KHẢO SÁT THÀNH PHẦN LOÀI PHỤ VÀ THÀNH PHẦN KIỂU HUYẾT THANH CỦA CÁC CHỦNG SALMONELLA NHIỄM TRONG THỰC PHẨM (Mục lục)

MỤC LỤC
CHƯƠNG TRANG
Trang tựa
Lời cảm tạ ...................................................................................................................... iii
Tóm tắt ........................................................................................................................... iv
Mục lục ........................................................................................................................... v
Danh sách các chữ viết tắt ............................................................................................
viii
Danh sách các hình ........................................................................................................ ix
Danh sách các bảng ........................................................................................................ x
Danh sách các biểu đồ .................................................................................................. xi
1. MỞ ĐẦU ............................................................................................................. 1
2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .................................................................................... 3
2.1 Đại cương về Salmonella ....................................................................................... 3
2.1.1 Giới thiệu chung về Salmonella ................................................................... 3
2.1.1.1 Đặc điểm hình thái ................................................................................. 3
2.1.1.2 Phân loại Salmonella theo loài và theo kiểu huyết thanh ...................... 4
2.1.1.3 Sự phân bố của Salmonella....................................................................5
2.1.1.4 Đặc điểm nuôi cấy ................................................................................. 5
2.1.1.5 Đặc điểm sinh hóa ................................................................................. 5
2.1.1.6 Cấu trúc kháng nguyên và độc tố ........................................................... 5
2.1.1.7 Sức đề kháng của vi khuẩn ................................................................... 8
2.1.2 Các đặc điểm gây bệnh của Salmonella ........................................................ 9
2.1.2.1 Điều kiện gây bệnh ................................................................................. 9
2.1.2.2 Cơ chế gây bệnh .................................................................................... 9
2.1.2.3 Các kiểu bệnh chính do vi khuẩn Salmonella ........................................9
2.1.2.4 Nguồn lây nhiễm .................................................................................... 10
2.1.2.5 Triệu chứng gây bệnh ........................................................................... 11
2.1.2.6 Phòng ngừa ............................................................................................ 11
v
2.2 Vấn đề an toàn vệ sinh thực phẩm đối với Salmonella ......................................11

2.2.1 Salmonella trong thực phẩm .........................................................................
11
2.2.2 Tình hình nhiễm Salmonella trong thực phẩm .............................................
12
2.2.3 Các chỉ tiêu về Salmonella trong thực phẩm ............................................... 12
2.3 Phát hiện Salmonella bằng phương pháp nuôi cấy ............................................... 14
2.3.1 Giai đoạn tiền tăng sinh .............................................................................. 14
2.3.2 Giai đoạn tăng sinh chọn lọc ...................................................................... 14
2.3.3 Giai đoạn phân lập ....................................................................................... 15
2.3.4 Khẳng định bằng các phản ứng sinh hóa ..................................................... 17
2.3.5 Phản ứng huyết thanh ngưng kết trên phiến kính để định nhóm hay loại vi
khuẩn...............................................................................................................
18
2.3.6 Các phản ứng sinh hóa xác định các loài phụ Salmonella ........................19
2.4 Một số phương pháp kiểm tra nhanh Salmonella ..............................................21
2.4.1 Phương pháp dựa trên DNA .........................................................................
22
2.4.1.1 Phương pháp PCR .................................................................................
22
2.4.1.2 Phương pháp Realtime – PCR ................................................................
22
2.4.1.3 Phương pháp lai phân tử .........................................................................
22
2.4.2 Phương pháp dựa trên kháng nguyên – kháng thể .......................................
23
2.4.2.1 Phương pháp ELISA.................................................................................
23
2.4.2.2 Phương pháp miễn dịch huỳnh quang ..................................................
23
3. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP TIẾN HÀNH................................................. 24

vi
3.1 Thời gian và địa điểm thực hiện ...........................................................................
24
3.2 Vật liệu ...................................................................................................................
24
3.2.1 Dụng cụ và thiết bị .......................................................................................
24
3.2.2 Hóa chất và môi trường ..............................................................................
24
3.2.3 Vật liệu thí nghiệm .......................................................................................
27
3.3 Phương pháp ..........................................................................................................
27
3.3.1 Phương pháp lấy mẫu và bảo quản mẫu .....................................................
27
3.3.2 Phương pháp bảo quản chủng vi sinh vật .....................................................
27
3.3.3 Phát hiện Salmonella spp. trong thực phẩm bằng phương pháp nuôi cấy . .
28
3.3.3.1 Tiền tăng sinh ..........................................................................................
28
3.3.3.2 Tăng sinh chọn lọc .................................................................................
28
3.3.3.3 Phân lập ..................................................................................................
29
3.3.3.4 Phục hồi ..................................................................................................
30
3.3.3.5 Khẳng định bằng thử nghiệm sinh hóa.....................................................
30
3.3.3.6 Khẳng định Salmonella bằng kháng huyết thanh .................................

32
3.3.4 Xác định S. enterica I .................................................................................
35
vii
3.3.5 Nhận định kết quả .......................................................................................
37
4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN..............................................................................
38
4.1 Khảo sát tỉ lệ tương đối giữa Salmonella enterica I và Salmonella spp. trong
các nhóm thực phẩm............................................................................................
38
4.2 Tỉ lệ phân bố tương đối các loài phụ trong số các chủng Salmonella phân lập được
từ các nhóm thực phẩm ......................................................................................41
4.3 Tỉ lệ phân bố các kiểu huyết thanh Salmonella trong các nhóm thực phẩm ........ 43
5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .................................................................................
47
6. TÀI LIỆU THAM KHẢO...................................................................................
49
viii