Nghiên cứu tạo que thử để phát hiện nhanh một số độc tố ruột của tụ cầu khuẩn trong thực phẩm

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

TRẦN THỊ SAO MAI

NGHIÊN CỨU TẠO QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN NHANH
MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU KHUẨN
TRONG THỰC PHẨM

LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC

HÀ NỘI, 2015


ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI
TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN

TRẦN THỊ SAO MAI

NGHIÊN CỨU TẠO QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN NHANH
MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU KHUẨN
TRONG THỰC PHẨM

Chuyên ngành

: Vi sinh vật học

Mã số

: 62 42 01 07

LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC
Cán bộ hướng dẫn:
1. PGS.TS. Nguyễn Thị Khánh Trâm
2. TS. Lê Quang Hòa

HÀ NỘI, 2015


LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi dƣới sự hƣớng
dẫn của tập thể các nhà khoa học hƣớng dẫn luận án. Các số liệu và kết quả thí
nghiệm trình bày trong luận án là trung thực và chƣa từng đƣợc công bố trong bất
kỳ công trình nào khác.
Hà Nội, ngày

tháng 05 năm 2015
NGHIÊN CỨU SINH

Trần Thị Sao Mai


LỜI CẢM ƠN
Hoàn thành Luận án này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới những người
thầy hướng dẫn: Thầy thuốc nhân dân, PGS.TS. BS. Nguyễn Thị Khánh Trâm,
Cục An toàn Thực phẩm, Bộ Y tế, TS. Lê Quang Hòa, Viện Công nghệ Sinh học và
Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội, đã tận tình định hướng,
chỉ dẫn và tạo mọi điều kiện cho tôi trong quá trình nghiên cứu thực hiện Luận án.
Tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn tới PGS.TS. Bùi Thị Việt Hà và các thầy cô
giáo, các cán bộ của Bộ môn Vi sinh vật học, các thầy cô giáo của Khoa Sinh học,

Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội đã tận tình trang bị
kiến thức cho tôi trong suốt những năm qua.
Tôi xin được cảm ơn tới các thầy cô lãnh đạo và cán bộ, nghiên cứu viên Viện Công
nghệ Sinh học và Công nghệ Thực phẩm, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội đã tạo
điều kiện giúp tôi cơ sở vật chất để thực hiện các thí nghiệm cho Luận án này.
Trong thời gian học tập và nghiên cứu, tôi đã nhận được sự hỗ trợ và động viên
của các thầy cô giáo lãnh đạo và cán bộ viên chức của Trường Đại học Kỹ thuật Y tế
Hải Dương, tạo điều kiện cho tôi về thời gian và vật chất, tinh thần để tôi hoàn thành
khóa học, tôi xin được cảm ơn sự giúp đỡ quí báu này.
Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Ban Chủ nhiệm khoa Sinh học, Phòng Sau đại
học và Ban Giám hiệu Trường Đại học Khoa học Tự nhiên đã tận tình giúp tôi hoàn
thành các hồ sơ trong suốt quá trình học tập và bảo vệ luận án.
Trong suốt những năm qua, tôi luôn nhận được sự động viên, giúp đỡ về vật
chất và tinh thần của gia đình, những người thân, sự đồng cảm của bạn bè, đồng
nghiệp, đây là nguồn động lực lớn giúp tôi hoàn thành khóa học và Luận án này.
Tôi xin được trân trọng biết ơn sự giúp đỡ quí báu đó.
Hà Nội, ngày

tháng 04 năm 2015

NGHIÊN CỨU SINH

Trần Thị Sao Mai


MỤC LỤC
MỤC LỤC.................................................................................................................................1
DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT .....................................................5
DANH MỤC HÌNH ẢNH.....................................................Error! Bookmark not defined.
DANH MỤC BẢNG ..........................................................................................9

CHƢƠNG 1 . TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU ..... ERROR! BOOKMARK
NOT DEFINED.
1.1.TỤ CẦU KHUẨN ............................................................ Error! Bookmark not defined.
1.1.1. Đặc điểm sinh học của tụ cầu vàng...........Error! Bookmark not defined.
1.1.2. Những yếu tố ảnh hƣởng tới sản sinh độc tố ruột của tụ cầu ......... Error!
Bookmark not defined.
1.1.3. Tình hình ngộ độc thực phẩm do tụ cầu ...Error! Bookmark not defined.
1.1.3.1. Tình hình ngộ độc thực phẩm do độc tố ruột tụ cầu trên thế giới........... Error!
Bookmark not defined.
1.1.3.2. Tình hình ngộ độc thực phẩm ở Việt Nam....... Error! Bookmark not defined.
1.2. ĐỘC TỐ RUỘT CỦA TỤ CẦU ................................... Error! Bookmark not defined.
1.2.1. Đặc điểm sinh hóa, hóa lý và di truyền của độc tố ruột của tụ cầu .. Error!
Bookmark not defined.
1.2.2. Cấu trúc phân tử của độc tố ruột tụ cầu ....Error! Bookmark not defined.
1.2.3. Hoạt tính sinh học của các độc tố ruột tụ cầu ......... Error! Bookmark not
defined.
1.2.3.1. Hoạt tính siêu kháng nguyên............................. Error! Bookmark not defined.
1.2.3.2. Hoạt tính gây nôn............................................... Error! Bookmark not defined.
1.2.3.3. Cơ chế gây viêm dạ dày - ruột do độc tố tụ cầuError! Bookmark not defined.
1.3. CÁC PHƢƠNG PHÁP PHÁT HIỆN ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU ..Error! Bookmark
not defined.
1.3.1. Phép thử sinh học .....................................Error! Bookmark not defined.
1.3.2. Phƣơng pháp sinh học phân tử .................Error! Bookmark not defined.
1.3.3. Phƣơng pháp miễn dịch ............................Error! Bookmark not defined.
1.3.3.1. Phương pháp khuếch tán trên gel (Microslide Double Diffusion ) ........ Error!
Bookmark not defined.

1

1.3.3.2. Phương pháp miễn dịch phóng xạ - RIA (Radio Immunoassay) ............ Error!
Bookmark not defined.
1.3.3.3. Ngưng kết hạt latex (Reversed Passive Latex Aggulutination - RPLA) Error!
Bookmark not defined.
1.3.3.4. Các phương pháp dựa trên kỹ thuật ELISA .... Error! Bookmark not defined.
1.4. KỸ THUẬT SẮC KÝ MIỄN DỊCH VÀ ỨNG DỤNG ... Error! Bookmark
not defined.
1.4.1. Kỹ thuật sắc ký miễn dịch.........................Error! Bookmark not defined.
1.4.1.1. Các hợp phần trong hệ thống sắc ký miễn dịchError! Bookmark not defined.
1.4.1.2. Nguyên tắc của phương pháp sắc ký miễn dịchError! Bookmark not defined.
1.4.1.3. Phân loại que thử nhanh ứng dụng kỹ thuật sắc ký miễn dịch................ Error!
Bookmark not defined.
1.4.2. Một số nghiên cứu tạo que thử phát hiện độc tố ruột tụ cầu trong thực
phẩm ..................................................................Error! Bookmark not defined.
1.5. CHẾ TẠO KHÁNG THỂ LÒNG ĐỎ TRỨNG VÀ ỨNG DỤNG CỦA IGY..Error!
Bookmark not defined.
1.5.1. Kháng thể lòng đỏ trứng IgY ...................Error! Bookmark not defined.
1.5.2. Sản xuất kháng thể IgY .............................Error! Bookmark not defined.
1.5.3. Các phƣơng pháp tinh chế kháng thể IgY Error! Bookmark not defined.
1.5.4. Ứng dụng của IgY trong chẩn đoán miễn dịch ....... Error! Bookmark not
defined.
1.6. CÁC PHƢƠNG PHÁP SẢN XUẤT ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU ...Error! Bookmark
not defined.
1.6.1. Sản xuất độc tố ruột tụ cầu trực tiếp từ S. aureus ... Error! Bookmark not
defined.
1.6.2. Sản xuất độc tố ruột tụ cầu bằng phƣơng pháp tái tổ hợpError! Bookmark
not defined.
CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
.......................................................................................ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.
2.1. ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU ....................................... Error! Bookmark not defined.

2.2. VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU............................................ Error! Bookmark not defined.
2.2.1. Vi sinh vật và plasmid ..............................Error! Bookmark not defined.

2


2.2.2. Hóa chất và sinh phẩm ..............................Error! Bookmark not defined.
2.2.3. Máy, thiết bị ..............................................Error! Bookmark not defined.
2.3. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU................................. Error! Bookmark not defined.
2.3.1. Phƣơng pháp sản xuất độc tố ruột tụ cầu SEC1 tái tổ hợpError! Bookmark
not defined.
2.3.1.1. Tách chiết DNA tổng số từ vi khuẩn S. aureus Error! Bookmark not defined.
2.3.1.2. Khuế ch đại gen sec
1 bằng kỹ thuật PCR ......... Error! Bookmark not defined.
2.3.1.3. Tinh sạch sản phẩm PCR .................................. Error! Bookmark not defined.
2.3.1.4. Xây dựng vector biểu hiện mang gen sec1 ...... Error! Bookmark not defined.
2.3.1.5. Biến nạp plasmid pGS-21a-sec1 vào tế bào E. coli BL 21.. Error! Bookmark
not defined.
2.3.1.6. Biểu hiện protein SEC1 tái tổ hợp................... Error! Bookmark not defined.
2.3.1.7. Tinh sạch protein tái tổ hợp SEC1 ................... Error! Bookmark not defined.
2.3.1.8. Phương pháp điện di biến tính protein (SDS-PAGE) .. Error! Bookmark not
defined.
2.3.1.9. Phương pháp định lượng protein bằng đo mật độ quang .. Error! Bookmark
not defined.
2.3.1.10. Kiểm tra tính kháng nguyên của protein SEC1 tái tổ hợp bằng kỹ thuật
Western blot...................................................................... Error! Bookmark not defined.
2.3.2. Phƣơng pháp sản xuất kháng thể IgY kháng BSA và kháng thể IgY kháng
5 loại độc tố SE (A+B+C1+D+E) .......................Error! Bookmark not defined.
2.3.2.1. Gây miễn dịch..................................................... Error! Bookmark not defined.
2.3.2.2. Tinh sạch kháng thể IgY từ lòng đỏ trứng ....... Error! Bookmark not defined.

2.3.3. Chế tạo que thử phát hiện nhanh một số độc tố ruột tụ cầu .............. Error!
Bookmark not defined.
2.3.3.1. Thiết kế bộ que thử nhanh phát hiện một số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED
và SEE) của tụ cầu........................................................... Error! Bookmark not defined.
2.3.3.2. Xác định giới hạn phát hiện và tính ổn định của que thửError! Bookmark not
defined.
2.3.4. Sử dụng que thử nhanh phát hiện độc tố ruột tụ cầu trên một số nhóm mẫu
thực phẩm đã gây nhiễm độc tố SE ....................Error! Bookmark not defined.
2.3.5. PHƢƠNG PHÁP Xử LÝ Số LIệU........................ Error! Bookmark not defined.

3


CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN ERROR! BOOKMARK
NOT DEFINED.
3.1. SẢN XUẤT VÀ TINH CHẾ ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU SEC1 TÁI TỔ HỢP ..Error!
Bookmark not defined.
3.1.1. Tách chiết DNA tổng số từ S. aureus .......Error! Bookmark not defined.
3.1.2. Khuếch đại gen sec1 bằng kỹ thuật PCR ..Error! Bookmark not defined.
3.1.3. Xây dựng vector biểu hiện pGS-21a mang gen sec1Error! Bookmark not
defined.
3.1.4. Kết quả biểu hiện gen mã hóa cho protein SEC1 tái tổ hợp.............. Error!
Bookmark not defined.
3.1.5. Xác định các điều kiện biểu hiện gen sec1 thích hợp trong E.coli .... Error!
Bookmark not defined.
3.1.6. Tinh sạch protein SEC1 tái tổ hợp.............Error! Bookmark not defined.
3.1.7. Kiểm tra tính kháng nguyên của protein SEC1 tái tổ hợp bằng phản ứng
Western Blot .......................................................Error! Bookmark not defined.
3.2. CHẾ TẠO KHÁNG THỂ LÒNG ĐỎ TRỨNG IgY . Error! Bookmark not defined.
3.2.1. Lựa chọn loài gà và cách chăm sóc gà .....Error! Bookmark not defined.

3.2.2. Cách gây miễn dịch và thu hoạch trứng ...Error! Bookmark not defined.
3.2.3. Kết quả tách chiết và tinh sạch kháng thể IgY ....... Error! Bookmark not
defined.
3.3. CHẾ TẠO QUE THỬ..................................................... Error! Bookmark not defined.
3.3.1. Thiết kế bộ que thử nhanh phát hiện một số độc tố ruột của tụ cầu (SEA,
SEB, SEC1, SED và SEE) ...................................Error! Bookmark not defined.
3.3.3.1. Tối ưu hóa lượng kháng thể cần cố định lên vạch kiểm chứng............... Error!
Bookmark not defined.
3.3.3.2. Tối ưu hóa lượng kháng thể cần cố định lên vạch thử nghiệm ............... Error!
Bookmark not defined.
3.3.3.3. Tối ưu hóa lượng kháng nguyên cộng hợp cần sử dụngError! Bookmark not
defined.
3.3.2. Xác định giới hạn phát hiện và tính ổn định của que thử ............. Error!
Bookmark not defined.

4


3.3.2.1. Xác định giới hạn phát hiện của que thử với các độc tố ruột SEA, SEB, SEC1,
SED và SEE...................................................................... Error! Bookmark not defined.
3.3.2.2. Xác định tính ổn định của que thử.................... Error! Bookmark not defined.
3.4. SỬ DỤNG QUE THỬ ĐỂ PHÁT HIỆN MỘT SỐ ĐỘC TỐ RUỘT TỤ CẦU TRÊN
THỰC PHẨM ĐƢỢC GÂY NHIỄM THỰC NGHIỆM . Error! Bookmark not defined.
3.4.1. Sử dụng que thử để phát hiện một số độc tố ruột của tụ cầu (SEA, SEB,
SEC1, SED và SEE) trên sữa đƣợc gây nhiễm thực nghiệm .. Error! Bookmark
not defined.
3.4.1.1. Xác định độ pha loãng sữa để thử nghiệm ..... Error! Bookmark not defined.
3.4.1.2. Sử dụng que thử để phát hiện một số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED và
SEE) trên sữa được gây nhiễm thực nghiệm ................ Error! Bookmark not defined.
3.4.2. Sử dụng que thử để phát hiện một số độc tố ruột của tụ cầu (SEA, SEB,

SEC1, SED và SEE) trên thịt đƣợc gây nhiễm thực nghiệm .. Error! Bookmark
not defined.
3.4.2.1. Xác định độ pha loãng thịt để thử nghiệm....... Error! Bookmark not defined.
3.4.2.2. Kết quả phát hiện một số độc tố ruột (SEA, SEB, SEC1, SED và SEE) trên thịt
được gây nhiễm thực nghiệm ......................................... Error! Bookmark not defined.
KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ .......... ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.
KẾT LUẬN.................................................. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.
DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU... ERROR! BOOKMARK NOT
DEFINED.
LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN................. ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.
TÀI LIỆU THAM KHẢO ......................................................................................................6

5


DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT

Ký hiệu

Tên đầy đủ tiếng Anh

Tên đầy đủ tiếng Việt

- APC

- Antigen Presenting Cell

- Tế bào trình diện kháng nguyên

- BSA

- Bovine Serum Albumin

- Albumin huyết thanh bò

- CFU

- Colony forming unit

- Đơn vị hình thành khuẩn lạc

- CNS

- Coagulase negative staphylococci

- Tụ cầu không sinh coagulase

- ELISA

- Enzyme Linked Immunosorbent Assay

- Phƣơng pháp miễn dịch hấp phụ
gắn enzym

- Fab

- Fragment of antigen binding

- Mảnh gắn kháng nguyên

- Fc

- Fragment crystalizable

- Mảnh kết tinh

- FCA

- Freud’s Complete Adjuvant

- Tá dƣợc Freud hoàn toàn

- FIA

- Freud’s Incomplete Adjuvant

- Tá dƣợc Freud không hoàn toàn

- GALT

- Gut Associated Lymphoid Tisue

- Mô limpho ở ruột

- GI

- Gastrointestinal

- Dạ dày-ruột

- GST

- Glutathione-S-Transferase

- HPLC

- High-Performance Liquid

- Sắc ký lỏng cao áp

Chromatography
- HLA-DR1

- Human Leukocyte
Antigen serotype DR1
- Hệ Thống Sắc Ký Miễn Dịch

- HTSKMD
- IPTG

-IsoPropyl-β-D-ThioGalactopyranoside

- kDa

- Kilo Dalton

- MCP-1

- Monocyte Chemoattractant Protein 1

6


- MHC-II

- Major histocompatibility complex

- NĐTP

- Phức hợp tƣơng thích mô chính
- Ngộ độc thực phẩm
- Muối đệm phosphate

- PBS

- Phosphate Buffered Saline-

- PCR

- Polymerase Chain Reaction

- PEG

- Polyetylen Glycol

- RNA

- Ribonucleic acid

- Axit ribonucleic

- RPLA

-Reversed Passive Latex Aggulutination

- Kỹ thuật ngƣng kết hạt latex

- SE

- Staphylococcal Enterotoxin

- Độc tố ruột tụ cầu

- SPA

- Staphylococcus aureus Protein A

- Protein A của tụ cầu

- TCR

- T-Cell antigen Receptor

- Thụ thể của tế bào T

- TNF

- Tumor Necrosis Factor

- Yếu tố hoại tử khối u

- TSST

- Toxic Shock Syndrome Toxin

- TSST-1

- Toxic Shock Syndrome Toxin-1

- Độc tố gây hội chứng sốc do độc
- Vệ Sinh An Toàn Thực Phẩm

- VSATTP

7


TÀI LIỆU THAM KHẢO
TIẾNG VIỆT
1.

Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật y học, NXB Y học, Hà Nội.

2.

Nguyễn Văn Dịp (1993), Ứng dụng những nguyên lý về vi sinh vật học và di
truyền học để xác định tính chất dich tễ của Staphylococcus aureus, Luận án
Tiến sĩ y học, Đại học Y khoa Hà Nội, Hà Nội.

3.

Lê Quang Hòa, Trần Thị Sao Mai, Nguyễn Hồng Nhung, Nguyễn Thị Khánh
Trâm, Tô Kim Anh (2012), “Sản xuất và thử nghiệm bộ sinh phẩm ELISA phát
hiện nhanh độc tố ruột dạng A của tụ cầu”, Tạp chí Y học thực hành (842),
tr.217- 220.

4.

Trần Thị Sao Mai, Nguyễn Hoàng Hải, Nguyễn Hồng Nhung, Nguyễn Thị
Khánh Trâm, Lê Quang Hòa (2012), “Ứng dụng kỹ thuật sắc ký miễn dịch cạnh
tranh để tạo que thử phát hiện nhanh độc tố ruột A của tụ cầu”, Tạp chí Y học
thực hành (842), tr.213-217.

5.

Nguyễn Hoàng Minh, Lê Quang Hòa, Nguyễn Thị Huệ, Nguyễn Thị Khánh
Trâm, Trần Hoa Cƣơng, Tô Kim Anh (2009), “Xây dựng quy trình phân tích phát
hiện nhanh độc tố tụ cầu vàng dạng A (SEA) trong sản phẩm thịt sử dụng bộ Kit
BK-SETA”, Kỷ yếu hội nghị khoa học An toàn vệ sinh thực phẩm lần thứ 5-2009,
tr. 469 – 474.

6.

Nghiêm Ngọc Minh (2011), “Biểu hiện và tinh sạch protein nội độc tố
Staphylococcal enterotoxin (SEB) trong các chủng Staphylococcus aureus phân
lập từ các vụ ngộ độc thực phẩm”, Tạp chí Khoa học và Công nghệ, 86 (10), pp
179-183.

7.

Đoàn Thị Nguyện (2009), Vi sinh vật học, NXB Giáo dục Việt Nam.

8.

Nguyễn Đỗ Phúc, Trần Linh Thƣớc (2008), “Tạo kháng thể đa dòng và xây dựng
quy trình ELISA phát hiện độc tố ruột nhóm A của Staphylococcus aureus”, Tạp
chí Y học TP. Hồ Chí Minh (12), tr. 272-277.

9.

Tim Sunnary (2013), Nghiên cứu chế tạo globulin miễn dịch từ trứng gà (IgY) kháng
trực khuẩn mủ xanh, Luận án tiến sĩ Y học, Học viện Quân Y 103, Hà Nội.
8


10. Đặng Đức Trạch (1984), Miễn dịch học, University of Amsterdam.
TIẾNG ANH
11. Agro-Bio (2011), Protocol for the production of chicken polyclonal antibodies
specific IgY, Version 2011/01.
12.

Antonina A Votintseva, Rowena Fung, Ruth R Miller, Kyle Knox, Heather
Godwin, David H Wyllie, Rory Bowden, Derrick W Crook, A Sarah Walker
(2014), Prevalence of Staphylococcus aureus protein A (spa) mutants in the
community and hospitals in Oxfordshire, BioMed Central, United Kingdom.

13. Antonsson, P., Wingren, A.G., Hansson, J., Kalland, T., Varga, M., Dohlsten, M.
(1997), “Functional Characterization of the Interaction Between the Superantigen
Staphylococcal Enterotoxin A and the TCR”. Journal of Immunology. 158, pp
4245–4251.

14. Asao, T., Kumeda, Y., Kawai, T., Shibata, T., Oda, H., Haruki, K., Nakazawa,
H., Kozaki, S (2003), “An extensive outbreak of staphylococcal food poisoning
due to low-fat milk in Japan: Estimation of enterotoxin A in the incriminated
milk and powdered skim milk’’, Journal of Epidemiology Infectionous. 130, 33–
40.
15. Asenjo, J.A. and

B.A. Andrews

(2009), “Protein purification using

chromatology: selection of type, modelling and optimization of operating
condition”, Journal of Molecular Recognit 22(2), pp 65-76.
16. Atanmassova. V, Meindl. A và Ring. C (2001), “Prevalence of Staphylococcus
aureus and staphylococci enterotoxin in raw pork and uncooked smoked ham – a
comparison of classical culturing detection and RFLP-PCR”, International
Journal of Food Microbiology 68: 105-113.
17. Audrey W. Jarvis, R. C. Lawrence, and G. G. Pritchard (1973), “Production of
Staphylococcal enterotoxins A, B and C under conditions of controlled pH and
aeration”, Journal of Infection and Immunity 7(6), pp 847-854.

9


18. Balaban N, Rasooly A (2000), “Staphylococcal enterotoxins”, Internatinal
Journal of Food Microbiology 61(1): 1-10.rnatio
19. Bergdoll, M.S., Crass, B.A., Reiser, R.F., Robbins, R.N., Davis, J.P. (1981), “A
New Staphylococcal Enterotoxin, Enterotoxin F, Associated with Toxic-ShockSyndrome Staphylococcus aureus Isolates”, Lancet 1, pp 1017–1021.
20. Boyle T., Njoroge JM., Jones RL. Jr., Principato M. (2010), “Detection of
staphylococcal enterotoxin B in milk and milk products using immunodiagnostic

lateral flow devices”, Journal of AOAC International 93, pp 569-575.
21. Cameron, S.B., Nawijn, M.C., Kum, W.W., Savelkoul, H.F., Chow, A.W.
(2001),

“Regulation

of

Helper

T

Cell

Responses

to

Staphylococcal

Superantigens”, European Cytokine Netw (12), pp 210-222.
22. Casman E.P., (1965), “Staphylococcal enterotoxin”, Annals of the New York
Academy of Sciences 128, pp 124–131.
23. Cha J.O., Lee J.K., JungY.H., Yoo J.I., Park Y.K., Kim B.S., Lee Y.S.(2006),
“Molecular analysis of Staphylococcus aureus isolates associated with
staphylococcal food poisoning in South Korea”, Journal of Applied Microbiology
101, pp 864–871.
24.

Chang HC, Bergdoll MS (1979), “Purification and some physicochemical

properties of staphylococcal enterotoxin D”, Journal of Biochemistry 18 (10), pp
1937–1942.

25. Chen T.R., Chiou, C.S., Tsen H.Y. (2004), “Use of Novel PCR Primers Specific
to the Genes of Staphylococcal Enterotoxin G, H, I for the Survey of
Staphylococcus aureus Strains Isolated From Food-Poisoning Cases and Food
Samples in Taiwan”, International Journal of Food Microbiology 92, pp 189–
197.
26. Christopher Marcq, André Théwis, Daniel Portetelle, Yves Beckers (2013),
“Refinement of the production of antigen-specific hen egg yolk antibodies (IgY)
intended for passive dietary immunization in animals. A review”, Biotechnology
Agron Society Environment 17 (3), pp 483-493.

10


27. Concordia R. Borja , Merlin S. Bergdoll (1967), “Purification and Partial
Characterization of Enterotoxin C Produced by Staphylococcus aureus Strain
137”, Journal of Biochemistry 6 (5), pp 1467–1473.
28. Cook M.E. and Trott D.L (2010), “IgY–immune component of eggs as a source
of passive immunity for animals and humans”, world's poultry science journal
66, pp 215-225
29. Crowle A.J (1961), Immunodiffusion, New York: Academic Press.
30. David F. Capenter and Gerald J. Silverman (1974), “Staphylococcal enterotoxin
B and nuclease production under controlled dissolved oxygen conditions”,
Journal of Applied Microbiology 28 (4), pp 628-637.
31. De Buyser M.L., Dufour B., Maire M., Lafarge V. (2001), “Implication of milk
and milk products in food-borne diseases in France and in different industrialised
countries”, International Journal of Food Microbiology 67, pp 1–17.
32. Desouza I.A., Hyslop S., Franco-Penteado, C.F., Ribeiro-DaSilva, G. (2001), “Mouse

Macrophages Release a Neutrophil Chemotactic Mediator Following Stimulation by
Staphylococcal Enterotoxin Type A”, Journal of Inflammation Research 50, pp 206–
212.
33. Desouza I.A., Hyslop S., Franco-Penteado C.F., Ribeiro-DaSilva, G. (2002),
“Evidence for the Involvement of a Macrophage-Derived Chemotactic Mediator
in the Neutrophil Recruitment Induced by Staphylococcal Enterotoxin B in
Mice”, Toxicon 40, pp 1709-1717.
34. Diana Pauly, Pablo A. Chacana, Esteban G. Calzado, Bjorn Brembs, Rudiger
Schade (2011), “IgY Technology: Extraction of Chicken Antibodies from Egg
Yolk by Polyethylene Glycol (PEG) precipitation”, Journal of

Visualized

Experiments (51), pp 1-5.
35. Dinges M.M., Orwin P.M., Schlievert P.M. (2000), “Exotoxins of Staphylococcus
aureus”, Clinical Microbiology Reviews 13, pp 16–34.
36. Do Carmo, L. S., Cummings, C., Linardi, V. R., Dias, R. S., De Souza, J. M.,
Sena, M. J., Dos Santos, D. A., Shupp, J. U., Poreira, R. K., Jett, M. (2004), A

11


case study of a massive staphylococcal food poisoning incident. Foodborne
Pathogens and Disease. 1, pp 241-246.
37. Edward J. Schantz , William G. Roessler , Jack Wagman , Leonard Spero , David
A. Dunnery , Merlin S. Bergdoll (1965), “Purification of Staphylococcal
Enterotoxin B*” , Journal of Biochemistry 4 (6), pp 1011–1016.
38. Evenson M.L., Hinds M.W., Bernstein R.S., Bergdoll M.S (1998), “Estimation of
Human Dose of Staphylococcal Enterotoxin A From a Large Outbreak of
Staphylococcal Food Poisoning Involving Chocolate Milk”, International

Journal of Food Microbiology 7, pp 311–316.
39. Evin K., Brunner. G., My A. and Wong. C (1992), “Staphylococcus aureus
growth and enterotoxin production in mushrooms”, Journal of Food Science
57(3), pp 700–703.
40. Goshorn SC, Schlievert PM (1988), “Nucleotide sequence of streptococcal
pyrogenic exotoxin type C”, Journal of Microbiology Immunology and Infection
56, pp 2518-2520.
41. Hamal KR., Burgess SC.,

Pevzner IY., Erf

GF.

(2006),

“Maternal

antibody transfer from dams to their egg yolks, egg whites, and chicks in meat
lines of chickens”, Journal of Poultry Science 85(8), pp 1364- 1372.
42. Haeghebaert S., Le Querrec F., Gallay A., Bouvet P., Gomez M., Vaillant V.
(2002), “Les toxi-infections alimentaires collectives en France en 1999 et 2000”,
Bulletin Epidémiologique Hebdomadaire 23, pp 105-109.
43. Harris TO, Grossman D, Kapp.ler JW, Marrack P, Rich RR, Betley MJ (1993),
“Lack of complete correlation between emetic and T-cellstimulatory activities of
staphylococcal enterotoxins”, Journal of Microbiology Immunology and Infection
61, pp 3175-3183.
44. Hennekine Jacques-Antonie, Annick Ostyn, Florence Guillier, Sabine Herbin, AnneLaure Prufer and Sylviane Dragacc (2010), “How should Staphylococcal food
poisoning outbreaks be characterized?”, Toxins (Basel) (2), pp 2106 – 2116.

12

45. Hennekinne de Buyser and S. Dragacci (2012), “Staphylococcus aureus and its
food poisoning toxins: characterization and outbreak investigation”, FEMS
Microbiology Reviews 36, pp 815–836.
46. Le Quang Hoa, Tran Thi Sao Mai, Nguyen Thi Khanh Tram, To Kim Anh
(2014), “Development of a Lateral Flow Immunoassay for the Rapid Detection of
Staphylococcal Enterotoxin A in Milk”, VNU Journal of Science 30, pp 153-157.
47. Hovde CJ, Marr JC, Hoffmann ML, Hackett SP, Chi YI, Crum KK, Stevens DL,
Stauffacher CV, Bohach GA (1994), “Investigation of the role of the disulphide
bond in the activity and structure of staphylococcal enterotoxin C1”, Journal of
Molecular Microbiology 13, pp 897-909.
48. Hu D.L., Omoe K., Shimoda Y., Nakane A., Shinagawa K. (2003), “Induction of
Emetic Response to Staphylococcal Enterotoxins in the House Musk Shrew
(Suncus Murinus)”, Journal of Microbiology Immunology and Infection 71, pp
567–570.
49. Hu D.L., Zhu G., Mori F., Omoe K., Okada M., Wakabayashi K., Kaneko S.,
Shinagawa K., Nakane A. (2007), Enterotoxin Induces Emesis Through Increasing
Serotonin Release in Intestine and It Is Downregulated by Cannabinoid Receptor
1, Cellular Microbiology 9, pp 2267–2277.
50. Hu D.L., Omoe K., Sashinami H., Shinagawa K., Nakane A. (2009),
“Immunization with a Nontoxic Mutant of Staphylococcal Enterotoxin A,
SEAD227A, Protects Against Enterotoxin-Induced Emesis in House Musk
Shrews”, Journal of Infectious Diseases 199, pp 302–310.
51. Jenny Schelin, Nina wallin-Carlquist, Marianne Thorup Cohn, Roland Lindqvist,
Gary C. Barker and Peter rådström (2011), “The formation of Staphylococcus
aureus enterotoxin in food environments and advances in risk assessment”,
Virulence Journal 2 (6), pp 580-592.
52. Jennifer Kovacs-Nolan and Yoshinori Mine (2012), “Egg Yolk Antibodies for
Passvie Immunity”, Annual Review of Food Science and Technology 3, pp 163182.

13


53. Jeremy M Berg, John L Tymoczko and Lubert Stryey (2002), Biochemistry, 5th
edition, W.H Freeman, New York.
54. Jhalka Kadariya, Tara C. Smith and Dipendra Thapaliy (2014), Staphylococcus
aureus and Staphylococcal Food-Borne Disease: An Ongoing Challenge in
Public Health, BioMed Research International, Hindawi Publishing Corporation.
55. Joseph F. Metzger, Anna D. Johnson, William S. Collins II and Virginia McGann
(1973), “Staphylococcusaureus Enterotoxin B release (excretion) under controlled
condition of fermentation”, Journal of Applied Microbiology 25(5), pp 770-773.
56. Kenneth Todar, Todar’s Online Textbook of Bacteriology University of
Wisconsin-Madison Department of Bacteriology (Staphylococcus), Kenneth
Todar University of Wisconsin-Madison Department of Bacteriology, 2005.
< />57. Kerouanton A., Hennekinne J.A., Letertre C., Petit L., Chesneau O., Brisabois
A., DeBuyser M.L. (2007), “Characterization of Staphylococcus aureus strains
associatedwith food poisoning outbreaks in France”, International Journal of
Food Microbiology 115, pp 369–375.
58. Koets M., Sander I., Bogdanovic J., Doekes G., Van Amerongen A.(2006), A
rapid lateral flow immunoassay for the detection of fungal alpha-amylase at the
workplace, Journal of Environmental Monitoring 8 (2006) 942-6.
59. Leenaars M. and Hendriksen C.F (2005), “Criticalsteps intheproduction of
polyclonaland monoclonal antibodies:evaluationand recommendations”, ILAR
Journal 46, pp 269-279.
60. Ler S.G., Lee F.K., Gopalakrishnakone P. (2006), “Trends in Detection of
Warfare Agents. Detection Methods for Ricin, Staphylococcal Enterotoxin B and
T-2”, Journal of Chromatography A1133, pp 1–12.
61. Liben Chen, Shuang Li, Zhengfang Wang, Ruilong Chang, Jingliang Su and Bo
Han (2012), “Protective effect of recombinant staphylococcal enterotoxin A

entrapped in polylactic-co-glycolic acid microspheres against Staphylococcus
aureus infection”, Veterinary Research 43 (20), pp 1-11.

14


62. Lívia Silveira Munhoz, Gilberto D’Ávila Vargas, Geferson Fischer, Marcelo de
Lima, Paulo Augusto Esteves, Silvia de Oliveira Hübner (2014), “Avian IgY
antibodies: characteristics and applications in immunodiagnostic”, Ciência Rural
44 (1), pp 153-160.
63. Marrack P., Kappler J. (1990), “The staphylococcal enterotoxins and their
relatives”, Science 248, pp 705-711.
64. Maria de Lourdes Ribeiro de Souza da Cunha (2010), “Staphylococcal
enterotoxins: Molecular aspects and detection methods”, Journal of Public
Health and Epidemiology 2, pp 29-42.
65. María Ángeles Argudín, María Carmen Mendoza and María Rosario Rodicio
(2010), “Food poisoning and Staphylococcus aureus enterotoxins”, Toxins 2, pp
1751-1773.
66. McCormick JK, Yarwood JM, Schlievert PM (2001), “Toxic shock syndrome
and bacterial superantigens: an update”, Annual Review of Microbiology 55, pp
77-104.
67. Miethke T, Wahl C, Heeg K, Echtenacher B, Krammer PH, Wagner H (1992), “T
cell-mediated lethal shock triggered in mice by the superantigen staphylococcal
enterotoxin B”, Critical role of tumor necrosis factor. Journal of Experimental
Medicine 175, pp 91-98.
68. Márta D, Wallin-Carlquist N, Schelin J, Borch E, Radstrom P. (2011), “Extended
staphylococcal enterotoxin D expression in ham products”, International Journal
of Food Microbiology 28, pp 617–620.
69. Mead PS, Slutsket L., Dietz V., McCaig LF., Bresee JS., Shapiro C., Griffin PM.,
Tauxe RV. (1999), “Food-related illness and death in the United States”,

Emerging Infectious Diseases Journal 5, pp 607-25.
70. Merlin S. Bergdoll and Amy C. Lee Wong (2006), “Staphylococcal
intoxication”, Foodborne Infection and Intoxications, pp 523-551.
71. Mihai Sandaran, Valentin Ordori, Ioanna Sisu, Horea Sandaran, Victor Lorin
Purcarea, Mircea Pennescu (2010), “Obtaining High Purity antibodies with

15


therapeutic potential”, FARMACIA 58 (6), pp 686-694.
72. Nandita P. Agnihotri, ManglaBhide (2014), “Cloning and expession of sec2 gene of
Staphylococcus aureus for antibody production”, Journal Biology Innovation 3 (1), pp
49-62.
73. Notermans, S. and Heuvelman, C.J (1983), “Combined effects of water activity,
pH, and suboptimal temperature on growth and enterotoxin production”, Journal
of Food Science 48, pp 1832-1835.
74. Novick, R.P. (2000), “Pathogenicity factors and their regulation” In: Gram
Positive Pathogens (Fischetti, V.A., Novick, R.P., Feretti, J.J., Portnoy, D.A. and
Rood, J.I., eds.). ASM Press, Washington, D.C., USA, pp. 392-407.
75. Oakley C.L and Fulthorpe A.J (1953), “Antigenic analysis by diffusion”, Journal
of Pathology and Bacteriology 65, pp 49-60.
76. O’Farrell B. and Bauer J. (2006), “Developing highly sensitive, more
reproducible lateral flow assays”, Part 1: New approaches to old problems. IVD
Technology June issue, pp 41.
77. Onoue, Y. and Mori, M (1997), “Amino acid requirement for growth and
enterotoxin production by Staphylococcus aureus in chemically defined media”,
International Journal of Food Microbiology 36, pp 77-82.
78. Ostyn A, De Buyser ML, Guillier F, Groult J, Felix B, Salah S, Delmas
G, Hennekinne JA.(2010), “First evidence of a food poisoning outbreak due to
staphylococcal enterotoxin type E”, France, Euro Surveillance 15 (13), pp 528.

79. Ouchterlony O. (1948), “Antigen-antibody reactions in gels”, Archiv fur Kemi,
Mineralogi, och Geology 26B, pp 1-9.
80. Oudin J. (1952), “Techniques and analysis of the quantitative precipitin reaction
B. Specific precipitation in gels and its application to immunochemical analysis”,
Methods in Medical Research 5, pp 335-378.
81. Otero, A., Garcia, M.C., Garcia, M.L. and Moreno, B (1988), “Effect of a
commercial starter culture on growth of Staphylococcus aureus and

16


thermonuclease and enterotoxins (C1 and C2) production in broth cultures”,
International Journal of Food Microbiology 6: 107-114.
82. Parma Y.R., Chacana P.A. et al. (2012), “Detection of Shiga toxin- producing
Escherichia coli by sandwich enzym-linked immunosorbent assay using chicken egg
yolk IgY antibodies”, Frontiers in Cellular and Infection Microbiology 2012, pp 8492
83. Petr Hodek and Marie (2003), “Chicken Antibodies – Superior Alternative for
Conventional Immunoglobulins”, Proceedings of the Indian National Science
Academy B69 4, pp 461-468.
84. Petr Hodek, Pavel Trefil, Jiri Simunek, Jiri Hudecek, Marie Stiborova (2013),
“Optimized protocol of chicken antibody (IgY) purification providing
electrophoretically

homogenous

preparations”,

International

Journal

of

Electrochemical Science 8, pp 113-114.
85. Pinchuk I.V., Beswick E.J., Saada J.I., Suarez G., Winston J., Mifflin R.C., Di
Mari J.F., Powell D.W., Reyes V.E (2007), “Monocyte Chemoattractant Protein1 Production by Intestinal Myofibroblasts in Response to Staphylococcal
Enterotoxin a: Relevance to Staphylococcal Enterotoxigenic Disease”. Journal of
Immunology 178, pp 8097- 8106.
86. Proft T, Fraser JD (2003), “Bacterial superantigens”, Journal of Clinical and
Experience Immunology 133, pp 299-306.
87. Plotz C.M. and Singer J.M. (1956), “The latex fixation test”, Application to the
serologicdiagnosis of rheumatoid arthritis, American Journal of Medicine 21 (6),
pp 888–892.
88. Raphael C. Wong, Harley Y. Tse (2009), Lateral Flow Immunoassay, Springer,
Humana Press, Springer Science and Business Media, New York, NY 10013,
USA.
89. Regassa,

L.B.,

Novick,

R.P. and Betley,

M.J

(1992),

“Glucose

and

nonmaintained pH decrease expression of the accessory gene regulator (agr)
in Staphylococcus aureus”, Journal of Infectious Immunology 60, pp 3381-3388.

17


90. Reginald W. Bennett and Jennifer M. Hait (2011), Bacteriological Analytical
Manual- Chapter

13A Staphylococcal

Enterotoxins:

Micro-slide

Double

Diffusion and ELISA-based Methods.
91. Richman DD., Cleverland PH., Oxman MN, Johnson KM. (1982), “The binding
of Staphylococcal protein A by the sera of different animal species”, Journal of
Immunology 128 (5), pp 2300-2305.
92. Roberts T. A., Baird-Parker A. C. and Tompkin R. B. (1996), Staphylococcus
aureus Microbiological specifications

of

food pathogens,

International

Commission on Microbiological Specifications for Foods, Blackie Academic,
London.
93. Rüdiger Schade, Esteban Gutierrez Calzado, Rodolfo Sarmiento, Pablo Anibal
Chacana, Joanna Porankiewicz-Asplund and Horacio Raul Terzolo (2005),
“Chicken Egg Yolk Antibodies (IgY-technology): A Review of Progress in
Production and Use in Research and Human and Veterinary Medicine”, ATLA
33, pp 1–26.
94. Ruth Robbins, Sara Gould, and Merlin Bergdoll (1974), “Detecting the
Enterotoxigenicity of Staphylococcus aureus Strains”, Journal of Applied
Microbiology 28 (6), pp 946-950.
95. Sameshima T., Magome C., Takeshita K., Itoh M. and Kondo Y. (1998), “Effect of
intestinal Lactobacillus starter cultures on the behaviour of Staphylococcus aureus in
fermented sausage”, International Journal of Food Microbiology 41, pp 1-7.
96. SchwarzkopfC., StaakC., BehnI.and ErhardM. (2001), Chicken egg yolk antibodies,
production and application: IgY technology, pp 25-64, Springer Publishcation.
97. Shinagawa. K,Ono. H. K, Omoe. K, Imanishi. K, 2008 “Identification and
characterization of two novel staphylococcal enterotoxins types S and T”,
Journal of Infectionous Immunology 76, pp 4999–5005.
98. Taylor S.L., Schlunz L.R., Beery J.T., Cliver D.O., Bergdoll M.S. (1982),
“Emetic Action of Staphylococcal Enterotoxin A on Weanling Pigs”, Journal of
Infectionous Immunology 36, pp 1263–1266.

18


99. Thermo Fisher Scientific (2010), Thermo Scientific Pierce Antibody Production
and Purification, Technical Handbook 2, pp 1-77.
100. Thomas H.Kent, M.D (1965), “Staphylococcal enterotoxin gastroenteritis in

Rhesus Monkeys”, The American journal of pathology 48(3), pp 387- 407.
101. T. Diraviyam, T. Jeevitha, P. Saravanan, A. Michael and S. Meenatchisundaram
(2011), “Preparation of Enteric Infections in Poultry”, Journal of Microbiology
and Biotechnology Research 1 (4), pp 95-103.
102. Van Den Bussche RA, Lyon JD, Bohach GA (1993), “Molecular evolution of the
staphylococcal and streptococcal pyrogenic toxin gene family”, Molecular
Phylogenetics and Evolution 2 (4), pp 281-292.
103. Vaitukaitis J.L., Braunstein G.D. and Ross G.T. (1972), “A radioimmunoassay
which specifically measures human chorionic gonadotropin in the presence of
human luteinizing hormone”, Journal of Obstetrics and Gynaecology 15, pp
751–758.
104. Victor E. Reyes et al. (2010), “Staphylococcal enterotoxins”, Toxins 2, pp 21772197.
105. Veerasami M., Singanallur N.B., Thirumeni N., Rana S.K., Shanmugham R.,
Ponsekaran S., Muthukrishnan M., Villuppanoor S.A. (2008), “Serotyping of
foot-and-mouth disease virus by antigen capture-ELISA

using

monoclonal

antibodies and chicken IgY”, Microbiology News 31(4), pp 549-554.
106. Xiao Y., Gao X., Taratula O., Treado S., Urbas A., Holbrook R.D., Cavicchi
R.E., Avedisian C.T., Mitra S., Savla R., Wagner P.D., Srivastava S., He H.
(2009), “Anti-HER2 IgY antibody- functionalized single-walled

carbon

nanotubes for detection and selective destruction of breast cancer cells”, BMC
Cancer 9, pp 351.
107. Yves Le Loir, Florence Baron and Michel Gautier (2003), “Staphylococcus

aureus and food poisoning”, Genetic and Molecular Research 2, pp 63-76.
108. Walk G (2002), Protein pruification and characterizatio, Proteins Biochemistry
and biotechnology, John Wiley Sons LTD, pp 99-116.

19


109. Wanchun Jin, Keiko Yamada, Mai Ikami (2013), “Application of IgY to
sandwich enzym-linked immunosorbent assays, lateral flow devices, and
immunopillar chips for detecting staphylococcal enterotoxins in milk and dairy
products”, Journal of Microbiological Methods 92, pp 323-331.
110. Wang RF., Cao WW. and Cerniglia CE. (1997), “A universal protocol for PCR
detection of 13 species of foodborne pathogens in foods”, Journal of Applied
Microbiology 83, pp 727-736.
111. Wieneke A.A., Roberts, D. Gilbert, R.J. (1993), “Staphylococcal food poisoning
in the United Kingdom”, Journal of Epidemiology and Infection 110, pp 519531.
112. />bid=66&language=vi-VN.
113. .

20