TIỂU LUẬN MÔN PHÂN TÍCH SẮC KÝ. TÌM HIỂU VỀ CÁC LOẠI CỘT TRONG PHÂN TÍCH SẮC KÝ LỎNG

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP TP HCM
KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC
TIỂU LUẬN MÔN
PHÂN TÍCH SẮC KÝ
TÌM HIỂU VỀ CÁC LOẠI CỘT TRONG PHÂN
TÍCH SẮC KÝ LỎNG
GVHD: TRẦN NGUYỄN AN SA
SVTH : TRẦN VĂN LỘC MSSV: 10080021

BÙI TRÌNH THU HiỀN 10232531

PHAN VĂN ĐỨC 10045881
Cấu tạo, vị trí, cơ chế tách của cột
trên máy sắc ký
Phân loại cột và tác dụng mỗi loại
cột.
Bảo vệ cột, rửa cột sau khi sử
dụng.
NỘI DUNG
I
II
II
I
I.Cấu tạo và vị trí, cơ chế tách của cột
trên máy sắc ký
1.Cấu tạo chung của một cột sắc ký.

Lớp vỏ bảo vệ làm bằng hợp chất không gỉ hoặc thủy tinh.

Lớp vỏ phân tích:chứa pha tĩnh


Pha tĩnh:là những hợp chất hữu cơ được gắn lên chất mang rắn silica hoặc
cấu thành từ silica .

Chất nhồi cột: bao gồm một hỗn hợp nước hoặc dung dịch đệm với một
hoặc nhiều dung môi hữu cơ phân cực tan được trong nước.
2.Vị trí cột trên máy
Lò cột (column ovent)
Dùng để điều khiển cột
tách
Cột tách là nơi xảy ra
quá trình tách. Gồm
cột tách và cột bảo vệ.
II.Phân loại cột và tác dụng mỗi loại cột

1.Cột sắc ký hấp phụ.

2.Cột sắc ký phân bố.

3.một số loại cột chuyên dụng khác.
1.Cột sắc ký hấp phụ.

Pha tĩnh thường là chất rắn có khả năng hấp phụ.

Thường là hợp chất vô cơ phân cực: SiO2,Al2O3.hay không phân cực
như than hoạt tính.

Được dùng cho những hợp chất hữu cơ và chủ yếu tan trong dung môi
hữu cơ ít tan trong nước.

Hấp phụ tốt những sản phẩm dầu mỏ,các axit béo và este của

chúng.các amin thơm và các hợp chất hữu cơ khác.
2.CỘT SẮC KÝ PHÂN BỐ:
1. Cột đảo pha.
2. Cột pha thường .
. A. Cột pha đảo
-Có chiều dài khác nhau:10-25 cm.đường kính 2=5 mm
-Tính chất:pha tĩnh mang tính chất không phân cực
-Gồm có:cột RP C18 (ODS),cột C8(octyl), cột C4, cột phenyl,cộtTMS…
-nguyên tắc: nó được dùng để phân tích những hợp chất từ ít phân cực đến phân
cực trung bình

-Được sử dụng trong phân tích các hợp chất trọng lượng phân tử
thấp như thuốc hóa dược, các hợp chất pháp y, amino acid,
carbohydrates, steroid, chất béo, các acid béo, các acid nucleic,
nucleotid
*.cột đảo pha điển hình c18

Cột C18 ( RP-18, ODS ) là loại cột có nền là silica, được biến tính
gắn vào mạnh hydrocacbon C18H37 -(CH2)17-CH3. Các "dây" C18
chĩa ra để "nắm bắt, lưu giữ" các cấu tử.

C18 là một cột không phân cực điển hình.

Có nhiều kích thước và chiều dài khác nhau Ví dụ:cột pha đảo
phenominex c18: 150-2mm.pha tĩnh 5 micromet. cột tách pha đảo là
Reprosil Pur C18-AQ và Reprosil. 80 ODS-2 (150mm x 4.6mm, 5µm)
các loai cột đảo pha c18:

Cột đảo pha silicat: Sử dụng phân tích các hợp chất trọng lượng
phân tử thấp như thuốc hóa dược, amino acid, carbohydrates,

steroid, các acid béo

Cột TSKgel Silica: có kích thước lỗ đồng đều 10, 14, 15 hoặc 25
nm, ngoài được phủ một lớp monomer hoặc polymer là sự trùng
hợp của octadecyl, cyano, hoặc nhóm phenyl.

cột đảo pha polymer:
Polymethacrylate-là được cấu trúc với các cỡ hạt khác nhau. Cho phép phân
tích nhiều hợp chất cơ bản, làm giảm hấp phụ thứ cấp, nâng cao chất lượng
phục hồi cho các peptide và protein do tương tác thứ cấp giảm.
Cột TSKgel RPC có thể được làm sạch và loại bỏ nội độc tố bằng cách sử dụng
Acid hoặc base mạnh.Cột TSKgel RPC sử dụng các loại nhựa không xốp (NPR)
hoặc với các loại nhựa xốp có kích thước khác nhau.
.
.
**các lọa cột pha đảo khác.

Cột sắc ký pha đảo C8, kích thước cột L x ID : 250 x 4,6 mm, kích thước hạt 5 mm.

Cột đảo pha c4

Cột đảo pha phenyl

Cột đảo pha TMS.

Hiện nay trên thị trường có rất nhiều dòng cột đảo pha khác nhau và ngày càng tiên
tiến và hiện con người.
C.Cột pha thường
1. Cột silical trung tính
2. Cột silical trên nền mạch cacbon

3. Cột cyano
*.cột silical trung tính
**.cột trên nền mạch cacbonsilical

-SI-CH2-CH2-CN

SI-CH2-CH2-NH

SI-CH2-CH2-CH2OCH(OH)-CH2(OH)
***.C t cyano: ộ

Đa mục đích

Khả năng tương thích với các dung dịch nước trong pha động cao.

Ít kỵ nước để rửa giải nhanh chóng của các phân tử kỵ nước.

Duy trì và phân tách các chất phân tích mạnh mẽ cơ bản, bao gồm cả bậc bốn
muối amoni.

Đặc biệt ổn định và tuổi thọ cột, từ pH 2 pH 8.
Hầu hết các hợp chất
hữu cơ có mạch carbon
dài (ít phân cực)
Dung môi sử dụng trong
sắc ký pha đảo là các dung
môi phân cực, rẻ tiền

Do đó, SKPĐ

được ứng dụng
nhiều và phổ biến
hơn SKPT.
3.CÁC LOẠI CỘT CHUYÊN DỤNG CHO TỪNG NHÓM
CHẤT

A.Cột sắc ký phân loại theo kích thước: sử dụng phân tách các hợp
chất hữu cơ cao phân tử: protein, polymer sinh học, các hợp chất hữu
cơ tan trong nước, tan trong dung môi…
b.Cột sắc ký trong phân tách protin: TSKgel SW-loại cột được cấu trúc
từ các hạt silica. Được gắn các nhóm Diol tương tác với các mẫu protein.