flublok vắc xin chống cúm sản xuất từ tế bào côn trùng

Côn Trùng Học Ứng Dụng Vắc - xin FluBlok
ĐẠI HỌC QUỐC GIATHÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN
KHOA SINH HỌC
BÀI BÁO CÁO MÔN CÔN TRÙNG HỌC ỨNG DỤNG
Đề tài:
GVHD: TS. TRẦN PHI HÙNG
SVTH : Hồ Thị Kim Lan
MSSV : 0515283
Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 29 tháng 5 năm 2009
MỤC LỤC
Hồ Thị Kim Lan - 0515283 Trang 1 29/5/2009
Côn Trùng Học Ứng Dụng Vắc - xin FluBlok
1. Tổng quan...........................................................................................Trang 1
2. Giới thiệu về FluBlok.........................................................................Trang 1
3. Giới thiệu về về Baculovirus..............................................................Trang 2
4. Sản xuất vắc-xin chống cúm từ tế bào côn trùng là một
phương thứ ưu thế.............................................................................Trang 4
4.1. Sơ lược về quy trình sản xuất...............................................................Trang 4

4.1.1. Sản xuất vắc-xin từ phôi trứng...........................................................Trang 4
4.1.2. Sản xuất vắc-xin từ nuôi cấy tế bào động vật hữu nhũ......................Trang 4
4.1.3. Sản xuất vắc-xin từ tế bào côn trùng...................................................Trang 5
4.2.So sáng tổng quan về lợi thế giữa quy trình sản xuất vắc-xin
chống cúm từ tế bào côn trùng với các phương thức còn lại..................Trang 5
5. Sản xuất FluBlok................................................................................Trang 9
5.1. Tế bào nền côn trùng expresSF+..........................................................Trang 9
5.1.1. Giới thiệu.............................................................................................Trang 9
5.1.2. Con đường xử lý tế bào.......................................................................Trang 11
5.1.3. Sự dò tìm virus ngẫu nhiên..................................................................Trang 11
5.1.3.1. Cách tiếp cận...................................................................................Trang 11

5.1.3.2. Lựa chọn các họ virus......................................................................Trang 12
5.1.3.3. Lựa chọn các virus đích...................................................................Trang 13
5.2Các thử nghiệm lâm sàng........................................................................Trang 13
6. Kết luận - Đề nghị..............................................................................Trang 15
7. Tài liệu tham khảo.............................................................................Trang 16
FLUBLOK - VẮC-XIN CHỐNG CÚM
Hồ Thị Kim Lan - 0515283 Trang 2 29/5/2009
Côn Trùng Học Ứng Dụng Vắc - xin FluBlok
SẢN XUẤT TỪ TẾ BÁO CÔN TRÙNG
1. Tổng quan
Đối với các nhà sinh học nói riêng cũng như các nhà khoa học và tất cả nhân
loại nói chung đã rất quen thuộc với hai chữ Côn Trùng. Ai cũng biết rằng Côn Trùng
hiện nay là loài động vật có số lượng lớn nhất và đa dạng nhất trên Trái Đất. Tầm
quan trọng của các loài Côn trùng không ai có thể phủ nhận được. Nói về Côn Trùng,
Giáo sư Marcel Dicke, nhà côn trùng học, Đại học Wageningen tại miền nam Hà Lan
cho biết: "Nếu không có côn trùng, thế giới sẽ không giống như những gì có ngày
hôm nay, và thậm chí chúng ta cũng chẳng có dịp có mặt trên đời. Chúng ta hoàn
toàn phụ thuộc vào đời sống của côn trùng, và nên cho mọi người thấy tầm quan
trọng của chúng. Đó chính là mục đích của tuần lễ hội này. Bởi sự thực trái đất là
hành tinh của côn trùng chứ không phải của con người".
(Theo: />nguoi/10977635/188/). Lời khẳng định của Giáo sư Marcel Dicke đã toát lên được
tầm quan trọng của Côn trùng đối với sự sống trên Trái đất này.
Thật vậy, chỉ có 1% còn lại là sâu bọ có hại, trong khi 99% côn trùng là có ích
cho sự sinh tồn của loài người. Nhiều nghiên cứu từ côn trùng đã đem đến cho con
người những ứng dụng mang tính thực tiễn và khoa học rất quý giá. Ngày nay, với sự
phát triển của khoa học kỹ thuật, ngoài những nghien cứu làm sao để Bảo tồn loài
sinh vật quý giá này, thì con người đang càng ngày càng hướng đến việc nghiên cứu
về các ứng dụng của côn trùng, để vừa có thể vừa thực hiện được mục đích bảo tồn,
vừa đem đến cho con người những lợi ích to lớn từ loài động vật với số lượng cực
lớn trong sinh giới. Công ty Protein Corp. (Mỹ) đã thử nghiệm thành công một loại

vắc-xin mới chống cúm ở người, tạo ra từ các tế bào của côn trùng với tên gọi là
FluBlOk (Theo: />chong-cum-tu-te-bao-con-trung.html) Phát hiện này có thể nói đã đem đến cho con
người một niềm hy vọng rất lớn, một phương thức bảo vệ sức khỏe cho nhân loại,
không những thế còn mang đến giá trị kinh tế lớn lao thu nhập được từ việc kinh
doanh loại vắc-xin này.
Bài báo cáo dưới đây xin được phép nói rõ hơn về quy trình sản xuất, các ưu
điểm cũng như những vấn đề xung quanh việc Sản xuất FluBlOk - một vắc-xin chống
cúm được sản xuất từ tế bào côn trùng.
2. Giới thiệu về FluBlok
FluBlok là một ngưng kết tố hồng cầu (trivalent recombinant hemagglutinin -
rHA) tái tổ hợp tam trị, được sản xuất từ các tế bào côn trùng thông qua việc sử dụng
hệ thống biểu thức vector baculovirus (Baculovirus Expression Vector System -
BEVS) cung cấp một giải pháp hấp dẫn so với loại vắc-xin cúm bất hoạt tam trị
(trivalent inactivated influenza vaccines - TIVs) sản xuất từ các tế bào trứng được
dùng lúc bấy giờ. Quy trình công nghệ mới này đem một sự sản xuất vắc-xin an toàn,
Hồ Thị Kim Lan - 0515283 Trang 3 29/5/2009
Côn Trùng Học Ứng Dụng Vắc - xin FluBlok
hiệu quả và nhanh chóng. FluBlok chứa đựng lượng HA cao hơn TIV gấp 3 lần và
trong thành phần không còn chứa đựng Protein trứng hay những chất bảo quản trứng.
Độ thuần khiết cao của sinh kháng thể cho phép một sự tác động ở liều bậc cao mà
không có sự ảnh hưởng lớn của cái gọi là phản ứng phụ lên chủ thể con người. BEVS
là một hệ thống sản xuất an toàn, hạn chế tốc độ phát triển của các sinh vậy không
mong muốn trong quá trình sản xuất. (Theo: />_ob=ArticleURL&_udi=B6WBS-4VVN4T3-
1&_user=10&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&view=c&_acct=C00005022
1&_version=1&_urlVersion=0&_userid=10&md5=063e2de7599dd62efaf78f15c8e4b
4c1 - Cox MM, Hollister JR, Báo cáo FluBlok, a next generation influenza vaccine
manufactured in insect cells, Biologicals (2009),
doi:10.1016/j.biologicals.2009.02.014)
3. Giới thiệu về về
Baculovirus

Baculovirus thường được tìm thấy trong rau xanh, do đó nó trở thành một thành phần
trong chế độ ăn uống lành mạnh của mỗi con người. Cái tên Baculovirus bắt nguồn từ
chữ baculum trong tiếng Latinh - có nghĩa là hình que, mô tả hình dạng của virus.
Baculovirus được xác định bởi một phạm vi hẹp trên sinh vật chủ - đối với các loài
sâu bọ cánh vảy như Bướm - nơi mà chúng gây ra các bệnh chết người. Khi đó,
những côn trùng bị nhiễm độc baculovirus sẽ gây biến tính cấu trúc keo, đặc biệt đối
với các polyhedrin protein. Trong môi trường sống của virus, polyhedrin protein. Bảo
vệ virus khỏi tia cực tím.
Tế bào côn trùng có thể thực hiện nhiều sửa đổi hợp lý đối với các hoạt động
sinh học của các protein phức tạp như quá trình đường hóa, sự hình thành mối liên
kết disulfua, và sự photphoryl hóa.
Hồ Thị Kim Lan - 0515283 Trang 4 29/5/2009
Baculoviruses
( />Côn Trùng Học Ứng Dụng Vắc - xin FluBlok
Nhiều năm qua, hàng ngàn gen đã được tái bản thành công và nhanh chóng
trong tế bào côn trùng. Với hệ thống sản xuất BEVS, protein có thể được sản xuất
trong tuần, thay vì trong tháng, trong năm; bởi vì vius (nói đúng hơn là các dòng gen
của chính virus đó) được biến đổi về mặt di truyền để gây độc cho tế bào côn trùng.
Kiểu gen của baculovirus tương đối nhỏ (khoảng 160 kb) và có thể được nhận
dạng bởi các kiểu gen bị tiêu hủy hoặc bằng kỹ thuật giấy thấm Southern.
Sau khi virus gây nhiễm độc tế bào côn trùng, tế bào sẽ được biến đổi trong một thiết
bị sản xuất protein baculovirus trước khi chết. Những protein (dị dạng) khác nguồn
gốc có thể gây chết tế bào trong phần đời ngắn ngủi còn lại trong vòng đời của
chúng.Các protein liên quan được tạo ra dưới sự điều khiển của promoter polyhedrin
- một trong những promoter mạnh nhất được biết đến. Các protein tế bào côn trùng
sản xuất thường độc hại vì các tế bào này có khả năng thực hiện các sửa đổi và bổ
sung phức tạp. (Theo:
/>B
Baculovirus Expression Vector System (BEVS)
/>Hệ thống BEVS mang lại nhiều lợi thế, và đặc biệt tránh được sự tiếp xúc trực

tiếp của con người với quy trình sản xuất.
Hồ Thị Kim Lan - 0515283 Trang 5 29/5/2009
Côn Trùng Học Ứng Dụng Vắc - xin FluBlok
Con người không tiếp xúc trực tiếp với quy trình sản xuất
(Theo: />DocID=701,686,650,26,12,2,1,Documents&MediaID=618&Filename=Robinson+-
+NCNV+II+(2007).pdf)
4. Sản xuất vắc-xin chống cúm từ tế bào côn trùng là một phương thứ ưu
thế
4.1 Sơ lược về quy trình sản xuất
Hồ Thị Kim Lan - 0515283 Trang 6 29/5/2009
Sản xuất vắc-xin từ phôi trứng
( />Côn Trùng Học Ứng Dụng Vắc - xin FluBlok
4.1.1 Sản xuất vắc-xin từ phôi trứng
Tập hợp, thu nhặt trứng đã được thụ tinh => gây ảnh hưởng với vius cúm, ủ ở
nhiệt độ 32-37
0
C => quay ly tâm LS/HS, xác định bản chất của bệnh thông qua một
sự phân tích chẩn đoán, sắc ký =>Xử lý - xử lý với Formal đehit
4.1.2 Sản xuất vắc-xin từ nuôi cấy tế bào động vật hữu nhũ
Làm tan một lọ nhỏ trong WCB, phát triển tới vảy Mfg => gây ảnh hưởng với
vius cúm, ấp trứng ở nhiệt độ 32-37
0
C => => quay ly tâm LS/HS, xác định bản chất
của bệnh thông qua một sự phân tích chẩn đoán, sắc ký => Xử lý với Formal đehit
Tóm lại quy trình là:
Chuẩn bị tế bào gốc => Gây ảnh hưởng và ủ bệnh => xóa dấu vết tế bào, làm sạch
vius => vius bất hoạt
4.1.3 Sản xuất vắc-xin từ tế bào côn trùng
Làm tan một lọ nhỏ trong
dụng cụ WCB, phát triển tới vảy

Mfg => gây ảnh hưởng với vius
cúm, ấp trứng ở nhiệt độ 22-
27
0
C, MF/DF sắc ký
=>Baculovirus bất hoạt.
(Theo: />DocID=701,686,650,26,12,2,1,Documents&MediaID=618&Filename=Robinson+-
+NCNV+II+(2007).pdf)
4.2 So sáng tổng quan về lợi thế giữa quy trình sản xuất vắc-xin chống cúm từ tế bào
côn trùng với các phương thức còn lại
Hồ Thị Kim Lan - 0515283 Trang 7 29/5/2009
Tế bào côn trùng
( />