng photodiode (LC-DAD-UV) và hàng loạt phổ (LC-MS
hoặc LC-MS-MS) cũng như GC-MS) cung cấp trực tuyến nhiều cấu trúc
thông tin trên các chất chuyển hóa trước khi cơ lập. Việc sử dụng của tất cả
các hyphenated kỹ thuật cho phép xác định nhanh chóng cấu trúc của nhà
máy được biết đến các thành phần với một số lượng phút của nguyên liệu
thực vật. Với cách tiếp cận như vậy, cô lập thời gian tiêu thụ các sản phẩm tự
nhiên phổ biến là tránh được và một hiệu quả nhắm mục tiêu cô lập của các
hợp chất trình bày thú vị spectroscopical hay sinh học tính năng có thể được
thực hiện.
Chất chiết xuất từ thực vật thơ là hỗn hợp rất phức tạp có chứa đôi khi
hàng trăm hoặc hàng ngàn các chất chuyển hóa khác nhau. Bản chất hóa học
của các thành phần khác nhau đáng kể trong một chiết xuất nhất định. Sự
thay đổi của các hóa lý thơng số của các hợp chất này gây ra rất nhiều vấn đề
phát hiện. Mặc dù các loại khác nhau của máy dò LC tồn tại, chẳng hạn như
tia cực tím, hồng ngoại, huỳnh quang, điện, bay hơi tia laser ánh sáng tán xạ,
vv, khơng có giấy phép phát hiện tất cả các thứ chất chuyển hóa gặp phải
trong một chiết xuất thực vật trong một phân tích duy nhất. Ví dụ,
Một sản phẩm khơng có mang màu quan trọng có thể khơng được phát hiện
bởi máy dò UV.

Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

19


Phát hiện tất cả các hợp chất này có thể được thực hiện bởi khối phổ
(MS) phát hiện, có thể được coi là lý tưởng như kỹ thuật phát hiện phổ quát.
Hiện nay, MS là phương pháp nhạy cảm nhất của phân tích phân tử và có
tiềm năng mang lại một thông tin về trọng lượng phân tử cũng như cấu trúc
của chất phân tích. Hơn nữa, do điện cao tách khối lượng, rất tốt lựa chọn
có thể thu được. Vấn đề chính của việc sử dụng LC-MS trong sản phẩm tự
nhiên hóa học nằm trong các ion hóa của các hợp chất tìm thấy trong một
chiết xuất thực vật thô. Thật vậy, nếu nhiều LC-MS giao diện tồn tại trên thị
trường, không ai trong số họ cho phép một thực tế ion hóa phổ quát của tất
cả các thành phần cấu tạo của một chiết xuất thực vật. Mỗi của các giao diện
này đặc tính và phạm vi riêng của mình các ứng dụng, và một vài người
trong số họ rất thích hợp cho phân tích các chất chuyển hóa thực vật thứ yếu.
[70].

Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

20


Tài liệu tham khảo
1. Heinrich, M. et al, nguyên tắc cơ bản của Pharmacognosy và
Phytotherapy, Elsevier Khoa học, Churchill Livingstone, Edinburgh, năm
2004.
2. Gathercoal, E.N. và Wirth, EH, Pharmacognosy, Lea & Febiger,
Philadelphia, năm 1947.

3. Youngken, HW, sách giáo khoa của Pharmacognosy, phiên bản 6,
Công ty Blakiston, Philadelphia, Toronto, 1950.
4. Mroczek, T., Widelski, J., và Glowniak, K., Tối ưu hóa
pyrrolizidine khai thác alkaloid từ nguyên liệu thực vật. Chem. Hậu môn, 51,
567, 2006.
5. Luque de Castro, MD và Garcia-Ayuso, LE, Soxhlet khai thác vật
liệu rắn: cửa hàng kỹ thuật với đầy hứa hẹn tương lai sáng tạo, hậu môn.
Chim. Acta, 369, 1, 1988
6. Wang, L. và Welle, CL, tiến bộ gần đây trong khai thác của
Nutraceuticals từ các nhà máy, Xu thế thực phẩm Khoa học. Công nghệ cao,
17, 300, 2006.
7. Raynie, D.E., kỹ thuật khai thác hiện đại,. Chem, 76, 4659, 2004.
8. Luque-Garcia, JL và Luque de Castro, MD, tập trung sự trợ giúp của lị vi
sóng Soxhlet khai thác các thiết bị và các ứng dụng, Talanta, 64, 571, 2004.
9. Luque-Garcia, JL và Luque de Castro, MD, Soxhlet khai thác sự trợ
giúp của siêu âm: một cách tiếp cận expeditive để điều trị mẫu rắn. Áp dụng
đối với việc khai thác của tổng số chất béo từ hạt có dầu, J. Chromatogr.
Một, 1034, 237, 2004.
10. Lang, Q. và Wai, CM, chất lỏng siêu tới hạn khai thác trong sản
phẩm thảo dược và tự nhiên nghiên cứu - đánh giá thực tế, Talanta, 53, 771,
2001.
Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

21


11. Lancas, FMMC, Queiroy, MEC, và da Silva, ICE, hạt giống dầu
khai thác với siêu carbon dioxide đổi với pentane, Chromatographia, 39,
687, 1994.
12. Teng, WY, Chen, CC, và Chung, RS, HPLC so sánh của chất lỏng

siêu tới hạn khai thác và chiết dung môi của coumarins từ vỏ của trái cây
Citrus maxima, Phytochem., 16, 459 năm 2005.
13. Ashraf-Khorassani, M., Gidanian, S., và Zamini, Y., Ảnh hưởng
của nhiệt độ, áp suất, sửa đổi, sửa đổi lần tập trung và mẫu ma trận về việc
khai thác chất lỏng siêu tới hạn hiệu quả của các hợp chất phenolic khác
nhau, J. Chromatogr. SCI, 33, 658, 1995.
14. Luque de Castro, MD và Jimeènez-Carmona, MM, ở đâu là siêu
tới hạn fuid khai thác đi? Xu hướng Chem, 19, 223, 2000.
15. Chemat, S. et al, So sánh khai thác truyền thống và sự trợ giúp của
siêu âm. carvone và limonene từ hạt giống cây caraway, hương vị Frag. J.,
19, 188, 2004.
16. Choi, Y.H. et al. So sánh khai thác carbon dioxide siêu tới hạn với
dung môi khai thác của nonacosan-10-ol-amyrin acetate, một, squalene và
stigmasterol từ dược liệu các nhà máy, Phytochem. , 8, 233, 1997.
17. King, JW, phân tích q trình chất lỏng siêu tới hạn khai thác: một
sự kết hợp synergestic để giải quyết phân tích và các vấn đề quy mơ phịng
thí nghiệm,Xu hướng. Chem, 14, 474, 1995.
18. Cocero, MJ và cộng sự chiết xuất siêu tới hạn của các sản phẩm
khơng bão hịa. Sự xuống cấp của b-carotene trong các quá trình chiết xuất
siêu tới hạn, J. Supercrit. Chất lỏng, 19, 39, 2000.

Cao Thị Hải Yến- cao học 18 hóa học

22