Một số khâu công nghệ trong việc sản xuất vacxin

Một số khâu công nghệ trong việc sản xuất vacxin:
•
•
•

•
•

•

•

Phân xưởng sản xuất vacxin virus đông khô:
Sản xuất vacxin virus đông khô trên môi trường thai trứng,
phôi tế bào..
Chia liều: vacxin thu được, chia liều , sau đó được đưa vào
hệ thống đông khô. Làm việc trong điều kiện vô trùng.
Hai máy đông khô làm việc trong khoảng 2h – 13h cho ra
10 nghìn lọ vacxin, mỗi lọ khoảng 100 liều, hệ thống được
điều khiển bằng máy tính.
Hoàn thiện sản phẩm
Kiểm nghiệm chất lượng sản phẩm vacxin virus đông khô.
Kiểm nghiệm trên mô bào sống, phôi thai(trứng), động vật
,sau đó, đặt trong tủ ấm (370C) để tạo điều kiện cho tổ
chức sống phát triển.
Phân xưởng sản xuất vacxin vi trùng :
Tổ môi trường: nhiệm vụ là sản xuất các loại môi trường
nuôi cấy cho vi trùng.
Nguyên liệu ở đây là từ thịt bò (thịt bắp)  lọc bỏ gân,
mỡ, mạch máu xay nhỏ đun chin (bằng hơi nước).
Sau đó cho sản phẩm thịt đã được đun chín một lượng

men tiêu hóa (tripsin tách từ tế bào lục giác của mô tụy
tạng), đun trong 6h môi trường lên men ( nước + acid
amin).
Một số loại môi trường nuôi cấy:
- Môi trường thịt yếm khí: để nuôi cấy vi trùng yếm khí, vi
trùng hô hấp tùy tiện. (trong thành phần có bổ sung những
phân tử glycogen)


NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH.

- Môi trường thạch nghiêng (thạch nấm): có thêm glucoza
và bổ sung glycerin.

- Môi trường thạch thường: chỉ gồm nước thịch thường và
agar.
- Môi tường có bổ sung formalin, muối chống nấm, để
kiểm định vi trùng đã chết hoàn toàn hay chưa. Nếu trên
2

2
- -


NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH.
môi trường này vẫn phát triển được thì các môi trường
khác phải nghi ngờ.

- Môi trường thạch máu: ngoài thạch có bổ sung hồng cầu
của cừu. Ngoài việc nuôi cấy vi khuẩn còn có thể xác định

vi khuẩn thuần khiết và vi khuẩn dung huyết.( Giúp trong
quá trình kiểm định độ vô khuẩn cuả vacxin, nếu có mặt
của vi khuẩn gây dung huyết, khi tiêm cho gia súc sẽ gây
tử vong tất nhanh).

•

3

- Ngoài ra, huyết thanh cũng là một nguyên liệu trong nuôi
cấy một số vi trùng.
Hệ thống lên men vi trùng : nồi lên men Pecnito.

3
- -


NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH.

•

Sau khi đã sản xuất thành công môi trường, sẽ tiến hành
quá trình lên men.
Hệ thống lên men vi trùng ở đây gồm 2 nồi lên men: một
nồi to có dung tích là 180l, một nồi nhỏ có dung tích là
10l, được tự động hóa điều khiển mọi thông số trong môi
trường nuôi cấy nhờ hệ thống máy tính điện tử. Công nghệ
lên men ở đây là lên men có sục khí.Năng suất của hệ
thống : từ 6h-8h cho ra một mẻ (1 triệu liều vacxin).
Ở đây luôn luôn duy trì một độ ẩm ( máy nén không khí

 khô không khí đến độ ẩm W = 4%), và áp suất nhất
định cho máy làm việc.
Tổ tiêu độc dụng cụ thiết bị thí nghiệm:
Tất cả dụng cụ, thiết bị sau khi làm xong, sẽ được cho vào
lò hấp và hấp bằng hơi nước nóng. Hệ thồng lò hấp hai vỏ,
muốn tăng nhiệt độ hấp, chỉ cần tăng áp lực hơi nước đi
vào. Nhiệt độ quá cao, sẽ có hệ thống hút nhiệt.

Tìm hiểu về quy trình kiểm nghiệm vacxin phó thương hàn
lợn nhược độc.
Đối tượng áp dụng:
Quy trình này áp dụng cho việc kiểm nghiệm vacxin
nhược độc chế từ chủng vi khuẩn Salmonella choleraesuis
đông khô.
•

•

4

Quy định về kỹ thuật:
Lấy mẫu: Mẫu được lấy theo TCVN 160-2008 “ Quy trình
lấy mẫu thuốc thú y và vacxin thú y để kiểm tra chất
lượng”.
Kiểm tra thuần khiết: Theo tiêu chuẩn 161-2008 “ Vacxin
thú y- quy trình kiểm tra thuần khiết” bao gồm:
o Kiểm tra sự tạp nhiễm vi khuẩn.
o Kiểm tra sự tạp nhiễm nấm mốc.
o Kiểm tra sự tạp nhiễm Mycoplasma.
4

- -


NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH.
Vacxin được kiểm tra trên các môi trường đặc biệt
như:
o Môi trường MacConkey agar (màu đỏ) : đây là môi
trường thích hợp cho sự phát triển của vi khuẩn Gr
(-) và cho nó lên men lactose.
Thành phần :
- Pepton.
- Lactose
- Mật muối( hỗn hợp acid steroid với ion natri)
- Nacl
- Toluylene đỏ (thuốc nhuộm)
- Agar
- Nước.
o Môi trường KIA: màu đỏ.
Thành phần : peptone, lactose/glucose = 10/1,dẫn
xuất cuả lưu huỳnh, chất chỉ thị đỏ phenol, sắt (2)
amoni citrate.
o Ngoài ra vacxin còn được kiểm tra sự ngưng kết với
acriflavin ( hoạt chất kháng khuẩn) 1/500 ( phản ứng
lên bông).
Kiểm tra an toàn: dùng một trong những phương pháp sau
đây:
o Tiêm vào dưới da cho 3 con lợn cai sữa khỏe
mạnh ( không có kháng thể chống Salmonella
choleraesuis) ,(20-30kg /con), mỗi con 10 liều
vacxin quy định. Tất cả lợn phải sống khỏe

mạnh và phát triển bình thường sau 7 – 10 ngày
theo dõi.
o Tiêm vào dưới da cho ít nhất 5 con chuột lang (
mỗi con 300- 350g), mỗi con 2 liều vacxin quy
định. Tất cả các chuột phải sống khỏe mạnh và
phát trển bình thường sau 7 – 10 ngày theo dõi.
o

•

•
5

Kiểm tra hiệu lực: vacxin được kiểm tra hiệu lực bằng một
trong hai cách sau:
5
- -


NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH.
•

•

Phương pháp đếm số vi khuẩn:
Đếm số khuẩn lạc trên đĩa thạch ( Brain heart agar:
BHA). Vacxin tiêu chuẩn khi có số khuẩn lạc không
thấp hơn 2.5×109/1 liều vacxin.
Phương pháp tiêm chuột:
Cho 5 chuột lang, trọng lượng 300 – 350 kg/con, mỗi

con tiêm 1/5 liều vacxin ghi trên nhãn ( 0.5× 109
CFU), 5 chuột sau khi tiêm trở thành 5 chuột chú
chuột miễn dịch. 21 ngày sau khi tiêm 5 chuột miễn
dịch, ta tiêm một lượng chủng thương hàn lợn cường
độc với liều MLD cho cả hai : 5 chuột miễn dịch và
2 chuột đối chứng. Trong 3 tuần theo dõi, chuột đối
chứng phải chết hết trong khi chuột miễn dịch phải
sống ít nhất 3 con.
Ghi chú : MLD : liều nhỏ nhất gây chết hết động vật
thí nghiệm.( Minimum Lethal Dose). CFU : đơn vị
khuẩn lạc ( Colony Forming Unit).

Một số vacxin đã thương mại hóa:
Vacxin cúm gia cầm:
• Vacxin Lasota: đây là loại vacxin nhược độc đông
khô chủng Lasota dùng để phòng “bệnh toi gà” cho
gà con dưới 2 tháng tuổi.
Thành phần: virus Newcastle nhược độ đông khô
chủng Lasota, được sản suất trên phôi thai trứng gà.
Mỗi liều vacxin chứ tối thiểu là 106EID50 virus
Newcastle, chất bổ trợ.
Cách dùng: hòa tan với nước muối sinh lý, dùng cho
gà dưới hai tháng tuổi, cho uống hoặc nhỏ mắt.

6

6
- -

NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH.

•

7

Vacxin Gumboro: Vacxin nhược độc đông khô
chủng 2512, sản xuất trên môi trường tế bào xoư
phôi gà một lớp.
Thành phần : một liều vacxin chứa 103TCID50 VR,
chất bổ trợ.
Liều lượng và cách dùng: hòa tan với nước sinh lý,
cho gà uống hoặc nhỏ mắt.
Nếu gà mẹ chưa tiêm phòng vacxin Gumboro, thì
phòng cho gà con vào lúc 5-7 ngày tuổi. Sau 2 tuần
nhắc lại 2 lần.
Nếu gà mẹ đã tiêm, thì sử dụng vacxin cho gà con
đạt lúc 2 tuần tuổi.

7
- -


NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH.
Vacxin phòng bệnh cho lợn:
• Vacxin phó thương hàn lợn .
Thành phần : vi khuẩn Salmonella cholera suis, chất
bổ trợ. Một liều vacxin chứa 2-2,5 tỉ CFU. Tiêm vào
bắp thịt hoặc dưới da, tiêm cho các loại lơn ở mọi
lứa tuổi 1ml/1con.

Vacxin tụ huyết trùng lợn: vacxin vô hoạt, dạng nước
để phòng bênh tụ huyết trùng cho lợn.
Thành phần: giống vi khuẩn tụ huyết trùng lợn
Pasteurella suis eptia, túyp B, formaldehyde, keo
phèn.
Cách dùng : tiêm dưới da cho lơn ở mọi lứa tuổi, mỗi
con 1ml. Sauk hi tiêm 3 tuần, con vật sẽ có miễn dịch
và miễn dịch kéo dài 6 tháng. Nơi mới có dịch tụ
huyết trùng xảy ra nên tiêm phòng hai lần, cách nhau
3-4 tuần, tiêm cho toàm đàn. Không tiêm cho lợn ốm,
sắp đẻ hay mới đẻ non.
Vacxin nhiệt thán cho trâu, bò: vacxin vô độc nha bào
dạng lỏng, phòng bệnh nhiệt thán cho trâu bò.
Thầnh phần : nha bào của vi khuẩn nhiệt thán vô độc,
không giác mô, mỗi liều vacxin cho khoảng 25 triệu nha
bào, chất bổ trợ là glyxerin.
Cách dùng: tiêm dưới da cho trâu, bò.
•

8

8
- -


NGÀNH Y TẾ-MÔI TRƯỜNG / BÁO CÁO THU HOẠCH.

9

9
- -