B
GIÁO D
O
VI N K THU T - KINH T BI N
ÁN T T NGHI P
IH C
NGÀNH CÔNG NGH TH C PH M
TÀI: NGHIÊN C U QUY TRÌNH S N XU
TH Y PHÂN T
C U NG
B T TRÁI
SVTH
: T ng Th
MSSV
: 13030483
GVHD
: ThS. Chu Th Hà
L p
: DH13TP
Khóa h c
: 2013 - 2017
i
A
TÀU
C NG HÒA XÃ H I CH
Vi n K Thu t Kinh T Bi n
cl p
PHI
TÀI
VI T NAM
T do H nh phúc
ÁN T T NGHI P
H và tên sinh viên: T ng Th
MSSV: 13030483
sinh: 24/02/1995
Thanh Hóa
a ch : Xã Tân Lâm, Huy n Xuyên M c, T nh Bà R
E- mail:
TÀI: Nghiên c u quy trình s n xu
I.
b
II.
c u ng th y phân t
.
TÀI: 2/2017
NGÀY GIAO
III. NGÀY HOÀN THÀNH
IV. H
ÁN: 6/2017
NG D N: Cô Chu Th Hà
TÊN CÁN B
Bà R a V ng Tàu, Ngày 26 tháng 6
GI NG VIÊN
(Ký và ghi rõ
NG B
(Ký và ghi rõ
NG D N
SINH VIÊN TH C HI N
tên)
tên)
MÔN
NG KHOA
tên)
tên)
i
NH N XÉT C A GI NG VIÊN
NG D N
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
Gi
ng d n
(kí và ghi rõ h tên)
ii
NH N XÉT C A GI NG VIÊN PH N BI N
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
.....................................................................................................................................
tháng 7
Gi ng viên ph n bi n
(kí và ghi rõ h tên)
iii
L IC
c tiên em xin g i l i c
Vi
t
kinh t bi n
ruy
c t i các th y cô
t cho em nh ng ki n th c, kinh nghi m
quý báu trong su t th i gian qua.
c bi t em xin g i l i c
n cô Chu Th Hà
,
tr c ti p ch b
ng d n em trong su
án,
hoàn thành t
án này. Trong th i gian làm vi c v i cô, em không ng ng
ti p thu thêm nhi u ki n th c b ích mà còn h c t
nghiêm túc, hi u qu
em có th
c tinh th n làm vi c,
u r t c n thi t cho em trong quá
trình h c t p và làm vi c sau này.
Do th i gian có h n và ki n th c còn h n ch
sót. Em r t mong nh
án còn nhi u thi u
c nhi u s góp ý c a các th y, cô giáo và các b
c hoàn thi
Em xin chân thành c
Tàu, ngày 26 tháng
iv
L
Trong quá trình th c hi
ng s li
quá trình th c nghi m là hoàn toàn chính xác và không sao chép t b t c
ct
án,
công trình nghiên c u nào. Các ph n có trích d n n i dung t nh ng tài li u
tham kh
c ghi rõ trong ph n Tài li u tham kh o cu
án. Tôi xin cam
u trên là s th t và ch u hoàn toàn trách nhi m v l
này.
Sinh viên th c hi n
T ng Th
v
M CL C
U .................................................................................................. 1
L IM
NG QUAN ............................................................................. 2
i m nguyên li u................................................................................. 2
1.1.1. Gi i thi u v
............................................................................ 2
1.1.1.1. Hình thái............................................................................................... 2
1.1.1.2. B
............................................................................................... 2
1.1.1.3. Phân b sinh h c và sinh thái............................................................... 3
1.1.1.4. Thành ph n hóa h c ............................................................................. 3
1.1.1.5.
..................................................................................... 4
1.2. Gi i thi u chung v tinh b t....................................................................... 5
1.3. Khái quát v quá trình th y phân ............................................................... 7
1.3.1. B n ch t và ý
1.3.2. Nh ng y u t
a quá trình th y phân ......................................... 7
n quá trình th y phân ................................. 8
c a quá trình th y phân ............................................................ 13
1.4. Quá trình th y phân tinh b t .................................................................... 14
1.5. Enzyme s d ng trong nghiên c u Enzyme -amylase (termamyl)....... 20
1.6. Ph gia và hóa ch t................................................................................... 23
1.6.1.
c s d ng trong nghiên c u ............................................................ 23
1.6.2.Acid citric ............................................................................................... 23
1.6.3. Bao
xu t ..................................................................................... 25
U......... 26
ng nghiên c u............................................................................... 26
2.1.1. B
................................................................................................ 26
2.1.2. Các ch ph m enzyme .......................................................................... 26
n thí nghi m ......................................................................... 29
c ............................................................................ 30
2.3. B trí thí nghi m ...................................................................................... 42
2.3.1. Quy trình d ki n .................................................................................. 42
vi
2.3.2. B trí thí nghi m nghiên c u ................................................................ 43
2.4.
oàn thi n s n ph m .......................................................... 47
T QU VÀ TH O LU N............................................... 48
3.1. K t qu và th o lu n................................................................................. 48
3.1.1. Kh o sát t l
c và b
phù h p cho s n ph m ....................... 48
3.1.2. Kh o sát nhi
và th i gian thích h p
3.1.3. Kh o sát n
enzyme và th i gian thích h
n d ch hóa ......... 50
ng hóa
......................................................................................................................... 51
xu t................................................................................... 54
xu t ...................................................................... 54
3.1.4.2. Thuy t minh quy trình........................................................................ 56
3.2. S n xu t th nghi m s n ph
T LU
xu t ............................ 57
NGH ................................................... 59
4.1. K t lu n .................................................................................................... 59
ngh ..................................................................................................... 59
TÀI LI U THAM KH O ............................................................................ 38
PH L C ....................................................................................................... 40
vii
DANH M C HÌNH
Trang
........................................................................... 2
Hình 1.2. B
............................................................................................ 3
Hình 1.3. M t s s n ph m khác t
......................................................... 4
Hình 1.4. M t ph n c u trúc amylose ............................................................... 5
Hình 1.5. M t ph n c u trúc amylopectin......................................................... 6
Hình 1.6. Bi n thiên v n t c ph n ng theo n
t......................... 10
Hình 1.7. C u trúc không gian c a a-Amylase ............................................... 15
Hình 1.8. C u trúc phân t tinh b t b phân c t .............................................. 17
Hình 2.1. Hình nh các enzyme s d ng trong nghiên c u ............................ 27
quy trình d ki n................................................................... 42
tóm t t b trí thí nghi m 2 .................................................... 44
tóm t t b trí thí nghi m 3 .................................................... 46
cu
y phân ..................................................... 47
Hình 3.1. Hình nh chu n b m u c m quan................................................... 48
th bi u di n k t qu c m quan s n ph m v i các t l
c: b t bí
khác nhau.................................................................................................... 49
th bi u di n s
ng c a nhi
, th
n
d ch hóa ........................................................................................................... 51
th bi u di n s
ng c a n
enzyme và th i g an
n hi u su t th y phân (%).......................................................... 53
th bi u di n s
ng c a n
enzyme và th i gian
ng kh (%) ..................................................... 53
xu t cho s n ph m ............................................ 55
viii
DANH M C B NG
Trang
B ng 1.1. Nhi
h hóa c a m t s tinh b t................................................... 7
B ng 1.2. M t s tính ch t khác nhau c a -amylase t các ngu n khác nhau 18
B ng 1.3. Các tính ch t khác nhau c
B
-Amylase........................................... 19
nh c a Termamyl (th i gian (phút) c n thi
m t 50% ho t
tính) ................................................................................................................... 21
B
nh v ch
ng c m quan c a acid citric trong th c ph m. 24
B
nh v thành ph n hoá h c c a acid citric trong th c ph m ... 24
B
c tính s n ph m ............................................................................ 27
B
m s n ph m........................................................................... 28
B ng 2.3. B ng mô t n
m quan ......................................... 32
B ng 2.4. B ng phân c p ch
B ng 2.5. B
ng ................................................................ 38
mv
trong và màu s c c a s n ph m............................ 39
B ng 2.6. B ng v v c
c gi i khát th y phân ......................................... 40
B ng 2.7. B
m v mùi c
c gi i khát th y phân ............................. 40
B ng 2.8. B ng t l các m u trong thí nghi m................................................. 43
B ng 3.1.
ng c a t l
B ng 3.2. B
c:b
n giá tr c m quan s n ph m48
p lo i ch
ng s n ph m................................... 49
B ng 3.3.
ng c a nhi
và th
B ng 3.4.
ng c a n
, th
n d ch hóa ....... 50
ng hóa ........... 52
ix
DANH SÁCH CÁC T
phút.
ml:
mililit.
g:
gram.
mg:
miligam
STT:
s th t
NXB:
nhà xu t b n
E. Termamyl
Enzyme Termamyl.
E. Fungamyl
Enzyme Fungamy
x
VI T T T
L IM
U
tv
Vi t Nam n m trong khu v c nhi
ng
cho th m th c v
ng
các lo i rau c . M
c bi t là s phong phú c a
u có nh ng lo i rau c qu
mi n
ng vùng
m mà không ph i qu c gia nào trên th gi
V i nh
c.
m y, c ng v i 70% dân s làm ngh nông và di n tích canh
tác rau c kho ng 1.500.000 ha, phát tri n s n xu t rau c qu là m t trong
nh ng v
mang t m chi
c qu c gia. H u h t rau c qu không nh ng
cung c p nh ng ch t b
mà còn cung c p các ch t có ho t tính
sinh h c cao, giúp con
i phòng và ch a b nh
k
lo i rau trái mà nhân dân ta quen dùng làm th c ph
Hi n nay, trên th
ng s d ng
nm t
.
làm th c ph m v n còn h n ch .
M t trong nh ng nguyên nhân chính là các s n ph m ch bi n t
trên th
ng. Chính vì l
ng nhu c u ngày càng cao c
gi i khát t
i mong mu n
i tiêu dùng, m t s n ph m m
c
, cho ra thành ph m u ng li n ti n l i, góp ph n làm phong
phú thêm th
c gi i khát Vi t Nam.
Bên c
nh
hi n có
u qu kinh t cây tr ng (nh t là
tb
T
th c hi
p, góp ph
m nghèo.
tài: Nghiên c u quy trình s n xu
c u ng
ng chai t b t
M c tiêu nghiên c u
Nh m t o ra s n ph
cu
ng, gi
ch t t nhiên c a nguyên li u. không ch a ch t b o qu n mà ch
c tính
ng v n n
nh.
c m c tiêu trên, chúng tôi ti n hành kh o sát nh ng n i dung sau:
- T l thích h p c a b
c
-
ng c a nhi
và th i gian lên hi u su t quá trình th y phân.
-
ng c a n
, th
n
1
ng hóa.
: T NG QUAN
m nguyên li u
1.1.1. Gi i thi u v cây
1.1.1.1. Hình thái
cg
b
là m t lo i cây thu c chi Cucurbita, h
là tên thông d
loài: Cucurbita
pepo, Cucurbita
ch các lo i cây thu c các
mixta, Cucurbita
maxima,
và Cucurbita
moschata.
B cM
México.
Hình 1.1.
1.1.1.2. B
B
l n vào các h t màu nâu. Trong quá
trình s n xu t, s y
ng nhi
n màu s c c a b
n ch
. Màu s c c a b t
c m quan c a s n ph m.
2
Hình 1.2. B
1.1.1.3. Phân b sinh h c và sinh thái
n
c tr ng
sinh thái r
nhi
ng b
n vùng núi
ng t t trên nhi
c gieo vào tháng 4 d
t có khí h u khác
có th thu non làm rau s
s liên t c ra qu nhi u, dây tr lâu, n u mu n b o
qu n d tr dùng lâu dài c
Có hai gi
bí già m i thu ho ch.
ng nh t
Tr ng ph bi n
Gi
c ta:
Kiên Giang, C
tròn d p, có khía, n ng 3 - 5 kg, trái già màu vàng, v hai da, th t d y, déo, màu
vàn
.
Gi ng bí trái dài Buôn Ma Thu t: Tr ng ph bi n
mi
cao nguyên. Trái b u d c dài, n ng 1
2 kg, v
hay s n sùi, th
n vàng cam, ít d o, ngon ng t. [15]
và
1.1.1.4. Thành ph n hóa h c
Qu b
ch a 88,3-
c, 1,40-1,33 protid, 0,5-0,43% lipid, 5,6 %
tinh b t, 0,08% vitamin C, 0,004% vitamin PP, 0,001% vitamin B1, 0,8-1,01%
tro. Th t qu
a
ng t ng s .
3
1.1.1.5.
là lo i cây tr ng l y
dùng
c ch bi n
ch bi n th c ph
t lo i rau. B
s y,
,b
c
m cho tr
Hình 1.3. M t s s n ph m khác t
mc
là lo i cây d tr ng, ít b sâu b nh, k thu t tr ng và
t, có th tr
c
nhi u lo
t khác
nhau.
i dân hi n nay là khâu tiêu th s n ph m. Vì v y,
m r ng và phát tri n di n tích tr ng cây
ngành ch
, h th ng khuy n nông và các
ng qu ng bá, gi i thi u giúp nông dân tiêu th s n
ph m trên th
ng, c n nghiên c u s n xu
ng hóa các s n ph m
quy
mô công nghi p.
1.1.1.6. Tác d ng c
là ngu n th
p provitamin A thiên nhiên phong phú. Ngoài t
l ch t x
còn mang l i vitamin C, axit folic, magic, kali và
ch t
là thành ph n ch a nhi u vitamin A,
quan tr ng trong s phát tri n c a s
ng
còn tham gia vào quá trình sinh t ng h p protein,
n, vitamin A
u hoà h mi n d ch, bão v
còn ch a m t ch t c n thi t cho s phát tri n c a não b
là acid glutamic,
ch
ng trong b
ng th n kinh,
ng các ph n ng chuy n hoá trong t bào th n kinh và não. Vì v y,
4
c coi là th
não, tr
c th n kinh và là th
em ch m phát tri n v trí óc.
1.2. Gi i thi u chung v tinh b t
Tinh b t là thành ph n chính c a h
c và c
c. H t tinh b t
c c u t o t amylose và amylopectin, xung quanh là m t l p v c u t
b ng amylose và amylopectin. Các h t x p thành t ng l p. H t tinh b t t nh ng
nguyên li u khác nhau có hình d
c khác nhau.
Tinh b t là m
bao g
D-glucose
n i v i nhau b i liên k t
-glucoside. Công th c phân t
(C6H10O5)n
t
n kho
g
i nghìn. Tinh b t có
d ng h t màu tr ng t o b i hai lo i polyme là amylose và amylopectin. Amylose
là polyme m ch th ng g
D- glucose liên k t v i nhau b i liên k t
-1,4- glucoside.
Hình 1.4. M t ph n c u trúc amylose
Amylopectin là polyme m ch nhánh, ngoài chu i glucose
ng còn
có nh ng chu i nhánh liên k t v i chu i chính b ng liên k t -l,6-glucoside. Các
h t tinh b t là nh ng tinh th
t tinh b t có ph n k t tinh do
amylose và ph n phân nhánh c a amylopectin t o thành làm cho chúng không tan
cl
i các enzyme.
5
Hình 1.5. M t ph n c u trúc amylopectin
Tính ch t c a tinh b t
:
Khi hòa tan tinh b
u tiên các phân t
gi a các phân t tinh b
c a tinh b t, t o ra l p v
b y
cl
c s thâm nh p vào
i các nhóm ho
c và làm cho m
ng
a phân t tinh b t
t qu , phân t tinh b t b xê d
cr
y ra không h n ch s làm bung ra các phân t tinh b t và h chuy n
thành d ng dung d
n tr
t quá trình ph thu
u ki n nhi
c quá trình hòa tan và
bên ngoài.
Tính ch t h hóa c a tinh b t:
Nhi
phá v h t chuy n tinh b t t tr
khác nhau thành dung d ch keo g i là nhi
t tinh b
m
phá v
nh t, các phân t
m mà là m t kho ng nhi
, ngu n g c tinh b
c a tinh b t khác nhau.
6
hydrat hóa
i hóa lí khi h
liên h p v
h hóa không ph i là m
u ki n h
h hóa. Các bi
trong su
m ch th ng và nh
Nhi
u có m
t o thành gel.
nh
nh.
c h t và pH mà
B ng 1.1. Nhi
h hóa c a m t s tinh b t [7]
Nguyên li u
Nhi
Tinh b t s n
h hóa
58,5-73°C
Tinh b
70-90°C
Tinh b t hu nh tinh
61-81°C
Tinh b t khoai tây
56-66°C
Tinh b t b p
62-72°C
nh t c a h tinh b t:
M t trong nh ng tính ch t quan tr ng c a tinh b t có
ng và k t c u c a nhi u s n ph m th c ph
có nhi u nhóm hydroxyl có kh
nh t. Phân t tinh b t
c v i nhau làm cho phân t
tinh b t t p h p l i, gi nhi u
d
n ch t
n cho dung d
dính,
nh
Kh
o gel và s thoái hóa gel:
Tinh b t sau khi h
ngu i, các phân t tinh b t s
x p x p l i m t cách có tr t t
t o thành gel tinh b
dung d ch tinh b t ph i có n
t
c v a ph i, ph
chuy n tinh b t thành tr
c gel thì
c h
ngu i
tr ng thái
t ch có các liên k t hydro tham gia, có th n i tr c
ti p các m ch polyglucoside ho c gián ti p qua phân t
ngu i m t th i gian dài s co l
c. Khi gel tinh b t
ng d ch th s thoát ra, g i là s thoái
hóa.
1.3. Khái quát v quá trình th y phân
1.3.1. B n ch t và ý
a quá trình th y phân [8]
Khái ni m quá trình th y phân là quá trình phân c t m t h p ch t cao phân
t thành các phân t
i tác d ng c a các xúc tác sinh h c, hóa
7
h c và có s tham gia c
c.
Ph n ng th y phân là ph n ng r t ph bi n trong b o qu n và s n xu t
th c ph m. Do ph n ng th y phân mà ch
gi
ng các s n ph m th c ph m b
ph n ng th
m ch t cho th c
ph m. Qua ph n ng th y phân, không nh ng các tính ch t c m quan mà các
tính ch t hóa h c c a s n ph m c a b bi
Ph n ng th
i r t nhi u.
ng là m
u cho m t lo t các ph n ng khác ti p
di n. Các ph n ng có th x y ra khi ph n ng th
t thúc .
Xét v m t sinh h c, ph n ng th
phân gi
n
n cu i cùng c a m t quá trình sinh h c.
Bên c
thu t s n xu t các s n ph m th c ph m, ph n ng
th y phân có vai trò r t quan tr
gi m b t t n th t các ch t th c ph m,
i ta ph i tìm nh ng bi n pháp k thu
các s n ph m th
c l i, n u qua ph n ng th y phân mà ch
thành ph
i ta t
u ki
cd
ng glucose
ph n ng th y phân tinh b t b ng enzyme
1.3.2. Nh ng y u t
ng
u ki n cho ph n ng th y phân y x y ra
n t n cùng. Ch ng h n t tinh b t, mu
ph i t
a và h n ch
i ta
nm ct i
n quá trình th y phân [6]
V n t c c a quá trình th y phân liên quan ho t tính c a enzyme xúc tác cho
ph n ng. Ho t tính c a enzyme xúc tác càng m nh thì quá trình th y phân di n
ra càng nhanh và tri
.
ng c a ch t xúc tác và n
Ph n
ch t xúc tác [6]
ch
t th
n m t gi i h n nào
t mà ti p t c b sung ch t xúc tác s cho s n
ph m th y phân mong mu n ti p t c phân h
nh n ng
n ki m tra th c nghi m
ch t xúc tác thích h p cho quá trình th y phân.
ng c a n
t th y phân [6]
N
u su t c a quá trình th y
8
t này ph i phù h p v i n
ch t xúc tác thì quá trình th y phân m i di n ra tri t
ch
u
ng c a s n ph m mà ta kh ng ch n
t cho phù h p.
-Menten bi u di n m i quan h gi a v n t c ph n
ng v i n
t:
E+S
ES
E+P
t
-
- E: emzyme
- P: s n ph m
- ES: ph c trung gian
Ph n ng enzyme
i các h ng s t c
ph n ng sau:
- K1 : h ng s t
c a ph n ng t o ph c [ES]
- K-1 : h ng s t
c a ph n ng phân ly ph c [ES]
- K2: h ng s t
cl i
c a ph n ng phân ly ph c thành s n
ph m
-
c th hi n qua công th c
sau:
V = V max
- [S]: n
t.
- Km: h ng s
cho ái l c enzyme
t:
i emzyme. Km
iv
t.
Km =
V: v n t c t o thành s n ph m.
- vmax: v n t c c
i.
9
c
Hình 1.6. Bi n thiên v n t c ph n ng theo n
y,
t
t thì v n t c ph n
n
t t i m t giá tr
Vmax
n t c ph n
nt
a dù n
ng c a nhi
t giá tr c
i
t ti p t
ng [6]
Theo quy lu t c a các ph n ng hóa h
ng, v n t c ph n ng
enzyme
enzyme có b n ch t là protein
t i m t giá tr gi i h
n t c ph n ng
enzyme s b gi m do s bi n tính c a protein.
Trong kho ng nhi
mà enzyme
bi n tính thì h s nhi
enzyme vào kho
t c ph n
hi
c a
lên 10°C thì v n
n 2 l n. Khi b
u có s bi n tính protein thì x y ra
ng: m t m t v n t c ph n ng v
, m t khác
v n t c bi n tính protein x y ra n
d nt
t qu là v n t c ph n ng gi m
hoàn toàn.
Nhi
ng v i v n t c c
i g i là nhi
enzyme b m t hoàn toàn ho t tính g i là nhi
t i thích. Nhi
t i h n. Nhi
t i thích
c a cùng lo i enzyme có ngu n g c khác nhau thì không gi
enzyme có ngu n g c th c v t có nhi
ngu n g
ng v t 40 - 50°C. Nhi
enzyme,
nhi
ng
t i thích là 50 - 60°C, enzyme t
quá th
m ho
c a
u ki n này enzyme không b bi
tr l
Nhi
mà t i
u ki n thích h p thì ho t tính c a enzyme l
c ph c h i.
t i thích c a enzyme không ph i là h ng s mà nó ph thu c vào
10
nhi u y u t
t, pH
ng, n
enzyme, ngu n enzyme.
bi t là th i gian tác d ng càng dài thì nhi
c
t i thích càng gi m.
ng c a th i gian th y phân [6]
Th i gian th y phân dài hay ng
cho quá trình phân gi i, c
liên k t glucoside trong chu i polypeptide c a tinh b
t các
i tác d ng c a các
ch t xúc tác. Khi nhi
n v n t c ph n ng
n ch t là protein nên enzyme b bi n
tính và m t ho
i gian thích h p s có tác d
y
quá trình th y phân.
ng c a ch t kích thích và ch t kìm hãm [6]
M t s ch t hóa h c khi b sung vào ph n ng enzyme
gi m v n t c ph n ng enzyme. Ch
c g i là ch t kích thích hay ch t
a s phân chia này ch
n
n
thích
i, vì m t ch t
khác l i là kìm hãm. Ho c ch t kích
ph n ng này mà l i là kìm hãm
ph n ng khác.
Ch t kích thích (ch t ho t hóa): là ch t có kh
ph n
ng enzyme, ho t hóa enzyme t tr ng thái không ho
ho
ng sang tr ng thái
ng.
: làm enzyme có kh
n ng chuy n hóa nhóm,
chuy n hóa hydro trong ph n ng xúc tác, bi
enzyme t i tr ng thái thích h p, d
ng trong trung tâm ho
t o thành trung tâm ho
i trung tâm ho
ng c a
n ph c h i nh ng nhóm ch
t
ng c a enzyme. Các ion kim lo i có th tham gia
ng c a các enzyme, làm c u n i cho enzyme
ch t.
Các ch t ho t hóa có th
enzyme b ng cách gián ti p hay
tr c ti p
- Ho t hóa gián ti p: n u ch t ho
ph n ng enzyme
b ng cách lo i tr ch t kìm hãm kh i h n h p ph n ng ho c tham gia ph n ng
ng tr c ti p v i phân t enzyme.
- Ho t hóa tr c ti p: các ch t ho
ng tác d ng vào trung tâm ho t
11
ng c a enzyme ho c làm bi
ng có l i cho ho
i c u hình không gian c a phân t enzyme
ng xúc tác.
Ch t kìm hãm (ch t c ch ): là nh ng ch t làm gi m t
ph n ng
enzyme, ho c vô ho t enzyme. T t c nh ng ch t gây bi n tính protein
nh ng ch
u là
c hi u c a enzyme. Các ch t này có tác d ng kìm
hãm t t c các enzyme. Ngoài ra, có nhi u ch t khác không làm bi n tính protein
enzyme
n làm gi m ho
xúc tác c a nó. Nói chung, tác d ng kìm
hãm có th là do ch t kìm hãm k t h p v i enzyme t o thành ph c Enzyme ch t kìm hãm theo ph n ng sau:
K+i
E+I=
EI
K-i
- N u k = 0 ph c ch t EI hoàn toàn không phân li. S kìm hãm
không thu n ngh
kìm
i tác d ng c a ch t kìm hãm không thu n ngh ch, m c
th i gian tác d ng, n u n
ch t kìm
l
bão hòa enzyme thì cu i cùng ph n ng enzyme s ng ng hoàn
khi lo i ch t kìm hãm ho
c a enzyme
n a,
c ph c h i.
ng h p kìm hãm thu n ngh ch, hình thành tr ng thái cân b ng
-
c a ph n ng trên, m
c th hi n b ng h ng s phân ly (K 1 )
c a ph c ch t enzyme - ch t kìm hãm.
- Giá tr K 1 càng l n, ph c ch t càng d
kìm hãm thu n ngh ch, ho
ng c a enzyme có th
i tác d ng c a ch t
c ph c h i sau khi lo i
ch t kìm hãm. Các ch t kìm hãm có th tác d ng v i enzyme theo nhi u cách
- Kìm hãm thu n ngh ch: khi lo i b ch t kìm hãm thì ho t tính enzyme tr
l
u.
- Kìm hãm b t thu n ngh ch: n u lo i b ch t kìm hãm thì enzyme
không có l i ho
u.
- Kìm hãm c nh tranh: ch t kìm hãm có c u trúc hóa h c g n gi ng c u t o
12
hóa h c c
c nh tranh trung tâm ho
t, ch t kìm hãm s k t h p v i trung tâm ho
ch t ph n ng v i enzyme b gi m xu ng, t
ng c a enzyme v i
ng, làm c
ph n ng gi m. N
kìm hãm càng cao, v n t c ph n ng càng gi m, kh c ph c b
ch t
ng
lo i b tác d ng c a ch t kìm hãm.
- Kìm hãm không c nh tranh: ch t kìm hãm k t h p v i enzyme, làm thay
i c u trúc không gian c a enzyme, làm cho enzyme không tác d
t, v n t c ph n ng lúc này ch ph thu c vào n
cv i
ch t kìm hãm mà
không có cách kh c ph c.
1.3.3.
ch c a quá trình th y phân [13]
1. Quá trình h hoá tinh b t
nhi
ng tinh b
t
ng ki
c, khi nhi
c và
t tinh b t s hút
nh t c a dung d ch. Khi th tích c a h
m
n
phá v l p v bên ngoài, amylose và amypectin thoát ra, t o
nh hình, kh
Các h t tinh b
c khác nhau, h t tinh b t l n b h
tiên, h t tinh b t nh b h hóa sau cùng. Vì v y, nhi
m
m mà là m t kho ng nhi
Nhi
h hóa là nhi
h hóa không ph i là
.
mà t
n ra và k t thúc quá trình chuy n
tinh b t t tr ng thái tinh th sang tr ng thái l ng. Nhi
vào nhi u y u t : tính ch t m i lo i tinh b
u c a tinh b
huy n phù tinh b t thì nhi
b tc
c nh s có nhi
h hóa ph thu c
ng khu ch tán, n
huy n phù c a tinh b t, t
n
u
h
c khi h t tinh
h
ih
c
l n.
Quá trình h hóa
t t c các lo i tinh b
c a h tinh b
2. Quá trình d
u gi
t giá tr c
ng hóa tinh b t
13
nh t
i r i gi m xu ng.
Tinh b t sau khi h hóa s d dàng cho vi c th c hi n các quá trình: d ch
ng hóa g i chung là quá trình th y phân tinh b t.
S n ph m c a quá trình th y phân tinh b t b ng enzyme là phân c t
amylose, amylopectin và dextrin b
n mantose,
m
c tr thành
ng nh glucose và các dextrin b c th p d
ch t hòa tan c a d
ng.
ng hóa tinh b t là k t qu c
ng c a nhóm
enzyme amylase.
c a ph n ng th y phân:
Không ph thu c vào ngu n g c c a ch t xúc tác, m i khi các liên k t 1,4 và - 1,6 glucoside b phân c t, thì t
v i các nhóm ion c
pt
c liên k t
c.
Kh o sát quá trình th y phân tinh b t
m
c b i enzyme
amylose cho th y r ng: các ch t xúc tác b gãy m i liên k t glucoside gi a
nguyên t carbon s 1 v i nguyên t oxy.
m ch amylose, khi m i liên k t
1,4- glucoside b phân c t thì nhóm hydroxyl (OH) c
k t carbon s 1
c s liên k t v i liên
g c glucoside bên trái, còn cation hydro (H+) s liên k t v i
nguyên t carbon s 4
m i liên k t
glucoside bên ph
i v i m ch amylopeptide, khi
-l,6-glucoside b phân c t, thì nhóm OH- c
nguyên t carbon s 1
c s liên k t v i
m ch chính, còn H+ s liên k t v i O2-
nguyên t
carbon s 6.
1.4. Quá trình th y phân tinh b t
1. Enzyme
-amylase ( -l,4-glucanohydrolase) (EC 3.2.1.1)
C ut o
Enzyme
-
-amylase là protein có phân t
14
ng th
ng n m trong