máy và thiết bị sinh học trong công nghệ thực phẩm

SEMINAR
QUÁ TRÌNH VÀ THIẾT BỊ SINH HỌC TRONG CNTP
GVHD: ThS NGUYỄN THỊ VÂN ANH
SVTH: NGUYỄN THỊ THÙY DƯƠNG
NGUYỄN THỊ HOA


ĐỀ TÀI
TÌM HIỂU VỀ MÁY ĐIỆN DI


NỘI DUNG

1. ĐIỆN DI LÀ GÌ?

2. AXIT DEOXYRIBONUCLEIC (AND) VÀ NGUYÊN TẮC XÁC ĐỊNH

3. CẤU TRÚC CỦA MÁY ĐIỆN DI

4. CẤU TRÚC VẬN HÀNH


1.Điện di là gì?
 Là hiện tượng dịch chuyển của các vật thể mang điện tích dưới tác động của điện trường
Điện di hay điện di gel áp dụng trong sinh học phân tử là một kĩ thuật trong phân tích các phân tích các phân tử AND,
ARN hay protein dựa trên các đặc điểm vật lý của chúng như kích thước, hình dạng hay điểm đẳng điên tích.


2. AXIT DEOXYRIBONUCLEIC (AND) VÀ NGUYÊN TẮC XÁC ĐỊNH

2.1. Định nghĩa.

- Acid Deoxyribo Nucleic (viết tắt ADN theo tiếng pháp
hay DNA theo tiếng Anh ) là một phân tử acid nucleic mang thông tin di truyền mã hóa cho hoạt động sinh
trưởng và phát triển của các dạng sống bao gồm cả một số virus.
- ADN thường được coi là vật liệu di truyền ở cấp độ phân tử tham gia quyết định các tính trạng. Trong quá
trình sinh sản, phân tử ADN được nhân đôi và truyền cho thế hệ sau.


2.2. Cấu trúc không gian của ADN


2.3. Nguyên tắc xác định
•

Công nghệ ADN tái tổ hợp – hiện là nền tảng cho sự phát triển như vũ bão của ngành công nghệ sinh học
hiện đại.

•
•

Các phương pháp phân tích, tổng hợp hiện đại là tách ADN, xác định thứ tự, tổng hợp…
Một dò tìm đơn giản chỉ là một khúc ADN (ARN) có thể tìm khúc bổ sung bằng cách lai.


3. Cấu trúc của máy điện di

Khay vận hành

en
Nắp có điện áp cao

Buồng giảm sốc

• Khuôn đúc gel
• Khay di động trong suốt
• Miếng bọt đệm

• Nắp thiết bị
• Mã màu đầu ra nối với điện cực trên đế máy với nguồn điện

• Ôngs nối điện cực
• Bục di chuyển
• Nơi nạp 50/50 etylen glycol/ nước vào


4. Cấu trúc vận hành
4.1. Chuẩn bị dung dịch

 Chuẩn bị 250ml dung dịch đệm.Hai dung dịch đệm được sử dụng phổ biến cho điện di AND
đượcchuẩn bị theo công thức pha chế sau:

1.
2.
3.

10X tris-borate-EDTA.nguồn cung cấp chất đệm
10X tris-acetate-EDTA.cung cấp cho chất đệm
Dung dịch ETDA(etylen diamin tetraacetic axid)


4.2. Đúc gel

- Thiết bị đặt khay di động
- Chuẩn bị lược
- Di chuyển lược
- Đổ dung dịch agaroza vào khuôn đúc
- Tiến hành tháo lược
- Tháo khay di động và gel


4.3. Vận hành điện di
- Làm lạnh trước khi điện di
- Đổ dung dịch vào các khoang sao cho đến khi đệm cao hơn gel khoảng 1mm(khoảng 220ml)
- Nạp mẫu
- Đặt nắp để catot(-,dây đen)ở đoạn
cuối gần mẫu nhất.(Mẫu acid nucleic di chuyển về phía cuối anot,+,dây đỏ.Nối các dây màu tới các
nguồn điện.Đặt mức điện áp và thiết bị để bấm giờ theo mức phân ly.


4.4. Tính kết quả
Hiện tượng điện di chất gel có thể sử dụng những mảnh nhỏ ADN khoảng 0.1kb hay nhỏ hơn loại gel
polyacrylamit thường sử dụng những mảnh nhỏ hơn 1kb

• Tính điện di của ADN:

-Nồng độ agaroza quy định cho quá trình phân ly thành những mảnh vỡ với những kích thước khác nhau
- Nhân tố ảnh hưởng :chất đệm, điện áp đặt vào, nhiệt độ, sự cố của etydi brommua, các agaroza đặc biệt có sẵn.
• Tính điện di của ARN
ARN có thể phân chia dưạ theo kích thước cơ bản


4.5. Sự phát hiện ADN

-AND được phát hiện nhờ sự phát huỳnh quangcuar liên kết etydi brommua hay nhờ phương pháp chụp
ảnh bằng tia Xcuar đồng vị phóng xạ AND.

-Để chụp ảnh gel,dùng phương pháp chiếu tai cực tím trên bề mặt mỗi đĩa vận hành hoặc di chuyển nhẹ
bản gel trên bề mặt sẽ quan sát được tối đa.


.Một số ứng dụng:
- Trong nghành công nghệ thực phẩm hiện nay:
♦ Dùng để phân tách ADN (ARN)
♦ Tinh sạch các đại phân tử protein
♦ Tinh sạch các nucleic acid-trên cơ sở kích thước/khối lượng, điện tch
và cấu hình của chúng.
13
- Ứng dụng điện di trong nông nghiệp
o Cải thiện phẩm chất những giống đặc sản
o Chọn tạo các giống triển vọng