19
ĐỊNH TÍNH - ĐỊNH LƯNG TINH BỘT
A-ĐỊNH TÍNH
- Dựa trên tính chất của tinh bột
- Kiểm nghiệm bằng vi học
-Tinhbột + dung dịch iod (dd lugol)Ỉ màu xanh tím
Ứng dụng:
- Có thể phát hiện được tinh bột đặc trưng cho dược liệu nào đó trong
thuốc bột hoặc góp phần đònh danh một dược liệu…
- Hồ tinh bột là chỉ thò phát hiện iod trong phân tích kiểm nghiệm.
20
ÑÒNH LÖÔÏNG TINH BOÄT
• ĐỊNH LƯƠNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP THUỶ PHÂN
– A- Thuỷ phân trựctiếpbằng acid.
– B- Thuỷ phân trựctiếp bàng enzym sau thuỷ phân bằng acid
– C. Phương pháp củaPurse
• ĐỊNH LƯƠNG BẰNG PHƯƠNG PHÁP KHÔNG THUỶ PHÂN
– A- Phương pháp dùng phân cựckế.
– B – Phương pháp tạophứcvớiiod
•
21
Thủy phân trựctiếp baèng acid
Nguyên tắc:Tinh bộtthủyphânbằng acid cho ra glucose.định lượng
glucose suy ra lượng tinh bột.
C
6
H
12
O
6
(C
6
H
10
O
5
)
n
+nH
2
O Æ (1+n) (C
6
H
12
O
6
)
Tiếnhành
-Rữakĩ 2,5-3g nguyên liệubằng nướccất nguội,
-Thủy phân vài giờ bằng 200ml H
2
O và 20 ml HCL.
- Làm nguội và trung tính bằng NaOH.
-Thêm nước đếnmộtthể tích xác định, lấymộtphần chính xác
- Định lượng glucose tạo thành và suy ra tinh bột.
(khốilượng glucose thu được x 0.9 = khốilượng tinh bột),
Phương pháp này chỉứng dụng cho những nguyên liệuchủ yếu là tinh bộtvì
các pentosan, galactan …Cũng bị thủy phân gây sai số.
22
Thủy phân bằng enzym rồitiếptheobằng acid
- Dùng men trong dịch chiếtMạch nha (Enzym amylase )thủy phân
tinh bột thành đường hòa tan (maltose).
-Thủygiảicácđường đôi (maltose) bằng acid ---cho ra glucose
- Định lượng glucose. Suy ra lượng tinh bột.
Phương pháp dựa trên cơ sở củaPurse
- Loại các đường tự do trong nguyên liệubằng cồnloãng
- Hòa tan tinh bộtbằng acid perchloric loãng.
-Tạophứctinhbột–iod
- phá phứcvàthủy phân tinh bộtbằng acid --- glucose
- định lượng glucose---- tinh bột.
23
PHÖÔNG PHAÙP KHOÂNG THUYÛ PHAÂN
Phương pháp dùng phân cựckế
•Hòa tan tinh bột trong CaCl
2
đặc và nóng .
•Đobằng phân cựckế
•So vớichuẩn[α]
D= 200
phương pháp tạophứcvớiiod
•Hòa tan tinh bột trong acid perchloric.
•Thêm dung dịch iod
•Đomàuở bước sóng thích hợp