Nghiên cứu tính đối kháng của aspergillus flavus không sinh độc tố để phòng chống aflatoxin trên ngô và lạc ( Luận án tiến sĩ)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI

LÊ THIÊN MINH

NGHIÊN CỨU TÍNH ĐỐI KHÁNG CỦA ASPERGILLUS FLAVUS
KHÔNG SINH ĐỘC TỐ ĐỂ PHÒNG CHỐNG AFLATOXIN
TRÊN NGÔ VÀ LẠC

Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
Mã số: 62420201

LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC

Hà Nội – 2014


BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO
TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI

LÊ THIÊN MINH

NGHIÊN CỨU TÍNH ĐỐI KHÁNG CỦA ASPERGILLUS FLAVUS
KHÔNG SINH ĐỘC TỐ ĐỂ PHÒNG CHỐNG AFLATOXIN
TRÊN NGÔ VÀ LẠC

Chuyên ngành: Công nghệ sinh học
Mã số: 62420201

LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC

NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC:
1. GS. TS. NGUYỄN THÙY CHÂU
2. PGS. TS. NGUYỄN THN XUÂN SÂM

Hà Nội - 2014


i

LỜI CẢM ƠN
Tôi xin chân thành cảm ơn Bộ Giáo dục và Đào tạo, Trường Đại học Bách khoa
Hà Nội, Viện Cơ điện Nông nghiệp và Công nghệ sau thu hoạch đã giúp đỡ tạo điều
kiện cho tôi trong quá trình học tập cũng như hoàn thành luận án của mình.
Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến GS.TS. Nguyễn Thuỳ Châu - Nguyên
trưởng Bộ môn Nghiên cứu Công nghệ Sinh học sau thu hoạch, Viện Cơ điện Nông
nghiệp và Công nghệ sau thu hoạch và PGS.TS. Nguyễn Thị Xuân Sâm – Trưởng bộ
môn Vi sinh - Hóa sinh - Sinh học phân tử, Viện Công nghệ Sinh học & CNTP, trường
Đại học Bách Khoa Hà Nội là những người thầy đã tận tình hướng dẫn, tạo mọi điều
kiện thuận lợi, giúp đỡ và chia sẻ những khó khăn cùng tôi trong suốt thời gian tôi
thực hiện luận án này.
Tôi cũng xin bày tỏ lòng biết ơn đến PGS.TS. Đinh Duy Kháng - Trưởng phòng
Vi sinh vật học phân tử, đã tạo điều kiện thuận lợi và ủng hộ tôi trong quá trình thực
hiện luận án.
Tôi xin chân thành cảm ơn các cán bộ phụ trách đào tạo, Viện đào tạo sau đại
học - Trường Đại học Bách khoa Hà Nội đã tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tôi hoàn
thành mọi thủ tục cần thiết trong quá trình làm nghiên cứu sinh.
Trong thời gian qua, tôi đã nhận được sự giúp đỡ nhiệt tình của các anh chị và
các bạn đồng nghiệp ở Bộ môn Nghiên cứu Công nghệ Sinh học sau thu hoạch - Viện
Cơ điện Nông nghiệp và Công nghệ sau thu hoạch, Phòng Vi sinh vật phân tử - Viện
Công nghệ sinh học và Bộ môn Vi sinh, Hóa sinh, Sinh học phân tử - Trường Đại học

Bách khoa Hà Nội. Nhân dịp này tôi cũng xin chân thành cảm ơn những sự giúp đỡ
quý báu đó.
Tôi rất biết ơn những người thân trong gia đình đã quan tâm và tạo điều kiện tốt
nhất cho tôi học tập và nghiên cứu. Tôi cũng vô cùng cảm ơn sự động viên, khích lệ
của bạn bè trong và ngoài Viện đã dành cho tôi.
Hà Nội, ngày 23 tháng 6 năm 2014

Lê Thiên Minh


ii

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng
tôi. Các số liệu và kết quả nêu trong luận án là trung thực
và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào
khác.

Hà nội, ngày 23 tháng 6 năm 2014
Tác giả

Lê Thiên Minh


iii

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT
ADN
ARN

EDTA
SDS-PAGE
TCA
v/p
v/v
vvm
w/v
X
WHO
Tm
FDA
TE
PCR
SDS
TLC
EtBr
dNTP
A. flavus
A. parasiticus
NOR
AVN
HAVN
OAVN
AVNN
AVF
VHA
VAL
VERB
VERA
DMST

DHDMST
ST
DHST
OMST
DHOMST
AFB1
AFB2
AFG1
AFG2

Axit deoxyribonucleic
Axit ribonucleic
Axit etylen diamin tetra axetic
Điện di trên gel polyacrylamit có chứa sodium dodecyl sulfate
Axit trichloroaxetic
vòng / phút
Thể tích/thể tích
thể tích/thể tích/phút
Trọng lượng /thể tích
Axit amin bất kỳ
Tổ chức Y tế thế giới
Nhiệt độ tan chảy
Cục quản lý Thực phNm và Dược phNm Hoa kỳ
Tris EDTA
Polymerase chain reaction
Sodium dodecyl sulfate
Thin layer chromatography (sắc ký lớp mỏng)
Ethydium bromit
Deoxiribonucleotit triphosphat
Aspergillus flavus

Aspergillus parasiticus
Norsolorinic acid
Averantin
5’ hydroxyaverantin
Oxoaverantin
Averufanin
Averufin
Versiconal hemiacetal acetate
Versiconal
Versicolorin B
Versicolorin A
Demethylsterigmatocystin
Dihydro demethylsterigmatocystin
Sterigmatocystin
Dihydro sterigmatocystin
O-methylsterigmatocystin
Dihydro-O-methylsterigmatocystin
Aflatoxin B1
Aflatoxin B2
Aflatoxin G1
Aflatoxin G2


iv

Danh môc c¸c b¶ng
STT

Tên bảng

Trang

1

Bảng 1.1 Một số tính chất lý, hóa của các aflatoxin

8

2

Bảng 1.2 Giới hạn aflatoxin cho phép trên nông sản thực ph m

12

3

Bảng 1.3 Giới hạn aflatoxin trong thức ăn tinh hỗn hợp cho Bê và Bò

12

4

Bảng 1.4 Giới hạn aflatoxin trong thức ăn chăn nuôi

13

5

Bảng 1.5 Đặc điểm hình thái của A. flavus

14

6

Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm thử độc tính cấp mẫu A. flavus DA2

40

7

Bảng 3.1 Kết quả phân lập các chủng A. flavus từ ngô, lạc ở một số tỉnh Việt

44

Nam
8

Bảng 3.2 Khả năng tạo aflatoxin của các chủng A. flavus phân lập từ ngô và

45

lạc
9

Bảng 3.3a Đặc điểm hình thái của các chủng A. flavus phân lập từ các mẫu ngô
và lạc

47

10

Bảng 3.3b Đặc điểm hình thái của các chủng A. flavus phân lập từ các mẫu
ngô và lạc

48

11

Bảng 3.4a Đặc điểm cấu trúc vi học của các chủng A. flavus phân lập từ các

49

mẫu ngô và lạc
12

Bảng 3.4b Đặc điểm cấu trúc vi học của các chủng A. flavus phân lập từ các

50

mẫu ngô và lạc
13

Bảng 3.5 Khả năng sinh aflatoxin B1 của chủng A. flavus phân lập

52

14

Bảng 3.6 Hiệu quả giảm aflatoxin B1 của chủng A. flavus AF14 nuôi cấy trên

54

môi trường ngô bằng các chủng A. flavus không sinh aflatoxin
15

Bảng 3.7 Mật độ tế bào A. flavus DA2 và A. flavus AF14 khi nuôi hỗn hợp theo

55

tỉ lệ 1:1
16

Bảng 3.8 Trình tự các cặp mồi

58

17

Bảng 3.9 Tổng hợp kết quả PCR với các mồi đã sử dụng

60

18

Bảng 3.10 Ảnh hưởng của A. flavus DA2 đến trọng lượng cơ thể chuột

63

19

Bảng 3.11 Mật độ bào tử của chủng A. flavus DA2 tạo được trên các môi

66

trường khác nhau


v
20

Bảng 3.12 Khả năng tạo bào tử chủng A. flavus DA2 của nhiệt độ nuôi cấy

67

khác nhau
21

Bảng 3.13 Ảnh hưởng của độ m môi trường đến khả năng tạo bào tử của

68

chủng A. flavus DA2
22

Bảng 3.14 Thời điểm thu bào tử của chủng A. flavus DA2

69

23

Bảng 3.15 Ảnh hưởng của tỷ lệ tiếp giống tới mật độ bào tử A. flavus DA2

70

24

Bảng 3.16 Ảnh hưởng của độ dày khối ủ tới mật độ bào tử chủng A. flavus

71

DA2
25

Bảng 3.17 Mật độ bào tử A. flavus DA2 trong các chất mang ở các thời gian

72

bảo quản khác nhau
26

Bảng 3.18 Khả năng cạnh của chế ph m A.flavus DA2 ở các tỷ lệ khác nhau

76

bằng sắc ký TLC
27

Bảng 3.19 Khả năng cạnh tranh của chủng A.flavus DA2 khi bón vào đất ở các

77

tỷ lệ khác nhau
28

Bảng 3.20. Ảnh hưởng của các thuốc bảo vệ thực vật hóa học đến sự phát triển

80

sinh khối của A.flavus DA2
29

Bảng 3.21 Mức độ nhiễm nấm mốc A.flavus trên đất trồng ngô, lạc tại một số

82

tỉnh Việt Nam
30

Bảng 3.22 Khả năng cạnh tranh của chủng A.flavus DA2 không sinh aflatoxin

84

trong đất trồng ngô sử dụng chế ph m AF
31

Bảng 3.23 Hiệu quả giảm nấm mốc và aflatoxin của chủng A.flavus DA2 trên

86

ngô bắp ở giai đoạn trước thu hoạch

32

Bảng 3.24 Hiệu quả phòng chống nấm mốc và aflatoxin của chế ph m AF trên

89

ngô sau thời gian bảo quản 6 tháng
33

Bảng 3.25 Khả năng cạnh tranh của chủng A.flavus DA2 không sinh aflatoxin

91

trong đất trồng lạc được bón chế ph m AF
34

Bảng 3.26 Hiệu quả giảm nấm mốc và aflatoxin của chủng A.flavus DA2 trên

92

lạc củ ở giai đoạn trước thu hoạch
35

Bảng 3.27 Hiệu quả giảm nấm mốc và aflatoxin của chủng A.flavus DA2 trên
lạc sau thời gian bảo quản 6 tháng

93


vi

Danh môc c¸c h×nh
STT

Tên hình

Trang

1

Hình 1.1 Công thức cấu tạo của một số dạng aflatoxin

6

2

Hình 1.2 Aflatoxin tương tác đồng hóa trị với vật chất di truyền

9

3

Hình 1.3 Khu n lạc A.flavus

15

4

Hình 1.4 Hệ sợi A.flavus quan sát dưới kính hiển vi

15

5

Hình 1.5 Cơ chế sinh tổng hợp aflatoxin

17

6

Hình 1.6 Hàm lượng aflatoxin trên hạt bông giảm khi tỷ lệ AF36 tăng

29

7

Hình 3.1 Sắc ký đồ phân tích aflatoxin tạo bởi chủng A. flavus AF14

52

8

Hình 3.2 Sắc ký đồ thể hiện khả năng sinh aflatoxin B1 của chủng A. flavus

53

DA2
9

Hình 3.3 Kiểm tra hàm lượng aflatoxin B1 của hỗn hợp các chủng A.flavus

54

nuôi cấy trên cơ chất ngô bằng sắc ký bản mỏng (TLC)
10

Hình 3.4 Chủng A. flavus DA2 cạnh tranh và lấn át chủng A. flavus AF14

56

trên đĩa thạch
11

Hình 3.5 Chất lượng ADN tổng số trên gen agarose 1,5%

59

12

Hình 3.6 Sản ph m multiplex PCR của chủng A.flavus DA2 và A. flavus

59

AF14
13

Hình 3.7 Khả năng sinh aflatoxin của chủng A.flavus DA2 sau 5, 10 và 15

61

thế hệ
14

Hình 3.8 Sự tồn tại của các gen aflR, ver, omt và nor của chủng A.flavus

61

DA2 sau 5, 10 và 15 thế hệ
15

Hình 3.9 Đường cong sinh trưởng của chủng A.flavus DA2

65

16

Hình 3.10 Khả năng cạnh tranh của A.flavus DA2 ở các tỷ lệ khác nhau

75

17

Hình 3.11 Khả năng đối kháng của chế ph m A.flavus DA2 ở các thời điểm

78

cấy khác nhau
18

Hình 3.12 Khả năng đối kháng của chủng A.flavus DA2 khi có mặt của

thuốc bảo vệ thực vật

81


vii
19

Hình 3.13 Nấm mốc nhiễm trên đất trồng ngô

83

20

Hình 3.14 Khu n lạc chủng A.flavus phát quang phân lập từ đất trồng ngô

85

được bón chế ph m AF tại xã Tam Hồng, Yên Lạc, Vĩnh Phúc (8/20076/2008)
21

Hình 3.15 Khả năng kiểm soát aflatoxin trên ngô trước thu hoạch của chế

87

ph m AF
22

Hình 3.16 Bắp ngô ở ruộng sử dụng hai lần chế ph m AF

88

23

Hình 3.17 Bắp ngô ở ruộng không sử dụng chế ph m AF

88

24

Hình 3.18 Ngô sử dụng và không sử dụng chế ph m AF sau thời gian bảo

90

quản 6 tháng
25

Hình 3.19 Chủng A. flavus phát quang và không phát quang phân lập trên

92

đất trồng lạc
26

Hình 3.20 Lạc sử dụng và không sử dụng chế ph m AF sau thời gian bảo
quản 6 tháng

94

CL C
Trang
L I

M

N………………………………………………………………………………….……i

L I CAM

OAN.……………………………………………………………………….…………ii

DANH M C CÁC KÝ HI U VÀ CH

VI T T T..………………………………..…………...iii

DANH M C CÁC B NG.………………………………………………………………………..iv
DANH M C CÁC HÌNH NH,

TH ……………………………………………………..…..vi

M

U……………………………………………………………………………………….…...4

CH

NG I. T NG QUAN TÀI LI U................................................................................ 6

1.1 T NG QUAN V AFLATOXIN ................................................................................... 6

1.1.1 C u t o.................................................................................................................... 6
1.1.2 Tính ch t hóa lý...................................................................................................... 7
1.1.3

c tính c a aflatoxin............................................................................................ 8

1.1.4 Th c tr ng nhi m aflatoxin trên ngô, l c ............................................................. 9
1.1.5 Gi i h n aflatoxin cho phép trong nông s n th c ph m .................................. 11
1.2 ASPERGILLUS FLAVUS ......................................................................................... 13
1.2.1

c

m hình thái ............................................................................................... 13

1.2.2 Các y u t
1.2.3

nh h

ng

n s sinh tr

ng c a A. flavus ................................ 15

u ki n sinh aflatoxin ....................................................................................... 16

1.3 PHÒNG CH NG S

NHI M AFLATOXIN............................................................... 19

1.3.1 Bi n pháp canh tác nông nghi p ........................................................................ 19
1.3.2 Bi n pháp sau thu ho ch..................................................................................... 20
1.3.3 Bi n pháp sinh h c .............................................................................................. 21
1.4 PHÒNG CH NG AFLATOXIN B NG CH NG A.FLAVUS KHÔNG SINH
AFLATOXIN ................................................................................................................... 22
1.4.1 C ch ki m soát n m m c và aflatoxin b ng các ch ng A.flavus không sinh
aflatoxin......................................................................................................................... 22
1.4.2 Tuy n ch n các ch ng A. flavus không sinh aflatoxin làm tác nhân
i kháng
....................................................................................................................................... 24
1.5 NGHIÊN C U NG D NG CH PH M N M A. FLAVUS KHÔNG SINH
CT
TRONG PHÒNG CH NG AFLATOXIN ......................................................................... 26
1


1.5.1 S n xu t ch ph m A. flavus không sinh aflatoxin ........................................... 26
1.5.2 ánh giá hi u qu c a ch ph m A. flavus không sinh aflatoxin
quy mô
phòng thí nghi m và nhà kính ..................................................................................... 27
1.5.2 ánh giá hi u qu c a ch ph m A. flavus không sinh aflatoxin
quy mô
ng ru ng.................................................................................................................... 28
1.5.3 ánh giá tác
1.5.4 Các y u t
CH

ng c a ch ph m ....................................................................... 30

nh h

ng

n hi u qu ch ph m................................................. 31

NG II. V T LI U VÀ PH

NG PHÁP NGHIÊN C U......................................... 33

2.1 V T LI U, HÓA CH T VÀ THI T B NGHIÊN C U................................................ 33
2.1.1 V t li u nghiên c u.............................................................................................. 33
2.1.2 Hóa ch t, d ng c nghiên c u............................................................................ 33
2.1.4 Môi tr
2.2 PH

ng nghiên c u ....................................................................................... 34

NG PHÁP NGHIÊN C U............................................................................... 34

2.2.1 Ph

ng pháp l y m u ......................................................................................... 34

2.2.2 Ph

ng pháp phân l p........................................................................................ 35

2.2.3 Sàng l c s

b

các ch ng sinh và không sinh aflatoxin b ng ph

ng pháp

phát quang .................................................................................................................... 36
2.2.4 Phân tích aflatoxin b ng s c ký

n m ng ........................................................ 36

2.2.5 Phân tích aflatoxin b ng s c ký l ng cao áp ..................................................... 36
2.2.6 Nuôi c y n m m c A. flavus cho vi c nghiên c u kh n ng t o aflatoxin ...... 36
2.2.6 Xác nh kh n ng c nh tranh c a các ch ng A. flavus không sinh aflatoxin
i v i ch ng A. flavus sinh aflatoxin......................................................................... 37
2.2.7 Nghiên c u kh n ng t o bào t c a ch ng A. flavus DA2 các
u ki n nuôi
y khác nhau ............................................................................................................... 37
2.2.8 Quy trình nuôi c y n m m c A. flavus DA2

qui mô phòng thí nghi m......... 38

2.2.9 T o ch ph m ch a bào t

ch ng A. flavus DA2 (ch ph m AF)..................... 38

2.2.10

A. flavus trong ch ph m...................................... 38

nh l

2.2.11 Xác

ng m t
nh s

bào t

có m t c a m t s gen trong c m gen mã hóa cho các enzym

tham gia vào quá trình sinh t ng h p aflatoxin c a các ch ng A. flavus b ng k
thu t multiplex PCR...................................................................................................... 38
2.2.12 Th nghi m tính an toàn c a ch ng A.flavus DA2 .......................................... 40
2.2.13 Xác

nh t l gi a ch ng sinh aflatoxin v i ch ng A.flavus DA2 không sinh

aflatoxin......................................................................................................................... 41

2


2.2.14 Xác

nh th i

2.2.15 ánh giá nh h

ms

d ng ch ph m ............................................................ 41

ng c a m t s lo i thu c b o v th c v t.......................... 41

2.2.16 ánh giá s c nh tranh c a A.flavus DA2 trong

t tr ng ngô, l c............... 41

2.2.17 ánh giá hi u qu
ph m AF trên ngô giai

gi m m t
A.flavus sinh
c t và aflatoxin c a ch
n tr c và sau thu ho ch............................................. 42

2.2.18

gi m m t

ánh giá hi u qu

ph m AF trên l c
2.2.19 Ph
CH

giai

ng pháp x

n tr

A.flavus sinh

c t

và aflatoxin c a ch

c và sau thu ho ch .............................................. 43

lý th ng kê s li u: theo ph n m m Microsoft Excel............. 43

NG III. K T QU VÀ TH O LU N...................................................................... 44

3.1 PHÂN L P, TUY N CH N CH NG A. FLAVUS KHÔNG SINH AFLATOXIN LÀM
CH NG S N XU T CH PH M AF.............................................................................. 44
3.1.1 Phân l p các ch ng Aspergillus flavus trên ngô, l c ........................................ 44
3.1.2 Sàng l c các ch ng Aspergillus flavus không sinh aflatoxin........................... 45
3.1.3 Phân lo i các ch ng Aspergillus flavus không sinh aflatoxin phân l p

c 46

3.1.4 Tuy n ch n các ch ng A. flavus không sinh aflatoxin ..................................... 51
3.1.5 ánh giá kh n ng c nh tranh c a các ch ng A. flavus không sinh aflatoxin 53
3.1.6 Ki m tra s có m t m t s gen trong c m gen mã hóa cho các enzym tham
gia vào quá trình sinh t ng h p aflatoxin c a ch ng A. flavus DA2......................... 57
3.1.7 Tính n

nh v kh n ng không sinh aflatoxin c a ch ng A. flavus DA2 ...... 61

3.1.8 ánh giá tính an toàn c a ch ng A. flavus DA2 trên

ng v t thí nghi m ...... 62

3.2 NGHIÊN C U S N XU T CH PH M A. FLAVUS DA2 ........................................ 65
3.2.1 Nghiên c u công ngh nuôi c y b m t s n xu t bào t

ch ng A. flavus DA2

quy mô phòng thí nghi m ............................................................................................ 65
3.2.2 Nghiên c u s n xu t bào t

ch ng A.flavus DA2

quy mô pilot.................... 70

3.2.3 Nghiên c u hoàn thi n ch ph m AF t ch ng A.flavus DA2 .......................... 72
3.3 NGHIÊN C U

NG D NG CH PH M AF............................................................. 75

3.3.1 Nghiên c u

quy mô phòng thí nghi m ........................................................... 75

3.3.2 Nghiên c u

quy mô

ng ru ng ..................................................................... 82

T LU N VÀ KI N NGH ............................................................................................ 95
KI N NGH ..................................................................................................................... 95
TÀI LI U THAM KH O .................................................................................................. 96

3


U
Aflatoxin là nh ng ch t chuy n hóa có
các loài n m m c Aspergillus. Các
nh ng làm gi m giá tr dinh d

c tính cao,

c t này t n t i trong nông s n th c ph m, không

ng c a th c ph m mà còn là m t trong nh ng nguyên nhân

gây nên nh ng c n b nh nguy hi m cho ng
gan, suy dinh d

ng

c sinh t ng h p ch y u b i

i và

ng v t nh viêm gan c p tính, ung th

tr em.

Vi c ki m soát hàm l

ng aflatoxin có m t trong nông s n th c ph m ã

nghiên c u t r t lâu v i nhi u bi n pháp khác nhau, m i bi n pháp
nh

c

m nh t

nh nh ng ch a có bi n pháp nào

t

c

u có nh ng u

c hi u qu nh mong

i. M t

bi n pháp truy n th ng nh x lý sau thu ho ch, ch n t o gi ng cây tr ng kháng n m
sinh aflatoxin… ch cho phép phát hi n n m m c
tri n sinh

n mu n, khi n m m c ã phát

c t và t n t i trong các s n ph m th c ph m. Nh ng n m g n ây, xu h

d ng chính nh ng ch ng n m

i kháng Aspergillus flavus không sinh

nh tranh cao làm tác nhân ki m soát ang
ph m n m Aspergillus flavus
ch ,

giai

ng

c t có tính

c phát tri n và t ra khá hi u qu . Ch

i kháng ã

c nghiên c u, ng d ng và c p b ng sáng

c s d ng r ng rãi trong nông nghi p

m t s qu c gia nh M ,

n

, Trung

Qu c... Ví d : ch ng NRRL 21882 và AF36 do các nhà khoa h c thu c b Nông nghi p
t o ra ã có tác d ng gi m trên 90% hàm l
thu nh n

c các ch ng A. flavus

ng aflatoxin trên ngô và bông.
i kháng không sinh

bi n pháp phân l p truy n th ng d a trên các
ph

ng pháp m i d a trên k thu t PCR ã

c

c t , bên c nh nh ng

m sinh lý, sinh hóa, còn có m t

c phát tri n

h tr cho công vi c sàng

c này. H u h t các gen trong c m gen tham gia vào quá trình sinh t ng h p aflatoxin c a
mm c ã

c sáng t và trình t ADN c a chúng c ng ã

c r t thu n l i cho vi c áp d ng ph

c xác

nh là c s khoa

ng pháp này trong sàng l c các ch ng m c tiêu.

Vi t Nam n m trong mi n khí h u nhi t

i nóng, m là

u ki n r t thu n l i cho

các loài n m m c phát tri n, xâm nhi m vào cây tr ng ngay t giai

n canh tác, trong

su t quá trình b o qu n và ch bi n n u không có bi n pháp ki m soát nghiêm ng t. Cho
n nay,

Vi t Nam ch a có công trình nghiên c u nào v

A. flavus không sinh
khác, kh n ng

ct

phòng ch ng n m m c và

ng d ng các ch ng n m m c
c t aflatoxin trên ngô, l c. M t

i kháng c a các ch ng n m m c không sinh

c t th

ng thay

i theo

u ki n khí h u và h sinh thái t ng vùng nên vi c ng d ng các ch ph m n m
kháng

c s n xu t

n

c ngoài trên

i

ng ru ng Vi t Nam không d dàng và em l i

4


Luận án đầy đủ ở file: Luận án Full