Test Nhanh Kháng Thể Virus Rubella

TRƯỜNG ĐẠI HỌC QUỐC TẾ HỒNG BÀNG
KHOA : XÉT NGHIỆM Y HỌC

BỘ MÔN : THỰC HÀNH VI SINH
LỚP:XNDH17-XN1

CHUYÊN ĐỀ: TEST NHANH XÉT NGHIỆM KHÁNG THỂ
VIRUS RUBELLA

 (Nanosign Rubella IgG/IgM)
Chuyên đề 7:
Giảng viên hướng dẫn: Ths. Võ Thị Trinh
GV: Nguyễn Thị Thanh Mai
Các thành viên :

Nguyễn Trọng Nghĩa
Phạm Thị Ngọc Ngân
Nguyễn Thị Dương


NGUYÊ

NỘI DUNG:

N LÝ
CHUẨ

TEAS

N

T

ĐOÁN

NHAN

XN

H

RUBE
LA
THUỐ

CÁCH

C

THỰC

THỬ-

HIỆN

DỤNG
CỤ

ĐỌC
KẾT
QUẢ

VIRUS RUBELLA 
A.ĐẠI CƯƠNG:

•

Rubella( hay cịn gọi là bệnh sởi Đức), ảnh hưởng chủ yếu lên da và hạch bạch huyết. 

•

Bệnh thường bị lây nhiễm bởi dịch tiết mũi và họng. Virus cũng có thể đi qua đường máu người mẹ nhiễm vào thai nhi.

•

Đây là một bệnh nhẹ ở trẻ em, nên mối nguy hiểm chính của Rubella là phụ nữ có thai, có thể gây ra hội chứng Rubella bẩm sinh.

•

Nhiễm Rubella ở phụ nữ có thai trước 20 tuần tuổi thường nguy cơ có dấu hiệu dị dạng thai nhưng tỷ lệ cao nhất là ở phụ nữ có thai dưới 12
tuần tuổi. Khoảng 90% số trẻ sinh ra bị mắc Hội chứng Rubella bẩm sinh (CRS: Congenital Rubella Syndrome) do người mẹ bị nhiễm bệnh
trong 3 tháng đầu mang thai.

•

- Bởi vậy, điều quan trọng là phải sàng lọc kháng thể Rubella ở phụ nữ mang thai. Rubella có hai kháng thể IgM và IgG. IgM xuất hiện vài
ngày sau khi nhiễm bệnh, và biến mất sau 1-3 tháng. IgG xuất hiện sau IgM và tồn tại mãi trong ở thể.


Chẩn đốn xét nghiệm:

 ELISA tìm kháng thể chun biệt: nhạy cảm nhất và dễ thực hiện.
(Hemagglutination inhibition): ức chế ngưng kết hồng cầu.
 IHA (Indirect Hemagglutination): ngưng kết hồng cầu thụ động.
 LA (Latex Agglutination): ngưng kết Latex.
IgM đặc hiệu.
 Phân lập siêu vi gây bệnh: hỗ trợ nghiên cứu.
Ở thai phụ có thể được xác định bằng hiệu giá kháng thể tăng lên 4 lần giữa thời kỳ cấp tính và thời kỳ khỏi bệnh bằng kỹ thuật miễn dịch
enzyme(ELISA)

Phân lập được virus từ họng bệnh nhân trong một tuần trước đến hai tuần sau phát ban.
Chẩn đoán xác định CRS .


I. MỤC ĐÍCH:
-Phát hiện kháng thể IgG/ IgM của virus Rubella trong huyết

TEST NHANH XÉT
NGHIỆM KHÁNG THỂ
VIRUS RUBELLA
(NanoSign Rubella IgG/IgM)

thanh / huyết tương hoặc máu toàn phần ở người.


II. NGUYÊN LÝ XÉT NGHIỆM:
 Bộ kit Rubella IgG/IgM là kit dùng kỹ thuật sắc ký miễn dịch cho chẩn đốn và định
tính kháng thể IgG/IgM của virus Rubella bằng huyết thanh hoặc huyết tương hoặc
máu toàn phần giúp chẩn đoán Rubella ở người.

 Trong xét nghiệm này, kháng nguyên Rubella được phủ trong các vùng thử nghiệm
của test.

 Trong q trình thử nghiệm, tồn bộ mẫu máu, huyết thanh hoặc huyết tương phản
ứng với các hạt phủ kháng thể dê kháng thể IgG/IgM người tại màng strip ở vùng
xét nghiệm.

 Hỗn hợp này sau đó di chuyển về phía trước trên màng bằng hoạt động mao dẫn và
phản ứng với kháng nguyên Rubella trên màng tại vùng xét nghiệm tương ứng.

 Sự hiện diện của vạch màu trong vùng test (vùng T) của nó cho thấy kết quả dương tính
nhiễm Rubella, nếu khơng có vạch màu trong vùng test thì cho kết quả âm tính.

 Để kiểm sốt được quy trình, một vạch màu sẽ ln xuất hiện tương ứng tại hai vùng đối

chứng trên màng strip (vùng C) để cho biết thể tích mẫu thêm vào đủ và sự thấm hút trên
màng đã xảy ra.


III. THUỐC THỬ-DỤNG CỤ:
Test này có chứa:
Kit Nanosign Rubella IgG/IgM Device gồm:

kháng IgG ở

người.

người.

Bufer.

kháng IgM

Hướng dẫn sử dụng.

Kháng thể Chuột

•
•

Kháng thể Dê

ẩm.
Các test xét nghiệm và chất hút
Rubella.

Một streptavidin-IgG
được sử dụng trong hệ
thống vùng đối chứng.

•

Kháng nguyên


Lưu ý
-Tính ổn định của của hóa chất xét nghiệm có thể bị ảnh hưởng của độ Khơng dùng kit quá hạn, không để kit trong tủ đông.
-Dùng cho chẩn đốn trong phịng xét nghiệm.
-Đeo găng tay khi thao tác, rửa tay khi xét nghiệm.
-Loại bỏ găng tay, swab, ống nghiệm và test đã sử dụng theo yêu cầu của GLP.

-Khơng dùng với hóa chất của các loại kit khác.
-Loại bỏ mẫu xét nghiệm nếu phát hiện mẫu nhiễm khuẩn hay nấm.
 


IV. BẢO QUẢN MẪU BỆNH PHẨM:
-Thu nhận và thao tác theo tiêu chuẩn PTN.
-Huyết thanh: để máu lắng kết và ly tâm để tách huyết thanh.
-Huyết tương: Thu nhận máu vào ống nghiệm chứa chất kháng đông như heparin, citrat, hay EDTA. Ly tâm máu và tách huyết tương.
-Máu toàn phần từ ngón tay: - Rửa tay bệnh nhân bằng xà phịng và nước ấm hoặc lau bằng tăm bơng. Để khô. - Mát xa tay mà không chạm vào chỗ đâm bằng cách
chà xát tay về phía đầu ngón tay giữa ngón tay giữa hoặc ngón tay đeo nhẫn. - Đâm vào vị trí da cần lấy máu bằng lancet vô trùng. Lau sạch giọt máu đầu tiên. - Nhẹ
nhàng chà xát tay từ cổ tay đến lòng bàn tay để ngón tay tạo thành một giọt t máu trịn tại vị trí đâm.
- Xét nghiệm phải được thực hiện ngay.
-Nên xét nghiệm mẫu ngay khi tách. Nếu phải lưu giữ, nên giữ ở 2 - 8°C khoảng 24 giờ hay ở -20°C nếu muốn giữ lâu hơn.
.


VI. BẢO QUẢN ,LƯU TRỮ VÀ HẠN SỬ DỤNG
- Test xét nghiệm NanoSign Rubella IgG/ IgM nên được lưu giữ ở nhiệt độ từ 4 - 30 °C (36 - 86° F )

- Hạn sử dụng: 24 tháng kể từ ngày sản xuất


VII. THỰC HIỆN XÉT NGHIỆM:
-Bước

1: Để mẫu và test về nhiệt độ phòng trước khi tiến hành xét nghiệm ( 15 - 20 phút )

-Bước 2: Khi đã sẵn sàng xét nghiệm, Xé test ra khỏi phôi, đặt test thử trên mặt phẳng nằm ngang khô và sạch và đánh dấu tên hay
mã bệnh nhân tương ứng trên đó.

-Bước 3: Cho 20 ul mẫu (huyết tương, huyết thanh hoặc máu tồn phần) vào mỗi giếng và sau đó thêm 2 giọt buffer lần lượt vào
từng .
-Bước 4: Đọc kết quả trong vịng 15 phút.
LƯU Ý: Khơng đoc kết quả q 20p.


VIII. ĐỌC KẾT QUẢ:
Lưu ý: vạch màu của xét nghiệm T đậm hay nhạt là tùy thuốc vào nồng độ
kháng thể Rubella có trong mẫu

g (C)
chứn
đối
và

(C)
chứng

ệm T

băng đối

nghi
xét
băng
hiện
Xuất
tnh:
ng
Dươ

hiện
Chỉ xuất
Âm tnh:


Dương tính chia làm 3 trường hợp:

Dương tnh IgM.

Dương tnh IgG.

Dương tnh IgM và IgG.


DƯƠNG TÍNH IgM
-Xuất hiện vạch (T) và vạch đối chứng (C) trên test IgM.
KẾT QUẢ: Nhiễm virus Rubella cấp.


DƯƠNG TÍNH IgG
-Xuất hiện vạch (T) và vạch đối chứng (C) trên test IgG
KẾT QUẢ: Cho thấy BN đã nhiễm virus Rubella trước đó hoặc đã được tiêm chủng.


Dương tính IgM và IgG

•
•
•

-Xuất hiện 2 vạch xét nghiệm (T) và 2 vạch đối chứng (C) trên cả hai test IgM và IgG.

Nếu có các triệu chứng lâm sàng trước đó thì có thể chuẩn đốn bệnh nhân bị nhiễm Rubella cấp tính.

Nếu khơng có dấu hiệu lâm sàng, IgM dương tính có thể do kháng thể IgM tồn tại lâu trong cơ thể hoặc IgM khơng đặc hiệu.

•

Cần làm thêm xét nghiệm với Rubella IgG.


-Nếu sau 20 phút, không xuất hiện vạch đối chứng (C) mặc dù có vạch xét nghiệm (T) trên test IgM hoặc IgG thì kết quả khơng có giá trị. Thực
Kết quả không giá trị:
hiện lại xét nghiệm với test mới.


ƯU ĐIỂM:

- Test NanoSign Rubella Igg/IgM Device đã được so sánh với các test Rubella EIA thương mại hàng đầu và cho thấy độ
chính xác trên 97%.
- Test NanoSign Rubella IgG/IgM Device đã được so sánh với các test Rubella EIA thương mại hàng đầu. Kết quả cho
thấy test có độ nhạy và
độ đặc hiệu cao:
 


HẠN CHẾ
-Test NanoSign Rubella IgG/IgM chỉ dùng trong chẩn đoán in vitro. Test này nên được sử dụng để phát hiện kháng thể IgM và IgG của virus Rubella
trong máu, huyết thanh hoặc huyết tương. Không xác định giá trị định lượng cũng như tỉ lệ nồng độ IgM và IgG kháng thể Rubella bằng test xét

nghiệm định tnh này.
-Test NanoSign Rubella IgG/IgM xác định sự hiện diện của kháng thể IgM hoặc IgG đối với Rubella trong mẫu và không nên được sử dụng làm tiêu
chuẩn duy nhất cho chẩn đoán nhiễm Rubella
Như với tất cả các xét nghiệm chẩn đoán, tất cả các kết quả phải được xem xét với thông tin lâm sàng khác từ bác sĩ.
-Nếu kết quả xét nghiệm là âm tnh và các triệu chứng lâm sàng vẫn tồn tạ, xét nghiệm bổ sung theo dõi bằng các phương pháp lâm sàng khác
được đề xuất. Một kết quả âm tnh bất cứ lúc nào không loại trừ khả năng nhiễm Rubella.