SỰ đa NĂNG của các tế bào gốc lợn

SỰ ĐA NĂNG CỦA CÁC TẾ BÀO GỐC
LỢN ĐƯỢC LẤY TỪ PHÔI IVF
TRONG QUÁ TRÌNH PHÁT TRIỂN In
vivo


TỔNG QUANG
• Lợn được coi là một mô hình quan trọng cho
bệnh người và là một động vật lý tưởng để thử
nghiệm tiền lâm sàng cấy ghép tế bào, nhưng
tiện ích của mô hình này đã bị cản trở do thiếu
tế bào gốc phôi lợn.
• Nghiên cứu dòng tế bào gốc đa năng lợn
(pPSC) từ các phôi nang ngày 5.5 trong một hệ
thống nuôi cấy mới phát triển dựa trên môi
trường MXV với nồng độ Oxi là 5%.


TỔNG QUANG

• Tế bào gốc lợn đa năng (pPSC)
 Hình thái tương tự như của tế bào gốc phôi người
 pPSC là alkaline phosphatase (AKP) dương tính, sở hữu các kiểu hình
bình thường và biểu thị các dấu hiệu đa nguyên cổ điển, bao gồm
OCT4, SOX2 và NANOG.
 Có thể phân biệt thành các tế bào của ba lớp mầm.
 Các pPSC được chuyển nạp với fuw-DsRed (pPSC-FDs) có thể được di
truyền 1 cách ổn định với cả hai maker DsRed và maker đa hướng.
 khi pPSC-FDs được sử dụng làm tế bào tặng trong chuyển gen soma,
11,52% phôi tái tạo phát triển thành phôi bào, không khác biệt đáng
kể so với phôi tái tạo có nguồn gốc từ nguyên bào sợi phôi thai.

 Khi pPSC-FDs được tiêm vào phôi nang ngày 4,5, chúng tham gia vào
sự phát triển phôi in vitro và đóng góp vào nội tạng bào thai vào ngày
thứ 50 của thai kỳ cũng như nhau thai sau khi phôi nang được
chuyển vào cá thể nhận.


VẬT LIỆU
• Buồng trứng lợn được thu thập từ Harbin
XinCheng Food Co.
• Tinh trùng lợn đã được cung cấp bởi Đại học
Nông nghiệp Đông Bắc
• Chuột ICR, cho các tế bào nguyên bào sợi phôi
chuột (MEF), được mua từ Phòng thí nghiệm
Vital River.


Phương pháp
1. Nuôi cấy tế bào trứng
2. Thụ tinh trong ống nghiệm của các tế bào trứng lợn
3. Chuẩn bị các tế bào tiếp liệu
4. Phân lập và nuôi cấy tế bào gốc lợn đa bào
5. Bảo quản và hồi sức
6. Nhuộm Alkaline phosphatase
7. Phân tích Karyotype
8. Hình thành cơ thể phôi thai (EB) và sự biệt hóa tự phát
9. Phân tích miễn dịch huỳnh quang
10.Hình thành Teratoma
11.Sản xuất Lentivirus và chuyển gen
12.Chuyển nhân tế bào sinh dưỡng (SCNT)
13.RT-PCR và PCR định lượng

14.Phân tích thống kê