Bài giảng HIV : Các phương pháp xét nghiệm HIV part 1 ppsx

C¸c ph¬ng ph¸p C¸c ph¬ng ph¸p
xÐt nghiÖm HIVxÐt nghiÖm HIV
Nguyen Thi Nhu HaNguyen Thi Nhu Ha
XÐt nghiÖm ph¸t hiÖn sµng läcXÐt nghiÖm ph¸t hiÖn sµng läc
C¸c kü thuËt ELISAC¸c kü thuËt ELISA
+ HIV Uniform II plus O+ HIV Uniform II plus O
+ Genscreen HIV 1/2 version 2+ Genscreen HIV 1/2 version 2
+ Murex HIV 1/2+ Murex HIV 1/2
C¸c xÐt nghiÖm nhanhC¸c xÐt nghiÖm nhanh
+ SFD HIV 1/2 PA+ SFD HIV 1/2 PA
+ Determine HIV 1/2+ Determine HIV 1/2
+ Multispot HIV+ Multispot HIV 1/HIV1/HIV 22
+ Genie II HIV 1/2+ Genie II HIV 1/2
Kỹ thuật SFD HIV 1/2 PAKỹ thuật SFD HIV 1/2 PA
NhNhữững hạt gelatin đợc gắn với các thành phần kháng nguyên của ng hạt gelatin đợc gắn với các thành phần kháng nguyên của
virut HIV(gp41, p24 của HIV1 và gp36 của HIV2) sẽ tạo ngng virut HIV(gp41, p24 của HIV1 và gp36 của HIV2) sẽ tạo ngng
kết khi có sự hiện diện của kháng thể đặc hiệu trong huyết thanh kết khi có sự hiện diện của kháng thể đặc hiệu trong huyết thanh
(hoặc huyết tơng) bệnh nhân cho phép phát hiện đồng thời (hoặc huyết tơng) bệnh nhân cho phép phát hiện đồng thời
kháng thể của virut HIV 1 và 2kháng thể của virut HIV 1 và 2
Trong phản ứng ngng kết, mẫu thử đợc tiến hành đồng thời Trong phản ứng ngng kết, mẫu thử đợc tiến hành đồng thời
trên hai giếng: với hạt gelatin không gắn kháng nguyên (giếng trên hai giếng: với hạt gelatin không gắn kháng nguyên (giếng
chứng âm) và các hạt gelatin có gắn kháng nguyên (giếng phản chứng âm) và các hạt gelatin có gắn kháng nguyên (giếng phản
ứng)ứng)
Không có phản ứng ngng kết khi các hạt gelatin tự động lắng Không có phản ứng ngng kết khi các hạt gelatin tự động lắng
xuống, gom lại thành nút nhỏ dới đáy giếngxuống, gom lại thành nút nhỏ dới đáy giếng
Có phản ứng ngng kết khi các hạt gelatin kết hợp tạo thành một Có phản ứng ngng kết khi các hạt gelatin kết hợp tạo thành một
mạng liên kết phủ đều trên giếngmạng liên kết phủ đều trên giếng
ĐĐiều kiện để đọc kết quảiều kiện để đọc kết quả
* Không có sự ngng kết ở các giếng chứng âm. * Không có sự ngng kết ở các giếng chứng âm.
Trong trờng hợp có hiện tợng ngng kết ở Trong trờng hợp có hiện tợng ngng kết ở
các giếng chứng âm phải sử lý huyết thanh các giếng chứng âm phải sử lý huyết thanh

bằng cách cho hấp phụ các yếu tố làm ngng bằng cách cho hấp phụ các yếu tố làm ngng
kết ngẫu nhiên trong huyết thanh thử nghiệm kết ngẫu nhiên trong huyết thanh thử nghiệm
với các hạt gelatine không gắn kháng nguyên với các hạt gelatine không gắn kháng nguyên
và làm lại phản ứngvà làm lại phản ứng
ĐĐọc và biện luận kết quảọc và biện luận kết quả
Mẫu âm tính: không có sự ngng kết ở cả hai Mẫu âm tính: không có sự ngng kết ở cả hai
giếng chứng âm và giếng phản ứnggiếng chứng âm và giếng phản ứng
Mẫu nghi ngờ: không có sự ngng kết ở giếng Mẫu nghi ngờ: không có sự ngng kết ở giếng
chứng âm, có sự ngng kết không rõ ràng ở chứng âm, có sự ngng kết không rõ ràng ở
giếng phản ứnggiếng phản ứng
Mẫu dơng tính: không có ngng kết ở giếng Mẫu dơng tính: không có ngng kết ở giếng
chứng âm, có ngng kết rõ ở giếng phản ứngchứng âm, có ngng kết rõ ở giếng phản ứng
Ưu điểm của kỹ thuật SFDƯu điểm của kỹ thuật SFD
Dễ thực hiệnDễ thực hiện
Thao tác đơn giảnThao tác đơn giản
Có thể làm hàng loạt Có thể làm hàng loạt
Cho kết quả sau 2 giờ và đọc bằng mắt thờngCho kết quả sau 2 giờ và đọc bằng mắt thờng
Sinh phẩm có tính đặc hiệu caoSinh phẩm có tính đặc hiệu cao
Tỷ lệ dơng tính giả tơng đối thấp hơn so với Tỷ lệ dơng tính giả tơng đối thấp hơn so với
kỹ thuật ELISAkỹ thuật ELISA
Genscreen HIV1/2 version 2Genscreen HIV1/2 version 2
Là kỹ thuật ELISA sandwich với hai giai đoạnLà kỹ thuật ELISA sandwich với hai giai đoạn
Sử dụng giếng microplate có gắn kháng nguyên tinh Sử dụng giếng microplate có gắn kháng nguyên tinh
chế là các protein tái tổ hợp và tổng hợp của Gp160, chế là các protein tái tổ hợp và tổng hợp của Gp160,
p25 và gp36 của HIV1 và HIV2p25 và gp36 của HIV1 và HIV2
Nếu trong mẫu thử có kháng thể kháng HIV1/HIV2, Nếu trong mẫu thử có kháng thể kháng HIV1/HIV2,
kháng thể này sẽ gắn đặc hiệu với các kháng nguyên kháng thể này sẽ gắn đặc hiệu với các kháng nguyên
cố định trên giếngcố định trên giếng
Cộng hợp đợc cho vào ở giai đoạn hai là kháng Cộng hợp đợc cho vào ở giai đoạn hai là kháng
nguyên đánh dấu bằng men Peroxidasenguyên đánh dấu bằng men Peroxidase

Phức hợp Kháng nguyênPhức hợp Kháng nguyên Kháng thểKháng thể Cộng hợp sẽ đợc Cộng hợp sẽ đợc
phát hiện bằng phản ứng hiện màu với cơ chấtphát hiện bằng phản ứng hiện màu với cơ chất