Tổng hợp một số acid hydroxamic mang khung 3 oxim isatin hướng tác dụng kháng ung thư



TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI





NGUYỄN THỊ MƠ



TỔNG HỢP MỘT SỐ ACID HYDROXAMIC
MANG KHUNG 3-OXIM-ISATIN HƢỚNG TÁC
DỤNG KHÁNG UNG THƢ




LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC










HÀ NỘI 2013

 

TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI






NGUYỄN THỊ MƠ



TỔNG HỢP MỘT SỐ ACID HYDROXAMIC
MANG KHUNG 3-OXIM-ISATIN HƢỚNG TÁC
DỤNG KHÁNG UNG THƢ


LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC



CH

MÃ S20402


TS. Phan Thị Phƣơng Dung
PGS.TS. Nguyễn Hải Nam

HÀ NỘI 2013



LỜI CẢM ƠN







 

  
H
Trong 
nhân trong và ngo              
   
 

        



cho tôi.



Nguyễn Thị Mơ





MỤC LỤC


Trang




 1
-  3
1.1. Histon deacetylase 3
 5
 5
 7
 8
1.2. Các chất ức chế histon deacetylase 10
 10
 16
 16
1.3. Các phƣơng pháp tổng hợp acid hydroxamic 18
1.3.1.  18
1.3.2.  19
1.4. Các chất ức chế HDAC do nhóm nghiên cứu bộ môn Hóa Dƣợc,

đại học Dƣợc Hà Nội thiết kế và nghiên cứu 19
-  
NGHIÊN  21



2.1. Nguyên liệu 21
2.2. Thiết bị và dụng cụ 21
2.3. Nội dung nghiên cứu 21
2.3.1.   22
   22
2.4. Phƣơng pháp nghiên cứu 22
 22
 22
 23
 25
 26
-  27
3.1. Tổng hợp hóa học 27
 1a-g 27
 2a-g 30
3.2. Kiểm tra độ tinh khiết, khẳng định cấu trúc 33
 33
 34
3.3. Kết quả thử hoạt tính sinh học 39
 39
in vitro 39
3.4. Kết quả docking 40
3.5. Đánh giá mức độ giống thuốc của các chất tổng hợp đƣợc 41
-  42

4.1. Hóa học 42
1a-g 42
2a-g 42



4.2. Khẳng định cấu trúc 43
 43
 44
 46
4.3. Hoạt tính sinh học 50
4.3.1. Tác d 50
in vitro 51
  56
1. Kết luận 56
 56
 56
2. Đề xuất 56



CHÚ GIẢI CHỮ VIẾT TẮT
 (ppm)
:

ADN
:
Acid desoxyribonucleic
ALL
:

AML
:

APL
:

AsPC-1
CDI
CLL
CTCL
CTPT
:
:
:

:
:

Carbonyldiimidazol



13
C-NMR
:

13
C
DCM
:
Dicloromethan
DMF
:
Dimethyl formamid
DMSO
:
Dimethyl sulfoxid
FDA
:
 
EtOH
:
Ethanol
HAT
:

Histon acetyltranferase
HDAC
:
Histon deacetylase
HDIs
:

1
H-NMR
:

1
H
IC
50
:
 
IR
:
 
J
MCF-7
MeOH
MTT
:
:
:
:



Methanol
3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromid



MS
NCI-H460
NSCLC
:
:
:


-smali lung cell)
NST
PC-3
:
:


SAHA
:
Acid suberoylanilid hydroxamic
T
0
nc
:

TLC
:


TMS
:
Tetramethylsilan
TSA
:
Trichostatin A
SW620
:




















DANH MỤC HÌNH VẼ

Tên hình Trang
Hình 1.1:  3
Hình 1.2:  
 DNA methyl
transferase, HMT  Histon methyltransferase, hình
tròn: nhóm methyl, hình tam giác: nhóm acetyl, hình
 4
Hình 1.3:  6
Hình 1.4:  7
Hình 1.5: Vùng ion K
+
 8
Hình 1.6:  10
Hình 1.7: 
Hình 1.8:  13
Hình 1.9: HDIs là các benzamid 13
Hình 1.10:  14
Hình 1.11:  15
Hình 1.12:  16
Hình 1.13:  16
Hình 1.14:  17
Hình 1.15:  18
Hình 1.16:  tác 
 20
Hình 3.1: 2a  40
Hình 3.2: 2a và N-(2-aminophenyl)benzamid
 41
Hình 4.1: 2g 44

Hình 4.2: 2c 45
Hình 4.3: 
1
H-2f 47
Hình 4.4: 
1
H-2e 48
Hình 4.5: 
13
C-2f 49
Hình 4.6: 2a-g 50
Hình 4.7: -
2a-g  52
Hình 4.8: kháng -1 2a-g
 SAHA 53


DANH MỤC BẢNG
Tên bảng Trang
Bảng 1.1:  12
Bảng 3.1: 
f
và T
o
nc
2a-g 34
Bảng 3.2:  acid hydroxamic 2a-g 35
Bảng 3.3:  acid hydroxamic 2a-g 36

Bảng 3.4: 
1
H-2a-g 37
Bảng 3.5: 
13
C- acid hydroxamic 2a-g 38
Bảng 3.6: 2a-g c Lipinsky 41
Bảng 4.1:  in vitro  các 2a-g 51






DANH MỤC SƠ ĐỒ
Tên sơ đồ Trang
Sơ đồ 1.1:  19
Sơ đồ 1.2:  - 19
Sơ đồ 3.1: hung 27
Sơ đồ 3.2: 1a-g 28
Sơ đồ 3.3: 2a-g 30
Sơ đồ 4.1:  42

ĐẶT VẤN ĐỀ



  tiêu phân
                
 
eacetylase, các protein
 càng 

   
g 
 
26]. Vì 
trung nghiên Acid
suberoylanilid hydroxamid (Vorinostat, Zolinza
®
) là 

là  
 (2006).   
TSA  

 [39].
 
môn Hóa D D 
mang khung benzothiazol deacetylase [1,2,41].
Trong  
in vitro [1,2]. 
 
 , :



    acid hydroxamic mang khung 3-oxim-  
 2 
1.   N-hydroxy-7-(3-(hydroxyimino)-2-oxoindolin-1-yl)heptanamid 
.
2. iston deacetylase in vitro
.




CHƢƠNG 1 - TỔNG QUAN
1.1. HISTON DEACETYLASE (HDAC)
1.1.1. Khái niệm HDAC

-N-acetyl và

2,28,50].
   
protein-       : ADN, các protein
 
A
(hình 1.1) [3,57].

Hình 1.1: 
 

1.1 




  
d


gen a 
và H4.

uôi c 
 deacetyl hóa có tác 
acetyltranferase (HAT) và histon deacetylase (HDAC) là 2 enzym
 26,52,57] hình
(1.2).

Hình 1.2: Vai trò   (DMMTs - DNA
methyl transferase, HMT- histon methyltransferase, hình tròn: nhóm methyl, hình tam giác:

nhóm acetyl, hình vuông: nhóm methyl trên uôi histon)
-
am




N 

 
chép mã [45] (hình 1.2).
1.1.2. Phân loại HDAC
có 18 HDAC khác nhau  
[15,42,47]. Các HDAC khác 
 [20,54].
1.1.2.1. Nhóm I 
 
. nh 2 phân nhóm HDAC1/2 và
HDAC3/8 [3].
1 và   cao (82%). Phosphorin hóa
serin trên HDAC1, HDAC     
cofactor khác nhau [17].
    các HDAC  
HDAC [45].

otein
       HDAC       
48].
1.1.2.2. Nhóm II (HDAC4, HDAC5, HDAC7, HDAC9)
và nhóm IIb (HDAC6, HDAC10).

-1122 aa) và khác HDAC nhóm I
khi 

   a HDAC4, HDAC     



-HDAC5.
 phiên mã MEF2 (myogenic
transcription factor 2)-
m soát s
 [45].
HDAC6 và HDACng khong 37%  vùng acid amin. Chúng có hai
vùng xúc tác, tuy nhiên HDAC10 có mt vùng xúc tác b bt hot. Mm riêng ch
có  HDAC6 là s có mt ca HUB (HDAC6-, USP3- và Brap2-related zinc finger
m này là du hiu cho s ubiquitin hóa và cho thy HDAC này thiên v s
in vitroin vivo
10 có kh 
i HDAC1-i HDAC6 [11,31,45].
1.1.2.3. Nhóm III:
SIRT 1-7, chúng không
 trong nhân [45,56].
1.1.2.4. Nhóm IV:
Nhóm này có HDAC11 . i trap
].
HDAC Protein Phân bố Biến đổi sau Liên quan đến
trong tế bào phiên mã ung thƣ

Hình 1.3: 11]



Các HDAC nhóm I, II, IV 
2+


2+

Trong khi   NAD
+
[47,53]. HDAC không
          

ang  sàng [3,5] (hình
1.3):
1.1.3. Cấu tạo của HDAC
,  




 

, 


1.4):

Hình 1.4: 
+ Ion Zn
2+
   chúng. y là
                

2+

HDAC và  [25,34].
+ Kênh enzym là nc 


 

-25,52].



8, ng
+
(hình 1. 
ion. Các ion này 
2+


3,54].

Hình1.5: Vùng ion K
+


1.1.4. HDAC và ung thƣ


 HAT  
nhóm -NH
2
trong phân  l
   ,   ,          

 [24,26,28]. 
và 





t 
18,44].
  u 
ác 







            


11,14,26
   

21,49

38].





Hình 1.6: 
 
giai  


13,28,46].


 
5].
1.2. CÁC CHẤT ỨC CHẾ HDAC
1.2.1. Phân loại các chất ức chế HDAC (HDIs)




các enzym HDAC
       
hình thành

53]. Chính v 
các 
 .
.1:  [35]
Nhóm
Hợp chất
Pha lâm
sàng
Loại ung thƣ
Peptid vòng
Depsipeptid
(FK228)
I, II


    
     

Các benzamid
MS-275


CI-994

MGCD-0103
I, II


I, II

II
 
   

    

     
MDS


Butyrat
AN-
Acid valproic
Phenyl butyrat
I, II
I, II
I, II
I
 tràng




Acid
hydroxamic
SAHA


PXD101
NVP-LAQ824


I, II
II
I
II, III
CTCL







LBH-589
ITF-2357
SB-939
CRA 024781
II
I
I
I

U lympho Hodgkin


LL,
n.

Hình 1.7:  [12]


hình 1.7  )
1.2.1.1. Các peptid vòng




Depsipeptid (FK-228), apicidin, trapoxin A và
các CHAP (cyclic hydroxamic acid-containing peptide) (hình 1.8
              
Chromobacterium violaceum
 da 
(tháng 11/2009) [31].


50

T
1/2
].

: HD
1.2.1.2. Các benzamid

in vitro và in vivo ]. -