Khảo sát ảnh hưởng của BA và NAA lên các giai đoạn nhân giống in vitro lan dendrobium soniaearsakul

KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA BA VÀ NAA LÊN CÁC GIAI ĐOẠN NHÂN
GIỐNG IN VITRO LAN DENDROBIUM SONIA EARSAKUL

SVTH: MSSV: 60702516
GVHD: Ks. Nguyễn Phi Viễn Phương
Ts. Lê Thị Thuỷ Tiên


MỞ ĐẦU


NỘI DUNG THỰC HIỆN

1. Tổng Quan
1.1. Đối tượng nghiên cứu
1.2. Giá trị kinh tế
1.3. Lý do thực hiện đề tài
2. Vật liệu - phương pháp nghiên cứu
2.1. Vật liệu
2.2. Phương pháp nghiên cứu
3. Kết quả nghiên cứu và bàn luận
4. Kết luận và kiến nghị
4.1. Kết luận
4.2. Kiến nghị


1. TỔNG QUAN
1.1. Đối tượng nghiên cứu

Dendrobium Sonia Earsakul

Lớp:

Monocotyledones

Bộ:

Orchidales

Họ:

Orchidaceae

Họ phụ:

Epidendroideae

Tông:

Epidendreae

Giống:

Dendrobium sp

Hình 1.1: lan Dendrobium Sonia Earsakul


1. TỔNG QUAN
1.2. Giá trị kinh tế

Hình 1.2: trồng lan D. Sonia Earsakul theo quy mô công nghiệp ở Thái Lan


1. TỔNG QUAN
1.2. Giá trị kinh tế

Hình 1.3: cây giống lan D. Sonia Earsakul


1. TỔNG QUAN

1.3. Lý do thực hiện đề tài

 Giá trị kinh tế.
 Chủ động nguồn giống
 Quy trình nhân giống chưa tối ưu

Hoàn thiện quy trình sản xuất theo quy mô
công nghiệp


2. VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Vật liệu


2. VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

 Phương pháp nghiên cứu:
Thí nghiệm 1: khảo sát khoáng thích hợp cho lan D. Sonia Earsakul

Bảng 2.1: môi trường nuôi chồi
Ký hiệu

Môi trường khoáng

A1

MS

A2

MS1/2

A3

B5

A4

LV

A5

Knud


2. VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Thí nghiệm 2: khảo sát nồng độ BA lên sự tạo chồi từ chồi đỉnh D. Sonia Earsakul

Bảng 2.2: môi trường tạo chồi
Nghiệm thức

Nồng độ BA (mg/ lít)

B1

0

B2

0,5

B3

1

B4

1,5

B5

2

B6

2,5

2. VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Thí nghiệm 3: khảo sát nồng độ BA lên sự tạo PLBs từ chồi đỉnh lan D. Sonia Earsakul

Bảng 2.3: môi trường tạo PLBs
Nghiệm thức

NAA

Nồng độ BA

mg/l

(mg/l)

C1

0

C2

2.0

C3

3.0
0,5

C4

4.0

C5

5.0

C6

6.0

C7

8.0


2. VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Thí nghiệm 4: khảo sát nồng độ NAA trong sự tạo rễ lan D. Sonia Earsakul
Bảng 2.4: môi trường ra rễ
Nghiệm thức

NAA(mg/l)

D1

0

D2

0,5

D3

1,0

D4

1,5

D5

2.0

D6

2.5


2. VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Kết quả thu nhận và xử lý bằng phần mềm thống kê MSTATC với α =0.05


3. KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN
Khảo sát khoáng thích hợp cho sự tăng sinh
của lan D. Sonia Earsakul

Bảng 3.1: chồi D. Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường khác nhau

Môi

Chiều cao chồi

Số chồi

Chiều dài lá

Hình thái chồi

trường

(cm)

MS1/2

2.150b

1.580c

1.48b

Chồi nhỏ, cao, có rễ

MS

3.150a

2.030b

1.72a

Chồi to, lá xanh, chồi cấy tăng trưởng đồng đều.

LV

2.375b

2.480a

1.43bc

Chồi to, mập, lá xanh

B5

1.825bc

1.960b

1.31d

Chồi nhỏ, xuất hiện rễ

Knud

1.775c

1.640c

1.37c

Chồi nhỏ, lá hơi vàng, xuất hiện rễ

(cm)


3. KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN

Hình 3.1: chồi D. Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường khác nhau

Môi trường MS được sử dụng cho các thí nghiệm sau


3. KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN
Khảo sát BA lên sự tạo chồi
Bảng 3.2: chồi D. Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA thay đổi

Nghiệm thức

Số chồi/ một chồi

Thời gian cảm ứng

Hình thái chồi

Ký hiệu

BA mg/l

ban đầu

chồi (ngày)

B0

0

2.35d

14

Chồi phát triển bình thường

B1

0.5

3.30c

12

Sự hình thành chồi chậm, chồi to, xanh

B2

1

5.05bc

10

Sự hình thành chồi chậm, chồi to, có màu xanh

B3

1.5

6.80b

10

Chồi to, phát triển bình thường, có màu xanh

B4

2

8.10a

7

Chồi hình thành chồi sớm, chồi to, đồng đều, có màu xanh

B5

2.5

8.30a

7

Sự hình thành chồi sớm, chồi không đồng đều, có màu xanh

B6

3

8.65a

11

Sự hình thành chồi sớm, chồi không đồng đều, có màu xanh


3. KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN

Hình 3.2: chồi D. Sonia Earsakul sau 45 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA khác
nhau

Nồng độ BA thích hợp cho sự tạo chồi lan Dendrobium Sonia Earsakul là 2 mg/l


3. KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN
Khảo sát BA lên sự tạo PLBs
Bảng 3.3: PLBs thu nhận sau 60 nuôi cấy trên môi trường có nồng độ BA thay đổi

Nghiệm thức

Số PLBs / một

Hình thái PLBs

BA mg/l

mẫu

0

0e

Không có sự hình thành PLBs

2

0e

Không có sự hình thành PLBs, sự tạo chồi mạnh

C2

3

0e

Không có sự hình thành PLBs, sự tạo chồi mạnh

C3

4

3.650 d

Cảm ứng tạo PLBs chậm, có nhiều chồi nhỏ phát triển

C4

5

5.300 c

Cảm ứng tạo PLBs chậm, có nhiều chồi nhỏ phát triển

C5

6

6.600 b

Cảm ứng tạo PLBs chậm, có nhiều chồi nhỏ phát triển

C6

8

14.50 a

Cảm ứng tạo PLBs sớm, PLBs tròn, có màu xanh

C

NAA mg/l

C0
C1

0,5


3. KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN
C1

C5

C2

C3

C6

C4

C7

Hình 3.3: PLBs thu nhận sau 60 nuôi cấy trên môi trường có nồng độ BA thay đổi

BA 8 mg/l kết hợp NAA 0,5 mg/l thích hợp cho sự tạo PLBs ở lan Dendrobium Sonia Earsakul


3. KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN
Khảo sát NAA lên sự tạo rễ

Bảng 3.4: chồi D. Sonia Earsakul sau 60 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA thay đổi

Nghiệm thức

NAA mg/l

Tổng số rễ/

Chiều dài rễ

1mẫu

(cm)

Hình thái rễ
Thời gian tạo
rễ (ngày)

D0

0

1.05d

1.50d

14

Cảm ứng tạo rễ chậm, số rễ tạo thành ít, rễ ngắn

D1

0.5

1.55c

1.75c

14

Cảm ứng tạo rễ chậm, số rễ tạo thành ít, rễ ngắn

D2

1.0

1.85bc

2.07bc

10

Cảm ứng tạo rễ sớm, rễ tăng trưởng bình thường

D3

1.5

2.00bc

2.49b

10

Cảm ứng tạo rễ sớm, rễ tăng trưởn bình thường

D4

2.0

3.450a

3.38a

8

Cảm ứng tạo rễ sớm, rễ dài, mẫu tăng trưởng bình thường

D5

2.5

3.550a

2.50b

9

Cảm ứng tạo rễ chậm, rễ ngắn, cây chậm phát triển

3. KẾT QỦA VÀ BÀN LUẬN

Hình 3.4: chồi D. Sonia Earsakul sau 60 ngày nuôi cấy trên các môi trường có nồng độ BA thay đổi

Môi trường MS ½ kết hợp với NAA 2 mg/l tạo rễ tốt nhất


4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ

Kết luận

•

Môi trường khoáng thích hợp cho sự tăng trưởng của chồi Dendrobium Sonia Earsakul là môi

trường MS (Murashige và Skoog, 1962)

• Nồng độ BA thích hợp cho sự tạo chồi lan Dendrobium Sonia Earsakul là 2 mg/l
• Sự kết hợp giữa BA 8 mg/l và NAA 0,5 mg/l thích hợp cho sự tạo PLBs ở lan Dendrobium
Sonia Earsakul

• Kích thích tạo rễ là môi trường MS ½ kết hợp với NAA 2 mg/l


4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
Quy trình nhân giống đề nghị
Cây mẹ

Tách đỉnh chồi

BA: 2mg/l

Tạo chồi

0
t: 22C
As: 2000-2500 lux

Ra rễ

NAA: 2mg/l
t: 22C

Huấn luyện giống

Cây con

0

As: 2000-2500 lux


4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
Kiến nghị

•

Khảo sát thêm các yếu tố khác ảnh hưởng tới kết quả thí nghiệm (nhiệt độ, thời gian

chiếu sáng…)

• Tiếp tục theo dõi sự tạo chồi và sự phát triển của chồi Dendrobium Sonia Earsakul
•Khảo ảnh hưởng của BA và NAA lên quá trình nhân nhanh PLBs
• Khảo sát thí nghiệm cảm ứng chồi từ PLBs được tạo thành từ thí nghiệm ba


Cám

Ơ

C
y
ầ
n Th

á
C
à
ôV

Đ
n
ạ
cB

g
n
ắ
ãL

!
e
h
Ng