Nghiên cứu quy trình xử lý và bảo quản màng BC tạo ra từ vi khuẩn gluconacetobacter


KHOA SINH - KTNN
======


 THÙY DUNG


NGHIÊN CU QUY TRÌNH X LÝ

VÀ BO QUN MÀNG BC TO RA
T VI KHUN GLUCONACETOBACTER


KHÓA LUN TT NGHII HC
Chuyên ngành: Vi sinh vt hc








I HM HÀ NI 2
KHOA SINH - KTNN
======

 THÙY DUNG


NGHIÊN CU QUY TRÌNH X LÝ
VÀ BO QUN MÀNG BC TO RA
T VI KHUN GLUCONACETOBACTER

KHÓA LUN TT NGHII HC
Chuyên ngành: Vi sinh vt hc


ng dn khoa hc
 KIM NHUNG







LI C


Em xin gi li cc nht ti 
Th Kim Nhung n tình ch b em trong thi gian hc tp
và nghiên c tài khóa lun tt nghip này.  lòng bii
các thy giáo, cô giáo trong t b môn Vi sinh, khoa Sinh  ng
i hm Hà Nu kin thun li cho em hoàn thành khóa
lun tt nghip. ng th  ca các
thy cô giáo, các anh ch trong phòng Vi sinh, khoa Sinh  i
hm Hà Nu kin tt nht, không ch v  vt cht
mà còn c s ng viên, khuyn khích em hoàn thành khóa lun.
Xin ci thân  em
vng tin hoàn thành khóa lun này.
Em xin chân thành c

Hà Ni, ngày 12 tháng 04 4
Sinh viên

 Thùy Dung





L

Em xin kht qu nghiên cu ca riêng cá nhân em, tt
c nhng s lic thu thp t thc nghim và qua x lý thng kê,
hoàn toàn không có s li tài nghiên cu này không trùng vi
công trình nghiên cu ca các tác gi khác. Nhng kt qu nghiên cu ca các
tác gi  u có trích d chính xác. Em
xin phép tác gi c trích d b sung cho khóa lun ca mình.
Em xin phép và trân trng c

Hà Ni, ngày 12 tháng 04 4
Sinh viên

 Thùy Dung







MC LC


M U 1
1. Lý do ch tài 1
2. Mc tiêu c tài 2
3. Ni dung c tài 2
c và thc tin c tài 2
m mi c tài 2

. TNG QUAN TÀI LIU 3
 vi khun sinh cellulose 3
1.1.1. Phân loi vi khun Gluconacetobacter xylinus 3
m hình thái, t bào hc 5
1.1.3. m nuôi cy 5
1.1.4. Nhu cng 6
1.1.5. ng cu kin nuôi cy 6
1.2. Tng quan v cellulose 7
1.2.1. Cellulose vi khun (Bacterial cellulose, BC) 7
1.2.2. Cu trúc cellulose vi khun 7
1.3. ng dng ca màng BC 8
1.3.1. ng dng ca BC trong mt s c 8
1.3.1.1. Thc phm 8
1.3.1.2. Y hc 9
1.3.1.3. M phm 9
1.3.1.4. Bo v ng 9
1.3.1.5. Công nghip 10
1.3.2. ng dng cu tr bng 10
1.4. Tình hình nghiên cu v màng BC  Vit Nam và trên th gii. 11
1.4.1. Trên th gii 11
1.4.2.  Vit Nam 12
. U 15
ng 15
2.1.1. Ngun ging 15
2.1.2. Thit b và hoá cht 15
2.1.2.1. Thit b 15
2.1.2.2. Hoá cht 15
ng 16
ng gi ging (MT1) 16
ng nhân ging (MT2) 16

ng lên men (MT3) 16
u 16
m hình thái và cách sp xp t bào
trên tiêu bn nhum kép 16
o qun chng ging thch nghiêng 17
 lí màng 17
ng và loi b các cha ca môi
ng nuôi cy. 17
 PH ca màng BC 17
ch t bào trên màng BC 17
 lý 18
o qun màng 18
y khô 18
2.2.5.2. Bo qun vi dch chit thc vt 18
 18
ng kê và x lý kt qu 18
. KT QU NGHIÊN CU VÀ THO LUN 20
3.1. Lên men to màng BC 20
3.1. Hình thái chng vi khun Gluconacetobacter BHN
2
20
3.1.1.1. Hình thái vi khun Gluconacetobacter BHN
2
trên
ng th 20
3.1.1.2. Hình thái chng Gluconacetobacter BHN
2
trên ng
thch nghiêng 21
3.1.1.3. Kt qu nhum Gram vi khun Gluconacetobacter BHN

2
21
3.1.2. Kh o màng BC ca vi khun
Gluconacetobacter BHN
2
21
3.2. Quy trình x lí và bo qun màng BC  quy mô phòng thí nghim 24
3.2.1. X lí màng sau lên men 24
n làm trng và loi b các cha ca
ng nuôi cy 24
 pH màng BC 26
3.2.1.3. n làm sch t bào trên màng BC 26
 lí 27
3.2.2. Bo qun màng BC 27
3.2.2.1. Sy khô 27
3.2.2.2. Bo qun vi dch chi xanh 29
 30
3.2.3. Kh n vi vi sinh vt ca màng BC 31
3.2.4. Hoàn thin quy trình x lí và bo qun màng BC  quy mô phòng
thí nghim 32
3.3. Ci tin x lý, bo qun màng BC 34
KT LUN VÀ KIN NGH 36
4.1. Kt lun 36
4.2. Kin ngh 36
TÀI LIU THAM KHO 37




Hình 1.1. Si cellulose ca cellulose thc vt và màng BC (SEM) 7
Hình 3.1. Gluconacetobacter BHN
2
ng th 20
Hình 3.2. Vi khun Gluconacetobacter BHN
2
ng thch nghiêng 21
Hình 3.3. Kt qu nhum Gram ca Gluconacetobacter BHN
2
21
Hình 3.4. Nhân ging Gluconacetobacter BHN
2
cp 1 22
Hình 3.5. Màng BC sau 5 ngày lên men 23
 lí 25
Hình 3.7. Màng BC qua x lí NaOH 25
Hình 3.8. Màng BC sy  30
o
C 28
Hình 3.9. Màng BC sy  50
o
C 29
Hình 3.10. Màng BC sy  70
o
C 29
Hình 3.11. Màng BC ngâm vi dch chi xanh 30
 công và nm mc xut hin trên màng 30
 bng máy hút chân không 31
Hình 3.14. Màng BC x lí theo quy trình mi chng 34
 bng acid acetic 5% 34

Hình 3.16. Màng BC ngâm vi dch chi xanh 35
Hình 3.17. Màng BC ngâm dch chit sau 2 tháng 35








Bm phân bit các chi thuc h Acetobacteraceae 3
Bng 3.1. Kt qu thu nhn màng BC 23
Bng 3.2. Kt qu x lí màng BC vi NaOH 24
Bng 3.3. Kt qu pH màng BC 26
B lí 27
Bng 3.5. Kt qu y 28
Bng 3.6. Kh n vi sinh vt ca màng BC 32

DANH MC CÁC T VIT TT


A.xylinum
Acetobacter xylinum
BC
Bacterial cellulose
CATB
Cetyl trimethylammonium bromide
Cs
Cng s
Dntp
Deoxynucleotide triphotphat

i Hm
MT1
ng 1
MT2
ng 2
MT3
Môi ng 3
Nxb
Nhà xut bn
SEM
Scanning Electron Microscope (Kính hin t quét)
SDS

Natri dodecyl sulfat
TE
Triethanol
TEA
Triethanol Amin
Tp. HCM
Thành ph H Chí Minh



1




Hin nay, công ngh vi sinh hc nhng phát trin
t bc mang li nhiu thành tu to ln cho nhân loi. Màng BC là mt sn
phm có nhiu ng dng thit thc trong thc t nên cn có s quan tâm phát
tri sn phm này thc s tr thành mt mi giá
tr kinh t i.
Màng BC (Bacterial cellulose c to ra t vi khun
Gluconacetobacter có cc tính rt ging vi cellulose thc vt.
Tuy nhiên, cellulose to ra t vi khun khác vi cellulose thc vt  ch:
không cha các hp cht cao phân t lulose, peptin và sáp
n  t tri v do dai, bn chc, kh 
polymer hóa cao.
Trên th gii màng BC c ng dng rt nhic
công ngh  c,
chc bing cho t bào,dùng làm cht bin
 nht trong sn xut các si truyn qt trong

sinh hc, làm màng bo qun thc phm c bi  c y hc,
c ng dng làm da tm thi thay th u
tr bng, loét da, làm mch máu nhân tu tr các bnh tim mch; làm mt
n i c ng dng trong
c thc phm nn xut thch d  tráng ming, làm
màng bc thc phm và trong công nghip sn xut giy
chng cao.

2
 Vit Nam, vic nghiên cu và ng dng màng BC còn  m 
khiêm tn, các nghiên cu ng dng mi ch dng lu nghiên cu.
Các kt qu ng dng ca màng BC hi ch dng li  u kin thí
nghim.
Trong nh  i phòng thí nghim Thc vt - Vi sinh
i hhm Hà Np, tuyn chc chng vi
khun có kh u xây dng quy trình x lí và bo
qun màng nhm ng dng rng rãi trong thc t. Các nghiên cu cho thy
màng BC to ra t vi khun Gluconacetobacter có rt nhiu ng dng trong
c khác nhau, vì vy cn xây dng mt quy trình x lí và bo qun
màng nghiêm ngt nhm tu king nghiên c
màng sau này. Vi mt thc trên, tôi ch tài: cu quy
trình x lí và bo qun màng BC to ra t vi khu

Hoàn thin trong vic x lí và bo qun màng BC to ra t vi khun
Gluconacetobacter.

3.1. Lên men to màng BC t chng vi khun Gluconacetobacter BHN
2

3.2. Quy trình x lí và bo qun màng BC  quy mô phòng thí nghim

3.3. Ci tin x lí, bo qun màng BC
4. 
Xây dng và hoàn thin quy trình x lí màng BC  quy mô phòng thí
nghim tu king ng dng ca màng v sau.

Ci ti pH màng BC bng acid acetic 5% và bo
qun màng bng dch chi xanh.



3


cellulose
1.1.1. Phân loi vi khun Gluconacetobacter xylinus
Theo Bergey (2005) [16], [17], Acetobacter xylinum i tên thành
Gluconacetobacter xylinus và xp vào chi Gluconacetobacter thuc h vi
khun Acetobacteraceae. H này gm 6 chi: Acetobacter, Acidomonas, Asaia,
Gluconobacter, Gluconacetobacter và Kozakiam phân loi gia các
c trình bày  bng 1.1
Bng 1.1m phân bit các chi thuc h Acetobacteraceae
m
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
Oxy hóa ethanol thành acid acetic
+

+
-/w
+
+
+
Oxy hóa acid acetic thành CO
2
và H
2
O
+
+
+
+
-
w
Oxy hóa lactate thành CO
2
và H
2
O
+
w
+
+/-
-
w
ng cha 0,35%
acid acetic
+

+
-
+
+
+
ng trên D-manitol
+/-
w
+/-
+/-
+
+
ng trên methanol
-/w
+
-
-
-
-
Tng hp cellulose
-
-
-
+/-
-
-
Oxy hóa glycerol thành dihydroxyaceton
+/-
w
-/w

+/-
+
+
Hình thành acid t:
D-manitol
Glycerol
Raffinose

-/+
-/+
-

-
-
nd

+/-
+
-

+/-
+
-

+
+
-

-
+

+
Loi Ubiquinon
Q-9
Q-10
Q-10
Q-10
Q-10
Q-10
% mol G+C
52-60
63-66
59-61
55-66
54-63
56-57




4
Chú thích:
(1): Acetobacter +: Kt qu 
(2): Acidomonas -: Kt qu âm tính
(3): Asaia w: Yu
(4): Gluconacetobacter nh
(5): Gluconobacter
(6): Kozakia
Chi Gluconacetobacter g      m phân bit ca
Gluconacetobacter xylinus (A. xylinum) vi các loài khác trong chi bao gm
[16]:

- Không có kh    ng có cha 3% (l/l)
ethanol và 5-
- i s có mt ca acid acetic.
- Không có kh ng hóa methanol.
- Có kh -ketogluconic, không có kh 
thành 2,5-diketogluconic t D-glucose
- Hu ht các chng có kh      ng có
ngun cacbon là ethanol.
- Có kh ng hp cellulose
- Ubiquinon loi Q-10
- % mol G + C = 55-63.
Theo Boesch và cs (1998) [22], Yamada và cs (2000), và hin nay vn
có nhm khác nhau v phân loi h Acetobacteraceae 
Gluconacetobacter xylinus (A. xylinum) và xp vào chi Gluconacetobacter
v ca s phân chia này là vic phân tích trình t chui 16S rDNA.
m này hi là da vào cu trúc
phân t  c nhi i công nhn. Mc dù xp chng vi khun
Gluconacetobacter vào nhng chi, nhng h, nhng lp phân loi khác nhau
t c u thng nht vi nhau v mt s m

5
sinh lý, sinh hóa ca Gluconacetobacter  u etylic
thành acid acetic, kh p tc acid acetic thành CO
2
và H
2
O;
kh   -ketogluconic t D-glucose c bit là kh
 ng hp cellulose kh      có  các chng
Gluconacetobacter.

1.1.2. m hình thái, t bào hc
Gluconacetobacter thuc nhóm vi khun Gram âm, hiu khí bt buc,
hoá d ng. T bào cng tìm thy trong gim, dc
ép hoa qut [25]. Gluconacetobacter có dng trc khuc
khong riêng l hoc xp thành tng chui, không có kh n
ng. Các t c bao bi màng nhy có bn cht là cellulose. Màng này
bt màu xanh khi nhum vi thuc nhum iod và dung dch acid sulfuric
60%. Chúng tích lu acid acetic, khi n t quá
gii hn cho phép, nó s c ch hong ca vi khun [26].
m nuôi cy
 u kin nuôi cng dch th, chúng s hình thành
trên b mng mt lp màng cellulose. Màng này có bn cht là tp
hp các t bào vi khun liên kt vi các phân t cellulose, trong t bào s xy
i cht nói chung còn  màng cellulose xy ra quá trình trao
i oxy và các chng [29ng sng thì phn ln các
vi khun có kh ng hp polysaccharid ngoi bào to thành hàng rào bo
v cho t bào. Màng BC do vi khun Gluconacetobacter  
vy. Mt s tác gi cho rng, cellulose tng hp t vi khun Gluconacetobacter
có vai trò d tr và có th s dng nghèo kit chng,
nó s phân hu nh enzyme ca vi khun là endoglucanase và exoglucanase.
Nh c tính nh   c ca màng BC giúp cho vi khun
Gluconacetobacter chng lc nhng thay i bt li.
Khi nghiên cu ch  o v c   i vi vi khun

6
Gluconacetobacter  n thy rng nhng t bào vi khun
Gluconacetobacter có màng BC bao bc s tn ti khong 20% trong 1 gi
khi x lý bng t bào b loi b màng bao bc
BC ch có kh ng sót là 3% [17c lu kin nuôi
lc, cellulose hình thành dng ht nh vu nhau và

ng to ra nhc tính hình thái khác
hn cellulose trong u kin nuôi c].
1.1.4. Nhu cng
Tu vào ngun nguyên li c da, dch khoai tây, dch trái cây,
ng hóa cht tng hpng nuôi mà n s
phát trin ca Gluconacetobacter và kh ng hp cellulose khác nhau.
1.1.5. ng cu kin nuôi cy
 pH: Vi khun Gluconacetobacter phát trin thun li trên môi
ng có pH thng nuôi cy cn b sung thêm acid
acetic nhng thi acid acetic còn có tác dng sát
khun s phát trin ca vi sinh vt có hi [27], [28].
 thông khí: Vi khun Gluconacetobacter là vi khun hiu khí bt
buu kin tiên quyt khi lên men to sinh khu kin thông khí.
 cng oxy cn cung ci ln.
Trong thc t  thông khí quyt BC. Vì vy hình thc sc khí
cung cp oxy và s dng cách khung là phù hp cho sn
ng BC cao trong lên men n s dng dng c có b
mt rng, thoáng và lng mng [22].
Nhi : Nhi  thích hp vi vi khun Gluconacetobacter t
25 - 30
o
C.  nhi thp quá trình lên men xy ra chm. Nhi cao s c
ch hong và n m  s sinh sn ca t bào và hiu
sut lên men s gim[24].

7

1.2.1. Cellulose vi khun (Bacterial cellulose, BC)
 A.J. Brown lu tiên trình bày v s tng hp cellulose
ca vi khun Gluconacetobacter    n na sau th k XX,

cellulose vi khun mi thc s c quan tâm và nghiên cu.
1.2.2. Cu trúc cellulose vi khun
Cellulose vi khuc cu to bi chui -1,4 glucopyranose mch
thc tng hp t mt s loài vi khuc bit trong t nhiên phi k
n là Gluconacetobacter. Khi nuôi cy Gluconacetobacter ng
lu ki hình thành nên mt ln
ch   c liên kt vi các t bào vi khun. Cellulose cu trúc
trong màng BC có thành phn hóa h cellulose thc vu
c tính li khác ng thi kh t tinh cao (khong
 polymer hóa l bc cao, kh m
c ln. Nhc tính n so vi cellulose thc vt ca
    chu l     b  c c so sánh
i ci kính hin t thng
kính ca si cellulose vi khun ch bng 1/100 so vi si cellulose ca t bào
thc vt [18] [30].



Hình 1.1. Si cellulose ca cellulose thc vt và màng BC (SEM)


8
Sn phm ca cellulose vi khun có mt s tính cht  [27]:
 bn hóa h bc và s
Kh   m cao, do  u ch xp.
Có th theo dõi, kim soát lý tính ca cellulose do cu trúc ca
cellulose vi khun có kh i trong quá trình nuôi cy.
Kic, cu trúc và chng ca cellulose trong
quá trình nuôi cy to cellulose.
Cellulose vi khun là cellulose sinh hc duy nhc tng hp mà

không gn lignin, có th d dàng b phân hy bi mt s nhóm vi sinh vt. Vì
vy, cellulose vi khuc xem là ngun vt liu mi có nhi trong
].
1.3
1.3.1. ng dng ca BC trong mt s c
Màng BC có nhiu lt tr tinh s k
bn s  co giãn, kh  hình du, kh
 c cao, b mt tip xúc lt g ng, b
dày ca vi si 100nm, b phân hu sinh h
hc và không gây d ng. Màng BC có các
ng dng trong nhic [2],[3].
1.3.1.1. Thc phm
Sn phc s dc ép trái cây và nhng thc
ung khác, trong mt ko, trong kem, yaourt, salad, thng có
tác dc, vt liu nh dch huyn phù, vt liu làm v
bc thc phm. Các sn phm ng dng cellulose vi khu  c
thc phm: Món tráng ming (thch da, kem ít calori, tho),
chc ép trái cây và nhng thc ung khác, màng bao thc
phm [12].

9
1.3.1.2. Y hc
Màng tr bng: màng cellulose vi khun Gluconacetobacter tm du
mù u có tác d màng sinh hc tr bng [7].
Màng bu tr t
ni tng.
Tác nhân vn chuyn thung ming và da): dc tính
 ca bi ta ng dng làm tác nhân vn chuyn thuc, làm
c t rã, dùng huy n c dc, làm cho
chúng không b tách pha khi bo qun lâu ngày.

Da nhân to:  t tinh sc sn xut và bán ra
th t loi da nhân t p v
1.3.1.3. M phm
Màng BC va có kh gi m cao mà không bám li lên làn da sau
khi rng ph t gi 
c ng dng da, cht làm nn cho móng nhân to, ch
 dày và bc làm bóng móng tay [6], [8].
1.3.1.4. Bo v ng
Màng BC ng dng làm ming xp làm sch nhng vt du tràn, làm
cht hp thu trong các vt liu loi b chc hi (làm sc cng 
thành th).
Thu hi du và khoáng sn: Các nhà khoa hn thy cu trúc
mng và s cn tr c ca các si BC nh t
du nh dính li v yên huyn phù du. Tính nh ca dch
huyn phù BC không b ng khi thêm mui nhi
S nh này là do s nh trong cu trúc tinh th ca các si cellulose
[21].

10
1.3.1.5. Công nghip
Vt liu làm qun áo và giày dép, vi da nhân to, lu lp ráp (lu xp
gn nh) cho cm tri, qun áo th thao.
Màng rung chuyi âm thanh: Màng BC có kh u lc rt
tt, t truyn âm khá cao 5000m/s. Mc to tp âm ca nó r
i giy làm màng rung truyn thng
làm màng rung chuyi âm thanh trong headphone.
Công nghip giy: các loi gic bi  tài
liu, giy có thi gian s dng lâu dài, trong v, in, cht dính và ch
trang v y ph làm b mt láng trong công ngh in.
Công nghip máy: là thành phn thân tàu, máy bay, xe, v bc tên la

[11],[19].
1.3.2. ng dng cu tr bng
Bng là mt tai nng gng và sinh hot hng ngày.
Ngoài tng hp bng nng còn gây ri lon ni t li
di chng nn kh ng, thm m và sc khe ci bnh.
 Vit Nam, ch riêng Vin Bng Quc gia (Hà Ni) m  p nhn
khong. Các tác nhân gây bng ch yu là bc sôi.
         c canh nóng, acid, vôi tôi
[9].
Viu tr ti ch vng là mc
bit quan tri vi vt bu tr ti ch vt bng có tác dng
làm gi
n các bin chng nhim khun, tu kin tt cho
quá trình tái to
phc hi vi nhng hp bu tr ti
ch có tác dng ln
trong viu tr d phòng các bin chng ca nhim
khun ti ch nhim khua s mc và
d dn t vong cao), loi b nhanh các t chc

11
hoi t, tu kin tt cho quá trình hình thành mô ht và biu mô hóa hình
thành so, chun b tt nn ghép da trong phu thut [10].
1.4. 
1.4.1. Trên th gii
Nghiên cu v màng BC t vi khun Gluconacetobacter và nhng ng
dng cc tin hành  nhiu c trên th gii. Tác gi Brown,
1999, [23], [24], ng phân tách cho quá trình x lý
c, dùng làm chc bing cho t bào.
t ch bi nh

làm ra các si truy      t trong sinh hc, thc
phm hoc thay th thc phc bic bit,
Nogiet và cs (2005), Jonas và Farad, 1998, Soloknicki và cng s (2006)
Sirlene M.Costa,  sn xut giy cht
 c nh protein hay cho sc kí [11], [23]. Trong y h to
các phc cht (vt liu composite) t s kt hp gia cellulose và chitosan,
hoc cellulose và polyvinyl, các phc chc s dng làm da tm thi
thay th u tr bng, loét da, làm mu tr các
bnh tim mch.
Các sn phm ch to t c ng dng trong
phu thuc s dng làm mt n
ng da cho ph n, làm giy chc dùng
ch tn t, vi nonwoven (vi không qua dt), thc phm ph
 c nh protein hay cho sc kí,
Hu ht các tác gi c nghiên cng sinh tng hp
cellulose t vi khun, ng dng ca màng BC trong y hc, công nghip giy,
trong ch bin thc phm.
Tuy nhiên, nhng ng dng thy trên th gii ca màng BC là
c phm và m phm. Các tác gi: Hamlyn và cs (1997),

12
Cienchanska (2004), Legeza và cs (2004) Wan và Millon (2005), Czaja và cs,
(2006) s dp lên các v, vt bc kt
qu tc bit tác gi n quyn v làm
màng BC t Gluconacetobacter dùng tr bng. Các tác gi Jonas và Farad
o, làm mt n
ng da cho ph n [15].
1.4.2.  Vit Nam
 Vit Nam nhng nghiên cu v Gluconacetobacter và màng BC là
khá mi m. H   t ít các nghiên cu, công b   n

Gluconacetobacter, s hình thành BC và ng dng màng BC còn rt khiêm
ta Nguyn Th Mùi nghiên
c thay th c da trong sn xut thch da t vi
khun Gluconacetobacter.  - 2000 các công trình nghiên cu v vi
khun Gluconacetobacter và kh a nhóm tác
gi n Th Ng Kim Nhung, Nguy
Cách. Các công trình mi ch u nghiên cu quá trình sinh acid acetic,
kh     c tính cu trúc màng BC [15]; g  t là
nghiên cu ng dng màng BC làm cht n  c nh t bào vi
khuu ca nhóm tác gi   Th
n Khc Thanh, Nguyng s nghiên cu v
ng c   u kin lên men cho vi khun
Gluconacetobacter ng dng vào làm thch d u
ca nhóm tác gi Nguyng và Phm Thành H v chn lc dòng
Gluconacetobacter thích hp cho các lo  ng dùng trong sn xut
cellulose vi khun.    u ca nhóm tác gi Nguy 
Thanh, Hunh Th Ngc Lan và cng s v màng BC t Gluconacetobacter
tm du tr bng. u ca tác gi
      c 1 chng vi khun Gluconacetobacter,

13
kho sát kh  o to màng ca chng này. Ngoài ngun nguyên liu
c hoa qu dùng cho lên men gim, còn có th s dng nhiu ngun
nguyên liu khu nht, các nguyên liu có chng,
tinh bt, acid h   tamin , t các vùng min khác nhau  Vit
Nam. Nhim v tip theo là nghiên cnh loi chng Gluconacetobacter
có kh c tính mng, dai, i, không gây kích
ng cho da, kh   n tt, kích thích mc da non nhanh, giá
thành r, dùng làm màng tr bng. [7], [8], [9].
Vic nghiên cu và s dng màng BC t chng Gluconacetobacter

c nhiu tác gi quan tâm. Ngày càng có nhiu các nghiên cu, công b
n chng Gluconacetobacter s ng
ng d Nguyng b môn
Vi Sinh - i hc h to thành
công màng tr bng sinh hc du mù u b
có kh c cao, kt dính ch mt hóa hc nên nó có vai
c, có th thay th da tm thi. Vi các hot cht tái sinh
mô và các cht sát khuu có ngun g
không cha các yu t gây kích ng da [4], chính vì vy dùng màng sinh hc
 a bin chng nhim trùng vng, tu kin che ph
sm vn thu tr và gim thiu so xu trên
vùng bng sâu [9], [19].
G u ca tác gi   
nhn màng BC t vi khun Gluconacetobacter, ng du
tr bu tr bng hi dng y ghép,
phu thut, hoc dùng mt s màng tr bi, trung bì da ln, da
ch, màng chitossan, s dng các cht có ngun gc t t nhiên có tác dng
u tr bng [14]. Theo tác gi Hunh Th Ngc Lan, màng tr bng sinh hc
BC vi các hot cht tái sinh mô và các cht sát khuu có ngun gc thiên

14
nhiên. Vì th, nó không cha các yu t c t trc
tip, không gây d ng, không có yu t lây lan mm bnh, không gii phóng
cht l vào v nt 100% vi khung gây ra
các nhim trùng v t bng Ch cn áp sát màng vào vt
n s dng bt c th  n
khung thi, làm vy quá trình tái to mô
ht [4].

15

PHÁP 

2.1.1. Ngun ging
Nhn ging vi khun Gluconacetobacter BHN
2
thun chng t phòng
thí nghim Vi sinh, i hm Hà Ni 2.
2.1.2. Thit b và hoá cht
2.1.2.1. Thit b
T m, t sc)
Ni hp Tommy (nht)
Box vô trùng (Haraeus)
Máy lc Orbital Shakergallenkump (Anh)
Máy li tâm Sorvall (M)
Micropipet Jinson (Pháp) các loi t  10ml
Máy so màu UV  vis (Nht)
- Thu 
Cân (Precisa XT 320M - Thu 
Máy cc 2 ln (Hamilton  Anh)
Kính hin vi quang hc)
Kính lúp soi ni STEMI 2000-C
n di
Máy hút chân không Amera
R

T lnh Daewoo, hp lng, ng nghi
cn và nhiu dng c hoá sinh thông dng khác.
2.1.2.2. Hoá cht
Ethanol, glucose, fructose, sacrose, mannose, lactose, manitol, sorbitol,
dihyroxyaceton, acid acetic.