Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết và khả năng chống rối loạn lipit của dịch chiết từ lá cây dâu tằm (morus alba l )

TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI 2
KHOA SINH - KTNN
*********


LÊ THỊ MAI




NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HẠ ĐƯỜNG HUYẾT
VÀ KHẢ NĂNG CHỐNG RỐI LOẠN LIPIT
CỦA DỊCH CHIẾT TỪ LÁ CÂY DÂU TẰM
(Morus alba L.)


TÓM TẮT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC
Chuyên ngành: Hóa sinh học



Ngƣời hƣớng dẫn khoa học
ThS. PHÍ THỊ BÍCH NGỌC



HÀ NỘI  2014
LỜI CẢM ƠN

  tài này, tôi xin chân thành cThS. Phí Th Bích Ngc,

ng dn và to mu kin thun li nht giúp tôi hoàn
 tài này.
Tôi xin chân thành c    Trung tâm H tr thit b và
Chuyn giao công ngh - i hm Hà Ni 2, Vin V sinh
Dch t  cao hu ki tôi trong
sut thi gian hc tp và nghiên cu.
Tôi xin gi li cc nht tn bè, là nhi
luôn bên c tôi trong sut thi gian nghiên cu.
Trong quá trình nghiên cu vì thi gian có hu làm quen
v   u khoa h  tài không tránh khi nhng
thiu sót. Vì vy, tôi rt mong nhc s a các quý thy cô và
các b  c hoàn thi
Tôi xin chân thành c

Hà Ni, ngày 15 
Sinh viên thực hiện

Lê Thị Mai






LỜI CAM ĐOAN

 tài ca riêng tôi, do chính tôi thc hii
s ng dn ca cô giáo Phí Th Bích Ngc  nghiên cu
các tài liu tham kho. Nó không trùng vi kt qu ca bt kì tác gi nào tng
công b.

Hà Ni, ngày 15 tháng 05 2014
Sinh viên thực hiện

Lê Thị Mai















KÝ HIỆU CÁC CỤM TỪ VIẾT TẮT

BP
Béo phì

T bào beta - o tu Langerhans

u tr

ng
EtOAc

Ethylacetate
EtOH
Cao cn tng s
HDL
Lipoprotein t trng cao
LDL
Lipoprotein t trng thp

n
IDF
International Diabetes Federation
VLDL
Lipoprotein t trng rt thp
TC
Cholesterol toàn phn
TG
Triglyceride
STZ
Streptozocin
YHCT
Y hc c truyn
WHO
World Health Organization

DANH MỤC HÌNH VÀ BẢNG

Hình 2.1. Cây Dâu tm (Morus alba L.)

Hình 3.1. Chut béo phì (A) và chung (B)

n
Hình 3.3. Bi so sánh mt s ch s hóa sinh gia các lô chut
Hình 3.4 t
Hình 3.4 14

Hình 3.5. 
Bng 1. Phân loi BMI ca ng thành châu Âu và châu Á
Bng 2. Thành phn th
Bng 3. Mô hình nghiên cu kh  glucose c  n dch
chit t lá cây Dâu tm










MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1
1. Lý do ch tài 1
2. Mc tiêu nghiên cu 2
3. Ni dung nghiên cu 2
c tin và khoa hc 2
Chƣơng 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3
1.1. Vài nét chung v cây Dâu tm (Morus alba L.) 3
m sinh hc 3
1.1.2. Mt s tác dng Sinh - c và công dng ca lá cây Dâu tm 3
ng huyt 4
1.2.1. Khái nim 4
1.2.2. Nguyên nhân 4
1.2.3. Du hiu - triu chng 4
1.3. Ri loi lipid 4
1.3.1. Khái nim 4
1.3.2. Phân loi 4
1.3.3. Nguyên nhân và triu chng ri lon lipid 5
1.4. Bnh béo phì (Obesity) 5
1.4.1. Khái nim và phân loi bnh béo phì 5
1.4.2. Thc tr gii và Vit Nam 6
1.4.3. Nguyên nhân gây béo phì 7
1.4.4. Tác hi ca bnh béo phì 7
1.4.5. Giu tr bnh béo phì 7
1.5. Bng (Diabetes mellitus) 8
1.5.1. Khái nim và phân loi 8
1.5.2. Thc trng trên th gii và Vit Nam 8
 sinh bnh c 10
1.5.4. Tác hi và bin chng 11
1.5.5. Mt s thuc tng hu tr b 12
ng vi y hc c truyn 12

1.5.7. Mi quan h gia béo phì và ng 13
Chƣơng 2. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15
ng nghiên cu 15
2.1.1. Mu thc vt 15
2.1.2. Mng vt 15
2.1.3. Hóa cht và dng c thí nghim 16
u 16
2.2.1. Xây dng mô hình chut béo phì thc nghim 16
2.2.2. Nghiên cu tác dng h ng huyt ca dch chit lá cây Dâu
tm lên chut nhng STZ 17
2.2.3. - c 18
2.2.4. X lý s liu bng kê toán hc 20
Chƣơng 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 22
3.1. Kt qu xây dng mô hình chut béo phì thc nghim 22
3.2. Tác dng h glucose huyt ca dch chit t lá cây Dâu tm trên mô
hình chu 25
3.2.1. Kt qu to mô hình chuc nghim 25
3.2.2. Tác dng cn dch chit t lá cây Dâu tm

n nng
 glucose huya chu type 2 26
3.2.3. Tác dn chuyn hóa lipid ca lá cây Dâu tm

trên mô hình
chu 28
KẾT LUẬN 30
KIẾN NGHỊ 31
TÀI LIỆU THAM KHẢO 32

1

MỞ ĐẦU

1. Lý do chọn đề tài
Hin nay, bnh tim m
nng cho toàn nhân loi. B là hu qu ca béo phì (BP) và tha cân
quá mc. Không ch mang tính cht là mt bnh m còn kéo theo
nhiu bin chng nguy hit qu, hôn mê, ct ct chi, mù lòa
   là 10 - 12%,
 - 
            


 .
Ngày nay, y hc hii i nhiu loi thuc chu
qu i thuc này có nhiu tác dng
ph u tr  [2]. Theo nghiên cu v chi phí cho b
c thc hin bi Hip hng th gii (IDF) thì ti  mi
i m s tn 25% thu nhp cu tr, 
M là 10%,  mt s quc gia khác con s ng t 10 - 20%. Theo
kho sát ca Vin Ni ti, công b vào gic ta
có 5,i mc bnh t trong nhc có t phát
trit toàn cm ho sc kho mà toàn cu phi
gánh cht s  gii thm l
Chính vì th, WHO khuyn cáo nghiên cu phát trin các loi thuc có
ngun gc t thc, vc liu sn có, không ng
n môi sinh, giá thành r, ít tác dng ph, d c cng chp nhn.
Các nhà nghiên cu Vic tác dng h ng
huyt ca nhic ling v thuc c truyp

2

ng, Bch trut Không ch dng  nhng nghiên cu sàng lc tác dng
ca cht hot tính t thc vt ng vt thí nghim, nhiu nghiên c
 các thành phn hot cht t nhc liu có
tác dng cha b.
Cây Dâu tm có tên khoa hc là Morus alba L.  Vit Nam, loài cây
 c bi n trong các bài thuc dân gian cha cm mo, h st, h
huyt áp, cha chng m hôi trm, chng th huyc bit, lá cây Dâu
tm theo dân gian có kh nh huyng huyt.
Vic nghiên cu tác dng dch chit ca lá cây Dâu tm nh
khoa hc cho vic s dng chúng mt cách hp lý, hiu qu c
tin rt quan trng trong phòng u tr b. Xut phát t 
thc tin trên, chúng tôi la ch tài “Nghiên cu tác dng h ng
huyt và kh ng ri lon lipit ca dch chit t lá cây Dâu tm
(Morus alba L.)”.
2. Mục tiêu nghiên cứu
Nghiên cu tác dng h ng huyt và kh ng ri lon lipit
ca dch chit t lá cây Dâu tm (Morus alba L.).
3. Nội dung nghiên cứu
- Xây dng mô hình chut BP thc nghim, chu type II.
- ng cn dch chin trng, mt
s ch s lipit máu ca chut BP thc nghim, n glucose huyt trên mô
hình chu mô phng type II.
4. Ý nghĩa thực tiễn và khoa học
- c tin: Giúp nhi bi
gim kh  mc b
- c: Cung cp 1 s dn liu khoa hc v tác dng h ng
huyt và kh ng ri lon lipid ca dch chit t lá cây Dâu tm.
3

Chƣơng 1
TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1. Vài nét chung về cây Dâu tằm (Morus alba L.)
1.1.1. Đặc điểm sinh học
Dâu tm (Morus alba L.) hay còn gi là dâu ta, dâu trng, dâu cang thuc
h Dâu tm (Moraceae) là mt loài cây g t nh n nh, ln nhanh, có th cao
ti 15 - 20m. Cành mm, lúc non có lông, sau nhn và có màu xám trng, chi
nách nh màu nâu vàng. V thân có nt sn, có m tra. Lá mc so le,
hình bu dc, hình tim hoc hình trng rn  u
u, phi - 5 thùy trên các nhánh còn non, 3 gân  gc,
t ti chiu dài ca phin cùng  1/2 chiu dài phin
lá. m r Lá kèm còn non hình tam giác nhn, khi già
xon li thành hình du nhn. Hoa - t c có nhu cái lép [7].
1.1.2. Một số tác dụng Sinh - dƣợc và công dụng của lá cây Dâu tằm
Lá cây Dâu ti là Tang Dip) có v ng ngt, tính hàn, có
công hiu mát gan sáng mt, lng, thông khp
ng tân dch, dùng cha cm su, chóng
mng, m, xut huyt do cht cn,
chân phù [5].
i Trung Qu dng lá cây Dâu tm trong các bài thu
y t rt lâu. Lá cây Dâu tm hãm l c u  chng mt mi, suy
c, mt ng, suy gim min dch, h tr h ng huyt. Mt s thc
nghim lâm sàng cho thlá cây Dâu tm hng ngày hoc hãm có
kh nh huyt áp, nhng huyt, làm gi 
t qu  t áp và bin chng  i .
  
            
].

4

1.2. Tăng đƣờng huyết
1.2.1. Khái niệm
 ng huyt là mt thut ng k thu  ng trong máu
cao. ng trong máu cao x     có quá ít insulin hoc 
không s dng.
1.2.2. Nguyên nhân
c hp th trc tip vào máu sau khi 
th  vào hu ht các t bào ca các mô và không có s tham gia ca insulin,
mt hormone tit ra t tuyn ty.
1.2.3. Dấu hiệu - triệu chứng
- Du hic, m mt, mt mi, nhu.
- Triu chng: Không gây ra triu ch  n khi giá tr ng
huyt cao có ý nga trên 200 milligram/decilit (mg/dl), hoc 11 millimoles/
lít (mmol/l). Các triu chng cng huyt phát trin t t trong vòng
vài ngày hoc vài tun.
1.3. Rối loạn trao đổi lipid
1.3.1. Khái niệm
S thii hay tuyi insulin trong b
gây tình tri chuyn hóa glucid. Do ri lon chuy
theo hàng lot ri lon chuyi lon lipid [15]. Ri lon
lipid máu là tình trng  cholesterol, triglyceride huyc c hai,
hoc gim nng  lipoprotein phân t ng  lipoprotein phân
t ng tha ng mch.
1.3.2. Phân loại
Trên thc hành lâm sàng, phân loi ri lon lipid máu da trên nhng ri lon
tiên phát hoc th phát và tính ch: n,
  cholesterol và TG n hp) [13].
5

1.3.3. Nguyên nhân và triệu chứng rối loạn lipid
- Nguyên nhân gây ri lon lipid máu có th là nguyên phát (do các bnh
v gen) hoc th ng, sinh hot hoc mt s bnh lý).
- Ri long không có triu chu ht là
nhng triu chng . Bnh nhân có th biu hin
bng các triu chng ca bnh tim mnh mch vành (BMV), bnh
mch máu ngoi biên, bng mch cnh. N TG cao (> 1000 mg/dl
hoc > 11,3 mmol/l) có th gây viêm ty cp.  m cc k cao, TG có
th làm huya. Triu chng có th gp là bnh nhân khó
th, ln ln, d cm.
1.4. Bệnh béo phì (Obesity)
1.4.1. Khái niệm và phân loại bệnh béo phì
Bnh BP c ng tích lu m quá mc và
không ng ti m hay toàn thân ti mc ng ti
sc khe. T chc này dùng ch s kh 
a hay thiu ht m ca mi.
Ch s kh c tính theo công thc sau:

2
W
B M I
H


ng (kg)
H: Chiu cao (m)

6

Bảng 1. Phân loại BMI của ngƣời trƣởng thành châu Âu và châu Á



châu Âu



< 18,5
< 18,5

18,5 - 24,9
18,5 - 22,9

- 29,9


30 - 34,9
> 23 - 24,9

35 - 39,9
25 - 29,9




1.4.2. Thực trạng béo phì trên thế giới và Việt Nam
* Trên thế giới
Theo WHO  gii có khong 1,6 t i b tha
i b BP và d  n khong 2,3
t i b tha cân vi b .
- n 3,5%; Philipin 4,27%;
Malaysia 3, T].
* Ở Việt Nam
    ng Qu       i
ng thành 25 - 64 tui cho thy t l tha cân - BP là 16,8% và còn có xu
ng TS. Nguyn Công Khn thì t l này  thành
th l n gii. Tr em Vit Nam 
16,3% mc tha cân BP [9]. Hà Ni có 4,9% tr 4 - 6 tui mc bnh, Thành
ph H Chí Minh có 6% tr i 5 tui và 22,7% hc sinh tiu hc
vào tình trng này. Theo s ling toàn qu
Ving Quc gia công b thì tình trng tha cân - BP nhn
p t  - 2010) t l tr 
9 ln. Vi nhng hiu bit hin nay, tha cân - c coi là nhng
7

n tc bit vi nhi có ch s BMI
cao li có vòng eo ln -  Y t thành lp
Trung tâm phc hng và kim soát béo phìc thuc Vin Dinh
ng, chính thc tuyên chin vi bnh BP.
1.4.3. Nguyên nhân gây béo phì
BP do nhiu nguyên nhân khác nhau, có th    
nhân ch yu sau: thói i vng và yu t 
1.4.4. Tác hại của bệnh béo phì
Tha cân - t v sc kho cng hàng

u  n. Nhiu qut quan ngi v
tình trng BP vì nu không có nhng bin kp thi, BP có th
tr i dch tht s. BP có kh  thành tác nhân gây t vong s 1
 M thuc lá.
Ti các thành ph ln, có ti trên 10% hc sinh tiu h  i
 tui 30 - 60 b tha cân - BP. Tha cân - n
nhiu tình trng bnh lý quan trng coi t l BP là chóp
ca tnh mn tính không lây  type 2 (khong
ng h ph n là do BP) và mt s bnh v tim
mt áp  p là mt trong nhnh
chu tác hi nghiêm trng ca tình trng này.
1.4.5. Giải pháp và điều trị bệnh béo phì
 phòng bnh BP có hiu qu, mi cá nhân cn nâng cao nhn thc
v ng hp lý và hong th lc. Trên phm vi xã h
bnh cn tc bnh này [6].
u tr tha cân - BP cn phi phi hp nhiu bin pháp, tuân th
n các bin pháp gu chnh ch  ng
vi li sng và dùng thung dn ca thy
thuc khi cn.
8

1.5. Bệnh đái tháo đƣờng (Diabetes mellitus)
1.5.1. Khái niệm và phân loại
1.5.1.1. Khái nim
Theo WHO, t hi chng ri lon chuyn hóa cacbohydrat có
c tính biu hin bu qu ca vic thiu hoc mt
hoàn toàn insulin hon s suy yu trong bài tit và hot
ng ca insulin.
 là mt nhóm các bnh chuy
trong máu, hu qu ca s thiu ht bài tit insulin, khim khuyt trong hot

ng ca insulin hoc c  glucose máu mng kt hp vi
s hy hoi, s i lon chc n suy yu cha nhi
quan, c bit là: mt, thn, thn kinh, tim và mch máu [13].
1.5.1.2. Phân loi
Da vào s ng và m nhy cm vi insulin, b 
thành hai nhóm [11]:
ng gp  i gy, tri 40 tui có gim s ng
t ( - Langerhans) b phân hy và n insulin máu rt thp.
ng gp  i ln tui, không gim s ng t 
và n insulin trong máu bình thng hoc cao.
1.5.2. Thực trạng đái tháo đƣờng trên thế giới và Việt Nam
* Trên th gii
Theo thng kê ca IDF gii có 382 trii mc bnh
  
theo thng kê này, trung  gi
sinh mng ca gn 5 trii trên th gii.
 th gii là 4,3 t i n 6,6% mc
b9% ri lon dung n th gii
9

d kin là 8,8 t i thì s có khong 7,8% mc b và t l ri lon
dung nng là 8,8%.
Theo WHO: N th gii có 135 trii mc b
chim 4% dân s th gii và d n
i m bnh này, chim 6,0%. T l b
lên   c phát tri         
Vit Nam) s là 170%.
 y,   nh không lây nhim có t  phát trin nhanh
chóng nht trên th gii ch yc rin. Nó 
nng cho s phát trin kinh t, xã hi và sc khe ci toàn th gii

trong th k 21 [3].
*  Vit Nam
 
6 vùng sinh thái  
Trung, Tây Nguyên, 
 

dân  
  


 
 
 
t. Vì th là mi quan tâm ca ngành Y
t mà còn thu hút c s chú ý ca các nhà qun lý xã hi.
10

1.5.3. Cơ chế sinh bệnh của ĐTĐ
 ngh phân loi da trên nhng tin b
khoa hc trong nh     i này da vào hiu bit v
nguyên nhân sinh bnh:
a. Đái tháo đƣờng type 1 (ĐTĐ phụ thuộc insulin)
trng huyt mn tính do hu qu ca
tình trng thiu ht insulin tuyi hoi kèm theo các ri lon
chuyn hóa protein, lipid. Các ri lon này có th n các bin chng cp
tính và mn tính.
+  sinh bnh
Do yu t di truyn kém sn xut insulin, phát bnh t nhiên, ít ph
thuu king. Bnh gp  0,2 - 0,5% s i trong qun

th và chim 5 - 10% s i m.

- n 1: Bn cht di truyn - nhy cm gene
- n 2: Khi phát quá trình t min
- n 3: Phát trin mt lot các kháng th
- n 4: T o ty
-  lâm sàng, phá hy hoàn toàn hoc g
toàn t o ty. Biu hi thuc insulin có kèm
bin chng.

B       m lâm sàng phc tp. Thiu ht
insulin tuyi ng huyt và axit béo quá mc dn t
lc thm thu. Bu nhiu, khát nhiu, st cân, m mt,
mt m Bn 1 bt buc phu tr bng insulin.
11

b. Đái tháo đƣờng type 2 (ĐTĐ không phụ thuộc insulin)
 type 2 là tình tr  ng huyt do hu qu ca kháng
insulin  m ch c do suy
gim chc n kháng insulin cy là
dng gp nht. ng gp  bnh nhân ln tui.
+  sinh bnh
Sinh bnh hn bin:
-  n 1: N  glucose trong máu vn  m  ng,
   ng kháng insulin vì m     c bình
ng trong máu.
- n 2: Tình trng nng dn và xut
hit sau b
- n 3: S t insulin suy
giu hin qua bên ngoài.

+ ng thai k
 xy ra  mt s ph n mang thai và s bin mt sau
khi sinh. Có th gây ra các bin chng cho m và con trong quá trình mang
thai. Ph n b  có nhiu kh n thành b
type 2 sau này.
1.5.4. Tác hại và biến chứng
ng trc tin sc khe và kh c ci
 là nguy n chng ca bng rt cao [8].
Bin chng m  nh lý võng mc (27, c thy tinh th
(6,,1%) Bnh v võng mn theo thi
gian phát hin bnh.
Bin chng th   u (11,6%), macroalbumin
(3%), suy thn t   4 (3,5%)
12

Bin chng thn kinh ngoi vi: gim hoc mt phn x c
cm giác rung
Tng m ng rp, bin dng, loét,
hot ct
 (1,2%),
t áp (27,6%)
1.5.5. Một số thuốc tổng hợp điều trị bệnh ĐTĐ
t nhiu loi thuu tr c s dng hin nay.
Da vào tác d tác dng có th chia chúng thành 3 nhóm chính:
- Insulin và các thuc kích thích t bào  bài ti  : các
sulfonylurea, meglitinnide và nateglinide.
- Các thuc ci thin tình trng kháng insulin  t   :
biguanide, thiazolidinedion.
- Các thuc ch   t sau b ng cách c ch
enzyme phân gii tinh b

Tuy nhiên, vic s dng các thuc trên còn gây ra mt s tai bin và tác
dng không mong mun. Ví d: Insulin gây phn ng d ng, long mô
 ch ng huyt hi ng; s dng các sulfonylurea gây d ng
ngoài da, ri lon tiêu hóa, gim bch cu, h tiu cu
1.5.6. Đái tháo đƣờng với y học cổ truyền
c phiêu khát
t cháy tân dch   th (tiêu) t  i
phu, ung nhiu  p tân dch [4]. Tiêu khát có nhiu hình thc
t cháy, tiêu hao tân dch, có th ch yu bng niu, bng st,
ra m hôii cùng gây ra ba triu chng ch yu là: u, ung nhiu
và tiu nhiu nhiu cht béo, ngt làm mt cân
b, to thành ha nhit, ut nhit, làm phn âm ca
13

ph t thn b hao tn. Ha nhit làm ph ng tiêu
khát, v âm gây chng gu nhiu và ting.
Xut phát t quan niu tr ch yng âm,
thanh nhit sinh tân d  lp li cân b.
 u tr hiu qu ên cnh ch  ng và tp luyn hp lý thì
vic s dng tho mu tr b c bit n vi nhiu
tác dng tích cc. Các thuu tr b yu là các thuc
có ngun gc t c liu. Mt s tho mc rt sc có tác dng h
tr u tr  Bng, 
1.5.7. Mối quan hệ giữa béo phì và đái tháo đƣờng
nh không truyn nhim nguy him nht ca th k
21. nh này có mi liên quan cht ch vi nhau th hin  trong s
nhc chi bkhong 80 - 
c ch BP. Mt cuc kho sát ca M g ra rng có
ti 58% s i b c quy cho là do BP.
Nhiu nghiên cu trên th githy rng: tha cân - BP có mt mi

liên quan cht ch n tính kháng insulin và b
không loi tr  các bi s ri lon
chuyn hóa glucid, s ri lon này ng ni môi 
kéo theo hoc làm quá trình ri lon chuyn hóa lipit  mi lo
nha ri lon chuyn hóa lipit trong
    , gim HDL-c và LDL-c vn nm trong gii hn bình
ng. Tuy nhiên  i lo s mc
glucose máu khác vi type 2, ri lon này có th vn kéo dài mc dù có s u
tr gim glucose máu thích hp. LDL-c c  và xut
hin nhiu LDL-c vc nh và nc kim soát glucose
u t a ng mch [10].
14

Kt qu ca nhiu nghiên cu cho thy acid béo t do có vai trò trong
bn li BP có n acid béo trong huyt
 ng này c ch quá trình hp thu glucose ngoi tác
dng ca insulin, c ch s dng glucose, c ch oxy hóa glucose  
Có nhiu nhân t ng ti mi quan h gia BP và b
type 2 bao gm: ch s kh, thi gian BP, ch  dng, s vn
ng thân th. Mt th rng: i có ch s kh l
30kg/m
2
     c b     p hai ln
i b u tr t kilogram thì ri
ro v b5%.

15

Chƣơng 2
ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1. Đối tƣợng nghiên cứu
2.1.1. Mẫu thực vật
+ Lá cây Dâu tm (Morus alba L.).
+ B phn s dng: Lá.
m, thi gian thu mu: Lá cây Dâu tc thu vào tháng 8
i huyn Sóc - Hà Ni.

Hình 2.1. Cây Dâu tằm (Morus alba L.)
2.1.2. Mẫu động vật
Chut nht trng chng Swiss nng t 14 - 16c nuôi BP và gây
n V sinh Dch t cp.

Hình 2.2. Chuột nhắt trắng chủng Swiss
16

2.1.3. Hóa chất và dụng cụ thí nghiệm
* STZ (streptozotocin) Sigma, ST.Louse.
* n dch chit t lá cây Dâu t   n tng s
(EtOH), n-hexan, ethylacetate (EtOAc).
* ng huyt t ng One Touch Ultra.
* B kít th Medisense optium blood glucose electrodes.
* Cân phân tích, cân k thut, lng nuôi chut
2.2. Phƣơng pháp nghiên cứu
2.2.1. Xây dựng mô hình chuột béo phì thực nghiệm
Chut nht trng chng Swiss, sau khi mua v 
ng trong 3 -  thích ng vng mi. Sn hành
phân chut thành 2 nhóm vi hai ch  ]:
Nhóm 1 - Nhóm đối chứng: Các con chut tip tc 
bng thng.
Nhóm 2 - Nhóm nuôi béo: Các con chung ch
 th
Bảng 2. Thành phần thức ăn giàu lipid
Thành phần
Tỉ lệ %
Hydratcacbon
41
Lipid

32
Protein
20
Cholesterol
1
Cht khoáng
4
Vitamin & acid amin
2

Các nhóm chuc theo dõi trong vòng 8 tun, trng ca các
con chuc kim tra hàng tun.
17

2.2.2. Nghiên cứu tác dụng hạ đƣờng huyết của dịch chiết lá cây Dâu tằm
lên chuột nhắt gây ĐTĐ type 2 bằng STZ
 tìm hiu tác dng h ng huyt ca dch chit lá cây Dâu tm;
c tiên, chúng tôi tin hành gây mô hình chung type 2 da
trên ch  t béo kt hp vi STZ liu thp [19], [20].
2.2.2c nghim mô phng type 2
Chung tiêm STZ (110mg/kg pha
m citrate 0,01M, pH = 4,i màng bngc khi thí nghim
cho chut nh. c và thbình
ng. Sau 3 - 4 ngày nhng con chut này b bnh vi n glucose
huyn hành phân các lô chut  b
nghiên cu kh  ng huyt khi s dn dch chit t
lá cây Dâu tm.
i chu tr
u tr bn EtOH
u tr bn n-hexan

u tr bn EtOAc
2.2.2.2. Th kh a n dch chit t lá
cây Dâu tm trên mô hình chu
Các lô chu 2 u tr hng ngày
bng cách cho u  n dch chit t lá cây Dâu tm vi liu
ng huyt ca các con chuc t thm
trong ngày và sau khi nh  các ngày th u tr),
ngày th 5, 10, 14 u tr.



18

Bảng 3. Mô hình nghiên cứu khả năng hạ glucose của các phân đoạn
dịch chiết từ lá cây Dâu tằm
Lô
Chế độ ăn
trƣớc điều trị
Tiêm
Mục đích
1
Thn

Uc cu tr.
2
Th
STZ
Uc cu tr.
3
Th

STZ
u tr n ethanol (2000mg/kg)
4
Th
STZ
u tr n n-hexan (2000mg/kg)
5
Th
STZ
u tr n ethylacetate (2000mg/kg)

2.2.3. Phƣơng pháp hóa sinh - y dƣợc
2.2.3.1. ng glucose huyt
* Nguyên tắc:
Da trên chui phn ng t
h ng glucose huyt.
+ Phn ng 1: Khi máu tip xúc vi b mt ca vùng phn ng que th,
c hiu ca glucose oxidase (GOD) có trong kít th, glucose
trong máu phn ng vi oxy (không khí) to thành axit gluconic và hydro
peroxide (H
2
O
2
).
+ Phn ng 2: H
2
O
2
va to ra s phn ng vi O-Dianisidin to phc
c thit b c trong máy One Touch Ultra chuyn hóa

ng biu th bng s mmol/l hoc mg/dl glucose.
* Tiến hành:
c 1: u khi khng máy.
c 2: Gn que th vào máy.