HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN VÀ KHÁNG UNG THƯ VÚ MCF7 CỦA MỘT SỐ CAO TRÍCH VÀ HỢP CHẤT CÔ LẬP ĐƯỢC TỪ CÁC CÂY THUỘC CHI HEDYOTIS



HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN VÀ KHÁNG UNG THƯ VÚ MCF-7
CỦA MỘT SỐ CAO TRÍCH VÀ HỢP CHẤT CÔ LẬP ĐƯỢC
TỪ CÁC CÂY THUỘC CHI HEDYOTIS

PHẠM NGUYỄN KIM TUYẾN
(
*
)
NGUYỄN KIM PHI PHỤNG
(
**
)
PHẠM ĐÌNH HÙNG
(
***
)



Kết quả thử nghiệm tính kháng khuẩn cho thấy cao etanol của H. nigricans có hoạt tính trên ba
chủng B. subtilis, E. coli và S. typhi. Kết quả thử nghiệm độc tính Brine Shrimp và khả năng gây
độc tế bào trên dòng tế bào ung thư vú MCF-7 cho kết quả khá tương đồng, ngoại trừ arbutin
(LC
50
=20

g/ml) và rutin (LC

50
=50

g/ml) có độc tính Brine Shrimp mạnh nhưng không độc đối
với dòng tế bào ung thư vú MCF-7 (I%= 1,33 đối với arbutin và I%= 3,53 đối với rutin). Hai
hợp chất 4'-butyloxy-5,7-dihydroxyflavanon (I%= 92,60) và

-amyrin (I%= 98,23) cho hoạt tính
mạnh nhất trên dòng tế bào ung thư vú MCF-7. Các nghiên cứu về hoạt tính của chi Hedyotis
vẫn đang được tiếp tục.
ABSTRACT
The ethanol extract of H. nigricans exhibited strong antibaterial activity on Bacillus subtilis,
Escherichia coli and Salmonela typhi. Arbutin and rutin exhibited strong Brine shrimp toxicity
(LC
50
20

g/ml and 50

g/ml, respectively) but showed mild inhibition on breast cancer cell
MCF-7 (1.33 and 3.53% inhibition, respectively). The remaining extracts and compounds
showed the correlation on Brine Shrimp toxicity and cytotoxicity against breast cancer cell MCF-
7. Two compounds, 4'-butyloxy-5,7-dihydroxyflavanone and

-amyrin (92.60 and 98.23 %
inhibition, respectively) showed the strongest cytotoxicity against breast cancer cell MCF-7. The
further researche sare underinvestigated.


HedyotisH. corymbosa, H. diffusa v.v. 



[4-




(
*
)
TS,
(
**
)
Th.S, T
(
***
)
TS, Khoa Hóa, T



-OV-
-MEL- -
-

Hedyotis
                Hedyotis  H.
auricularia, H. biflora và H. nigricansloài Hedyotis 
   

Hedyotis  0,14
-12].

-
Hedyotis.


kháng kí Plasmodium falciparumEscherichia coli
(Gram âm), Salmonela typhi (Gram âm), Staphylococus Bacillus subtilis (Gram
-7.











Hedyotis cho
H. auricularia và H. nigricans 
Plasmodium falciparumH.
biflora Hedyotis 

COOH
HO
3
9

12
13
18
19
20
23
24
25
29
30
26
COOH
HO
3
9
12
13
18
19
20
23
24
25
29
30
26
HO
3
9
12

13
18
19
20
23
24
25
29
30
26
(13)
(11)
(12)
O
3
18
20
21
19
22
24
28
29
26
27
25
23
5
6
11

15
Glc
(15)
OH
O
HO
HO
OH
OH
1'
2'
3'
4'
5'
6'
O
H
1
2
3
4
5
6
(14)
(21)
S
OH
O
4'
3'

2'
1'
5'
6'
3
2
4
10
5
6
7
8
9
O
O
OH
OH
1
2
3
4
10
11
12
9
13
14
5
6
7

8
(16)
(20)
OOH
O
4'
3'
2'
1'
5'
6'
3
2
4
10
5
6
7
8
9
O
OH
HO
O
4'
3'
2'
1'
5'
6'

3
2
4
10
5
6
7
8
9
O
OH
O
4'
3'
2'
1'
5'
6'
3
2
4
10
5
6
7
8
9
1
HO
OMe

(17)
(19)
(18)
O
OH
OH
HO
O
O
HO
HO
H
OH
O
H
H
OH
O
OH
HO
HO
H
3
C
O
1"
1"'
OOH
MeO
O

OMe
4'
3'
2'
1'
5'
6'
3
2
4
10
5
6
7
8
9
MeO
OMe
OOH
HO
O
OH
4'
3'
2'
1'
5'
6'
3
2

4
10
5
6
7
8
9
(24)
(22)
SOH
MeO
O
OMe
4'
3'
2'
1'
5'
6'
3
2
4
10
5
6
7
8
9
MeO
OMe

(23)
OOH
HO
O
OC
4
H
9
4'
3'
2'
1'
5'
6'
3
2
4
10
5
6
7
8
9
(25)
S
OH
HO
O
OC
4

H
9
4'
3'
2'
1'
5'
6'
3
2
4
10
5
6
7
8
9
(26)

Hình 1


Plasmodium falciparum
Hedyotis.
E. coli, S. typhi, S. aureus và B. subtilis 
Hedyotis 1

         H. auricularia        S.
aureus và E. coli.  H. nigricans B. subtilis, E. coli và
S. typhi.

Bảng 1Hedyotis 

1. 
2. Staphylococus
aureus
3. Bacillus
subtilis
4. Escherichia
coli
5. Salmonela
typhi
6. H. auricularia
7. 3
8. 1
9. 2
10. -
11. H. biflora
12. -
13. -
14. 1
15. 1
16. H. nigricans
17. -
18. 3
19. 2
20. 3
Ghi chú: (-
   nghi tính Brine shrimp c các cao trích và m  hp c trình bày
trong ng 2.  q c tính n LC
50

(

g/ml)
là n 
(

g/ml)
gây 
50%   Artemia salina  nghim.  
tính Brine shrimp thì         ao  cho  Brine
shrimp m nh cao etanol và cao cloroform c loài H. auricularia; cao etanol, cao
cloroform, cao etyl acetat và nh là cao metanol c loài H. nigricans.  p  cho 
tính Brine shrimp m   arbutin, -amyrin, 1,4-dihydroxy-9,10-antraquinon, 5-
hydroxyflavon, 5,7,4'-trihydroxyisoflavon, rutin, 5,7-dihydroxyflavon, 5-hydroxythioflavon,
5,7-dihydroxyflavon, 4'-butyloxy-5,7-dihydroxyflavanon, 5,7,4'-trihydroxyflavanon, acid
oleanolic v là acid ursolic.
   nghim k ng gây   bào trên dòng  bào ung  vú MCF-7  các cao
trích và m  hp  c trình bày trong  2.   c tính giá  I%,  
k ng kháng phân bào c  th. Giá  càng ln,    tính càng m 
 cao  có ho tính   cao etanol thô ban r H. auricularia và 
là cao metanol ca H. nigricans. Trong  các h  nghim, hai hp  4'-butyloxy-
5,7-dihydroxyflavanon (I%= 92,60) và  là -amyrin (I%= 98,23) cho  tính m  hai
hp  5,7,4'-trihydroxyflavanon và 5,7,4'-trihydroxyisoflavon cho  tính khá trên dòng 
ung  vú MCF-7.
Th nghim  tính Brine shrimp và k ng gây   trên dòng    vú


MCF-7 cho k  khá tng g, ng  hp  arbutin (LC
50
=20


g/ml)
và rutin
(LC
50
=50

g/ml)
 tính Brine shrimp m nhng không   vi dòng  ung 
vú MCF-7 (I%= 1,33  vi arbutin và I%= 3,53  vi rutin).
So sánh  tính kháng ung  trên dòng  bào ung  vú MCF-7  m p 
thioflavon và flavon tng n tron các hp   nghim, hai  h 5-
hydroxythioflavon (I%= 21,83) và 5-hydroxyflavon (I%= 20,39); 3,7,2',4'- tetrametoxy-5-
hydroxythioflavon (I%= 9,89) và 3,7,2',4'-tetrametoxy-5-hydroxyflavon (I%= 9,59) cho 
tính g  tng  nhau, trong khi   4'-butyloxy-5,7- dihydroxythioflavon (I%=
28,04) cho  tính  hn  so vi 4'-butyloxy-5,7- dihydroxyflavanon (I%=92,60).
Bảng 2:   t nghim  tính Brine shrimp và k ng gây   bào trên dòn
ung  vú MCF-7  các cao trích và hp  tinh k
21. N
0

22. 
23. 
24. 
25. Brine
shrimp
26. LC
50
(g/ml)
27. 


28. 
vú
29. MCF-7
(I%)
30. 1
31. 
32. 10
33. 97,10
34. 2
35. H. auricularia
36. 100
37. 40,86
38. 3
39. Cao cloroform H. auricularia
40. 100
41. 47,97
42. 4
43. H. biflora
44. 1000
45. - 4,78
46. 5
47. Cao metanol H. biflora
48. 500
49. 9,63
50. 6
51. H. nigricans
52. 100
53. 24,27
54. 7

55. Cao etH. nigricans
56. 500
57. 1,25
58. 8
59. Cao cloroform H. nigricans
60. 100
61. 31,07
62. 9
63. Cao etyl acetat H. nigricans
64. 100
65. 13,54
66. 10
67. Cao metanol H. nigricans
68. 10
69. 65,13
70. 11
71. Acid ursolic
72. 0,1
73. 64,59
74. 12
75. Acid oleanolic
76. 10
77. 19,16
78. 13
79. -Amyrin
80. 10
81. 98,23
82. 14
83. Arbutin
84. 20

85. 1,33
86. 15
87.

-Sitosterol 3-

-O-D-glucopyranosid
88. 500
89. - 3,34
90. 16
91. 1,4-Dihydroxy-9,10-antraquinon
(Quinizanin)
92. 100
93. 23,63
94. 17
95. 5,7-Dihydroxyflavon (Chrysin)
96. 100
97. 19,69


98. 18
99. 3,5,7,3',4'-Pentametoxyflavon 3-rutinosid
(Rutin)
100. 50
101. 3,53
102. 19
103. -Trihydroxyisoflavon (Biochanin A)
104. 20
105. 73,37
106. 20

107. 5-Hydroxyflavon (Primuletin)
108. 100
109. 20,39
110. 21
111. 5-Hydroxythioflavon
112. 100
113. 21,83
114. 22
115. 3,7,2',4'-Tetrametoxy-5-hydroxyflavon
116. 500
117. 9,59
118. 23
119. 3,7,2',4'-Tetrametoxy-5-hydroxythioflavon
120. 500
121. 9,89
122. 24
123. 5,7,4'-Trihydroxyflavanon (Naringenin)
124. 50
125. 71,92
126. 25
127. 4'-Butyloxy-5,7-dihydroxyflavanon
128. 50
129. 92,60
130. 26
131. 4'-Butyloxy-5,7-dihydroxythioflavon
132. 100
133. 28,04
Riêng hp ct 5,7,4'-trihydroxyflavanon (I%=71,92) sau khi c   
 alkyl hóa thành -butyloxy-5,7-dihydroxyflavanon (I%= 92,60) cho ho tính mh hn
 rõ.

Da trên k  nghiên cu   Thành  các thioflavon có  tính kháng
k m hn và có k ng c    ra NO trên  bào vi  kinh m BV-2
ng so vi các flavon tng ng. Tuy nhiên, vi  tính kháng dòng  bào un vú
MCF-7, các hp  thioflavon  nghim cho h tính ng   hn so vi hp 
flavon tng ng.

 


3. 
1.1. Các cao trích và các hp ch tinh khit  nghim h tính sinh  thu c v
kho sát thành  hóa   ba loài cây  chi Hedyotis là H. auricularia (L.) Lam., H.
biflora (L.) Lam. và H. nigricans (L.) Lam ) [9-12]. Các hp  thioflavon   
 ng gia các flavon tng ng và tác  Lawesson trong  k vi sóng
không dung môi [13]
.

1.2.  tính kháng kí sinh trùng  rét Plasmodium falciparum: gi m th  Phòng thí
nghim Sinh  kí sinh trùng và Sinh hóa     tàng thc v  g hòa
Pháp, do  s  Quang thc 
1.3.  tính kháng khu gi m   Phòng thí nghim Công ng sinh  phân t,
Khoa Sinh, Trng   Khoa   nhiên, TP. HCM.
1.4.   tính Brine shrimp: m  c thc   phòng thí nghim Hóa Hu c,
Khoa Hóa, trng   Khoa  T nhiên, TP. HCM.


M  c xem là không    LC
50
> 1000


g/ml.
  c xem là có
 ha  có    LC
50
< 200

g/ml.

1.5.  k ng gây   bào trên dòng t bào ung  vú MCF-7: gi m  
thí nghim Công n sinh  phân t, Khoa Sinh, trng  KHTN. ghim c
 hành  phng pháp MTT trên  ung  vú MCF-7.
Phương pháp MTT: là phng pháp so màu  có tính  lng, dùng   s
ng, ng sinh và  ng  t bào. Phng pháp  da trên  n nhng enzym
dehydrogenase trong các t     hp  màu vàng,  c trong nc là
bromur
3-(4,5-dimetylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl
tetrazolium thành s formazan màu xanh
 không tan trong nc. S lng formazan  thành  ánh trc  ng 
không phân chia nhng v ng OD  các gng th nghm sau 72 gi. Các giá  thu
c c     thí nghim là giá  I%,    ng kháng phân bào c hp
 n v là %.



I% c tính theo công thc sau :

I% =
CT
C





x 100 %
I%: k ng kháng phân bào c hp  (%)
C : giá    chng
T : giá  

TÀI  THAM 

1. Tran Thanh Dao (2005), T. N. Tuyen, H. Park, Synthesis and iNOS inhibitory activities of
thioflavones, Arch. Pharm. Res., 28, 652-656.
2. Phan c Bình (2000), Tạp chí Thuốc và Sức khỏe, 125, tr. 31.
3. Ho T-I., Chen G-P., Lin Y-C., Lin Y-M., Chen F-C. (1986), An anthraquinone from Hedyotis
diffusa, Phytochemistry, 25, pp. 1988-1989.
4. Hong X.X., Min W., Boon N.L. (1996), Screening of traditional medicines for their
inhibitory activity against HIV-1 protease, Phytother. Res, 10, pp. 207 - 210.
5. Kim Sung Hoon, Ahn Byung-Zun, Ryu Shiyong (1998), Antitumour effects of ursolic
acid isolated from Oldenlandia diffusa, Phytother. Res, 12, pp. 553-556.
6.  Hoàng H Cây có vị thuốc ở Việt Nam, NXB  tr. 512-515.
7. Montagnac A., Provost J. T., Litaudon M., Pais M. (1997), Antimitotic and cytotoxic
constituents, Myodocarpus gracilis, Planta. Med., 63, pp. 365-366.
8.   Li (1986), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Khoa    Hà
 264 -268.
9.  Ng Kim  Ng Kim Phi g, Phm  Hùng (2005), Khảo sát thành
phần hóa học của cây Hoa Kim Cương Hedyotis nigricans, họ Cà Phê (Rubiaceae), 
Hóa   Nam, 43(6), 778-782.
10.  Ng Kim  Ng Kim Phi g, Phm  Hùng (2007), Khảo sát thành
phần hóa học của cây An Điền Tai Hedyotis auricularia, họ Cà Phê (Rubiaceae),  chí Hóa
  Nam, 45(2), 233-236,.

11. Phm Ng Kim Tuyn, Ng Kim Phi ng, Phm  Hùng, Poul Erik Hansen
(2007), Khảo sát thành phần hóa học của cây An Điền hai hoa Hedyotis biflora, họ Cà phê
(Rubiaceae), Tuy Các Công Trình  ng Khoa  và Công ng Hóa u 
toàn    4, 252-255.
12. Phm Ng Kim  Ngu Kim Phi ng, Phm ình Hùng (2008), Cô lập một
vài flavon và antraquinon từ cây Hedyotis auricularia, họ Cà phê (Rubiaceae),  chí Khoa
 và Công ng 46, 237-243.
13. Pham Nguyen Kim Tuyen, Nguyen Kim Phi Phung, Fadhil S. Kamounah, Wei Zhang
and Poul Erik Hansen, NMR of a series of novel hydroxyflavothiones, Magn. Reson Chem,
Published online in Wiley Interscience, July 2009.