Nghiên cứu khả năng nhân giống cây Giảo cổ lam Gynostemma pentaphyllum bằng phương pháp in vitro (Khóa luận tốt nghiệp)

i

---------------------------

(Gynostemma pentaphyllum)

Chuyên ngành
Khoa

IN VITRO

: Chính quy
:
: CNSH - CNTP
: 2011 - 2015
: 1. PGS.TS Ngô Xuân Bình

Thái Nguyên

2015


ii

cùng
em
.
Qua

e

KS
.

Thái Nguyê


iii

ADN

: Acid deoxyribonucleic

B1

: Thiamin

B3

: Nicotinic acid

B5
B6

: Pyridoxine

BA

: 6-Benzylaminopurine

Cs

CT
CV

: Coefficient of Variation

IBA

- Indol axetic acid

Kinetin

: 6-Furfurylaminopurine

LSD

: Least Significant Difference Test

MS
NAA

:

- Naphlene axetic acid


iv

2 ............................ 25

.... 26

...................................................................................... 27

.......................... 28

................Error!
Bookmark not defined.
................................... 30

).................... 32

.................................. 34

............................................................................................ 35

............................... 37

...................... 39
.......... 41


v

.................................... 6
............... 34

.................................................................. 36

............................................... 38

............................................ 40
....... 42


vi

PH N 1: M

U...........................................................................................................1

tv

......................................................................................................................1

1.2. M

u....................................................................................................2

1.3. Yêu c u c

tài.........................................................................................................2
tài.........................................................................................................2

PH N 2: T NG QUAN TÀI LI U..............................................................................3
2.1. Khái quát v cây Gi o c lam .....................................................................................3
2.1.1. Ngu n g c phân b c a c y Gi o c lam...............................................................3
2.1.2. Phân lo i.....................................................................................................................3
m th c v t h c c a cây Gi o c lam. .........................................................3
u ki n sinh thái c a cây Gi o c lam.................................................................4
2.1.5. V trí cây Gi o c lam trong h th ng th c v t h

c li u..................4

2.1.6. Nghiên c u v giá tr y h c c a Gi o c lam .........................................................5
2.2. Khái quát v nuôi c y mô t bào th c v t................................................................10
.................................. 10
............ 12
2.2.3. M t s y u t

n

n quá trình nuôi c y mô t bào th c v t................13
ng cây tr ng ..................................................................15

2.3.1. Nhân gi

ng h t).............................................................................16

2.3.2. Nhân gi ng vô tính..................................................................................................16
2.3.3. Nhân gi ng vô tính in vitro.....................................................................................17
2.4.

... 18
........................ 18

2.4.1. Tình hình nghiên c u v cây Gi o c
PH N 3:

NG, N

c ........................................20
U..23


vii
ng, v t li u và ph m vi nghiên c u..............................................................23
ng nghiên c u.............................................................................................23
3.1.2. Ph m vi nghiên c u.................................................................................................23
3.1.3. Hóa ch t và thi t b ..................................................................................................23
u ki n nuôi c y......................................................................................................24
m và th i gian ti n hành nghiên c u ............................................................24
3.4. N i dung nghiên c

u.................................................24

3.4.1. N i dung nghiên c u...............................................................................................24
u........................................................................................24
3.5.1. Thu th p s li u .......................................................................................................30
3.5.2. Các ch tiêu theo dõi................................................................................................30
lý s li u......................................................................................31
4: K T QU VÀ TH O LU N....................................................................32
4.1. K t qu

ng c a th i gian kh trùng b ng HgCl2

n kh

o v t li u

s ch n m, vi khu n cây Gi o c lam ...............................................................................32

4.2. K t qu

ng c

n kh

ch i Gi o c lam (sau 20 ngày nuôi c y) ........................................................................33
4.3. K t qu

ng c a

ng kinetin

4.4. K t qu

ng c

ng kinetin t t nh t k t h p v i

thích h p
4.5. K t qu

n kh

n c m ng ch i Gi o c lam......35
ng BA

ch i Gi o c lam..................................................37
ng c

ng kinetin t t nh t k t h p v

n kh

ng Gi o c lam ...............................................................................39
5: K T LU N VÀ KI N NGH ....................................................................43
5.1. K t lu n .......................................................................................................................43
.................................................................................................. 43
TÀI LI U THAM KH O


viii

Thái Nguyên, ngày

GVHD1

GVHD2

(

tháng

Sinh Viên

)


1
PH N 1

M
1.1.

U

tv
Gynostemma pentaphyllum (Thunb)

lam
Cucurbitaceae
.

(

[14].

Theo ngh

trong

cung, da,

(

còn

, 2009) [6].

g

,

Theo
(

[5].

có t
Tuy nhiê


2

(gynostemma pentaphyllum

in vitro

1.3. Yêu c u c

tài

-

2

.
ây

.

.
.
tài
-

-

0,


3

(Gynostemma pentaphyllum)
(Hoàng Ng c Thu n,
2000) [26
3.200m
(

[10].

ph
Lan, Lào và bán

(Chen J.C et al, 2000) [37].

vôi (

g, 1998) [9], (

[3]. M

(

, 2009) [6].

Gynostemma pentaphyllum (Thunb)
Gynostemma

[28]. Theo
và các

t

Gynostemma

- Cucurbitaceae.

.
Thân cây
trên các cây

leo.


4

Lá cây

-7 lá chét.

trên

ng c

dài 3 - 4cm.
Hoa cây

: ho

10.
:
chí

(

1998) [29], (

(

và cs, 2010) [20].

và cs, 2007) [22].

các vùng

Ngoài ra

còn
-

10 - -50C (

và cs, 2007) [22], (

(

[23].

và cs, 2007) [22].

2.1.5.
Gynostemma,
Cucurbitaceae (Chen J.C et al, 2000) [37


5
Gynosemma

Cucurbitaceae

lam
Magnoliophyt
Magnoliopsida

Liê

Chi: Gynostemma
Loài: Gynostemma pentaphyllum (Thunb) Makino
- Loài

3 lá: Gynostemma laxum (Wall.) Cogn.

- Loài

5 lá: Gynostemma pentaphyllum (Thunb) Makino

- Loài

7 lá: Gynostemma pubescens (Gagnep) C.Y.Wu.

- Loài

9 lá: Gynostemma sp.

Gynostemma pentaphyllum (Thunb) Makino. Cây

ng,

(
Jiaogulan, Qi Ye Dan, Gong Luo Guo Di, Pian Sheng Gen, Xiao Ku Yao,
Amachazuru, Dung kulcha

[10]

(
[4].
2.1.6. Nghiên c u v giá tr y h c c a Gi o c lam


6

[19].
Trong

có

saponin

Saponin trong

(

Ngoài ra

lam

-

[16].

Flavononid

Saponin

và
Flavononit,
[19
immortality herb
-

hàm


7
chim cút (
[14].

1mg/

(STZ) (

[14].

phan

h

gypenosid (250mg/kg)

insulin (
và cs, 2007) [18].
(
010) [30]. Trong n
(2,5;
tim (

[17].

Gypenosid

(100mg/kg)
làm

phosphocreatine
(Carlson R.F, 1964) [36]. Gypenosid

vành (

và cs, 2007) [18


8
gype

CG
.
-

trong

(Hà Thanh Bình và cs, 2002) [2].

(Carlson R.F, 1964) [36].
G

(Hà Thanh
Bình và cs, 2002) [2
c

(Carlson R.F, 1964) [36

ARN (Carlson
R.F, 1964) [36].
-


9

ra do cyclophosphamid (Hà Thanh Bình và cs, 2002) [2].
-acetyltransferase (NAT), hình
thành AF(

và cs, 2001) [15

(

và cs,

2001) [15
and HA22T) (Carlson R.F, 1964) [36].

-

(Vander Zaag) [40
s
(Vander Zaag) [40].
Theo

viêm

(Carlson R.F, 1964) [36

[28].


10

và mãn tính (Carlson R.F, 1964) [36].
[1]
[28]

(

[24].

B

hành th
2-

.

(Murashige T and Skoog F, 1962) [39].

(


11

(Murashige T and Skoog F, 1962) [39].

12

(Murashige T and Skoog F, 1962) [39].
2.2.2
2.2.2.1. Auxin

acid (NAA) và 2,4 -

(
Chi, 1997) [7].

(

[7].

2.2.2.2. Cytokinin

- Benzyl aminopurin (BA).


13
rotein và

(V

[7], (Arichi S and et, 1986) [35].

auxin/cytokinin ca

er

(Võ

[7], (Arichi S and et, 1986) [35].

in vitro.
in vitro là


14

in vitro.

in vitro

ã qua
in vitro.

HgCl2 0,1%

in vitro

-18
0

C-270C,

-75%

(Arichi S

and et, 1986) [35].

M
.

chính sau:
-

in vitro
(Arichi
S and et, 1986) [35].
-


15
bào,... (Arichi S and et, 1986) [35

in vitro,

-

B3, B5, B6

1

(Arichi S and et, 1986) [35].
-

cây

-

Benzylaminnopurine), Kinetin, IBA (

- Indol butyric acid), NAA (

-

hoàn
- Agar:

-0,8% (Arichi S and et, 1986) [35].
-

-5,8 (Arichi S and et, 1986) [35].

(

và

cs, 2009) [31].
- dù


16
bào (
và cs, 2009) [31].

36

chí
(

in vitro.


17

h

(Võ
[8].

Giâm:

Ghép: là s liên k t gi a hai b ph n cành ghép và g c ghép c a hai cá
th

ng áp d

i v i cây thân g ).

2.3.3. Nhân gi ng vô tính in vitro
y mô, t
nhân t

ng

u ki n vô trùng và tái sinh chúng thành cây con.
Nhân gi ng in vitro

i b sung cho các k thu t nhân

gi ng truy n th ng nhi u k thu t ti n b .

-