Nghiên cứu bào chế và đánh giá sinh khả dụng viên nang chứa pellet verapamil giải phóng kéo dài TT TIENG ANH

1
ĐẶT VẤN ĐỀ
INTRODUCTION
Verapamil là một thuốc chẹn kênh calci, được dùng để điều trị
đau thắt ngực, tăng huyết áp và rối loạn nhịp tim. Dược chất có thời
gian bán thải ngắn (2,8-7,4 giờ) dẫn đến bệnh nhân phải uống thuốc
nhiều lần trong ngày. Do đó, việc bào chế verapamil dưới dạng giải
phóng kéo dài rất có ý nghĩa trong điều trị. Dạng thuốc này có nhiều
ưu điểm so với các dạng bào chế quy ước như: duy trì được nồng độ
thuốc trong máu ở vùng điều trị trong khoảng thời gian dài nên giảm
số lần dùng thuốc trong ngày ở người bệnh, thuận lợi cho bệnh nhân
khi tuân thủ theo chế độ điều trị, nâng cao sinh khả dụng và hiệu quả
điều trị của thuốc.
Verapamil is a calcium channel blocker, used to treat angina,
hypertension, and arrhythmias. The drugsubstance has a short halflife (2.8-7.4 hours) leading to the patient having to take the drug
many times a day. Therefore, the preparation pharmaceutics of
verapamil as an extended- release pellet is ofa great therapeutic
significance. This drugPellet form has many advantages in
comparison withed to the conventional dosage forms such as:
increasing the bioavailability and safety of the drug, active substance
releasing easily following the kinetic class 1, maintaining the drug
concentration in the blood in the treatment area for a long time, so it
reduces the number of drug taking times of drug used per day forin
patients, which is convenient for patients onwhen complying with the
treatment regimen, improving the dug bioavailability and therapeutic
efficacyect of the drug.
Trên thế giới và Việt Nam, đã cơng bố nhiều cơng trình nghiên
cứu về verapamil giải phóng kéo dài. Tuy nhiên, dạng viên nang
verapamil giải phóng kéo dài chưa được nâng cấp qui mơ sản xuất và
chưa đánh giá được sinh khả dụng của thuốc. Do đó, để góp phần
thúc đẩy việc nghiên cứu và sản xuất các dạng bào chế mới, làm

2
phong phú thêm kỹ thuật bào chế thuốc giải phóng kéo dài ở trong
nước, đề tài luận án “Nghiên cứu bào chế và đánh giá sinh khả
dụng viên nang chứa pellet verapamil phóng kéo dài” được tiến
hành với các mục tiêu:
In over the world and in Vietnam, many research projectsstudies
on extended-release verapamil have been published. However, the
production scale of the extended-release verapamil capsule form has
not been upgraded the production scale and its bioavailability has not
been evaluated. Therefore, in order to contribute onto promoting the
research and production of new dosage forms, enriching the
techniques of extended-release drug preparationpharamceutics in the
countrylocally, the thesis topic “" Preparation rResearch on
pharmacetics and bioavailability assessment of capsules filled
verapamil extended-release capsule containing verapamil pellets”
has been conducted with the following objectives:
1. Xây dựng được cơng thức và quy trình bào chế viên nang
verapamil hydroclorid 120 mg giải phóng kéo dài 12 giờ ở quy mơ
phịng thí nghiệm.
1. Developing Tthe preparation formulation and pharmaceutics
process of verapamil hydrochloride 120 mg extended-release
capsules for 12 hours has been developed at the laboratory scale.
2. Xây dựng được tiêu chuẩn cơ sở và bước đầu đánh giá được
độ ổn định của chế phẩm nghiên cứu.
2. Developing the in-house specificationbasic standards and
initially assessing the stability of the researched product
preparation.
3. Đánh giá được sinh khả dụng của chế phẩm nghiên cứu

trên chó thực nghiệm.


3
3. Evaluating the bioavailability of the researched preparation
product on experimental dogs.

* Những đóng góp mới của luận án:
* New contributions of the thesis:
- Đã tối ưu hố cơng thức và xây dựng được kỹ thuật bào chế
viên nang chứa pellet verapamil hydroclorid (VER.HCl) GPKD theo
phương pháp bao màng kiểm soát giải phóng trên thiết bị tầng sơi ở
qui mơ phịng thí nghiệm (cơng suất 1000 viên/mẻ). Chế phẩm đạt
u cầu theo tiêu chuẩn của DĐVN IV và USP 41. Đây là dạng bào
chế hiện đại trên thế giới, nhưng còn mới mẻ ở nước ta.
- Optimizeding the formulation and developeding the
pharmaceutics technique of theto prepare capsules containing
verapamil hydrochloride pellets (VER.HCl) GPKD by using the
controlled-release film- coating method on the fluid bed machine at
the laboratory scale. (Capacity 1000 capsules /batch). The finished
products meet the standards required by VIETNAMESE
PHARMACOPOEIA IV and USP 41. This is a modern dosage form
in the world, but it is still new in our country.
- Đã tiêu chuẩn hoá chất lượng và đánh giá được độ ổn định của
chế phẩm bào chế được.
- Standardizeding the quality and assesseding the stability of the
prepared preparationfinished product.
- Đã xây dựng được phương pháp xử lý mẫu và ứng dụng
phương pháp HPLC- để định lượng VER.HCl trong huyết tương chó.
Bước đầu đánh giá được sinh khả dụng của chế phẩm trên chó thực

nghiệm và so sánh được một số thông số dược động học của viên
nang VER.HCl 120mg với chế phẩm đối chiếu.


4
- Developeding thea sample processingtreatment method and
applied the HPLC method application tfor quantify VER.HCl
quantation in dog plasma. Evaluated Iinitially, the bioavailability of
the preparation was evaluatedfinish product in experimental dogs and
compared some pharmacokinetic parameters of VER.HCl 120mg
capsules with the reference productpreparation.
* Bố cục, cấu trúc luận án:
* Thesis lLayout and structure of the thesis:
Luận án gồm 148 trang: Đặt vấn đề 2 trang; chương 1 (tổng
quan) 37 trang; chương 2 (nguyên liệu, thiết bị, đối tượng và phương
pháp nghiên cứu) 20 trang; chương 3 (kết quả nghiên cứu) 64 trang;
chương 4 (bàn luận) 21 trang; kết luận 2 trang; kiến nghị 1 trang.
Danh mục bài báo 1 trang, có 145 tài liệu tham khảo và 4 phụ lục.
The thesis includeconsists of 1498 pages: 2 pages of Introduction
2 pages; 37 pages of Cchapter 1 (overview) 37 pages; 20 pages of
cChapter 2 (materials, equipment, research objects and methods) 20
pages; 64 pages of cChapter 3 (research results) 64 pages; 21 pages
of cChapter 4 (discussion) 21 pages; 3 pages of cConclusion 2 pages;
1 page of rRecommendations 1 page, list of articles with 1 page, with
145 reference documents usedmaterials and 4 appendices.
Chương 1. TỔNG QUAN
Chapter 1. OVERVIEW
Tổng quan về VER.HCl gồm: Cơng thức hố học, tính chất lý
hoá, dược động học, tác dụng dược lý và cơ chế tác dụng, tương tác
thuốc, tác dụng không mong muốn, chỉ định và liều dùng, một số biệt

dược kiểm sốt giải phóng, phương pháp định lượng và một số
nghiên cứu bào chế pellet VER.HCl giải phóng kéo dài. Tổng quan
về pellet: khái niệm, ưu nhược điểm của pellet, ứng dụng của pellet,


5
tá dược trong bào chế pellet, kỹ thuật bào chế pellet và các yếu tố ảnh
hưởng đến khả năng giải phóng dược chất từ pellet giải phóng kéo
dài. Tổng quan về một số phương pháp định lượng VER.HCl trong
dịch sinh học và một số nghiên cứu đánh giá sinh khả dụng
VER.HCl.
Overview of VER.HCl includesed: chemical formula, physicochemilogical properties, pharmacokinetics, pharmacological effects
and mechanism of action, drug interaction, undesirable effects,
indications and dosages, some controlled- release patent medicines,
quantitative
methods
and
some
studies
on
the
preparationpharmaceutics of extended-release VER.HCl pellets.
Overview of pellet: the concept, advantages and disadvantages of
pellet, pellet applications of pellet, excipients in pharmacetics of
pellet preparation, pellet preparationpharmaceutics techniques and
the factors affecting the ability to release the drug substance from
extended-release pellet. Overview of some methods to quantify
VER.HCl in the bio-dripslogical fluid and some studies evaluating
the bioavailability of VER.HCl bioavailability.
Chương 2. NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, ĐỐI TƯỢNG VÀ

PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Chapter 2. RESEARCH MATERIAL, EQUIPMENT,
SUBJECTS AND METHODS

2.1. Nguyên liệu, thiết bị và đối tượng nghiên cứu
2.1. Research material, equipment, and subjects
- Nguyên liệu, hoá chất, tá dược đạt tiêu chuẩn các Dược điển,
hoặc tiêu chuẩn của nhà sản xuất. VER.HCl đạt tiêu chuẩn USP 38.
Thiết bị được sử dụng đạt yêu cầu cho nghiên cứu bào chế, kiểm
nghiệm và đánh giá sinh khả dụng.


6
- Materials, chemicals, and excipients met the standardscriteria of
the Pharmacopoeias, or the manufacturer's specificationstandards.
VER.HCl met the USP 38 standardspecification. The equipment used
was satisfactory for pharmaceuticspreparation research, testing and
bioavailability assessment.
- Thuốc đối chiếu: viên nén Vérapamil MYLAN L.P 120mg
GPKD (NSX Mylan Pharmaceutical, USA), số lô: Y6048, hạn dùng:
10/2019.
- Reference drug: Vérapamil MYLAN L.P 120mg GPKD tablets
(manufacturer:NSX Mylan Pharmaceutical, USA), batch number:
Y6048, expiry date: October 2019.
- Động vật thí nghiệm: Chó ta, giống đực khoẻ mạnh, cân nặng
10-12 kg, đạt tiêu chuẩn thí nghiệm.
- Experimental animals: Healthy Vietnamese male Ddogs,
healthy male, weigheding 10-12 kg, meeting experimental
standardsrequirements.
2.2. Phương pháp nghiên cứu

2.2. Research Methods
2.2.1. Phương pháp nghiên cứu bào chế
2.2.1. The method on preparationformulation and pharmaceutics
process development of Verapamil hydrochloride 120mg 12 hoursextended-release capsules research method
Bào chế viên nang VER.HCl gồm 2 giai đoạn chính là: Bào chế
pellet nhân và bao màng kiểm sốt giải phóng DC cho pellet nhân, cụ
thể:
The pharmaceuticspreparation of VER.HCl capsules consists of 2
main stages: The preparation of core pellets and the DC controlled-release
film coating for core pellets, specifically:


7
- Bào chế pellet VER.HCl nhân: bằng phương pháp đùn-tạo cầu.
- Preparing core VER.HCl pellets: by the extrusion-spheronization
method.
- Bào chế pellet VER.HCl giải phóng kéo dài: bằng cách bao
màng kiểm sốt giải phóng DC lên pellet nhân bằng thiết bị bao tầng
sôi.
- Preparing extended-release VER.HCl pellets: by the DC controlledrelease film coating on core pellets by the fluid bed machine.
- Bào chế viên nang VER.HCl 120mg giải phóng kéo dài: Pellet
sau khi bao được đóng vào nang cứng số 1 bằng máy đóng nang thủ
cơng. Hàm lượng VER.HCl trong mỗi viên nang là 120 mg. Nang
được lấp đầy bằng pellet trơ (không chứa dược chất) bào chế với các
tá dược Avicel PH 102 (60 %), lactose (40 %) và tá dược dính là PVP
10 % (vđ).
- Preparing VER.HCl 120 mg extended-release capsules: Pellets
aAfter coating, pellets are packedfilled into hard capsules No. 1 by the
manual encapsulation machine. The strengthcontent of VER.HCl in each
capsule iswas 120 mg. The capsules were filled with inert pellets (without

drug substance) prepared with the excipients of Avicel PH 102 (60 %),
lactose (40 %) and the adhesive excipient was PVP 10% (qsvd).
2.2.2. Phương pháp đánh giá chất lượng và độ ổn định của viên
nang VER.HCl giải phóng kéo dài
2.2.2.
The
method
onfor
developing
the
in-house
specificationassessing quality and stability assessment of extendedrelease VER.HCl capsules
- Phương pháp đánh giá tiêu chuẩn chất lượng pellet và pellet
GPKD: độ mài mòn, độ trơn chảy, mất khối lượng do làm khô, khối
lượng riêng biểu kiến, định lượng VER.HCl trong pellet và độ hòa
tan.
- The quality standard evaluation method of pellet and GPKD pellet
quality: abrasion, fluidity, mass loss due to drying, apparent density,
quantification of VER.HCl in pellet and solubilitydisolution.


8
- Đánh giá một số chỉ tiêu của viên nang chứa pellet VER.HCl
GPKD: hình thức, độ đồng đều khối lượng, định lượng VER.HCl và
độ hoà tan.
- Evaluating some criteria of capsules containing VER.HCl GPKD
pellets: appearanceform, uniformity of mass, quantification of VER.HCl
and disolutionsolubility.
- Đánh giá độ ổn định: Theo quy định của FDA và của tổ chức y
tế thế giới. Nghiên cứu 18 tháng ở điều kiện thực và 6 tháng ở điều

kiện lão hoá cấp tốc.
- Evaluating the stability: According to the requirementsgulations of
FDA and World Health Organization. Researching 18 months study
atunder the real condition and 6 months understudy at the accelerated
aging condition.
2.2.3. Phương pháp đánh giá sinh khả dụng của viên nang
VER.HCl 120mg GPKD trên chó thực nghiệm
2.2.3. The method of evaluating the bioavailability of VER.HCl 120 mg
GPKD capsules in experimental dogs
2.2.3.1. Xây dựng và thẩm định phương pháp HPLC để định lượng
VER.HCl trong huyết tương chó
2.2.3.1. Developing and validatingappraising the HPLC method for
quantification of VER.HCl in dog plasma.
- Xử lý mẫu huyết tương: tủa protein huyết tương bằng methanol.
- ProcessTreatment of plasma samples: The precipitation of plasma
protein with methanol.
- Điều kiện sắc ký: cột SunFireTM C18 (250 x 4,6mm, 5µm),
nhiệt độ cột: nhiệt độ phịng, pha động: ACN: acid formic 0,1%
(30:70), tốc độ dòng: 1ml/phút, Detertor: Huỳnh quang λkt = 272nm,
λpx = 295,8nm.
- Chromatographic conditions: SunFireTM C18 column (250 x
4.6mm, 5µm), column temperature: room temperature, mobile phase:


9
ACN: formic acid 0.1% (30:70), flow rate: 1ml/ min, Detertor:
Fluorescence λkt = 272nm, λpx = 295,8nm.
- Thẩm định phương pháp: tính tương thích, độ đặc hiệu - chọn
lọc, đường chuẩn và khoảng tuyến tính, giới hạn định lượng dưới, độ
đúng và độ chính xác trong ngày và khác ngày, hiệu suất chiết và độ

ổn định.
- The method validation: compatibility, specificity-selectivity, base
line and linear interval, the lower limit of quantification, the precision and
accuracy in the same day and different day, the extraction efficiency and
stability.
2.2.3.2. Đánh giá sinh khả dụng trên chó
2.2.3.2. Evaluation of bioavailability in dogs
- Bố trí thí nghiệm: theo phương pháp chéo đôi, ngẫu nhiên, đơn
liều, 2 giai đoạn, bố trí 2 đợt cách nhau 7 - 10 ngày. Thực hiện trên 6
cá thể chó đực, khỏe mạnh được chia ngẫu nhiên thành 2 nhóm, mỗi
nhóm 3 con.
- Experimental arrangement: According to the method of double
crossover, randomization, single dose, 2 phases, arranging 2
periodsbatches 7-10 days apart. Conducting on 6 healthy male dogs
randomly divided into 2 groups, each group of 3 dogs.
- Lấy mẫu máu: 0; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 12, 16 và 24 giờ.
- Taking blood samples: 0; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 12, 16 and 24
hours.
- Xác định các thông số dược động học và đánh giá kết quả: Với
AUC , Cmax, MRT sử dụng ‘‘khoảng tin cậy 90%’’; T max so sánh theo
phương pháp thống kê phi tham số.
- Determining the pharmacokinetic parameters and evaluating the
results: For AUC, Cmax, MRT use ‘‘90% confidence interval’’; Tmax
compared by non-parametric statistical method.
2.2.4. Cơng cụ tính tốn số liệu, thiết kế thí nghiệm và tối ưu hố
2.2.4. Tools for calculating data, designing experiments, and optimizing


10
Bố trí thí nghiệm theo mơ hình mặt hợp tử tại tâm sử dụng phần

mềm Modde 8.0. Tối ưu hoá bằng phần mềm Inform 3.1. tính tốn
các thơng số dược động học: Bằng phần mềm Kinetica 4.4. Các số
liệu thống kê bằng phần mềm Excel 2010. Các kết quả được xử lý và
biểu thị trong luận án dưới dạng: giá trị trung bình, độ lệch chuẩn
(SD) và độ lệch chuẩn tương đối (RSD %).
The experimental layout according to the zygote surface model at the
center using Modde 8.0 software. Optimizing by Inform 3.1 software,
Calculation of pharmacokinetic parameters: Using Kinetica 4.4 software.
Statistical data using Excel 2010 software. The results were processed and
expressed in the thesis in the form: mean value, standard deviation (SD)
and relative standard deviation (RSD %).
Chương 3.KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
Chapter 3. RESEARCH RESULTS
3.1. Kết quả nghiên cứu bào chế
3.1. Research results of formulation and
pharmaceuticspreparation process development of Verapamil
hydrochloride 120 mg extended-release capsules
3.1.1. Định lượng VER.HCl bằng quang phổ UV-Vis và HPLC
3.1.1. Quantifying VER.HCl by UV-Vis spectroscopy and HPLC
spectroscopy
- Phương pháp quang phổ UV-Vis: λmax= 278nm. Đường chuẩn:
y=0,0111x-0,0834 (R2=0,9953).
- The UV-Vis spectroscopy method: λmax= 278nm The baseline
y=0.0111x-0.0834 ( R2=0.9953).
- Phương pháp HPLC:
- The HPLC method:
+ Độ tương thích: RSD (%) của thời gian lưu và diện tích píc
<2%, 0,9 ≤ AF ≤ 1,5.

11
+ Compatibility: RSD (%) of retention time and peakic area <2%, 0,9
≤ AF ≤ 1,5.
+ Độ đặc hiệu: Tại thời điểm 5,063 phút khơng thấy xuất
hiện píc lạ trên sắc ký đồ của mẫu trắng.
+ Specificity: At the time of 5.063 minutes, no strange peakic
appeared in the chromatograms of the white sample.
+ Độ tuyến tính của phương pháp: có sự tương quan tuyến
tính chặt chẽ giữa diện tích píc và nồng độ VER.HCl ( R 2=0,9998).
+ Linearity of the method: there is a close linear correlation between
the peakic area and concentration of VER.HCl (R2=0, 9998)
+ Độ lặp lại: RSD=0,807% (<2%).
+ Repeatability: RSD=0,807% (<2%).
+ Độ đúng: tỷ lệ tìm lại=100,3%, RSD=1,5% (< 2%).
+ Accuracy: The recovery rate = 100.3% RSD=1,5% (< 2%).
+ Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng: 0,05 μg/ml và
0,15 μg/ml.
+ Limit of detection and quantification: 0.05 μg/ml and 0.15 μg/ml
3.1.2. Kết quả nghiên cứu bào chế pellet VER.HCl GPKD
3.1.2. Research results on VER.HCl GPKD pellet preparation
3.1.2.1. Kết quả bào chế pellet VER.HCl nhân
3.1.2.1. VER.HCl core pellet preparation results
- Ảnh hưởng của tỷ lệ dược chất: Khi tăng dần tỷ lệ DC thì hiệu
suất tạo pellet giảm, q trình vo tạo pellet khó khăn. Chọn cơng thức
CT 1.2 (40%).
- The effect of drug substance ratio: When increasing gradually
the drug substance ratio, the pellet making efficiency decreases, the
pellet making vo process isfaces the difficulty. Selecting the formula
CT 1.2 (40%).

12
- Ảnh hưởng của tỷ lệ Avicel PH102: tỷ lệ thấp không đủ để tạo
cầu, khi tăng tỷ lệ sẽ tăng độ cầu, ở tỷ lệ cao khiến khối bột khô. Nên
lựa chọn Avicel PH102 ở tỷ lệ 45%.
- The effect of the Avicel PH102 rate: at a low rate, it was not
enough to create the sphericity, when the rate was increased, the
sphericity would be increased, at a high rate, the dough mass would
be dry. Therefore, Avicel PH102 would be selected at the rate of
45%.
- Ảnh hưởng của tỷ lệ tá dược trơn: Chọn CT 1.7 (talc=2,5%).
- The effect of smooth excipient rate: Selecting CT 1.7
(talc=2,5%)..
- Ảnh hưởng của lượng tá dược dính: cơng thức CT1.12 (HPMC
E6=0,2 g) có tỷ lệ phù hợp nhất, cho pellet cảm quan tốt nhất.
- The effect of adhesive excipients: CT1.12 formula (HPMC
E6=0.2 g) had the most suitable rate, giving the best sensory for
pellet.
- Ảnh hưởng của thời gian tạo cầu: Thời gian tạo cầu 7 phút cho
hiệu suất tạo pellet là cao nhất (93,77%), chất lượng pellet tốt hơn.
-The effect of sphericity creating time: The 7 minute sphericity
creating time gave the highest pellet forming efficiency for pellet
forming (93.77%), better pellet quality.
- Ảnh hưởng của tốc độ tạo cầu: Tốc độ tạo cầu 400 vòng/phút là
phù hợp, chất lượng pellet thu được tốt, hiệu suất tạo pellet cao
(93,77%).
- The effect of sphericity forming speed: The sphericity forming
speed of 400 rounds per minute was suitable, pellet quality was good,
pellet forming efficiency was high (93.77%).
3.1.2.2. Kết quả bào chế pellet VER.HCl giải phóng kéo dài

3.1.2.2. Results of extended release VER.HCl pellet preparation
a. Ảnh hưởng của một số thơng số thuộc quy trình kỹ thuật
a. The influenceeffect of some parameters of the technical process


13
- Ảnh hưởng của tốc độ phun dịch: tốc độ phun từ 0,85 ml/phút
cho kết quả bao thuận lợi, pellet sôi đều ổn định và hiệu suất cao.
-The effect of fluid spraying speed: The spraying speed from 0.85
ml/min gave favorable encapsulation coating results, pellets boiled
evenly and stably and high efficiency.
- Ảnh hưởng của áp suất phun dịch: áp suất phun 1,2, bar cho
hiệu suất bao 73,21%, pellet sôi đều, ổn định.
- The effect of fluid spraying pressure: The spraying pressure of
1.2, bar gave 73.21% encapsulation efficiency, pellets boiled evenly
and stably.
- Ảnh hưởng của tốc độ thổi khí nóng: tốc độ thổi khí nóng 18
3
m /giờ cho hiệu suất bao phim cao nhất (73,21%), bề mặt nhẵn, ổn
định.
- The effect of hot air blowing speed: The hot air blowing speed
of 18 m3/hour gave the highest film coating efficiency (73.21%),
smooth and stable surface.
b. Ảnh hưởng của công thức màng bao
b. The effect of coating formula
- Ảnh hưởng của tỷ lệ và loại polyme: khi tăng tỷ lệ cả 2 loại EC
thì tỷ lệ % VER. HCl giải phóng giảm. Với EC N10, cả 3 cơng thức
đều khơng kiểm sốt được tỷ lệ % DC giải phóng theo USP 41. Với
EC N20, cả 3 cơng thức đều kiểm sốt tốt tỷ lệ % DCGP, CT4 sử
dụng EC N20 ở mức 3g có khả năng kiểm soát thấp theo yêu cầu

DCGP.
- The effect of rate and type of polymer: when increasing the rate
of both types of EC, the percentage of VER. HCl release decreased.
With EC N10, to all 3 formulas did not control the percentage of DC
released according to USP 41 was not controlled. With EC N20, to all
3 formulas controlled well the percentage % of DCGP was controlled
well, CT4 using EC N20 at level 3g, it was able tolow controllable
low as required by DCGP.


14
- Ảnh hưởng của tỷ lệ và loại polyme phối hợp: HPMC E15
kiểm sốt giải phóng tốt hơn so với E6 do có độ nhớt cao hơn. Lựa
chọn CT11 (HPMC E15=17,5% so với EC).
- The effect of coordinated polymer ratio and type: HPMC E15
had the better release control than E6 due to its higher viscosity.
Selecting CT11 (HPMC E15=17.5% compared to EC).
- Ảnh hưởng của tỷ lệ HPMC E6 và HPMC E15: CT13 với tổng
HPMC so với EC là 17,5%, tỷ lệ HPMC E15/HPMC E6=6:1 được
lựa chọn.
- The effect of the ratio of HPMC E6 and HPMC E15: CT13 with
the total HPMC in comparisoned towith EC was 17.5%, the ratio
HPMC E15/HPMC E6=6:1 was selected.
- Ảnh hưởng của chất hóa dẻo: lựa chọn công thức CT18 với tỷ
lệ TEC=6% khối lượng EC có độ hịa tan phù hợp với USP 41.
- The effect of plasticizer: choosingselect the formula CT18 with
a rate of TEC=6% of EC mass which hasof EC with solubility in
accordance with USP 41.
- Ảnh hưởng của tỷ lệ chất chống dính: CT18 và CT22 sử dụng
talc ở tỷ lệ 40-50% có đồ thị hịa tan tương tự nhau, ít ảnh hưởng đến

khả năng GPDC.
- The effect of anti-adhesive rate: CT18 and CT22 using talc at
the rate of 40-50% with the similar solubility graph, little effect a bit
on the drug substance releasing ability.
3.1.2.3. Tối ưu hố cơng thức pellet VER.HCl GPKD
3.1.2.3. Optimizing the VER.HCl GPKD pellet formula
a, Thiết kế thí nghiệm:
a,. Experimental design:
- Biến độc lâp: Khối lượng EC; tỷ lệ tổng HPMC và TEC (so với
khối lượng EC). Thiết kế thí nghiệm theo mơ hình hợp tử tại tâm
bằng phần mềm MODDE 8.0, có 11 cơng thức được xác định.
- Independent variable: EC volume; the rate of total HPMC and
TEC (compared to EC volume). Experiment wasal designed


15
according to the zygote model at the center using MODDE 8.0
software, 11 formulas were determined.
- Biến phụ thuộc: tỷ lệ % DCGP từ pellet VER.HCl GPKD tại
các thời điểm 1, 2, 4 và 8 giờ theo yêếu cầu của USP 41.
- Dependent variable: the percentage of the drug substand
releasedDCGP from VER.HCl GPKD pellet at 1, 2, 4 and 8 hours as
required by USP 41.
b, Tiến hành thực nghiệm:
b,. Conducting the experiment:
- Các công thức đều đạt hàm lượng từ 95,25-103,03%.
- To All formulas reached the content was reached the range from
95.25-103.03%.
- Kết quả đo độ hoà tan cho thấy: . Tất cả 11 cơng thức nghiên
cứu đều có khả năng kéo dài q trình giải phóng VER.HCl so với

pellet khơng bao màng.
- The solubility dissolution measurement results showed: All 11
studied formulas were able to prolong the release of VER.HCl in
comparison withed to uncoated pellets.
c, Đánh giá ảnh hưởng của các thành phần màng bao đến độ hòa tan:
c,. Evaluating the effect of coating composition on the latent
timedisolution:
Phân tích kết quả được sự trợ giúp của phần mềm Inform 3.1 cho
R thử=93,38 và R2 luyện=96,53 (nằm trong khoảng 90-99). Do đó,
mơ hình có sự tương quan giữa các biến độc lập và các biến phụ
thuộc. Kết quả ở các mặt đáp cho thấy: yếu tố ảnh hưởng lớn nhất tới
tỷ lệ % DCGP là khối lượng EC, sau đó đến tỷ lệ HPMC và cuối
cùng là tỷ lệ TEC.
The analysis of results was supported by Inform 3.1 software for
R2 test=93.38 and R2 training=96.53 (in the range of 90-99).
Therefore, the model had a correlation between the independent
variables and the dependent variables. The results in all aspects
2


16
showed that: the factor that had the biggest influence on the
percentage of the substance releasedDCGP was the EC volume, then
the HPMC rate and finally the TEC rate.
d, Tối ưu hoá công thức màng bao:
d,. Optimizing the coating formula:
Kết quả tối ưu thu được bằng phần mềm như sau: X1 (EC N20)=
3,34 g, X2 (HPMC)=18,98 % (so với EC), X3 (TEC)= 8% (so với
EC).
The optimal results obtained by the software were as follows: X1

(EC N20)= 3.34 g, X2 (HPMC)=18.98% (compared to EC), X3
(TEC)= 8% (compared to EC) .
Giá trị dự đoán của các biến phụ thuộc: Y1=9,72 %, Y2=21,69%,
Y4=46,21% và Y8=85,00%.
Predicted values of dependent variables: Y1=9.72%, Y2=21.69%,
Y4=46.21% and Y8=85.00%.
3.1.2.4. Khảo sát và đề xuất tiêu chuẩn cho pellet VER.HCl GPKD
3.1.2.4. Surveying and proposing standards the specificationfor of
VER.HCl GPKD pellets
Tiến hành bao 20 g pellet theo công thức tối ưu, đánh giá một số
tiêu chuẩn của công thức tối ưu pellet VER.HCl GPKD, kết quả như
sau:
Carrying outPerform coating 20g pellets coating according to the
optimal formula, evaluating some criteria of the optimal formula
pellet VER.HCl GPKD, the results were as follows:
- Hình thức: Pellet hình cầu, bề mặt nhẵn, mịn, kích thước 0,81,2 mm.
- Appearance: spherical pPellet, smooth surface, size 0.8-1.2 mm.
- Khối lượng riêng biểu kiến: 0,75± 0,05 (g/ml)
- Apparent density: 0.75± 0.05 (g/ml).
- Tốc độ chảy: 0,81± 0,09 (g/s).
- Flow speed: 0.81± 0.09 (g/s).
- Hàm ẩm: 2,70±0,10 (%)


17
- Moisture content: 2.70±0.10 (%).
- Hàm lượng VER.HCl: 35,67±1,16 (%)
- VER.HCl assaycontent: 35.67±1.16 (%).
Kết quả thử hồ tan từ cơng thức tối ưu cho thấy tỷ lệ %
VER.HCl giải phóng tại các thời điểm gần với mơ hình tính tốn của

phần mềm INFORM 3.1 cho giá trị f 2=85,67. Động học giải phóng
VER.HCl từ pellet VER.HCl GPKD tn theo mơ hình Weibull với
AIC=4,163.
The dissolution test result from the optimal formula showed that
the percentage of VER.HCl released at times whichwasare close to
the calculation model of INFORM 3.1 software for showed the value
f2=85.67. The kinetics of VER.HCl released from the VER.HCl
GPKD pellet followed the Weibull model with AIC=4,163.
3.1.3. Kết quả bào chế viên nang VER.HCl 120mg GPKD
3.1.3. The result of preparation pharmaceutics of VER.HCl 120mg
GPKD capsules
3.1.3.1. Bào chế pellet kéo dài ở quy mô lớn hơn
3.1.3.1. Extended pellet preparation on a larger scale
a. Bào chế pellet nhân VER.HCl
a. Preparing VER.HCl core pellets
Tiến hành nâng quy mô bào chế với bộ máy trộn ERWEKA với
quy mô 300 g pellet/mẻ với công thức bào chế: VER.HCl 120 g,
Avicel PH102 135 g, Lactose 37,5 g, Talc 7,5 g, HPMC E6 0,6 g,
nước cất 150 ml.
Proceeding to increase the preparation sScale-up with the
ERWEKA mixer with the scale of 300 g pellet/batch with the
preparation formulation: VER.HCl 120 g, Avicel PH102 135 g,
Lactose 37.5 g, Talc 7.5 g, HPMC E6 0.6 g, 150 ml distilled purified
water.
Tiến hành bào chế 3 mẻ và đánh giá hiệu quả quy trình
Preparing 3 batches and evaluating the process efficiency:


18
- Về hiệu suất tạo pellet và chất lượng pellet: nâng tỷ lệ tạo

pellet lên khoảng 3,83%, nguyên nhân là do hạn chế được lượng bột
hư hao trong quá trình trộn khô và trộn ướt so với dùng chày, cối thủ
công (p<0,05).
- Regarding the pellet creating efficiency and pellet quality:
raising the pellet creating rate was incresed to about 3.83%, the
reason was due to the limitation of powder loss during dry mixing
and wet mixing compared to using manual pestles and mortars.
(p<0.05).
- Một số đặc tính khác của pellet như: khối lượng riêng biểu
kiến, tốc độ chảy, độ mài mòn, hàm ẩm và hàm lượng VER.HCl của
hai mẻ 100 g và 300 g khác nhau khơng có ý nghĩa thống kê
(p>0,05).
- Some other characteristics of pellets such as: apparent density,
flow rate, abrasiveness, moisture content and VER.HCl content of
two different batches of 100 g and 300 g were not statistically
significant (p). >0.05).
Tiếp tục khảo sát độ lặp lại của quy trình bào chế pellet của 3 mẻ
bào chế ở quy mô 300 g trên máy, cho thấy: kết quả các đặc tính của
pellet cho giá trị độ lệch chuẩn (SD) của 3 mẻ đều <5% so với giá trị
trung bình. Do đó, quy trình bào chế có độ lặp lại cao, đảm bảo thu
được sản phẩm đồng nhất giữa các mẻ.
Continueing to investigatinge the repeatability of the pellet
preparation process of 3 batches of preparation at the scale of 300 g
on the machine, it showed that: the results of the pellet characteristics
for the standard deviation (SD) of the 3 batches were < 5% compared
with the average value. Therefore, the preparation process was highly
repeatable, ensuring to get the homogenous products between
batches.
b. Bao màng kiểm soát giải phóng
b. The controlled-release film coating

19
Công thức dịch bao cho mẻ bao 300 g pellet nhân VER.HCl như
sau: Pellet nhân VER.HCl 300,00g, EC N20 50,10g, HPMC E6
1,35g, HPMC E15 8,10g, TEC 4,05g, Talc 20,10g, nước cất 75,0ml,
EtOH 96% 750,0ml.
The formula of coating fluid for a batch of 300g VER.HCl core
pellets was as follows: 300.00g VER.HCl core Pellet, EC N20
50.10g, HPMC E6 1.35g, HPMC E15 8.10g, TEC 4.05g, Talc 20.10g,
75.0ml purifieddistilled water, 96% EtOH 750.0ml.
Đánh giá tiêu chuẩn chất lượng 3 mẻ pellet VER.HCl GPKD cho
thấy kết quả các đặc tính của 3 mẻ pellet bao 300 g cho giá trị độ lệch
chuẩn (SD) của 3 mẻ đều <5% so với giá trị trung bình, hệ số f 2 của
mẻ 2 và mẻ 3 so với mẻ 1 đều lớn hơn 50, tỷ lệ % DCGP tại các thời
điểm đều đạt yêu cầu so với USP 41. Do đó, quy trình bào chế có độ
lặp lại cao, đảm bảo thu được sản phẩm đồng nhất giữa các mẻ. Trên
các kết quả thu được, dự kiến tiêu chuẩn chất lượng cho pellet
VER.HCl GPKD như bảng 3.40.
Evaluating the quality standards of 3 batches of VER.HCl GPKD
pellets showed that the characteristics result of 3 batches of 300g
coating pellets showed that the standard deviation (SD) of the 3
batches were <5% compared to the average value, the coefficient f 2
of batch 2 and batch 3 compared to batch 1 was greater than 50, the
percentage of the drug substance releasedDCGP at all times were
satisfactory compared to USP 41. Therefore, the preparation process
had a high repeatability, ensuring to obtain homogeneous products
between the batches. Based on the obtained results, the quality
standards for VER.HCl GPKD pellets are expected as in Table 3.40.
Bảng 3.40. Dự kiến tiêu chuẩn pellet VER.HCl GPKD

Chỉ tiêu
Hình thức

Yêu cầu
Pellet hình cầu, bề mặt nhẵn, mịn,


20
kích thước 0,8-1,2 mm
Khối lượng riêng biểu kiến
Tốc độ chảy
Hàm ẩm (%)
Hàm lượng VER.HCl (%)
Độ hòa tan (%)

0,70 - 0,80 (g/ml)
0,8-1,0 (g/s)
< 5%
34-40 %
Sau 1 giờ: 2 đến 12%
Sau 2 giờ: 10 đến 25%
Sau 4 giờ: 25 đến 50%
Sau 8 giờ: >80%

Table 3.40. Estimated VER.HCl GPKD pellet standards
Targets
Requirements
FormAppearance
Apparent density
Flow rate

Moisture content (%)
VER.HCl content Assay
(%)
Solubility Disolution(%)

Spherical pellet , fine and smooth
surface, size0,8-1,2 mm
0,70 - 0,80 (g/ml)
0,8-1,0 (g/s)
< 5%
34-40 %
After 1 hour: 2 to 12%
After 2 hours: 10 to 25%
After 4 hours: 25 to 50%
After 8 hours: >80%

3.1.3.2. Xây dựng công thức đóng nang
3.1.3.2. Deveploping the formulation of capsule encapsulation
- Pellet trơ được bào chế bằng các tá dược Avicel PH 102 (60%),
lactose (40%) và dung dịch PVP 10 % (vđ) theo phương pháp đùn-


21
tạo cầu như ở mục 2.2.1.1. Tiến hành đo khối lượng riêng biểu kiến
của pellet trơ thu được d=0,728 mg/ml. Từ đó tính ra được lượng
pellet trơ cần thêm vào một nang thuốc là:
- Inert pellets were prepared with the excipients Avicel PH 102
(60%), lactose (40%) and PVP solution 10% (qsvd) by the extrusionspheronization method as in section 2.2.1.1. Measuring the apparent
density of the inert pellet and to obtain d = 0.728 mg/ml. Then the
amount of inert pellet added to a capsule could be calculated as:

mpellet trơ= (0,470 - 0,449) x 0,728 =15,29 (mg)
minert pellet = (0.470 - 0.449) x 0.728 = 15.29 (mg)
- Cơng thức (tính cho 1 viên):
- Formula (calculated for 1 capsule):
Pellet VER.HCl GPKD
336,42 mg
Pellet VER.HCl GPKD
336.42 mg
Pellet trơ
15,29 mg
Inert pellet
15.29 mg
3.1.3.3. Đánh giá độ hoà tan viên nang VER.HCl 120 mg GPKD
3.1.3.3. Evaluating the solubility disolution of VER.HCl 120 mg
GPKD capsules
Viên nang thu được có tốc độ giải phóng dược chất khá giống với
pellet VER.HCl GPKD. Như vậy q trình đóng nang khơng ảnh
hưởng đến khả năng giải phóng dược chất.
The obtained capsules had a drug substance releasinge speed that
wasto be quite similar to the VER.HCl GPKD pellet. Thus, the
encapsulation process did not affect on the drug substance release
ability.
3.2. Kết quả nghiên cứu xây dựng tiêu chuẩn cơ sở và đánh giá
độ ổn định của viên nang VER.HCl 120mg GPKD


22
3.2. Research results onto developing the in-house specification
base standards and evaluatinge the stability assessment of
VER.HCl 120mg extended-releaseGPKD capsules

3.2.1. Xây dựng tiêu chuẩn cơ sở của viên nang VER.HCl 120mg
giải phóng kéo dài
3.2.1. Developing base standardsthe in-house specification of
extended-release VER.HCl 120mg capsules
3.2.1.1. Xây dựng một số chỉ tiêu chất lượng viên nang VER.HCl
120mg giải phóng kéo dài
3.2.1.1. Developing some quality targetscriteria of VER.HCl 120mg
extended-release capsules
- Tính chất: Viên nang số 1, thân màu trắng, nắp màu đỏ. Bên
trong chứa các hạt pellet nhỏ màu trắng.
- Properties: No. 1 capsule, white body, red cap. There were with
the small white pellets inside.
- Độ đồng đều khối lượng: Tiến hành theo DĐVN IV, PL 11.3,
PP 2. Kết quả cho thấy: Khối lượng giữa các viên chênh lệch nhau ít
và chênh lệch < ±7,5 % so với khối lượng trung bình viên.
-The weight uniformity: Conducting accordingFollowing to
VIETNAMESE PHARMACOPOEIA IV, PL 11.3, PP 2. The results
showed that: The weights ofdifference between the pellets wereas
small different a bit and the difference descripancy was < ±7.5 %
compared to the average weight of the pellets.
- Hàm lượng: Định lượng VER.HCl theo phương pháp ở mục
2.2.2.1. Kết quả hàm lượng VER.HCl trung bình của viên là
100,24±0,43% (n=6) so với hàm lượng ghi trên nhãn, đạt yêu cầu
theo tiêu chuẩn USP 41.
- ContentAssay: Quantifying VER.HCl according to the method
in section 2.2.2.1. The average VER.HCl content assay of the capsule
was 100.24±0.43% (n=6) compared to the content assay stated on the
label, which met the requirements of USP 41 standard.

23
- Độ hoà tan: Trong 3 mẻ bào chế, độ hòa tan của viên nang
VER.HCl 120mg GPKD theo thời gian khác nhau không đáng kể và
đều đạt yêu cầu của USP 41.
- SolubilityDisolution: In 3 batches of preparation, the solubility
disolution of VER.HCl 120mg GPKD capsules according toin the
different times was not different significantly and all met the
requirements of USP 41.
3.2.1.2. Đề xuất tiêu chuẩn chất lượng và xây dựng tiêu chuẩn cơ sở
viên nang VER.HCl 120mg GPKD
3.2.1.2. Proposing quality standards and developing base
standardsin-house specification for VER.HCl 120mg GPKD capsules
Dựa vào kết quả kiểm nghiệm viên nang VER.HCl 120mg giải
phóng kéo dài, đề xuất tiêu chuẩn chất lượng của chế phẩm như sau:
Based on the test results of VER.HCl 120mg extended-release
capsules, the proposed quality standards of the preparation drug
product were proposed as follows:
- Hình thức: Viên nang cứng số 1, thân màu trắng, nắp màu đỏ.
Bên trong chứa các hạt pellet nhỏ, hình cầu, màu trắng.
- FormAppearance: No. 1 hard capsule, white body, red cap.
There werewith small, spherical and white pellets inside .
- Độ đồng đều khối lượng: < ±7,5% (DĐVN IV, PL 11.3, PP 2)
- The weight uniformity: < ±7,5% (DĐVN VN pharmacopeia
IV, PL Annex 11.3, PPMethod 2).
- Độ đồng đều hàm lượng: nằm trong giới hạn 85-115% hàm
lượng trung bình (DĐVN IV, PL 11.2, PP 2).
- The content uniformity: within the range of 85-115% of average
content (VN pharmacopeiaDĐVN IV, PL Annex 11.2, PP Method 2).

24
- Định tính: phải giống chuẩn (USP 41)
- Qualification: must match be similar to the standard (USP 41).
- Định lượng: 90,0-110,0% (HPLC)
- Quantification: 90.0-110.0% (HPLC).
- Độ hoà tan: 1 giờ: 2-12%, 2 giờ: 10-25%, 4 giờ: 25-50%, 8 giờ:
≥80% (USP41).
- SolubilityDisolution: 1 hour: 2-12%, 2 hours: 10-25%, 4 hours:
25-50%, 8 hours: ≥80% (USP41).
3.2.2. Nghiên cứu độ ổn định viên nang VER.HCl 120mg GPKD
3.2.2. Studying Result ofon the stability assessment of VER.HCl
120mg GPKD extended-release capsules
3.2.2.1. Về hình thức
3.2.2.1. About formAppearance
Các viên nang VER.HCl 120mg GPKD bảo quản 18 tháng ở điều
kiện thực và điều kiện lão hố cấp tốc khơng có thay đổi so với thời
điểm ban đầu.Các viên bảo quản 18 tháng ở điều kiện thường và 6
tháng ở điều kiện lão hố cấp tốc khơng có thay đổi so với thời điểm
ban đầu.
VER.HCl 120mg GPKD capsules which were storedpreserved
for 18 months atin the real condition and atunder the accelerated
aging condition with nodid not change compared to the
startingoriginal time. The capsules which were stored for 18 months
under at the normal condition and 6 months under at the accelerated
aging condition did not with no change compared to the
originalstarting time.
3.2.2.2. Về độ hoà tan
3.2.2.2. About solubilityDisolution
Sau 18 tháng theo dõi độ ổn định ở điều kiện thực và 6 tháng ở
điều kiện lão hố cấp tốc, độ hịa tan của viên nang VER.HCl 120 mg

GPKD thay đổi không đáng kể và vẫn đạt các yêu cầu của USP 41.


25
After 18 months of stability monitoring under at the real
condition and 6 months under at the accelerated aging condition, the
solubility disolution of VER.HCl 120 mg GPKD capsules did not
change significantly and still met the requirements of USP 41.
3.2.2.3. Về hàm lượng VER.HCl
3.2.2.3. About the VER.HCl contentassay
Hàm lượng VER.HCl trong chế phẩm không giảm nhiều trong 18
tháng bảo quản ở điều kiện thường (giảm khoảng 2,2%). Sau 6 tháng
ở điều kiện lão hoá cấp tốc, hàm lượng VER.HCl giảm khoảng
2,16%.
The content assay of VER.HCl in the preparation finished
product did not decrease much in 18 months of storage under atthe
normal condition (decreased about 2.2%). After 6 months in theat
accelerated aging condition, the VER.HCl content assay decreased by
about 2.16%.
3.3. Kết quả nghiên cứu sinh khả dụng
3.3. Results of bioavailability researchstudyassessment of
VER.HCl 120mg extended-release capsules in experimental dogs
3.3.1. Thẩm định phương pháp định lượng VER.HCl trong huyết
tương chó
3.3.1. Validation of method for quantification of VER.HCl in dog
plasma
- Tính tương thích của hệ thống: Kết quả cho hệ số biến thiên CV
(%) của thời gian lưu và diện tích píc đều nhỏ hơn 1,0 % và 2,0 %.
- System compatibility: Results for the coefficient of variation CV
(%) of the retention time and peakic area were less than 1.0% and

2.0%.