Hoàn thiện kỹ thuật trung hòa vi lượng trong nghiên cứu huyết thanh dịch tễ học trên người tiếp xúc với virus cúm gia cầm H5N1

LOGO
Luận văn thạc sĩ khoa học
Chuyên ngành: Hoá sinh học
Mã số: 1.05.10
Đại học Quốc gia Hà Nội
Trường Đại học Khoa học Tự nhiên
LOGO
Hoàn thiện kỹ thuật trung hòa vi lượng trong
nghiên cứu huyết thanh dịch tễ học
trên người tiếp xúc với virus cúm gia cầm H5N1
Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Vân Trang
Học viên: Nguyễn Hoà Bình
Đại học Quốc gia Hà Nội
Trường Đại học Khoa học Tự nhiên
Nội dung
Tổng quan tài liệu
1
Vật liệu và phương pháp
2
Kết quả và bàn luận
3
Kết luận và kiến nghị
4
Lời cảm ơn
5
TỔNG QUAN TÀI LIỆU
Tình hình dịch cúm gia cầm H5N1 trên thế giới
11/2007
11/2007
2005
2003

1997
2004
2006
- 60 quốc gia đã
có dịch bùng phát
- 207/337 người
chết/người nhiễm
virus
-200 triệu gia cầm
bị chết và tiêu huỷ
- 10 tỷ USD thiệt
hại về kinh tế
Tình hình dịch cúm gia cầm H5N1 tại Việt Nam
11/2007
11/2007
2005
2004
2006
- 61/64 tỉnh đã có
dịch bùng phát
- 46/100 người
chết/người nhiễm
virus
- 50 triệu gia cầm
bị chết và tiêu huỷ
2003
Virus cúm gia cầm H5N1
Lớp lipit kép
NA (Neuraminidase)
HA (Hemaglutinin)

M
2
(Kênh ion)
M
1
(protein nền)
NS
1
(protein không cấu
trúc, xâm nhiễm tế bào)
NP (protein nucleocapsit)
PB
1
, PB
2
, PA (phức hợp
polymeraza)
NS
2
Phân loại: - Thuộc họ Orthomyxoviridae, chi cúm A;
Lây truyền: -Gia cầmÆGia cầm; - Gia cầmÆĐộng vật có vú;
-Gia cầmÆNgười; (NgườiÆNgười)
Sự xâm nhập và sao chép của virus
Lắp ghép và phóng thích
Tổng hợp các thành phần
Xâm nhập và “cởi áo”
Hấp phụ
Chu kì xâm nhập
và sao chép
Cơ chế hình thành chủng mới

Thay đổi lớn KN
(Antigenic Shift): Khi
hai (nhiều) chủng virus
với các đoạn RNA
khác nhau cùng xâm
nhiễm vào một tế bào
chủ, chúng có thể trao
đổi các đoạn gen với
nhau, tạo ra chủng
virus mới có kháng
nguyên thay đổi.
Thay đổi nhỏ KN
(Antigenic Drift): Sự
thay đổi kháng nguyên
do đột biến ngẫu nhiên
như thêm, mất, chèn
điểm hoặc đoạn xảy ra
ở gen mã hoá cho
protein của virut đặc
biệt là HA và NA.
Các phương pháp chẩn đoán virus
1
Chẩn đoán trực tiếp:
-Phản ứng HA
-Phản ứng HI
-Kính hiển vi điện tử
-RT-PCR
-Multiplex RT-PCR
-Real-time PCR
2

Chẩn đoán gián tiếp:
-Phân lập từ trứng
-Phân lập từ tế bào
3
PP huyết thanh học:
- NA và NAI
-Phản ứng HI
-Western Blot
- Serial radial
hemalysis
- Trung hoà virus
(Trung hoà vi lượng)
Trung hoà virus
Trung hoà vi lượng
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
Vật liệu
Dòng tế bào: Tế bào thận chó (MDCK)
KN & KT:
- KN virus A/Vietnam/Ck/6/03 H5N1;
-KT chuột kháng NP virus cúm A và cộng hợp
Phiếu điều tra thông tin cá nhân
Ho
Ho
à
à
n
n
thi
thi
ệ

ệ
n k
n k
ỹ
ỹ
thu
thu
ậ
ậ
t
t
trung hòa
trung hòa
vi lư
vi lư
ợ
ợ
ng
ng
Chủng virus: NIBRG-14
Huyết thanh:- Người tiếp xúc với bệnh nhân
- Người tiếp xúc với gia cầm
Đi
Đi
ề
ề
u tra
u tra
huy
huy

ế
ế
t
t
thanh h
thanh h
ọ
ọ
c
c
Huyết thanh:-Chứng âm của người
-Chứng dương của gà và cừu