Nghiên cứu phối tạo công thức pha chế thuốc tiêm đông khô carboplatin 50mg lọ dùng điều trị ung thư

1
B GIÁO D C VÀ ĐÀO T O
Đ I H C ĐÀ N NG

LÊ NG C V NH

NGHIÊN C U PH I T O CÔNG TH C PHA CH
THU C TIÊM ĐÔNG KHÔ CARBOPLATIN
50MG/L DÙNG ĐI U TR UNG THƯ

Chuyên ngành: Hóa h u cơ
Mã s : 60.44.27

TĨM T T LU N VĂN TH C SĨ KHOA H C

Đà N ng - 2011


2
Cơng trình đư c hồn thành t i
Đ I H C ĐÀ N NG
-------------------

Ngư i hư ng d n khoa h c: GS.TS. Đào Hùng Cư ng

Ph n bi n 1: PGS.TS.Ph m Văn Hai
Ph n bi n 2: PGS.TS.Tr n Văn Th ng

Lu n văn s ñư c b o v trư c H i ñ ng b o v ch m Lu n
văn t t nghi p Th c sĩ khoa h c h p t i Đ i h c Đà N ng vào ngày
27 tháng 08 năm 2011.

Có th tìm hi u Lu n văn t i:
- Trung tâm Thông tin - H c li u - Đ i h c Đà N ng
- Thư vi n trư ng Đ i h c Sư ph m - Đ i h c Đà N ng


3

M

Đ U

1. LÝ DO CH N Đ TÀI
Đông khô (lyophilization) hay cịn g i là làm khơ thăng hoa, là
m t trong các phương pháp làm khơ đư c áp d ng nhi u hi n nay trong
lĩnh v c th c ph m và dư c ph m. Trong bào ch thu c, cơng ngh
đơng khơ khá ph bi n t i m t s nư c, ñ c bi t ñ i v i các s n ph m
kém b n v i nhi t, các s n ph m kém b n trong dung d ch khi b o qu n
trong th i gian dài.
Vi t Nam hi n nay trong lĩnh v c dư c ph m ch có vài cơng
ty như cơng ty Dư c Phú Yên, công ty Dư c Vĩnh Phúc b t ñ u tri n
khai công ngh ñông khô trong s n xu t nên khơng đ đáp ng đư c
nhu c u s d ng các ch ph m đơng khô ngày m t tăng.
Các ch ph m paraplatin, carboplatin teva d ng thu c tiêm
đơng khơ hi n nay ñ u nh p t nư c ngoài. Vi c tri n khai áp d ng
cơng ngh đơng khơ vào nghiên c u s n xu t thu c nh m ñáp ng cho
nhu c u ñi u tr trong nư c, thay th d n các thu c nh p ngo i. Do đó
tơi ch n đ tài: “Nghiên c u ph i t o công th c pha ch thu c tiêm
đơng khơ Carboplatin 50 mg/l dùng đi u tr ung thư”.
2. M C ĐÍCH NGHIÊN C U

Xác ñ nh hàm lư ng thích h p nh t c a các tá dư c ñ ph i t o
v i ho t ch t nh m t o ra thu c tiêm đơng khơ Carboplatin đ t các tiêu
chu n cơ s dùng ñ ch a b nh ung thư.
3. Đ I TƯ NG VÀ PH M VI NGHIÊN C U
3.1. Đ i tư ng nghiên c u: Thu c tiêm đơng khơ carboplatin, th c
hi n t i Công ty Dư c và trang thi t b Y t Bình Đ nh
3.2. Ph m vi nghiên c u: Nghiên c u ph i t o công th c pha ch
thu c tiêm đơng khơ Carboplatin 50mg/l dùng ñi u tr ung thư.
4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U


4
4.1. Tham kh¶o các tài li u có liên quan
4.2. Ch n các thành ph n tá dư c d a trên các th c nghi m
5. Ý NGHĨA KHOA H C VÀ TH C TI N C A Đ TÀI
T o ra cơng th c thu c tiêm đơng khơ Carboplatin dùng trong
đi u tr b nh ung thư.
6. C U TRÚC C A LU N VĂN
Ngoài ph n m ñ u, k t lu n tài li u tham kh o, trong lu n văn
g m có các chương như sau :
Chương 1. T NG QUAN TÀI LI U
Chương 2. NH NG NGHIÊN C U TH C NGHI M
Chương 3. K T QU .

Chương 1. T NG QUAN TÀI LI U
1.1. T NG QUAN V K THU T ĐƠNG KHƠ
1.1.1. Khái ni m, ưu đi m và h n ch
1.1.2. Q trình đơng khơ
1.2. T NG QUAN V THU C TIÊM ĐÔNG KHÔ
1.2.1. Khái ni m

1.2.2 Các y u t nh hư ng ñ n ch t lư ng công th c
* T l nư c trong dung môi: Nư c là môi trư ng thu phân r t
nhi u dư c ch t có các liên k t hoá h c d b thu phân như este,
lacton, lactam, ... M t trong nh ng bi n pháp h n ch thu phân dư c
ch t là gi m t l nư c trong h n h p dung môi b ng vi c s d ng các
dung mơi khan đ ng tan v i nư c như propylen glycol, ethanol,
glycerin, ... ñ thay th m t ph n ho c toàn b lư ng nư c trong dung
d ch. Ngồi ra cịn dùng h n h p tert-butanol và nư c (20:80) khi c n
tăng s hoà tan tr l i c a b t đơng khơ vì nó t o ra b m t ti p xúc l n
sau q trình đơng khơ.
* Đ pH c a dung d ch đơng khơ: pH c a dung d ch hịa tan sau
đơng khơ và pH c a dung d ch đơng khơ thư ng tương t nhau.
Kho ng giá tr pH ñư c l a ch n v i m c đích làm cho s n ph m có đ


5
b n cao. N u t i pH mà thu c n ñ nh nh t nhưng dư c ch t thì ít tan
thì có th dùng h n h p dung môi hay ch t trung gian t o ph c d tan
hay các ch t ñi n ho t ñ làm tăng ñ tan c a dư c ch t. Trong quá
trình b o qu n, pH c a thu c tiêm có th thay đ i do các ch t có trong
thành ph n bao bì th y tinh hoà tan d n vào dung d ch ... t o ra s bi n
ñ i c a dư c ch t. Do v y, đ duy trì pH c a dung d ch thu c tiêm n
ñ nh giá tr thích h p nào đó c n dùng h ñ m.
* Đi u ki n pha ch : (a) Nhi t đ dung d ch cao thì ho t ch t d
tan tuy nhiên làm gi m ñ

n ñ nh c a ho t ch t. (b) Th i gian pha ch

các dung d ch thu c càng ng n càng t t, tuy nhiên có nhi u y u t
khách quan nh hư ng ñ n th i gian pha ch như: c lô s n xu t, t c ñ

l c dung d ch, t c đ đóng chai….
* Bao bì: Bao bì ch a s n ph m có nh hư ng l n ñ n ñ

n

ñ nh c a s n ph m trong quá trình pha ch và trong su t th i gian b o
qu n s n ph m. Thư ng s d ng l th y tinh có th tích 2ml, 3ml, 5ml
đ n 10ml. Đáy l càng ph ng s giúp cho quá trình d n nhi t t t hơn
khi gia nhi t.
L th y tinh màu có tác d ng ngăn c n b c x t ngo i, giúp b o
v thu c tiêm có dư c ch t nh y c m v i ánh sáng. Song thành ph n
c a th y tinh màu l i có s t oxyd hay mangan oxyd, các v t ion kim
lo i n ng này có th hịa tan t b m t bao bì vào thu c và xúc tác q
trình oxy hóa dư c ch t nhanh hơn. L th y tinh trong có ưu đi m
khơng ch a các v t ion kim lo i n ng nhưng l i không ngăn c n b c x
t ngo i.
Nút ñ y làm b ng cao su có x rãnh cho hơi nư c thốt ra ngồi
trong q trình đơng khơ. Cao su s d ng làm nút ñ y làm gi m thi u
tương tác thu c và ñ ñ ng, cũng như ch ng s xâm nh p hơi nư c t
môi trư ng ngoài.
1.3. CARBOPLATIN


6
1.3.1. C u trúc hóa h c
1.3.2. Tính ch t lý hóa
1.3.3. Ch đ nh
1.3.4. Ch ng ch đ nh
1.4. CÁC TÁ DƯ C
1.4.1. nh hư ng c a tá dư c ñ n ch t lư ng s n ph m

Các s n ph m thu ñư c t q trình đơng khơ ph i đ m b o: Đ
m th p, th i gian n ñ nh dài; kh i s n ph m thu ñư c nguyên v n; d
dàng hòa tan tr l i khi hòa tan v i dung mơi; tính ch t c a ho t ch t
khơng thay đ i sau khi hịa tan tr l i. Kh i s n ph m đơng khơ thư ng
có đ x p thích h p giúp ho t ch t d dàng hòa tan tr l i do có di n
tích b m t l n. Tuy nhiên kh i x p ph i có ñ ñ b n cơ h c ñ duy
trì hình d ng trong su t q trình đơng khơ và su t th i gian b o qu n
s n ph m. M t khác n u ñ x p c a kh i s n ph m th p s làm c n tr
s thăng hoa c a nư c do đó q trình đơng khơ s kéo dài ho c s n
ph m s không khô.
Các y u t
t ng h p s

nh hư ng ñ n ch t lư ng c a khung x p: Là k t qu

nh hư ng c a các y u t thành ph n, đó là tá dư c đ n t o

khung; tá dư c ch ng oxi hóa; tá dư c n ñ nh pH…Vi c l a ch n các
tá dư c ñưa vào thành ph n c a dung d ch đem đơng khơ ph i chú ý t i
kh năng hút m, tr ng thái v t lí c a tá dư c trong q trình đơng
khơ... vì chúng có th

nh hư ng t i s thu phân c a dư c ch t. Hàm

lư ng nư c cịn trong ch ph m đơng khơ khơng ch quy t đ nh b i các
thơng s k thu t trong q trình đơng khơ mà cịn ph thu c khá l n
vào tá dư c ñã s d ng.
Di n tích b m t và chi u dày c a dung d ch đem đơng khơ:
Dung d ch đem đơng khơ ch a trong d ng c ph i có di n tích b m t
và chi u dày thích h p đ thu n l i cho quá trình thăng hoa c a nư c.

7
Ngồi ra đ dày và c u t o đáy d ng c ch a nh hư ng ñ n quá trình
truy n nhi t cho s n ph m trong su t q trình đơng khơ nên cũng nh
hư ng ñ n ch t lư ng khung.
1.4.2. Các lo i tá dư c
1.4.2.1. Tá dư c ñ n t o khung
1.4.2.2. Tá dư c ch ng oxi hóa
1.4.2.3. Tá dư c n ñ nh pH
1.5. CÁC CH T T O DUNG MƠI
1.5.1. Ethanol
1.5.2. Đ c tính c a Tert–butanol
1.6. CƠ S LÝ THUY T PHÂN TÍCH PHƯƠNG SAI (ANOVA)
1.6.1. So sánh m t s giá tr trung bình
1.6.2. Bài tốn phân tích phương sai m t y u t (one-way ANOVA)

Chương 2. NH NG NGHIÊN C U TH C NGHI M
2.1. TH C NGHI M KH O SÁT CÁC THƠNG S

CHO QUI

TRÌNH ĐƠNG KHƠ CƠ B N
2.1.1. Th c nghi m kh o sát nhi t đ đơng l nh
Khi nhi t xu ng ñ n nhi t eutecti, ñi n tr s tăng ñ t bi n ñ n
∞. H nhi t ñ dung d ch t t và ghi l i các giá tr ñi n tr theo giá tr
nhi t ñ trong nh ng kho ng th i gian ng n. Nhi t đơng l nh ñư c
ch n ph i th p hơn nhi t eutecti kho ng t 5°C ñ n 10°C.
2.1.2. Th c nghi m kh o sát th i gian đơng l nh
Th i gian đơng l nh là kho ng th i gian đ tồn b dung d ch

đơng k t hồn tồn ng v i đư ng bi u di n

∞ c a q trình kh o sát

nhi t đ eutecti khi h nhi t ñ dung d ch.
2.1.3. Th c nghi m kh o sát th i gian đơng khô


8
Nư c ñá t o thành t giai ño n ñông l nh s thăng hoa tr c ti p
ñi u ki n áp su t c a bu ng ñông khô th p hơn áp su t c a hơi nư c ñá
và nhi t ñ c a giá ñ trong kho ng t -300C ñ n +100C.
Khi ti n hành đơng khơ, l p nư c đá càng gi m, khi v ch phân
cách xu ng ñ n ñi m th p nh t c a l là th i đi m k t thúc q trình
đơng khơ sơ c p. Tính th i gian cho đ n khi m t phân cách h xu ng
ñ n ñi m th p nh t c a l , ta xác đ nh đư c th i gian đơng khơ.
2.1.4. Th c nghi m kh o sát áp su t th i kỳ đơng khơ
V i áp su t càng th p, th i gian đơng khơ s n ph m s rút ng n.
Càng ti n v th i kỳ s y khơ thì áp su t bu ng ph i càng th p.
2.1.5. Th c nghi m kh o sát nhi t ñ và th i gian s y khơ
Theo ph n 1.1.2 c đ nh nhi t s y khô là 300C, th i gian s y
khô s n ph m thay ñ i trong kho ng 10, 15, 20 gi . Ta ch n nhi t ñ
s y khô là 300C và th i gian s y khô là 20 gi .
2.2. PHƯƠNG PHÁP PH I T O CÔNG TH C THU C TIÊM
ĐÔNG KHÔ CARBOPLATIN
2.2.1. Các thí nghi m nghiên c u đ ph i t o công th c
(1) Ch n tá dư c ñ n t o khung; (2) Ch n dung môi pha ch ; (3)
Ch n tá dư c ch ng oxy hóa hi u qu cho s n ph m; (4) Ch n h đ m
thích h p cho s n ph m; (5) Nghiên c u ch n ñi u ki n pha ch phù
h p; (6) Ch n l a bao bì đóng gói phù h p cho s n ph m.

2.2.2. Các tiêu chí đánh giá s n ph m
* C m quan: Quan sát c m quan hình th c kh i b t ph i ñ t tiêu
chu n: B t sau khi ñông khô màu tr ng, khơng đóng trong l th y tinh,
khơng teo vón và khơng n t b kh i.
T th c nghi m, nh ng s n ph m thu đư c t q trình đơng khơ
đư c mơ t : (1) Kh i s n ph m màu tr ng, x p, nguyên v n, hòa tan l i
d dàng cho dung d ch trong; (2) Kh i s n ph m b teo, gi m th tích


9
kh i; (3) S n ph m không khô, sau khi l y ra kh i máy m t ph n kh i
s n ph m tan ch y tr l i; (4) S n ph m khơng hình thành kh i, các
ch t tan t o l p nh y
*Đ

ñáy chai.

m: Đ xác ñ nh ñ

m ta ti n hành như sau:

(1) Cân m t lư ng b t thu c vào chén cân (m1: g m b t thu c và
chén, m: kh i lư ng chén); (2) S y

nhi t ñ 1050C trong 3 gi ; (3)

L y ch ph m ra và làm ngu i trong bình hút m. Cân kh i lư ng thu c
cịn l i m2 (b t thu c còn l i và chén cân); (4) Hàm m ñư c xác ñ nh:
a% =

(m1 − m 2 )
x100
m1 − m

Đ m t kh i lư ng do s y khơ khơng đư c l n hơn 2,0%.
Hàm lư ng: ñ t 90-110 % so v i hàm lư ng trên nhãn.
Đ xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin trong s n ph m ta dùng
phương pháp s c ký l ng hi u năng cao (HPLC).

2.2.3. Các th c nghi m nghiên c u ph i t o công th c thu c
tiêm đơng khơ Carboplatin 50mg
Th c nghi m 1: Nghiên c u ch n tá dư c ñ n t o khung
B ng 2.1. Mơ hình thí nghi m nghiên c u tá dư c ñ n t o khung
Thành ph n

Công th c
1A

1B

1C

1D

1E

1F

1G

Carboplatin (mg)

50

50

50

50

50

50

50

Manitol (mg)

0

50

0

75

0

100

0

C12H22O11. H2O (mg)

0

0

50

0

75

0

100

Nư c c t (ml)

5

5

5

5

5

5

5

Th c nghi m 2: Nghiên c u ch n h dung môi


10
B ng 2.2. Mơ hình thí nghi m nghiên c u ch n h dung môi
Thành ph n

Công th c
2A

2B

Carboplatin (mg)

50

50

Manitol (mg)

50

50

Ethanol- nư c t l 1:4 v th tích (ml)

5

0

Tert-butanol- nư c t l 1:4 v th tích (ml)

0

5

Th c nghi m 3: Nghiên c u ch n tá dư c ch ng oxi hóa
B ng 2.3. Mơ hình thí nghi m nghiên c u tá dư c ch ng oxi hóa.
Thành ph n

Cơng th c
3A

3B

3C

Carboplatin (mg)

50

50

50

Manitol (mg)

50

50

50

EDTA (mg)

2,5

0

2,5

S c khí N2 trong qui trình

0

S c khí N2

S c khí N2

Nư c c t (ml)

5

5

5

Th c nghi m 4: Nghiên c u ch n tá dư c ñi u ch nh pH.
B ng 2.4. Mơ hình thí nghi m nghiên c u tá dư c ñi u ch nh pH.
Thành ph n

Công th c
4A

4B

4C

Carboplatin (mg)

50

50

50

Manitol (mg)

50

50

50

EDTA (mg)

2,5

2,5

2,5

Na2HPO412H2O (mg)

17,9

18,5

21

H3PO4 v a ñ

pH = 5,5

pH = 6,0

pH = 6,5

Nư c c t (ml)

5

5

5

Th c nghi m 5: Nghiên c u ch n ñi u ki n pha ch phù h p.


11
B ng 2.5. Mơ hình thí nghi m nghiên c u đi u ki n pha ch .
Thành ph n

Cơng th c
5A

5B

Carboplatin (mg)

50

50

Manitol (mg)

50

50

EDTA (mg)

2,5

2,5

Na2HPO4.12H2O (mg)

17,9

17,9

H3PO4 v a ñ

pH = 5,5

pH = 5,5

Nư c c t (ml)

5

5

Th i gian pha ch (gi )

5

7

Th c nghi m 6: Nghiên c u ch n bao bì cho s n ph m.
B ng 2.6. Mơ hình thí nghi m nghiên c u ch n bao bì.
Thành ph n

Cơng th c 6A

Carboplatin (mg)

50

Manitol (mg)

50

EDTA (mg)

2,5

Na2HPO4 12H2O (mg)

17,9

H3PO4 v a ñ (mg)

pH = 5,5

Nư c c t (ml)

5

Th i gian pha ch (gi )

5

Chai tr ng 20 ml

1 chai


12

Chương 3. K T QU
3.1. K T QU KH O SÁT CÁC THƠNG S

C A QUY TRÌNH

ĐƠNG KHƠ CƠ B N
Đông khô 5 ml dung d ch (50mg carboplatin + 50mg manitol)
3.1.1. Nhi t đơng l nh: Ti n hành ño ñi n tr c a dung d ch theo
2.1.1. Trong kho ng -20°C ñ n -25°C ñi n tr tăng nhanh đ t bi n.
Theo ph n 2.1.1 thì nhi t đơng l nh c a dung d ch ñư c ch n: -30°C
°
3.1.2. Th i gian ñông l nh: Th i gian đơng l nh là đ tồn b dung
d ch đơng k t hồn tồn. K t qu đo th i gian đơng l nh

6 v trí khác

nhau đư c ghi l i:
V trí

1

2

3

4

5

6

Th i gian (phút)

115

117

118

110

115

112

Trung bình: 114 phút 30 giây. V y ch n 2 gi .
3.1.3. Th i gian đơng khơ: Khi tăng nhi t đ thì nư c bay hơi kh i
m ng lư i tinh th đơng l nh. Th i gian ñông khô b t ñ u t lúc tăng
nhi t ñ ngay sau khi k t thúc giai ño n ñông l nh. K t qu ño th i gian
ñông khơ theo 2.1.3

6 v trí khác nhau đư c ghi l i:

V trí
Th i gian (h)

1
29

2

3

28,5 29,5

4
27,5

5

6

28

30

Ta ch n th i gian đơng khơ là 30 gi .
3.1.4. Áp su t bu ng đơng khơ : Theo ph n 1.1.2 ta ch n áp su t
bu ng trong th i kỳ ñ u là 0,15mbar và

th i kỳ cu i là 0,1 mbar. Áp

su t này đư c duy trì trong su t q trình đơng khơ.
3.1.5. Nhi t đ và th i gian s y khô: Theo ph n 2.1.5 và nh ng kinh
nghi m thì nhi t đ s y khô là 300C và th i gian là 20 gi .

13
B ng 3.4. Các thơng s c a quy trình ñông khô cơ s
Nhi t ñ

Th i gian

Th i gian

Áp su t cu i

Th i gian

đơng l nh

đơng l nh

đơng khơ

chu trình

s y khơ

2 gi

20 gi

o

-30 C

3.2. K T QU

<= 0,1 mbar

20 gi

TH C NGHI M NGHIÊN C U PH I T O

CƠNG TH C
Trong m i cơng th c

các thí nghi m nghiên c u sau ta đ u pha

40 l và quy trình đơng khơ theo b ng 3.4
3.2.1. Ch n tá dư c ñ n t o khung: Thành ph n các công th c ta xem
b ng 2.1; tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2.
* K t qu c m quan
B ng 3.5. K t qu c m quan công th c 1A, 1B, 1C, 1D, 1E, 1F, 1G.
Cơng

S l thu

C m quan

th c

đư c

(1)

(2)

(3)

(4)

1A

36

0

0

0

36

1B

36

35

1

0

0

1C

35

0

17

0

18

1D

37

29

0

8

0

1E

35

0

19

0

16

1F

36

0

6

30

0

1G

35

0

24

0

11

Các tiêu chu n (1), (2), (3), (4) đư c mơ t

2.2.2. D a vào b ng

trên ta có nh n xét sau:
- Cơng th c 1A khơng có l nào có tiêu chu n (1) nên dung d ch
Carboplatin không th t o khung. Cơng th c 1B có 35 l ñ t tiêu chu n
(1) nên dùng 50mg Manitol/5 ml làm tá dư c ñ n là t t nh t. Khi tăng
lư ng manitol

cơng th c 1D, 1F thì ñ x p c a khung gi m. V y

lư ng Manitol có nh hư ng đ n s t o khung.


14
- Hàm lư ng Lactose các m c kh o sát có kh năng t o khung
kém. Cơng th c 1C, 1E, 1G khơng thu l nào đ t têu chu n (1).
V y tá dư c ñ n t o khung ch n là Manitol

hàm lư ng 50mg/5

ml hay 75mg/5ml ( ng v i công th c 1B và 1D).
* K t qu ñ

m s n ph m.

M i cơng th c 1B và 1D đo 6 l theo cách ño ñ

B ng 3.6. K t qu ñ
Tiêu chu n

m

2.2.2.

m công th c 1B và 1D.

Công th c

K t qu

1B

1D

1,02

1,28

1,01

1,38

1,03

1,29

F = 102,1468

1,05

1,38

Fα = 4,9646

1,02

1,36

1,04

1,21

Trung bình

1,0283

1,3167

SD

0,0147

0,0683

RSD %

1,4314

5,1883

Đ

-Đ

m (%)

m trung bình ñ u < 3%

Theo phép th ng kê ANOVA thì giá tr RSD < 2% cho ta bi t ñ
m c a 6 l trong m t công th c khơng chênh l ch nhau nhi u. V y đ
m ñ t s ñ ng ñ u
cho ta bi t ñ

m

công th c 1B. Giá tr RSD > 2%

công th c 1D

6 l trong m t cơng th c có s chênh l ch l n (đ

m khơng đ t ñư c s ñ ng ñ u).
K t qu phân tích ANOVA cho th y có s khác bi t v đ

m

gi a các cơng th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F = 102,1468 > Fα =

4,9646). Đi u này cho th y s khác nhau v hàm lư ng c a Manitol


15
trong hai cơng th c có ý nghĩa. M t khác cơng th c 1B có RSD% =
1,4314 < 2% cịn cơng th c 1D có RSD% =5,1833 > 2%.
K t lu n: Ch n công th c 1B v i tá dư c ñ n 50 mg Manitol.
3.2.2. Ch n dung môi pha ch : Thành ph n các công th c ta xem
b ng 2.2; tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2.
* K t qu c m quan
B ng 3.7. K t qu c m quan s n ph m c a công th c 1B, 2A và 2B
S l thu
C m quan
Cơng th c
đư c
(1)
(2)
(3)
1B
36
35
1
0
2A
35
18
7
10
2B
36

20
8
8
Các tiêu chu n (1), (2), (3), (4) đư c mơ t

2.2.2. D a vào b ng

trên ta th y: Dung môi nư c thì s n ph m có hình th c ñ t tiêu chu n
c m quan cao nh t (cơng th c 1B có 36 l đ t tiêu chu n (1)).
* K t qu ñ

m s n ph m: Ta ti n hành đo đ

cơng th c theo cách ño ñ
B ng 3.8. K t qu ñ
Tiêu chu n

m

m6l c ac 3

2.2.2.

m các s n ph m công th c 1B, 2A, 2B.
Công th c

K t qu

1B

2A

2B

1,02

1,03

1,05

1,01

1,02

1,04

1,03

1,04

1,03

F = 1,0072

1,05

1,03

1,02

Fα = 3,6823

1,02

1,05

1,04

1,04

1,04

1,05

Trung bình

1,0283

1,0350

1,0383

SD

0,0147

0,0105

0,0117

RSD %

1,4314

1,0133

1,1259

Đ

m (%)


16
-Đ

m trung bình đ u < 2%

- Tương t cách phân tích đ
s đ ng đ u

m

ph n 3.2.1 ta rút ra đ

mđ t

c 3 cơng th c 1B 2A và 2B.

- K t qu phân tích ANOVA cho th y khơng có s khác bi t v

đ

m gi a công th c 1B, 2A và 2B v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F <

Fα). V y 3 dung mơi kh o khơng nh hư ng đ n ñ

m s n ph m.

* K t qu hàm lư ng: M i công th c 1B, 2A và 2B ch n 6 l
6 v trí khác nhau khơ ñem ti n hành xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin
theo cách xác ñ nh

2.2.2.

B ng 3.9. K t qu hàm lư ng công th c 1B, 2A và 2B
Tiêu chu n

Công th c

K t qu

1B

2A

2B

92,21

93,01

92,32

92,35

92,68

92,65

Hàm lư ng

92,32

92,36

92,96

F = 2,3093

(%)

92,33

92,95

93,05

Fα =

92,87

92,73

93,06

3,6823

93,01

92,85

93,45

Trung bình

92,515

92,763

92,915

SD

0,3357

0,2341

0,3878

RSD %

0,3629

0,2523

0,4173

Cũng như s phân tích k t qu ñ

m

3.2.1. T các giá tr RSD

< 2% cho ta bi t hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng đ u

c ba cơng th c.

K t qu phân tích ANOVA cho th y khơng có s khác bi t v hàm
lư ng gi a các công th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα ). V y 3
dung môi kh o sát khơng nh hư ng đ n hàm lư ng Carboplatin
cơng th c 1B, 2A và 2B.

ba


17
C 3 cơng th c đ u đ t tiêu chu n đ

m, hàm lư ng. Nhưng

cơng th c 1B (dung mơi nư c) đ t tiêu chu n c m quan cao nh t.
K t lu n: Nư c là dung môi phù h p nh t, ch n công th c 1B.
3.2.3. Ch n tá dư c ch ng oxi hóa: Thành ph n các cơng th c ta xem
b ng 2.3; tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2.
* K t qu c m quan
B ng 3.10. K t qu c m quan s n ph m công th c 1B, 3A, 3B , 3C.
Công th c

S l thu

C m quan

ñư c

(1)

(2)

(3)

1B

36

35

1

0

3A

37

35

1

1

3B

37

36

1

0

3C

36

36

0

0

Các tiêu chu n (1), (2), (3), (4) đư c mơ t

2.2.2. Theo b ng

trên ta th y: Lư ng EDTA thêm vào dung d ch, s c khí nitơ hay nư c
c t pha ch khơng nh hư ng ñ n ch t lư ng khung s n ph m t o thành
(s l ñ t tiêu chu n (1)
* K t qu đ
l

các cơng th c là như nhau)

m s n ph m: M i công th c 3A, 3B và 3C l y 6

6 nơi khác nhau r i ño ñ

m theo cách ño ñ

m

2.2.2..

B ng 3.11. K t qu ñ m công th c 1B, 3A, 3B và 3C.
Công th c
Tiêu
K t qu
chu n
1B
3A
3B

3C
1,02
1,04
1,05
1,05
1,01
1,03
1,06
1,06
1,04
1,04
Đ m
1,03
1,03
F = 2,7559
(%)
1,05
1,01
1,02
1,06
Fα = 3,0984
1,02
1,02
1,03
1,03
1,04
1,01
1,05
1,02
Trung bình 1,028

1,023
1,042
1,043
SD
0,01
0,01
0,01
0,02
RSD %
1,431
1,183
1,413
1,565


18
Cũng như s phân tích đ

m

hàm lư ng đ t ñư c s ñ ng ñ u

3.2.1, giá tr RSD < 2% cho th y
c b n công th c. K t qu ANOVA

cho th y khơng có s khác bi t v đ

m gi a các cơng th c v i m c ý

nghĩa α = 0,05 (F < Fα ). V y lư ng EDTA thêm vào và s c khí N2 vào

nư c khơng nh hư ng ñ n ñ

m c a s n ph m.

* K t qu hàm lư ng: M i công th c ch n 6 l

6 v trí khác

nhau đem ti n hành xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin theo 2.2.2.
B ng 3.12. K t qu hàm lư ng công th c 1B, 3A, 3B và 3C
Tiêu chu n

Công th c
1B

3A

3B

3C

92,21

94,01

95,67

95,92

92,35

94,05

95,43

96,24

Hàm lư ng

92,32

94,53

95,88

96,42

(%)

92,33

94,68

95,65

95,97

92,87

94,54

95,72

96,37

93,01

94,65

95,29

96,51

Trung bình

92,515

94,41

95,6067

96,2383

SD

0,3357

0,3005

0,2121

0,2439

RSD %

0,3629

0,3183

0,2218

0,2534

Cũng như s phân tích k t qu ñ

m

3.2.1, t các giá tr RSD

< 2% cho bi t hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng đ u

4 cơng th c.

B ng 3.13. K t qu x lý s li u hàm lư ng công th c 3A và 1B,
3B và 1B, 3A và 3B, 3C, 3B
Công
3A và 1B
3B và 1B
th c
K t

F = 106,1439 F= 363,6755
qu
Fα = 4,9646
Fα = 4,9646

3A và 3C

3C và 3B

F= 133,9115 F= 22,9129
Fα = 4,9646 Fα = 4,9646


19
D a vào k t qu b ng 3.13 ta so sánh và ch n ra cơng th c nào
đ t tiêu chu n cao nh t. Các công th c 3A và 1B; 3B và 1A; 3A và 1C;
3C và 3B đ u có s khác bi t v hàm lư ng gi a các công th c v i
m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα). Như v y cơng th c nào có hàm lư ng
Carboplatin cao nh t thì ta ch n. Theo k t qu b ng 3.12 ta ch n công
th c 3C (96,2383%) .
K t lu n: N ng ñ EDTA s d ng 0,05% (g/ml) và ti n hành
s c khí Nitơ cho dung d ch trư c khi hịa tan Carboplatin ñ n khi n ng
ñ oxy trong dung d ch < 5 % cho hi u qu ch ng oxi hóa cao nh t. Ta
ch n cơng th c 3C cho các thí nghi m ti p theo.
3.2.4. Ch n tá dư c ñi u ch nh pH: Thành ph n các công th c ta xem
b ng 2.4; tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2.
* K t qu c m quan
B ng 3.14. K t qu c m quan công th c 3C, 4A, 4B và 4C.
Công th c

S l thu

C m quan

ñư c

(1)

(2)

(3)

3C

36

36

0

0

4A

37

36

0

1

4B

36

35

1

0

4C

36

35

1

0

Các tiêu chu n (1), (2), (3), (4) đư c mơ t

2.2.2. D a vào b ng

trên ta có nh n xét sau: Cơng th c 3C, 4A, 4B và 4C đ u có s l ñ t
tiêu chu n (1) cao. V y lư ng ch t ñ m s d ng trong dung d ch khơng
nh hư ng đ n tiêu chu n c m quan kh i s n ph m.
* K t qu đ

m: M i cơng th c ch n 6 l

6 v trí khác nhau

đem ti n hành xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin theo 2.2.2.


20
B ng 3.15. K t qu đ

m cơng th c 4A, 4B và 4C

Cơng th c
Tiêu chu n

K t qu
4ª

4B

4C

1.09

1.05

1.06

1.08

1.06

1.09

1.07

1.08

1.08

F = 1,7687

1.06

1.09

1.09

Fα = 3,6823

1.07

1.06

1.09

1.06

1.07

1.08

Trung bình

1.071667

1.068333

1.081667

SD

0.01169

0.01472

0.01169

RSD %

1.090866

1.37781

1.080781

Đ

m (%)

Gi ng s phân tích k t qu đ

m

3.2.1, t các giá tr RSD <

2% cho th y hàm lư ng ñ t ñư c s đ ng đ u

c ba cơng th c. K t

qu phân tích ANOVA th y khơng có s khác bi t v đ

m

các

cơng th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα ). V y lư ng ch t ñ m
ñưa vào dung d ch khơng nh hư ng đ n đ

m kh i s n ph m.

* K t qu hàm lư ng: M i công th c ch n 6 l

6 v trí khác

nhau đem ti n hành xác đ nh hàm lư ng Carboplatin theo cách xác ñ nh
2.2.2. K t qu hàm lư ng c a các công th c 4A, 4B, 4C ñư c so sánh
v i k t qu hàm lư ng c a công th c 3C.

21
B ng 3.16. K t qu hàm lư ng công th c 4A, 4B, 4C và 3C
Tiêu chu n

Công th c
4A

4B

4C

3C

99,36

97,98

97,13

95,92

98,86

98,01

96,89

96,24

Hàm lư ng

99,57

98,04

97,06

96,42

(%)

99,62

97,65

96,92

95,97

99,48

97,86

97,21

96,37

98,91

97,59

97,05

96,51

99,3

97,855

97,0433

96,2383

SD

0,3338

0,1930

0,122

0,2439

RSD %

0,3361

0,1972

0,1256

0,2534

Trung bình

Gi ng như s phân tích k t qu hàm lư ng
cho ta bi t hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng ñ u

3.2.2, RSD < 2%

c b n công th c.

B ng 3.17. K t qu x lý s li u hàm lư ng c a công th c 3C và 4C;
4B và 4C; 4A và 4B
Công th c
K t qu

3C và 4C

4B và 4C

4A và 4B

F= 52,2858

F= 75,8747

F= 84,2909

Fα= 4,9646

Fα = 4,9646

Fα = 4,9646

D a vào k t qu b ng 3.17 ta so sánh và ch n ra công th c nào
ñ t tiêu chu n cao nh t. Các công th c 3C và 4C; 4B và 4C; 4A và 4B
đ u có s khác bi t v hàm lư ng gi a các công th c v i m c ý nghĩa
α = 0,05 (F < Fα). Như v y cơng th c nào có hàm lư ng Carboplatin
cao nh t thì ta ch n. Theo k t qu b ng 3.16 ta ch n công th c 4C
(99,3%) .
K t lu n: Thành ph n h ñ m cho s n ph m Carboplatin 50mg
trong 5ml dung d ch: Na2HPO4.12H2O là 17,9 mg; Acid phosphoric
v a ñ pH = 5,5. Thí nghi m ti p ta ch n công th c 4A.


22
3.2.5. Ch n ñi u ki n pha ch làm tăng ñ