NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH DNA BẰNG KĨ THUẬT PCR KẾT HỢP VỚI PHÉP ĐO ĐIỆN HOÁ pptx

NGHIÊN CỨU PHÂN TÍCH DNA BẰNG KĨ THUẬT PCR KẾT HỢP VỚI
PHÉP ĐO ĐIỆN HOÁ


A STUDY ON AN ELECTROCHEMICAL BASED DETECTION METHOD
FOR DNA AMPLIFICATION USING PCR


Nguyễn Bá Trung*

Trường Đại học Sư phạm


TÓM TẮT


Trong những năm gần đây, Polymerase chain reaction (PCR) được sử dụng rộng rãi trong nghiên
cứu về di truyền, phân tích pháp y, chuẩn đoán bệnh… Sản phẩm PCR thông thường được phân tích
bằng kĩ thuật điện di phức tạp, đắt tiền và tiêu tốn nhiều thời gian. Trong bài báo này, chúng tôi trình
bày một phương pháp điện hoá đơn giản, sử dụng Hoechts 33258, một chất có hoạt tính điện hoá và có
khả năng khuếch tán vào cấu trúc xoắn kép của DNA, làm chất chỉ thị điện hoá để xác định sự có mặt
của sản phẩm PCR bằng phương pháp đo Linear Sweep Voltametry (LSV) trên hệ 3 điện cực DEP
chip. Kết quả nghiên cứu cho thấy, hiệu quả khuếch đại gen Beta Actin trong human DNA có thể được
xác định hoàn toàn chính xác. So với phương pháp điện di, phương pháp được lập dựng trong bài báo
này nhanh, chính xác và rẻ tiền hơn rất nhiều. Sự thành công của phương pháp này mở ra hướng ứng
dụng trong phân tích y sinh, nghiên cứu sinh học phân tử và kiểm định thực phẩm …


Từ khóa: Hoechts 33258; PCR; Chỉ thị điện hoá; Beta Actin; DEP chip

ABSTRACT


In recent years, Polymerase chain reaction (PCR) has been extensively used in genetic study,
forensic science, and medical diagnosis… The PCR amplification product is normally analyzed by gel
electrophoresis in agarose or polyacrylamide matrix, which is a time consuming, expensive, and
complicated method. In this work, an electrochemical method is proposed for the PCR amplification
detection using Hoechts 33258, an electro-active and dsDNA intercalating dye, as an electrochemical
indicator for qualitative analysis of DNA amplification in combination with Linear Sweep Voltammetry
(LSV) on a three electrode DEP (Disposable electrochemical printed) chip. The result shows that the
amplification of Beta Actin gene from human template DNA can be detected in a short time. Compared
to gel electrophoresis, this method is much cheaper and time saving with high accuracy and sensitivity.
The success of this method hopefully opens the door to medical analysis, biomolecule study, and food
security applications.


Keywords: Hoechts 33258; Polymerase chain reaction; electrochemical indicator; Beta Actin; DEP
chip