phương pháp sắc ký lỏng khối phổ (lc-ms ms) xác định dư lượng một số kháng sinh nhóm sulfonamides trong thịt gia súc gia cầm

1



TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN



Vũ Thị Trang



PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ (LC-MS/MS) XÁC ĐỊNH
DƢ LƢỢNG MỘT SỐ KHÁNG SINH NHÓM SULFONAMIDES
TRONG THỊT GIA SÚC GIA CẦM







H- 2012


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TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN


Vũ Thị Trang

PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG KHỐI PHỔ (LC-MS/MS) XÁC ĐỊNH
DƢ LƢỢNG MỘT SỐ KHÁNG SINH NHÓM SULFONAMIDES
TRONG THỊT GIA SÚC GIA CẦM

 
 60.44.29



 


- 2012
3

LỜI CẢM ƠN





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

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
 




c

Hà Nội, năm 2012


Vũ Thị Trang



4

MỤC LỤC

MỞ ĐẦU 1
CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN3
 3
 
 3
4
 6
 8
 9
As 9
1.2.1  10
 .10
CHƢƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19
 19
 19

 19
.21
.26
 26
2 26
 27
 28
CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29
 29
 29
 32
 32
 36
 38
5

As 40
 43
 46
 48
 49
 52
  52
3 56
 58
 65
KẾT LUẬN 73
TÀI LIỆU THAM KHẢO 75
PHỤ LỤC 80
 80

 82
 87

 92
 94
          
 104



6

DANH MỤC CÁC BẢNG

Trang

4

9
B tu kinh
29
B t
31

38

44

45


46

48

49
 
53

53

55

56
 

59


61

    

65
 
67

7

DANH MỤC HÌNH VẼ

Trang

21

23

25
 radient 1
33

34

34

35

35

36
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73

9

DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT
ACN
Acetonitrile

CE
Collision energy
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EI
Electron Ionization
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European Union
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International Union of Pure and
Applied Chemistry
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Methanol
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Primary and secondary amine
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MS/MS
Ultral performance liquid
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10

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Sulfonamid (SAs)  
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11

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“Phương pháp sắc ký lỏng khối phổ(LC-MS/MS) xác đinh dư lượng một số
kháng sinh nhóm Sulfonamid trong thịt gia súc gia cầm ”. 
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12


1.1. Giới thiệu về kháng sinh nhóm sulfonamid (SAs)

1.1.1 Lịch sử phát hiện [6]
nh
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1941.



 


1.1.2. Phân loại SAs

            




- m:
-
sulfathiazole
-
13

    -  sulfamethoxypyridazin, sulfadimethoxin,
sulfadoxin
- ng rut: sulfaguanidin,phtalylsulfathiazon
- ng ti ch (thuc nh mt): sulfacetamid,sulfadiazine bc

- SAs tr c  ng kt hp v  
sulfadimidin, solfaquinoxalin, sulfadimethoxin,sulfadoxin
1.1.3 Cấu tạo của SAs
Thay th  





STT
SAs

Công thức
phân tử
Khối
lƣợng
phân tử
(g/mol)
pK
a

Công thức cấu tạo
1
Sulfisomidine
(SIM)
4-amino-N-(2,6-
dimethylpyrimidin-4-yl)
benzenesulfonamid
C
12

H
14
N
4
O
2
S
278,331
7,35

2
Sulfadiazine
(SD)
4-amino-N-pyrimidin-
2-yl-benzenesulfonamid
C
10
H
10
N
4
O
2
S
250,278
6,5


3
Sulfathiazole

(STZ)
C
9
H
9
N
3
O
2
S
2

255,319
7,24

14

4-amino-N-(1,3-thiazol-
2-yl)benzenesulfonamid

4
Sulfapyridine
(SP)
(4-amino-N-pyridin-2-
ylbenzenesulfonamid)
C
11
H
11
N

3
O
2
S
249,29
8,54

5
Sulfamerazine
(SM)
4-amino-N-(4-
methylpyrimidin-2-yl)
benzenesulfonamid
C
11
H
12
N
4
O
2
S
264,305
6,98

6
Sulfamonomethoxine
(SMM)
4-Amino-N-(6-
methoxy-4-

pyrimidinyl)benzenesulf
onamid
C
11
H
12
N
4
O
3
S
280,30
6,05

7
Sulfachloropyridazine
(SCP)
-(6-Chloro-3-
pyridazinyl)sulfanilamid
e
C
10
H
9
ClN
4
O
2
S
284,72

5,90

8
Sulfamethoxazole
(SMX)
4-amino-N-(5-
methylisoxazol-3-yl)-
benzenesulfonamid
C
10
H
11
N
3
O
3
S
253,279
5,81

15

9
Sulfisoxazole
(SSA)
4-amino-N-(3,4-
dimethyl-1,2-oxazol-5-
yl)benzenesulfonamid
C
11

H
13
N
3
O
3
S
267,30
4,83

10
Sulfadimethoxine
(SDM)
4-amino-N-(2,6-
dimethoxypyrimidin-4-
yl)
benzenesulfonamid

C
12
H
14
N
4
O
4
S
310,33
6,21

11
Sulfadimethoxine-d4
(IS)
C
12
H
10
D
4
N
4
O
4
S
314
6,21


1


2



1.1.4 Tác dụng của SAs
 Cơ chế tác động:
SAs           SO
2
NH

2
(amid  acid
sulfonic).     p-aminobenzoic acid (PABA) 
       enzym dihydropteroat
  acid tetrahydrofolic (







16

               
               


 trong       
 
 




Protozoa [9].
 Tác dụng phụ của SAs:





do 
    
. 
              



4
-   


 

  
17


              -
Johnson  

1.1.5 Tình hình sử dụng kháng sinh Sulfonamid
              
 
 




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18

Kết quả thực hiện chƣơng trình kiểm soát dƣ lƣợng các chất độc hại hàng tháng [1]
               
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
1.1.6 Giới hạn tồn dƣ tối đa cho phép của SAs trong thực phẩm



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
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Nƣớc

Đối tƣợng
MRL (µg/kg)
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(EU)
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19

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20
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10
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10


1.2 Các phƣơng pháp xác định SAs
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


1.2.1 Trong nƣớc
-2010
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sulfamethazin, sufamethoxypiridazin, sulfacloropyridazin, sulfadoxin,
 
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
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     
3
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4
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g/kg
1.2.2 Thế giới
1.2.2.1 Phương pháp sắc ký lỏng với detector UV
20


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Beer.
Rodrigo H.M.M. Granja [20] 

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21

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1.2.2.2 Phương pháp sắc ký lỏng với detector huỳnh quang
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1.2.2.3 Phương pháp điện di mao quản
22

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1.2.2.4 Phương pháp sắc ký khí kết nối với detector phát xạ nguyên tử (GC-AED)

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C. Detector
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1.2.2.5 Phương pháp ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay)
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23

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1.2.2.6 Phương pháp sắc ký lỏng với detector khối phổ LC/MS/MS
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24

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m/z 156 [NH
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