Bài giảng Công nghệ sinh học đại cương: Chương 2 - ThS. Ninh Thị Thảo (Bài 5) - Trường Đại Học Quốc Tế Hồng Bàng
Bạn đang xem bản rút gọn của tài liệu. Xem và tải ngay bản đầy đủ của tài liệu tại đây (663.7 KB, 10 trang )
<span class='text_page_counter'>(1)</span><div class='page_container' data-page=1>
<b>CHƯƠNG II:</b>
<b>CÁC KỸTHUẬT NỀN CỦA CNSH HIỆN ĐẠI </b>
<b>(10 TIẾT)</b>
1.
Chức năng và ứng dụng của các enzyme giới hạn
2.
Giới thiệu các vector nhân dòng và kỹ thuật nhân dòng gen
3.
Các phương pháp lai phân tử
4.
Phương pháp PCR, ứng dụng
5.
Kỹ thuật xác định trình tự DNA
</div>
<span class='text_page_counter'>(2)</span><div class='page_container' data-page=2>
<b>KỸ THUẬT XÁC ĐỊNH </b>
<b>TRÌNH TỰ DNA </b>
</div>
<span class='text_page_counter'>(3)</span><div class='page_container' data-page=3>
<b>Khái niệm </b>
</div>
<span class='text_page_counter'>(4)</span><div class='page_container' data-page=4>
<b>Các mốc giải mã hệ gen của các sinh vật khác nhau </b>
<b>Cho đến nay, hệ gen của hơn 100 tổ chức sinh vật </b>
<b>đã được giải mã trình tự </b>
</div>
<span class='text_page_counter'>(5)</span><div class='page_container' data-page=5>
<b>Maxam-Gilbert (1977) </b>
Sanger (1977)
<b>Các phương pháp xác định trình tự </b>
Xác định trình tự tự động
</div>
<span class='text_page_counter'>(6)</span><div class='page_container' data-page=6>
<b>Phương pháp Maxam-Gilbert</b>
• Là phương pháp phân giải hóa học
• Sử dụng hóa chất để biến đổi DNA
ở các vị trí base đặc hiệu
tạo ra
các đoạn có chiều dài khác nhau
<b> Walter Gilbert </b></div>
<span class='text_page_counter'>(7)</span><div class='page_container' data-page=7>
Dimethyl sulfat methyl hóa G.
Axit formic pH=2 gây biến đổi và loại A + G.
Hydrazin gây biến đổi tại C và T.
Hydrazin + NaCl nồng độ cao gây biến
đổi tại C.
Piperidine được dùng để loại bỏ các
base sau khi bị biến đổi và cắt mạch.
</div>
<span class='text_page_counter'>(8)</span><div class='page_container' data-page=8>
<b>Base </b>
<b>specificity</b>
<b>Chemical used for </b>
<b>base alteration</b>
<b>Chemical used for </b>
<b>altered base </b>
<b>removal</b>
<b>Chemical used </b>
<b>for strand </b>
<b>cleavage</b>
<b>G</b> <b>Dimethylsulphate</b> <b>Piperidine</b> <b>Piperidine</b>
<b>A+G</b> <b>Acid</b> <b>Acid</b> <b>Piperidine</b>
<b>C+T</b> <b>Hydrazine</b> <b>Piperidine</b> <b>Piperidine</b>
<b>C</b> <b>Hydrazine + alkali</b> <b>Piperidine</b> <b>Piperidine</b>
<b>A>C</b> <b>Alkali</b> <b>Piperidine</b> <b>Piperidine</b>
</div>
<span class='text_page_counter'>(9)</span><div class='page_container' data-page=9>
<b>G </b> <b>C </b> <b>T </b> <b>G </b> <b>C </b> <b>T </b> <b>A </b>
<b>A </b>
<b>T </b>
<b>C </b>
<b>T </b>
<b>C </b> <b>G </b>
<b>G </b>
<b>CH<sub>3 </sub></b>
<b>T </b>
<b>C </b>
<b>T </b>
<b>C </b>
<b>G </b> <b>A </b>
<b>DNA labeled at one </b>
<b>end with 32<sub>P </sub></b>
<b>Base modification </b>
<b>Release or displace- </b>
<b>ment of reacted bases </b>
<b> Maxam and Gilbert </b>
<b>chemical method </b>
</div>
<span class='text_page_counter'>(10)</span><div class='page_container' data-page=10></div>
<!--links-->
