BÁO cáo THỰC tập ĐỊNH TÍNH CÁC CYCLIN VÀ ĐỊNH TÍNH PENICILLIN

BÁO CÁO THỰC TẬP
ĐỊNH TÍNH CÁC CYCLIN & ĐỊNH TÍNH PENICILLIN

Bài 1: ĐỊNH TÍNH CÁC CYCLIN:
A. KIỂM TRA ĐẦU GIỜ:
 1. Nêu các phản ứng định tính chung của nhóm Cyclin: 3 phản ứng
 1. Phản ứng màu với FeCl3:
 1.Tetracyclin. HCl
→ Nâu sẫm
 2. Oxytetracyclin. HCl
→ Nâu sẫm
 3. Doxycyclin. HCl
→ Nâu sẫm
 4. Clotetracyclin. HCl
→ Vàng
 2. Phản ứng khử với thuốc thử Fehling:
 1.Tetracyclin. HCl
→ Nâu
 2. Oxytetracyclin. HCl
→ Nâu
 3. Doxycyclin. HCl
→ Nâu
 4. Clotetracyclin. HCl
→ Xanh
 3. Phản ứng phát huỳnh quang:
 1.Tetracyclin. HCl
→ Vàng
 2. Oxytetracyclin. HCl
→ Vàng
 3. Doxycyclin. HCl
→ Vàng

 4. Clotetracyclin. HCl
→ Xanh lơ
 2. Nêu các phản ứng định danh của các kháng sinh thuộc nhóm cyclin?
 Phản ứng màu với H2SO4 đđ:
 1.Tetracyclin. HCl
→ tím
+ H2O
→ Vàng
 2. Oxytetracyclin. HCl → Đỏ thắm + H2O
→ Vàng
 3. Doxycyclin. HCl
→ Vàng
+ H2O → Vàng
 4. Clotetracyclin. HCl → Xanh dương chuyển tím đậm + H2O → Vàng
 3. Nêu các phản ứng định danh của nhóm penicillin:
 1. Phản ứng màu với H2SO4đđ:
 Penicillin G:
→ Vàng nhạt
 Amoxicillin:
→ Vàng
 2. Phản ứng với formaldehyde trong acid H2SO4:
1


 Penicillin G:
→ Nâu đỏ
 Amoxicillin:
→ Vàng nhạt
 3. Phản ứng với thuốc thử Fehling:
 Penicillin G:

→ Xanh thẫm
 Amoxicillin:
→ Đỏ tím
 4. Phản ứng với acid Cromotropic:
 Penicillin G:
→ Nâu
 Amoxicillin:
→ Đỏ tía sau đó chuyển sang tím
B. KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM
Tên mẫu kiểm định: CÁC CYCLIN
Chỉ tiêu
Tiêu chuẩn
Kết quả
ĐỊNH TÍNH CHUNG ( Đúng / khơng đúng )
1.Tạo màu với FeCl3
Tetracyclin.HCl
Vàng trong
Oxytetracyclin.HCl → Nâu sẫm.
Vàng trong
→ nâu sẫm
Doxycyclin.HCl
Vàng trong
Clotetracyclin
→ Vàng
Vàng đục
→ vàng đục
2.Với thuốc thử Fehling Tetracyclin.HCl
Tủa đỏ
Oxytetracyclin.HCl → Nâu
Tủa đỏ

→ Nâu
Doxycyclin.HCl
Xanh lá cây đậm
Clotetracyclin
→ Xanh lá
Tủa đỏ
→ xanh lá
ĐỊNH TÍNH PHÂN BIỆT ( Đúng / khơng đúng )
Với H2SO4 đậm đặc
Tetracyclin
Đỏ tím + H2O → Vàng nâu đậm
Đỏ tím + H2O→ Nâu vàng
Oxytetracyclin Đỏ thắm + H2O → Vàng cam
Đỏ thắm + H2O → Vàng cam
Doxycyclin
Vàng
→ Vàng
Vàng
+ H2O → Vàng đen
Clotetracyclin Xanh dương đậm → tím đậm + H2O → vàng cam Vàng
+ H2O → Vàng
tươi

Kết luận
Đúng
Đúng
Đúng
Đúng
Đúng
Đúng

Đúng
Đúng
Đúng
Đúng
Đúng
Đúng

C. CÂU HỎI CHUẨN BỊ CHO BÀI THỰC TẬP:
 1. Các tiêu chuẩn kiểm tinh khiết doxycyclin hydroclorid theo DĐVN IV?
 Tạp hấp thụ ánh sáng và các tạp liên quan
 Kim loại nặng
 Tro sulfat
 Nước
 Ethanol: 4,3-6%
 Nội độc tố vi khuẩn

 2. Phương pháp định lượng tetracyclin hydroclorid và doxycycline hydroclorid
theo DĐVN IV?
 Sắc ký lỏng hiệu năng cao ( HPLC)
 Đo quang
2


 3. Đề nghị các phương pháp khác để định lượng chloramphenicol?
 Sắc ký lỏng hiệu năng cao ( HPLC)
 Phương pháp vơ cơ hóa : Clo tồn phần, đo Nitrit …
 Phương pháp vi sinh
 Đo quang (� max: 278nm) ( sách trình bày)
 4. Đề nghị cơ chế phản ứng định tính chloramphenicol trong kiềm NaOH
 Do có nhóm nitro thơm trong cơng thức cloramphenicol nên trong mơi trường

kiềm (NaOH) dưới xúc tác là nhiệt độ sẽ xuất hiện màu vàng → tiếp tục đun màu
sẽ chuyển dần sang màu cam.
BÀI 2: ĐỊNH TÍNH PENICILLIN
A. KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM:
Tên mẫu kiểm định: Kháng sinh Amoxicillin & Kháng sinh Penicillin G
Chỉ tiêu
ĐỊNH TÍNH CHUNG ( Đúng/ khơng đúng)
Phản ứng với Hydroxylamin hydroclorid
(NH2OH.HCl)
ĐỊNH TÍNH PHÂN BIỆT ( đạt / khơng đạt )
1.Phản ứng với H2SO4 đậm đặc
2.Phản ứng với Formaldehyd trong acid
H2SO4
( HCHO/ H2SO4)
3.Phản ứng với thuốc thử Fehling

Tiêu chuẩn

Kết quả

Kết luận

P: Tủa xanh ngọc
A: Tủa xanh rêu

P: Tủa xanh ngọc
A: Tủa xanh rêu

Penicillin
Amoxicillin

P: màu vàng nhạt
A: màu vàng đậm
P: Nâu đỏ
A: Vàng nhạt

P: Màu vàng nhạt
A: Màu vàng
P: Nâu đỏ
A: Vàng nhạt

Penicillin
Amoxicillin
Penicillin
Amoxicillin

P: xanh thẫm
A: Đỏ tím

P: Xanh
A: Đỏ tím

Penicillin
Amoxicillin

B. CÂU HỎI CHUẨN BỊ CHO BÀI THỰC TẬP:
1. Đề nghị cơ chế phản ứng giữa amoxicillin với thuốc thử Fehling?
 Amoxcillin tạo phức với Cu2+ → tạo phức màu tím (các nhóm chức tham gia
tạo phức: amin bậc 1 và O của khung beta-lactam)
 Màu của phản ứng thay đổi theo thời gian:

Tím → tím đỏ → đỏ tím → xanh đen → xanh lục. (màu sắc thay đổi tùy
lượng chế phẩm cho vào ban đầu.
 Ngoài ra do amoxicillin có tính khử , cịn Cu2+ có tính oxi hóa → nên khi để lâu
ammoxicillin bị oxy hóa thành các sản phẩm có màu.
2. Giải thích phản ứng định tính chung các penicillin và Hydroxylamin?
3


 Penicillin
 acid hydroxamic
 acid hydroxamic

+ Hydroxylamin → acid hydroxamic
+ FeCl3
→ màu đỏ
+ CuSO4
→ màu xanh lục

3. Các tiêu chuẩn kiểm tinh khiết amoxcicillin
 PH
 Gốc quay cực riêng
 Tạp chất liên quan:
 N,N-dimethylanilin
 Acid 2-ethylhexanoic
 Kim loại nặng
 Nước
 Nội độc tố vi khuẩn

4