Kỹ thuật hỗ trợ sinh sản pot

GVHD: Th.S Trần Thị Phương Nhung
SVTH : Nhóm 9
Lớp : ĐHSH07LT
Bài tiểu luận : Công nghệ sinh học động vật
Nội dung
Nội dung
1. Các rủi ro trong sinh sản
2. Công nghệ hỗ trợ sinh sản
3. Các kỹ thuật hỗ trợ sinh sản

Bảo quản phôi, giao tử.

Xác định giới tính của phôi

Kỹ thuật chuẩn bị giao tử

Kỹ thuật hỗ trợ sinh sản

Cấy truyền phôi

Chuyển phôi
1. Các rủi ro trong sinh sản
1. Các rủi ro trong sinh sản

Vô sinh

Thai ngoài dạ con

Chửa trứng

Đa thai

Vô sinh
Vô sinh

Do đời sống thói quen : rượu, cà phê, thuốc lá, béo phì.

Ở phái nữ: Bất thường trong chu kỳ rụng trứng
Bất thường trong ống dẫn trứng
Lạc nội mạc tử cung

Ở phái nam:Tinh trùng chất lượng và số lượng kém, di
động kém.
Tinh dịch chất lượng kém và thể tích kém.

Khái niệm

Nguyên nhân
Mất hoặc thiếu khả năng
sinh sản khi hai người
chung sống và có quan hệ
trong vòng 2 năm. Biểu
hiện là không thấy thụ
thai, hoặc có thụ thai
nhưng lần nào cũng sẩy.
Vô sinh
Vô sinh
o
Bơm tinh trùng vào buồng tử cung (thụ tinh nhân
tạo):
o
Kích thích buồng trứng

o
Thụ tinh trong ống nghiệm (TTTÔN)
o
Xin trứng, TTTÔN
o
Xin tinh trùng
o
Mang thai hộ
o
ICSI và MESA ICSI
o
Canh ngày rụng trứng và giao hợp xung quanh thời
điểm đó

Khái niệm

Nguyên nhân

Phương pháp điều trị
Thai ngoài dạ con
Thai ngoài dạ con
Chửa ngoài tử cung là trường
hợp trứng không làm tổ ở
buồng tử cung mà trứng làm
tổ ở bất kì nơi nào trên
đường đi của nó.

Khái niệm

Nguyên nhân


Viêm nhiễm vòi trứng : gây tắc, hẹp vòi
trứng và dễ gây ra tình trạng thai ngoài tử cung.

Các bệnh phụ khoa như: Khối u phần phụ, dị
dạng bẩm sinh vòi trứng…

Chất nicotin : Chất nicotin có trong thuốc lá
làm hỏng các nhung mao phủ trên các thành ống
và làm giảm cử động của các vòi trứng, gây khó
khăn cho quá trình trứng thụ tinh tiến về tử cung
Thai ngoài dạ con
Thai ngoài dạ con
Quá trình vào tử cung của trứng sau
khi thụ tinh.
Thai ngoài dạ con
Thai ngoài dạ con

Khái niệm
Chửa trứng
Chửa trứng
Chửa trứng là bệnh của tế bào
nuôi do các gai rau thái hóa
phồng lên tạo thành túi ối chứa
dịch dính vào nhau như chùm
nho. Thường toàn bộ tử cung
chứa các túi dịch (như trứng
ếch).
Là hiện tượng thai nghén không bình thường,
trong đó tổn thương đã làm trứng hỏng, gai

rau vẫn được nuôi dưỡng bằng máu mẹ nên
tiếp tục hoạt động chế tiết gây tinh dịch trong
lớp đệm rau và tế bào nuôi tăng sinh.

Khái niệm

Nguyên nhân
Chửa trứng
Chửa trứng
Chửa trứng
Chửa trứng

Khái niệm

Nguyên nhân

Phương pháp điều trị
Chửa trứng
Chửa trứng
Cơ chế tạo thành chửa trứng
Đa thai
Đa thai
Đa thai là sự phát triển đồng thời hai hay nhiều thai
trong lòng tử cung người mẹ.
Có 2 loại đa thai:

Đa thai 1 trứng

Đa thai khác trứng


Khái niệm
Đa thai
Đa thai

Đó là hiện tượng khi chỉ có một noãn thụ
tinh nhưng trong quá trình phát triển chúng bị
phân đôi hoặc phân ba, bốn…

Luôn cùng giới tính, giống y nhau về mặt di
truyền và có đặc điểm sinh học rất giống
nhau.

Thường xảy ra ở giai đoạn phôi nang, khoảng
cuối tuần thứ nhất và chia đôi mầm phôi
thành hai hoặc nhiều phôi.

Đa thai 1 trứng
Đa thai
Đa thai

Đây là trường hợp các thai nhi được sinh ra do việc thụ tinh
bởi các trứng và tinh trùng khác nhau. Trứng có thể rụng từ
một buồng trứng, hoặc từ hai buồng trứng. Tinh trùng có thể
từ cùng một người đàn ông hoặc từ những người đàn ông
khác nhau

Trẻ đa thai khác trứng có thể cùng giới hay khác giới, không
giống nhau về mặt di truyền.

Đa thai khác trứng

2. Công nghệ hỗ trợ sinh sản
2. Công nghệ hỗ trợ sinh sản
2.1. Kỹ thuật chuẩn bị giao tử

Kỹ
thuật
chuẩn
bị giao
tử
Chuẩn bị
trứng
Cho trứng
Gây rụng trứng nhiều
Thu nhận trứng
Quan sát và phân loại trứng
Nuôi trứng trưởng thành
Chuẩn bị
tinh trùng
Thu nhận tinh trùng
Đánh giá tinh dịch và tinh trùng
Chuẩn bị TT cho kỹ thuật thụ tinh
Chuẩn bị TT cho vi thụ tinh
2.1.1. Chuẩn bị trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
a.Cho trứng
a.Cho trứng

Tiêm GnRHa (DecapepTil 0,1mg) dưới da người cho
trứng/ngày /14 ngày (từ ngày 21 CK kinh nguyệt).


Thử lại LH và E2, nếu hàm lượng LH<5 IU/L và
E2<100pg/ml thì kích thích buồng trứng với FSH/hMG,
nếu chưa đạt, tiêm tiếp GnRHa.

Tiêm phối hợp GnRHa (0,05mg) với FSH (Puregon 50 IU;
100 IU.

Siêu âm từ 2-3 lần nhằm theo dõi kích thước và số lượng
nang trứng. Theo dõi hoocmone (LH, E2) từ ngày thứ 6 sau
kích thích.

Tiêm hCG (Pregnyl 5000 IU) khi xuất hiện ít nhất 2 nang
trứng lớn nhất đạt kích thước siêu âm 17mm nhằm kích
thích trưởng thành nõan.

Chọc hút trứng 35-36h sau khi tiêm hCG.
Phức hợp trứng – tế bào hạt
2.1.1. Chuẩn bị trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
b.
b. Gây rụng trứng nhiều
Mục đích: thu nguồn trứng và cho thụ tinh tự nhiên để
thu nhận nguồn phôi
Phương pháp : Sử dụng PMSG (huyết thanh ngựa chữa) để
gây chín trứng nhanh và FSH (chiết từ tuyến yên cừu/heo) kết
hợp với hoocmon HCG (bò sữa sử dụng PMSG, FSH và HMG)
2.1.1. Chuẩn bị trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
c.
c. Thu nhận trứng

Từ ống dẫn trứng sau khi rụng, từ nang trứng của
buồng trứng, bằng nội soi-siêu âm hoặc bằng giải phẫu
con vật còn sống sử dụng dụng cụ thu nhận trứng rụng
Kỹ thuật thu nhận trứng
+ Phương pháp chọc hút
+ Phương pháp rạch-múc
+ Phương pháp cắt nghiền buồng trứng
+ Kỹ thuật soi ổ bụng
+ Siêu âm xuyên qua niệu đạo
+ Phương pháp rửa nang trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
c.
c. Thu nhận trứng
Kỹ thuật soi ổ bụng
Phương pháp chọc hút
phương pháp siêu âm
2.1.1. Chuẩn bị trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
d.
d. Quan sát và phân loại trứng
Kỹ thuật:
+Làm dẹp phức hợp OCC (phức hợp trứng) để gây xung
động mạnh đĩa nuôi dưới KHV
+Phân tách khối cumulus bằng enzyme: phức hợp OCC đặt
trong đĩa bốn giếng chứa môi trường thu trứng có bổ sung
0,4% BSA và hialuronidase 80 IU/ml tại 370C trong 30-60
giây, dùng pipiette tách lớp cumulus khỏi phức hợp OCC
sau đó rửa trứng vài lần bằng dung dịch thu trứng bổ sung
10% huyết thanh

2.1.1. Chuẩn bị trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
d.
d. Quan sát và phân loại trứng
Tiêu chí đánh giá
Túi mầm: có nhân lớn (túi mầm) hiện diện→các TB bao quanh không
phát triển rộng và bám chặt vào xung quanh là trứng chưa trưởng thành.
Metaphase I: trứng bao lớp TB chặt chẽ và có lớp cumulus bám chặt
xung quanh, ĐK gấp 5 lần ĐK trứng
Metaphase II: Trước khi rụng trứng (từ nang Graff): TB vành corona
áp dính lên trứng,thể cực được đẩy ra. Lớp cumulus mở rộng thành một
khối
Trưởng thành: trứng thấy rõ, lớp cumulus nhiều, cô đặc lớp TB
cumulus, có các giọt đen nhỏ bằng vành corona tái hình thành vây kín
xung quanh TB trứng
Hòang thể hóa: TB mờ nhạt, lớp cumulus bị phá vỡ và trở thành một
khối keo xung quanh trứng
Sẹo hóa: TB hạt bị phân mảnh, giống dây buộc, phân bố lệch về một
phía TB trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
2.1.1. Chuẩn bị trứng
e.
e. Nuôi trứng trưởng thành
Trứng thu nhận, rửa và làm ấm 37
0
C, nuôi trên môi
trường có đệm HEPES, huyết thanh và heparin (đã ủ ở
37
0
C), tiếp tục rửa bằng môi trường nuôi chín sau đó

đưa vào các giọt môi trường nuôi trên đĩa petri, chứa 1-
10 TB trứng/giọt.
Môi trường cho IVM:
+Đơn giản
+Phức tạp
Quá trình phát triển của trứng

Phương pháp kích thích cơ học

Phương pháp dùng âm đạo giả
b. Đánh giá tinh dịch và tinh trùng
-Sử dụng phòng đếm HC → đếm mẫu TT bị làm bất động
→ đánh giá mật độ TT → ước tính độ di động và bất
động → xác định các kiểu di động của TT
2.1.2. Chuẩn bị tinh trùng
2.1.2. Chuẩn bị tinh trùng
a. Thu nhận tinh trùng
a. Thu nhận tinh trùng