SẢN XUẤT KHÁNG SINH RIFAMYCIN B

Đề tài: Sản Xuất Kháng
Sinh Rifamycin
Nhóm 9:
Trịnh xuân tùng
Nguyễn Thái Việt
Hoàng Phước Vinh
Nguyễn Hoàng Anh Vũ
Trần Thị Yến
… Trí
QUY TRÌNH
CÁC
NGHIÊN
CỨU
MỚI
TỔNG
QUAN
VỀ
KHÁNG
SINH
TÌM
HIỂU
VỀ
RIFAMYCIN
SẢN XUẤT KHÁNG
SINH
TỔNG QUAN VỀ KHÁNG SINH
•
Khái Niệm
Kháng sinh là những chất có khả năng tiêu
diệt vi khuẩn hay kìm hãm sự phát triển của vi
khuẩn một cách đặc hiệu.

RIFAMYCIN
+ Khái niệm: Rifamycin là nhóm
chất kháng sinh trao đổi bậc
hai, được thu nhận tự nhiên
trong quá trình lên men vi
khuẩn Amycolatopsis
mediterranei, hoặc được tổng
hợp. Nó là phân lớp của họ
Asammycin.

sử dụng để chữa trị bệnh lao,
phong

bệnh nhiễm trùng do vi
khuẩn lao và phong gây ra.
RIFAMYCIN
Rifamycins được phân lập lần
đầu tiên năm 1957 từ quá trình
lên men Streptomyces
mediterranei
Có tất cả 7 loại Rifamycin A, B,
C, D, E, S và SV, Rifamycin B
được sản xuất công nghiệp đầu
tiên
SƠ ĐỒ TỔNG HỢP RIFAMYCIN B
•
Gồm 2 giai đoạn:
+ Quá trình tổng hợp AHBA
+ Quá trình tổng hợp Rifamycin B từ AHBA

QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SX
1. PHÂN LẬP GIỐNG
QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SX
2.MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY
QUY TRÌNH CÔNG NGHỆ SX
3. QUY TRÌNH
Phương pháp mới
Nghiên cứu sản xuất kháng sinh Rifamycin
Phương pháp lên men gián đoạn sử dụng chủng cố định trong
gel alginate và các hạt alginate biến đổi
Cấu trúc pUAMSAG1. Vector
cuối cùng đã được xây dựng như
hình, sử dụng các vùng PermE
promoter, gen VHB, kanamycin
(KMR), và các gen kháng
erythromycin (ermE), nguồn gốc
của bản sao PA-đại diện cho A.
mediterranei, và ColE1 E. coli.
Biểu hiện của gen
Hemoglobin từ vi khuẩn
Vitreoscilla stercoraria trong
quá trình B trong
Amycolatopsis tăng cường sản
xuất rifamycin mediterranei
Kết quả ghi nhận được
•
Nhiều cố gắng đã được thực hiện để phát triển một quá trình chuyển giao oxy tốt hơn , nhưng không có phương án sử
dụng gen hemoglobin từ V. stercor aria ( hoặc từ một sinh vật khác nhau ) trong A. mediterranei . Vì vậy, với mục tiêu
này , các gen VHB được nhân bản, và pUAMSAG1 vector đã được xây dựng
•

Trình tự mã hóa gen VHB và promoter PermE đã được tạo ra bằng cách khuếch đại PCR.
•
Kết quả cho thấy trong điều kiện khí oxy thấp , sản xuất rifamycin B giảm khoảng 50 % liên quan đến sự nuôi cấy
trong điều kiện khí oxy cao khi dòng đã được nuôi cấy mà không barbital . Tuy nhiên, khi barbital đã được thêm vào sự
nuôi cấy trong điều kiện khí thấp , sản xuất rifamycin B đã gần như cao như trong các sự nuôi cấy trong điều kiện khí
cao
•
Để xác nhận rằng sản xuất cao hơn của rifamycin B bởi dòng biến đổi là do khả năng tiêu thụ oxy nhiều hơn, chúng tôi
đồng thời so sánh tốc độ của sự hấp thu oxy giữa các chủng. Các sự nuôi cấy trong môi trường sản xuất đã được thu
hoạch tại 96 h ( trong idiophase ) và sự hấp thu oxy được đo từ các tế bào rửa sạch của từng dòng . Kết quả cho thấy tỷ
lệ hấp thụ oxy của dòng biến đổi ( MSB - sag ) là nhanh hơn so với dòng của cha mẹ khoảng 1,5 lần
•
Phát hiện của mRNA của phiên mã ngược ( RT-PCR) để xác nhận rằng sự hấp thu oxy cao hơn bởi dòng MSB - sag là
do sự biểu hiện của gen VHB nhân bản vô tính, RT-PCR được sử dụng. RNA được chiết xuất từ ​​tế bào idiophase của
giống bố mẹ và chuyển đổi, và RT-PCR các thí nghiệm được thực hiện bằng cách sử dụng một lớp mồi cho một bp
503. Không có bảng sao trong dòng của cha mẹ (MSB) được phát hiện trong khi dòng biến đổi (MSB-nhóm SAG) sản
xuất rõ ràng dự kiến​​, mà tương ứng với VHB RNA
•
Những kết quả này cho thấy VHB biểu hiện
cải thiện sự hấp thu oxy và đã ảnh hưởng
đến sản xuất của rifamycin B trong điều
kiện khí thấp, hoặc từ một góc độ khác, họ
chỉ ra rằng việc chuyển đổi với các gen VHB
không cần barbital để tiếp tục sản xuất theo
điều kiện khí thấp