tài liệu quá trình phát máu

www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn

Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
QUI TRÌNH PHÁT MÁU
Tiến sỹ. Bùi Thị Mai An
I. Mục tiêu:
Đảm bảo phát máu an toàn cho người bệnh. Đây là một khâu rất quan
trọng để bảo đảm rằng máu của người cho và bệnh nhân được xác định đúng
nhóm máu hệ ABO, Rh và máu người cho đã được lựa chọn, làm phản ứng
hoà hợp đúng cho bệnh nhân
I. Các bước của qui trình:
2.1. Chuẩn bị và kiểm tra dụng cụ, sinh phẩm:
2.2. Nhận bệnh phẩm:
- Kiểm tra các thông tin trên phiếu yêu cầu máu và ống máu bệnh nhân.
- Ghi thời điểm nhận bệnh phẩm.
2.3. Định nhóm máu hệ ABO và Rh của bệnh nhân.
2.4. Tìm túi máu (chế phẩm) phù hợp hệ ABO và Rh. Kiểm tra chất
lượng túi máu bằng mắt thường.
2.5. Định lại nhóm máu người cho.
2.6. Tiến hành làm phản ứng chéo giữa máu người cho và máu người
nhận.
2.7. Dán nhãn vào bịch máu
2.8. Ghi chép vào phiếu yêu cầu máu, sổ kết quả phản ứng chéo (lưu),
phiếu truyền máu các thông tin liên quan đến người cho, bệnh nhân
và kết quả phản ứng chéo.
2.9. Kiểm tra lại toàn bộ các thông tin về người cho và bệnh nhân trên
túi máu, phiếu yêu cầu máu, sổ kết quả phản ứng chéo và phiếu
truyền máu.
2.10. Lấy chữ kí người lĩnh máu vào phiếu yêu cầu máu và sổ kết quả
phản ứng chéo. Phát máu.

www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
2


KỸ THUẬT ĐỊNH NHÓM MÁU HỆ ABO
Tiến sỹ. Bùi Thị Mai An

Mục đích bài này là giới thiệu một cách kỹ càng với bạn những nguyên lý và các
bước tiến hành của kỹ thuật định nhóm máu hệ ABO. Việc xác định chính xác nhóm
máu là cần thiết và điều này chỉ có thể đạt được bằng sự thực hiện đúng các qui trình
kỹ thuật trong phòng thí nghiệm và kiểm tra đầy đủ các thủ tục hành chính.
1. MỤC TIÊU HỌC TẬP
Khi bạn học xong bài này bạn phải có khả năng:
1. Hiểu nguyên lý của kỹ thuật.
2. Thực hiện một cách chính xác các kỹ thuật định nhóm máu hệ ABO.
3. Xác định nguyên nhân và tránh những lầm lẫn thông thường trong định
nhóm máu.
4. Biết cách kiểm tra chất lượng huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu.
5. Xác định được các dụng cụ thiết để tiến hành các kỹ thuật xác định nhóm
máu hệ ABO.

2. NGUYÊN LÝ CỦA KỸ THUẬT:
Nguyên lý của kỹ thuật được dựa trên nguyên lý của phản ứng ngưng kết. Nhóm
máu hệ ABO được xác định nhờ sự có mặt của kháng nguyên trên bề mặt hồng cầu và
kháng thể có trong huyết thanh, người bình thường trong huyết thanh có kháng thể tự
nhiên chống lại kháng nguyên mà kháng nguyên đó lại không có trên bề mặt hồng cầu
của chính mình. Nhóm máu hệ ABO được xác định bằng hai phương pháp là huyết
thanh mẫu và hồng cầu mẫu.
3. DỤNG CỤ VÀ THUỐC THỬ:
A. Dụng cụ:
1. Ly tâm ống thẳng.
2. Tủ lạnh bảo quản thuốc thử huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu và mẫu máu.
3. Quầy lạnh sâu để bảo quản mẫu huyết thanh
4. Hộp sáng hoặc gạch men trắng.
5. Bình cách thuỷ 37
0
C (hoặc tủ ấm hoặc bình giữ nhiệt)
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
3

6. Bình đựng nước muối.
7. Nhiệt kế
8. Pipet Pasteur.
9. Ống nghiệm để định nhóm (50 x 7
mm
) nhựa hoặc thuỷ tinh.
10. Giá đựng ống nghiệm để tiến hành kỹ thuật.

11. Lam kính.
12. Bút chì kính, bút dạ
13. Giấy đo pH
14. Bông thấm
15. Cốc mỏ thuỷ tinh
16. Que thuỷ tinh
17. Kính hiển vi
18. Tủ sấy dụng cụ
B. Thuốc thử:
- Huyết thanh mẫu: Chống A, chống B, chống AB, chống H, chống A1.
- Hồng cầu mẫu: Hồng cầu mẫu A, B, O.
- Nước muối 0,9 %
- Nước cất hoặc nước không có ion.
- Huyết thanh AB
- Enzyme Papain
4. TIẾN HÀNH KỸ THUẬT:
4.1. Định nhóm trên phiến đá:
4.1.1. Phương pháp huyết thanh mẫu
- Trên một phiến đá: Nhỏ 2 giọt huyết thanh mẫu chống A, chống B, chống AB
vào 3 vị trí khác nhau
- Thêm 1 giọt hồng cầu cần định nhóm 10-20% (được pha trong nước muối
0,9%, huyết thanh hoặc huyết tương).
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
4

- Trộn đều huyết thanh mẫu với hồng cầu của bệnh nhân cần định nhóm bằng

một que thuỷ tinh thành một vòng tròn có đường kính 2-3 cm. Lắc nhẹ liên tục
trong vòng 2 phút rồi đọc kết quả.
4.1.2. Phương pháp hồng cầu mẫu
- Trên một phiến đá: Nhỏ 2 giọt huyết thanh của bệnh nhân cần định nhóm vào 2
vị trí khác nhau.
- Thêm 1 giọt hồng cầu mẫu A, 1 giọt hồng cầu mẫu B 10-20%.
- Trộn đều huyết thanh của bệnh nhân với hồng cầu mẫu thành một vòng tròn có
đường kính 2-3 cm. Lắc nhẹ liên tục trong vòng 2 phút rồi đọc kết quả.
4.2. Định nhóm trong ống nghiệm:
4.2.1. Phương pháp huyết thanh mẫu:
- Nhỏ 1 giọt huyết thanh mẫu chống A, chống B, chống AB vào 3 ống nghiệm
khác nhau.
- Thêm 1 giọt hồng cầu cần định nhóm 2-5 % (được pha trong nước muối 0,9%,
huyết thanh hoặc huyết tương) vào mỗi ống nghiệm trên.
- Lắc đều, ly tâm 1000 vòng/phút/ 1 phút
- Nghiêng nhẹ thành ống nghiệm, đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển
vi.
4.2.2. Phương pháp hồng cầu mẫu:
- Nhỏ 1 giọt huyết thanh của bệnh nhân vào 3 ống nghiệm khác nhau.
- Thêm 1 giọt hồng cầu mẫu A, 1 giọt hồng cầu mẫu B, 1 giọt hồng cầu mẫu O 2-
5% vào mỗi ống nghiệm trên.
- Lắc đều, ly tâm 1000 vòng/phút/ 1 phút
- Nghiêng nhẹ thành ống nghiệm, đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển
vi.
5. ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ:
Huyết thanh mẫu + Hồng cầu cần
định nhóm
Hồng cầu mẫu + Huyết thanh
cần định nhóm
Nhóm máu

được xác
định
Chống A Chống B Chống AB Hồng cầu A Hồng cầu B
A ++++ (-) ++++ (-) ++++
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
5

B (-) ++++ ++++ ++++ (-)
AB ++++ ++++ ++++ (-) (-)
O (-) (-) (-) ++++ ++++
6. NGUYÊN NHÂN SAI LẦM TRONG ĐỊNH NHÓM MÁU HỆ ABO
1. Kỹ thuật nghèo nàn, sai sót về kỹ thuật
2. Huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu hỏng, biến chất, nhiễm trùng, quá hạn sử dụng.
3. Mẫu máu cần định nhóm bị nhiễm trùng, Mẫu máu định nhóm không lấy đúng
quy cách.
4. Dụng cụ bẩn
5. Tay nghề và trình độ của người làm kỹ thuật

Các Câu hỏi lượng giá


Đánh dấu [x] vào vị trí 1 hoặc 2 nếu bạn cho là đúng
1. Nguyên lý của kỹ thuật định nhóm máu hệ ABO được dựa trên nguyên lý
của phản ứng ngưng kết:
1. Đúng: 2. Sai:
2. Tỷ lệ giữa kháng nguyên và kháng thể không tương ứng sẽ cho kết quả định

nhóm máu hệ ABO không chính xác:
1. Đúng: 2. Sai:
3. Huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu hỏng, biến chất, nhiễm trùng, quá hạn sử
dụng sẽ ảnh hưởng đến kết quả xác định nhóm máu hệ ABO:
1. Đúng: 2. Sai:
4. Để định nhóm máu hệ ABO bằng phương pháp trong ống nghiệm cần sử
dụng dung dịch hồng cầu 3-5%:
1. Đúng: 2. Sai:
5. Để định nhóm máu hệ ABO bằng phương pháp trên phiến đá cần sử dụng
dung dịch hồng cầu 10-20%:
1. Đúng: 2. Sai:
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
6

6. Mẫu máu bị nhiễm trùng sẽ ảnh hưởng đến kết quả định nhóm máu:
1. Đúng: 2. Sai:
7. Kết quả định nhóm máu được đọc trong vòng 2 phút:
1. Đúng: 2. Sai:
8. Để định nhóm máu hệ ABO chỉ cần lấy một mẫu máu không chống đông
1. Đúng: 2. Sai:
9. Để xác định chính xác nhóm máu hệ ABO chỉ cần định nhóm máu bằng một
phương pháp là đủ:
1. Đúng: 2. Sai:
10. Huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu phải kiểm tra hàng ngày trước khi sử
dụng
1. Đúng: 2. Sai:

www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
7

PHẢN ỨNG HOÀ HỢP ĐẦY ĐỦ
Tiến sỹ. Bùi Thị Mai An
1. Đặt vấn đề
Hiện nay, trên thế giới để bảo đảm an toàn truyền máu về mặt miễn dịch, mọi
phòng xét nghiệm phát máu đều định nhóm máu hệ ABO, hệ Rh và các hệ nhóm máu
hồng cầu khác, xác định kháng thể bất thường cho cả người cho và bệnh nhân. Sau đó
chọn túi máu có các nhóm máu phù hợp nhất với bệnh nhân để tiến hành phản ứng hoà
hợp cho bệnh nhân. Do vậy truyền máu tại các nước tiên tiến là rất an toàn và hiệu lực.
Tại Việt Nam hiện nay việc đảm bảo an toàn truyền máu về mặt miễn dịch chúng
ta mới chỉ được thực hiện định nhóm máu hệ ABO và làm phản ứng chéo ở 22
0
C. Do
vậy an toàn truyền máu về mặt miễn dịch tại nước ta chưa được đảm bảo. Trong giai
đoạn còn nhiều khó khăn về mặt kinh tế chưa đủ điều kiện mua kháng huyết thanh
mẫu của hệ hồng cầu để định nhóm cho cả người cho và bệnh nhân thì việc thực hiện
phản ứng hoà hợp đầy đủ (Tiến hành phản ứng hoà hợp ở cả 22
0
C, 37
0
C, enzyme và
nghiệm pháp Coombs gián tiếp) là rất cần thiết để bảo đảm an toàn truyền máu về mặt
miễn dịch. Kỹ thuật này là một kỹ thuật đơn giản, dễ thực hiện và chỉ cần đầu tư thêm
một số thuốc thử mà hiện tại các địa phương chưa có đủ.
2. Mục đích của kỹ thuật
Phản ứng hoà hợp đầy đủ là phản ứng để lựa chọn nhóm máu hệ hồng cầu của
người cho phù hợp nhất với bệnh nhân, đặc biệt là những trường hợp bệnh nhân có
kháng thể bất thường. Xét nghiệm này góp phần đảm bảo an toàn về mặt miễn dịch

cho bệnh nhân khi được truyền máu, thực hiện truyền máu có hiệu lực.
3. Mục tiêu học tập:
Khi bạn học xong kỹ thuật này bạn phải có khả năng:
1. Thực hiện một cách chính xác phản ứng hoà hợp đầy đủ.
2. Xác định và tránh những lầm lẫn trong việc thực hiện phản ứng hoà hợp.
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
8

3. Xác định được các dụng cụ thiết để tiến hành phản ứng hoà hợp.
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
9

4. Nguyên lý của phản ứng:
Tìm sự hoà hợp về nhóm máu hệ hồng cầu ABO và các hệ nhóm máu hồng cầu
khác giữa người cho và người nhận.
5. Dụng cụ và thuốc thử:
A. Dụng cụ:
1. Ly tâm ống thẳng.
2. Tủ lạnh bảo quản thuốc thử huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu và mẫu máu,
huyết thanh Coombs.
3. Quầy lạnh sâu để bảo quản mẫu huyết thanh
4. Hộp sáng hoặc gạch men trắng.

5. Bình cách thuỷ 37
0
C (hoặc tủ ấm hoặc bình giữ nhiệt)
6. Bình đựng nước muối.
7. Nhiệt kế
8. Pipet Pasteur.
9. Ống nghiệm để định nhóm (50 x 7
mm
) nhựa hoặc thuỷ tinh.
10. Giá đựng ống nghiệm để tiến hành kỹ thuật.
11. Lam kính.
12. Bút chì kính, bút dạ
13. Giấy đo pH
14. Bông thấm
15. Cốc mỏ thuỷ tinh
16. Que thuỷ tinh
17. Kính hiển vi
18. Tủ sấy dụng cụ
B. Thuốc thử:
- Anti D
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
10

- Huyết thanh Coombs
- Nước muối 9 %
- Nước cất hoặc nước không có ion.

- Enzyme Papain
6. Tiến hành kỹ thuật:
A. Bước 1: Chuẩn bị
1. Chuẩn bị hồng cầu của người cho và hồng cầu nhóm O. Trước khi dùng, hút
bỏ dung dịch bảo quản hồng cầu, rửa hồng cầu 1 lần và pha thành dung dịch
hồng cầu 5% để tiến hành phản ứng.
2. Xử lý hồng cầu bằng men Papain hoặc brommelin:
+ Xử lý hồng cầu bằng men Papain: Trong một ống nghiệm nhỏ 1 giọt hồng
cầu khối, nhỏ tiếp vào ống nghiệm 1 giọt men Papain. Để 7 phút ở nhiệt
độ phòng. Sau đó rửa lại 3 lần bằng nước muối 0,9%
+ Xử lý hồng cầu bằng men Bromelin: Cứ 2 thể tích khối hồng cầu mẫu với
3 thể tích men Bromelin 2,5%. Ủ 15 phút ở 37
0
C. Sau đó rửa 3 lần bằng
nước muối 0,9%, pha lại dung dịch hồng cầu 5%.
B. Bước 2: Tiến hành phản ứng hoà hợp đầy đủ (Làm phản ứng chéo giũa huyết
thanh của bệnh nhân và hồng cầu của người cho) ở 4 điều kiện, nhiệt độ: 22C,
37C, enzyme, nghiệm pháp Coombs gián tiếp cụ thể tiến hành như sau:
1. Phản ứng ở nhiệt độ phòng thí nghiệm 22

C:
Trong một ống nghiệm tan máu nhỏ:
1 giọt hồng cầu 5% của người cho đã được chuẩn bị ở trên.
1 giọt huyết thanh bệnh nhân.
Ủ 45 phút ở 22C.
Đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển vi.
2. Phản ứng ở nhiệt độ phòng thí nghiêm 37

C:
Trong một ống nghiệm tan máu nhỏ:

www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
11

1 giọt hồng cầu 5% của người cho đã được chuẩn bị ở trên.
1 giọt huyết thanh bệnh nhân.
Ủ 45 phút ở 37C.
Đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển vi.
3. Phản ứng ở điều kiện enzyme:
Trong một ống nghiệm tan máu nhỏ:
1 giọt hồng cầu người cho 5% đã được xử lý enzyme ở trên.
2 giọt huyết thanh bệnh nhân
Ủ 45 phút ở 37C
Đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển vi.
4. Phản ứng ở điều kiện Coombs gián tiếp:
Trong một ống nghiệm tan máu nhỏ:
1 giọt hồng cầu người cho 5%.
2 giọt huyết thanh bệnh nhân
Ủ 45 phút ở 37C
Rửa 3 lần bằng nước muối 9%
Nhỏ 1 giọt huyết thanh Coombs
Ly tâm 1000 vòng phút/ 1 phút
Đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển vi
Nghiệm pháp Coombs gián tiếp luôn luôn có chứng dương và chứng âm đi kèm
- Chứng (+): Trong một ống tan máu nhỏ:
1 giọt hồng cầu nhóm O người cho đã rửa 3 lần pha 5%
2 giọt anti D (Đã pha loãng 1/50)

Ủ 45 phút ở 37
0
C
Rửa 3 lần bằng nước muối 0,9%
Nhỏ 1 giọt huyết thanh Coombs
Ly tâm 1000 vòng/ phút/ 1 phút
Đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển vi
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
12

- Chứng (-): Trong một ống nghiệm nhỏ
2 giọt nước muối 0,9%
1 giọt hồng cầu O đã rửa 3 lần pha 5%
Ủ 45 phút ở 37
0
C
Rửa 3 lần bằng nước muối 0,9%
Nhỏ 1 giọt huyết thanh Coombs
Ly tâm 1000 vòng/ phút/1 phút
Đọc kết quả bằng mắt thường và kính hiển vi
Phản ứng hoà hợp ở điều kiện Coombs gián tiếp chỉ có giá trị khi chứng âm phải
luôn âm và chứng dương phải luôn dương tính +++.
Nếu kết quả một trong những điều kiện, nhiệt độ của phản ứng hoà hợp đầy đủ
trên dương tính phải tiến hành chọn máu cho bệnh nhân.
Nếu kết quả phản ứng hoà hợp đầy đủ ở các điều kiện, nhiệt độ trên đều âm tính
thì kết luận máu người cho hoà hợp với máu của bệnh nhân. Túi máu được phát để

truyền cho bệnh nhân.

PHẢN ỨNG HOÀ HỢP LY TÂM ĐỌC NGAY

1. Nguyên lý kỹ thuật:
Phản ứng hoà hợp ly tâm đọc ngay là phản ứng để phát hiện sự không
hoà hợp về nhóm máu hệ ABO giữa người cho và bệnh nhân. Phản ứng được
dựa trên nguyên lý là kháng thể A và kháng thể B có thể gây ngưng kết và làm
vỡ hồng cầu khi trên bề mặt hồng cầu có kháng nguyên tương ứng.
2. Dụng cụ và thuốc thử:
A. Dụng cụ:
1. Ly tâm ống thẳng.
2. Tủ lạnh bảo quản thuốc thử huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu và mẫu máu,
huyết thanh Coombs.
3. Quầy lạnh sâu để bảo quản mẫu huyết thanh
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
13

4. Bình cách thuỷ 37
0
C (hoặc tủ ấm hoặc bình giữ nhiệt)
5. Bình đựng nước muối.
6. Nhiệt kế
7. Pipet Pasteur.
8. Ống nghiệm để làm phản ứng hoà hợp (50 x 7
mm

) thuỷ tinh.
9. Giá đựng ống nghiệm để tiến hành kỹ thuật.
10. Lam kính.
11. Bút chì kính, bút dạ
12. Cốc mỏ thuỷ tinh
13. Kính hiển vi
14. Tủ sấy dụng cụ
B. Thuốc thử:
- Nước muối 9 %
- Nước cất hoặc nước không có ion.
- Hồng cầu của người cho, của bệnh nhân được pha thành hồng cầu 3-5%
- Mẫu huyết thanh và huyết tương của người cho và bệnh nhân.
- Mẫu máu của người cho và bệnh nhân đều đã được xác định nhóm máu hệ
ABO và Rh.
3. Tiến hành kỹ thuật:
- Trong một ống nghiệm tan máu đã được dán nhãn gồm tên bệnh nhân và tên
của người cho nhỏ:
+ Một giọt hồng cầu 3-5%
+ Hai giọt huyết thanh của
- Trộn đều và ly tâm 1000 vòng/ phút/ 1 phút.
- Kiểm tra hiện tượng ngưng kết và tan máu bằng mắt thường và ghi lại kết quả.
4. Đánh giá kết quả:
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
14

- Nếu có hiện tượng ngưng kết hồng cầu, điều đó chứng tỏ máu người cho và

người nhận là không hoà hợp. Phải tiến hành chọn máu cho bệnh nhân và
lựa chọn túi máu phù hợp nhất để truyền cho bệnh nhân.
- Nếu không có hiện tượng ngưng kết hồng cầu chứng tỏ máu người cho và
bệnh nhân là hoà hợp. Máu được phát để truyền cho bệnh nhân.
CÂU HỎI LƯỢNG GIÁ

Đánh dấu [x] vào vị trí 1 hoặc 2 nếu bạn cho là đúng
1. Phản ứng hoà hợp đầy đủ là phản ứng để lựa chọn nhóm máu hệ hồng cầu
của người cho phù hợp nhất với bệnh nhân
1. Đúng: 2. Sai:
2. Kết quả phản ứng hoà hợp đầy đủ âm tính. Kết luận máu người cho hoà hợp
với máu của bệnh nhân
1. Đúng: 2. Sai:
3. Phản ứng hoà hợp ly tâm đọc ngay là phản ứng để phát hiện sự không hoà
hợp hoặc không hoà hợp về nhóm máu hệ ABO giữa người cho và bệnh
nhân
1. Đúng: 2. Sai:
4. Nếu phản ứng hoà hợp dương tính phải tiến hành chọn máu cho bệnh nhân
1. Đúng: 2. Sai:
5. Chuẩn bị hồng cầu của người cho và hồng cầu nhóm O 5% trước khi tiến
hành phản ứng hoà hợp
1. Đúng: 2. Sai:






www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn

Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
15






NHỮNG KHÓ KHĂN TRONG VIỆC XÁC ĐỊNH NHÓM MÁU
HỆ ABO VÀ CÁCH GIẢI QUYẾT
Tiến sỹ. Bùi Thị Mai An

I. MỤC ĐÍCH CỦA BÀI GIẢNG:
- Giúp học viên hiểu rõ và xác định được nhóm máu khó
- Giúp học viên biết cách giải quyết các trường hợp nhóm máu khó

II. NHÓM MÁU KHÓ HỆ ABO VÀ CÁCH GIẢI QUYẾT:
1. Nguyên tắc: Nhóm máu hệ ABO được xác định nhờ sự có mặt của kháng nguyên
trên bề mặt hồng cầu và kháng thể có trong huyết thanh. Người bình thường có trong
huyết thanh kháng thể tự nhiên chống lại các kháng nguyên không có trên bề mặt hồng
cầu của chính bản thân mình.
Nhóm máu Kháng nguyên trên bề mặt hồng cầu
Kháng thể có trong
huyết thanh
A
A Chống B
B
B Chống A

AB
A,B Không có Chống A,B
O
Không có cả kháng nguyên A và B
Có cả chống A và
chống B
Dựa vào các đặc tính trên mà người ta có thể xác định các nhóm máu hệ ABO
bằng 2 phương pháp:
1. Phương pháp huyết thanh mẫu (Beth Vincent): Dùng các kháng thể biết
trước (Chống A, Chống B, chống AB) để phát hiện các kháng nguyên có trên
bề mặt hồng cầu.
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
16

2. Phương pháp hồng cầu mẫu (Simonin): Dùng các kháng nguyên biết trước
(Hồng cầu mẫu A,B) để phát hiện các kháng thể có trong huyết thanh.
Hai phương pháp này phải luôn được tiến hành đồng thời và phải luôn cho kết
quả phù hợp. Tất cả mọi trường hợp khó khăn xảy ra khi định nhóm máu hệ ABO đều
có sự không phù hợp giữa 2 phuương pháp huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu. Muốn
biết nguyên nhân của sự không phù hợp này, ta phải tiến hành như sau:
+ Rửa hồng cầu bệnh nhân và hồng cầu O có đầy đủ kháng nguyên các nhóm
máu của hệ hồng cầu bằng nước muối 0,9% 3 lần. Pha thành dịch treo hồng cầu 5%.
+ Tiến hành 3 chứng:
1) Chứng tự thân: Phản ứng giữa huyết thanh của bệnh nhân và hồng cầu của
bệnh nhân (Nhỏ vào 1 ống nghiệm tan máu 2 giọt huyết thanh của bệnh nhân
và 1 giọt hồng cầu bệnh nhân đã rửa pha thành 5%. Trộn đều, ly tâm 1000

vòng phút/ 1 phút, đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển vi).
2) Chứng AB: Phản ứng giữa huyết thanh AB và hồng cầu bệnh nhân
(Nhỏ vào 1 ống nghiệm tan máu 2 giọt huyết thanh AB và 1 giọt hồng
cầu bệnh nhân đã rửa pha thành 5%. Trộn đều ly tâm 1000 vòng phút/ 1 phút,
đọc kết quả bằng mắt thường và trên kính hiển vi). Nếu phản ứng âm tính thì
phương pháp định nhóm bằng huyêt thanh mẫu được bảo đảm.
3) Chứng đồng loài: Phản ứng giữa huyết thanh bệnh nhân và hồng cầu O (Nhỏ
vào 1 ống nghiệm tan máu 2 giọt huyết thanh bệnh nhân và 1 giọt hồng cầu O
đã rửa pha thành 5%. Trộn đều, ly tâm 1000 vòng phút/ 1 phút, đọc kết quả
bằng mắt thường và trên kính hiển vi). Nếu phản ứng âm tính thì phương
pháp định nhóm bằng hồng cầu mẫu được bảo đảm.
Dựa vào kết quả 3 chứng tự thân, đồng loài, AB ở trên ta có thể phân các trường
hợp khó khăn trong định nhóm máu hệ ABO thành 2 nhóm chính để tìm nguyên nhân
gây khó khăn trong việc xác định nhóm máu hệ ABO như sau:

A. Những khó khăn xảy ra khi cả 3 chứng nói trên đều âm tính:
1. Trường hợp có tiêu huyết tố:
Ví dụ:
Chống A

Chống B Chống AB Hồng cầu A Hồng cầu B

Chứng Allo (-)
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
17

(-) (-) (-) (-) +++
Chứng AB (-)
Chứng Auto (-)

Nhận xét:
- Bệnh nhân có thể có nhóm máu O nhưng không có sự phù hợp giữa 2 phương
pháp huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu vì kháng thể chống A của bệnh nhân này rất
yếu hoặc âm tính.
- Bệnh nhân có thể có tiêu huyết tố chống A.
- Tiêu huyết tố chỉ xảy ra khi có mặt bổ thể.
Cách giải quyết: Khử bổ thể có trong huyết thanh của bệnh nhân ở 56C / 30
phút
Thử lại phương pháp hồng cầu mẫu, nếu có tiêu huyết tố thì sau khi khử bổ thể
phản ứng sẽ trở lại bình thường như sau:
Chống A Chống B Chống AB

Hồng cầu A Hồng cầu B
(-) (-) (-) +++ +++
Chứng Allo (-)
Chứng AB (-)
Chứng Auto (-)
2. Hai quần thể hồng cầu
Ví dụ:
Chống A Chống B Chống AB Hồng cầu A Hồng cầu B
() (-) () (-) +++
Chứng Allo (-)
Chứng AB (-)
Chứng Auto (-)
Nhận xét:
Nhóm máu của bệnh nhân có thể là nhóm A, nhưng hồng cầu của bệnh nhân

ngưng kết với huyết thanh mẫu chống A, chống AB không hoàn toàn, còn nhiều hồng
cầu tự do. Có thể gặp hiện tượng 2 quần thể hồng cầu trong nhứng trường hợp sau:
+ Những người được truyền máu, truyền tuỷ khác nhóm hệ ABO.
+ Những người có nhóm máu A yếu, B yếu.
+ Bệnh nhân đa u tuỷ xương, Leucemie.
+ Thể khảm hoặc ghép các gen của hệ nhóm máu ABO.
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
18

Cách giải quyết:
+ Hỏi triệu chứng lâm sàng của bệnh nhân.
+ Hỏi tiền sử truyền máu, truyền tuỷ của bệnh nhân.
+Tìm chất ABH trong nước bọt.
+ Xác định kiểu hình trong các trường hợp khảm hoặc ghép của gen bằng nghiên
cứu di truyền.


3. Suy giảm miễn dịch bẩm sinh hoặc mắc phải:
Ví dụ:
Chống A Chống B Chống
AB
Hồng cầu A

Hồng cầu B
+++ (-) +++ (-) (-)
Chứng Allo: (-)

Chứng AB: (-)
Chứng Auto: (-)
Nhận xét:
+ Bệnh nhân có thể có nhóm máu A, nhưng có kháng thể B rất yếu hoặc âm tính.
+ Những trường hợp này có thể gặp ở trẻ sơ sinh dưới 6 tháng tuổi do kháng thể
chống A, chống B chưa được hình thành một các đầy đủ.
+ Thiếu hụt miễn dịch bẩm sinh.
+ Thiếu hụt miễn dịch mắc phải (Leucemie cấp, người già )
Cách giải quyết:
+ Điện di miễn dịch để khẳng định.
+ Làm các xét nghiệm để chẩn đoán lecemie.

B. Những trường hợp khó khăn khi xác định nhóm máu hệ ABO mà trong đó
một hoặc cả 3 chứng Allo, Auto, AB đều dương tính.
1. Kháng thể lạnh:
Ví dụ
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
19

Chống A

Chống B Chống AB

Hồng cầu A

Hồng cầu

B
+++ +++ +++ +++ +++
Chứng Allo: +++
Chứng AB: +++
Chứng Auto: +++
Nhận xét:
+ Bệnh nhân có thể có kháng thể lạnh.
+ Khi để hồng cầu bệnh nhân vào bình cách thuỷ 37C thì hiện tượng ngưng kết
mất dần.
Cách giải quyết:
+ Rửa hồng cầu bệnh nhân bằng nước muối 0,9% để ấm 37 C.
+ Định nhóm trên phiến kính nóng 37 C hoặc trong ống nghiệm ở 37 C.
2. Kháng thể tự miễn:
Ví dụ:
Chống A Chống B Chống AB

Hồng cầu A Hồng cầu B
+++ +++ +++ +++ +++
Chứng Allo: +++
Chứng AB: +++
Chứng Auto: +++

Nhận xét:
Bệnh nhân có thể có kháng thể tự miễn. Các kháng thể này đã được cố định trên
bề mặt hồng cầu
Cách giải quyết:
+ Xem lại chẩn đoán lâm sàng của bệnh nhân
+ Rửa hồng cầu bệnh nhân nhiều lần bằng nước muối ấm để ở 37C, rồi định lại
nhóm máu cho bệnh nhân.
3. Hồng cầu chuỗi tiền:

Ví dụ:
Chống A Chống B Chống AB Hồng cầu A Hồng cầu B Chứng Allo: +++
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
20

+++ +++ +++ +++ +++ Chứng AB: +++
Chứng Auto:
+++
Nhận xét:
+ Bệnh nhân có sự tăng bất thường của Protein trong huyết thanh thường gặp ở
bệnh nhân đa u tuỷ xương, tăng sợi huyết.
+ Có sự ngưng kết tầng nhanh của hồng cầu giống như một ngưng kết và nó sẽ
được phân tán rất nhanh khi ta nhỏ vào hồng cầu bệnh nhân 1 giọt nước muối
1,5%.
Cách giải quyết:
+ Rửa hồng cầu bệnh nhân bằng nước muối 0,9%, rồi định lại phương pháp
huyết thanh mẫu.
+ Với phương pháp hồng cầu mẫu thì pha loãng nhẹ nhàng huyết thanh bệnh
nhân trong nước muối sinh lý 0,9% cho đến khi nồng độ protein trong huyết
thanh không đủ để kết tầng các hồng cầu mẫu thành hình chuỗi tiền thì định lại
với phương pháp hồng cầu mẫu.

Câu hỏi lượng giá

Đánh dấu [x] vào vị trí 1 hoặc 2 nếu bạn cho là đúng

1. Phải tiến hành 3 chứng đồng loại, tự thân, AB trước khi xác định và giải
quyết các trường hợp định nhóm máu khó?
1. Đúng: 2. Sai:
2. Kháng thể miễn dịch có bản chất là IgG?
1. Đúng: 2. Sai:
3. Kháng thể tự nhiên có bản chất là IgM?
1. Đúng: 2. Sai:
www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn


Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
21

4. Hai quần thể hồng cầu gặp ở những bệnh nhân được truyền máu, truyền tuỷ
khác nhóm hệ ABO, những người có nhóm máu A yếu, B yếu, bệnh nhân đa u tuỷ
xương, Leucemie?
1. Đúng: 2. Sai:
5. Khi bệnh nhân có tiêu huyết tố phải khử bổ thể có trong huyết thanh
của bệnh nhân ở 56

C / 30 phút trước khi xác định nhóm máu cho bệnh nhân?
1. Đúng: 2. Sai:

www.thaiduonghealth.vn – www.thenhommau.vn – www.nhommau.vn

Tài liệu được sưu tầm từ nhiều nguồn khác nhau và mang tính tham khảo.
NhómMáu.vn không chịu trách nhiệm về tính pháp lý và tính chính xác trong các tài liệu này.
22