Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (1.49 MB, 23 trang )
<span class="text_page_counter">Trang 1</span><div class="page_container" data-page="1">
<small>GVHD: GS.TS. Trần Linh Thước</small>
<b><small>Tổ 5: </small></b>
<small>Phạm Thị Thanh Tình 22C64014Lê Võ Bảo Trân 22C64015 Nguyễn Quốc Vủ 22C64016</small>
<small>1</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 3</span><div class="page_container" data-page="3">• Tác nhân gây loét dạ dày và viêm dạ dày mãn tính. • Nguồn: Acid hữu cơ nhỏ, amino acid, peptide.
Trong nghiên cứu này, chỉ ra việc bổ sung H<sub>2</sub>tăng nồng độ enzyme ACC.
<small>3</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 4</span><div class="page_container" data-page="4"><small>4</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 5</span><div class="page_container" data-page="5"><small>Thu tế bào+ 10ml khuẩn </small>
<small>vào bình 165 ml</small>
<small>5</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 6</span><div class="page_container" data-page="6"><small>6</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 7</span><div class="page_container" data-page="7"><i>H.Pylori </i>
WT 26695
Nuôi cấy BA ở 37°C/36h.
ĐK: vi hiếu khí khơng
đổi
Rửa bằng đệm phosphate pH
7.5 có PMSF
Huyền phù trong 3 ml PBS + French pressure cell 18.000 lb/in<small>2</small>
Loại vụn vỡ TB
Thu dịch nổi
<small>Ly tâm</small>
Thu dịch nổi, phần tế bào màng được huyền phù lại PBS
<small>WT-Ly tâm</small>
<small>Ly tâm</small>
<small>7</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 8</span><div class="page_container" data-page="8"><small>Alkyl hóa </small>
<small>55 mM iodoacetamideKhử 10 mM DTT </small>
<small>50 mM </small>
<small>NH</small><sub>4</sub><small>HCO</small><sub>3</sub><small>-50% acetonitrile </small>
<small>(ACN)Khử màu</small>
<small>Dịch phân cắt được sấy chân không + bảo quản ở -20°C chờ phân tích khối </small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 9</span><div class="page_container" data-page="9"><small>Tạo huyền phù/2% 0,1% FA</small>
<small>ACN-Agilent 1100 capillary liquid chromatograph (LC)</small>
<small>LTQ linear ion trap mass spectrometer</small>
<small>Phổ khối MS/MS thô mzXML Mascot (MGF) </small>
<small>thông qua Proteomic </small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 10</span><div class="page_container" data-page="10"><b><small>Ni trong 7h</small></b>
<small>- Sục khí N</small><sub>2</sub><small>.- Thêm vào: 5mM NaHCO</small><sub>3</sub><small>,</small>
<small> 1,3 Ci NaH14CO</small><sub>3 </sub>
<b><small>Ủ thêm 12h</small></b>
<small>(37oC + 200 v/p)</small>
<small>- Lấy 1 ml dịch nuôi, cho vào mỗi:</small><sup>3 lọ chứa chất </sup>
<small>nhấp nháy </small>
<small>(0,3 ml TCA 60%)</small>
<b><small>Lắc + tủ hút 48h</small></b>
<small>- Mẫu trắng => bỏ.</small>
<small>- Mẫu chứa tế bào.</small>
<b><small>Lặp lại 3 lần</small></b>
<small>- Mật độ tế bào </small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 11</span><div class="page_container" data-page="11"><b>0,5 ml hỗn hợp:</b>
+ 10 U pyruvate kinase
+ 9,3 U lactate dehydrogenase+ 0,1 mM NADH
+ 1 mM acetyl-CoA + 50 µM ATP
<small>Phản ứngỞ 340nm</small>
bổ sung 3 µl dịch chiết tế bào/nước
</div><span class="text_page_counter">Trang 12</span><div class="page_container" data-page="12"><small>12</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 13</span><div class="page_container" data-page="13"><small>13</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 14</span><div class="page_container" data-page="14"><small>14</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 16</span><div class="page_container" data-page="16"><small>17</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 18</span><div class="page_container" data-page="18"><small>18</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 19</span><div class="page_container" data-page="19"><small>19</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 20</span><div class="page_container" data-page="20"><small>20</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 21</span><div class="page_container" data-page="21"><small>21</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 22</span><div class="page_container" data-page="22"><small>22</small>
</div><span class="text_page_counter">Trang 23</span><div class="page_container" data-page="23"><small>23</small>
</div>