170925 DAVX ppt

CÔNG TY CP THUỐC THÚ Y TRUNG ƯƠNG 5

THUYẾT MINH NHIỆM VỤ KH&CN
THUỘC DỰ ÁN KH&CN VẮC XIN 4 BỆNH Ở GIA CẦM

Tên nhiệm vụ:
Nghiên cứu sản xuất vắc-xin tứ giá quy mô phòng thí nghiệm phòng 4 bệnh ở gia cầm do các chủng vi rút
Newcastle, vi rút Infectious bronchitis, vi rút Infectious bursal disease và vi khuẩn Haemophilus
paragallinarum.

Hà Nội, 2017


CƠ SỞ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ
Đơn vị: Công Ty Cổ Phần Thuốc Thú Y Trung Ương 5 (FIVEVET.,JSC)
Địa chỉ: CCN Hà Bình Phương – Thương Tín – Hà Nội




Chuyên nghiên cứu, sản xuất, kinh doanh các loại thuốc, Vắc xin và Sinh phẩm thú y.
Đội ngũ chuyên gia, nghiên cứu viên, nhiều kinh nghiệm trong nghiên cứu, sản xuất vắc xin và sinh phẩm thú y.

2


Cơ sở vật chất:



Nhà máy sản xuất/phòng kiểm nghiệm/hệ thống kho cho sản xuất vắc xin và sinh phẩm đạt tiêu

chuẩn GMP-WHO/GLP-WHO/GSP-WHO.



Hệ thống trang thiết bị hiện đại, tiên tiến nhất hiện nay.

Tiềm lực tài chính:




Thị phần của Công ty chiếm 7,8% so với các công ty sản xuất thuốc thú y trong nước.
Doanh thu liên tục tăng trưởng 10-15%/năm - đứng TOP 10 doanh nghiệp sản xuất thuốc thú y
tại Việt Nam.


Năng lực quản lý Dự án:



Công ty đã hoàn thành xuất sắc dự án :“Nghiên cứu điều chế thuốc đặc hiệu điều trị bệnh tiêu chảy do vi
khuẩn ở heo”- dự án cấp Quốc gia, theo nghị định 119/1999/NĐ-CP.



Năm 2015: Công ty phối hợp với Viện chăn nuôi nghiên cứu đề tài: “Sản xuất thử 3 chế phẩm thảo dược
IAS-1, IAS-2, IAS-3 dùng để thay thế một phần kháng sinh trong phòng và trị bệnh tiêu chảy cho lợn và gà.



Năm 2017, Công ty được Bộ KH&CN giao thực hiện dự án: “Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm thuốc điều
trị hữu hiệu bệnh do các loại vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae, Pasteurella multocida,
Streptococcus suis gây ra tại đường hô hấp ở lợn”.

Hợp tác:
Hợp tác chặt chẽ với các đơn vị nghiên cứu đầu ngành trong lĩnh vực thú y như Viện thú y Quốc gia, Trung tâm
chẩn đoán thú y trung ương, Viện Công nghệ sinh học… phối hợp với nhiều chi cục các tỉnh, thành phố.


ĐẶT VẤN ĐỀ
Biểu đồ thể hiện số lượng gà cả nước trong 3 năm gần đây
246757.5

55711.2

259295

59767

Năm 2014
Gà đẻ trứng Năm 2015
Tổng số gà

276189

63338

Năm 2016

ĐẶT VẤN ĐỀ
Tình hình một số dich bệnh trên gia cầm năm 2016
TT

Dịch bệnh

Số tỉnh, thành phố có
bệnh

Số ốm (con)

Số chết, xử lý (con)

1

Cúm gia cầm

7

9.956

9.956

2

Bệnh Newcastle

17

63.673

17.656

3

Bệnh Gumboro

10

59.740

11.729

4

Tụ huyết trùng

18

99.039

19.921

5

Bệnh CRD

4

42.040

1.611


Vắc xin đơn giá và đa giá

Vắc xin đơn giá

 Tạo được miễn dịch nhanh
 Hiệu giá bảo hộ cao
 Thời gian miễn dịch lâu hơn
 Tốn nhiều công lao động, gây stress cho vật nuôi, tổng chi
phí cho vắc xin cao hơn, … dẫn đến giảm hiệu quả kinh tế
trong chăn nuôi.

Vắc xin đa giá

 Miễn dịch chậm hơn
 Hiệu giá bảo hộ thấp hơn
 Thời gian miễn dịch ngắn hơn
 Tiêm 1 mũi/1 loại vắc xin có thể phòng được nhiều bệnh
cho vật nuôi

 Giảm chi phí cho công lao động để tiêm phòng
 Hạn chế tác động đến vật nuôi


Một số loại vắc xin vô hoạt, đa giá dùng cho gà

STT

Tên vắc xin

Thành phần

1

ITA ND+IBD (Laprovet – Pháp)

ND: Chủng Lasota; IBD: chủng GP

2

Bursine NK ( Zoetis)

ND: chủng Kimber; IBD: chủng Luckert

3

Virsin 437L (Biovac Ltd)

ND: chủng VH; IC: serotype A, B, C

4

TALOVAC 201 IB/ND (Immunovet)

ND: chủng Terumo; IB: Chủng Mass 41

5

IC+NDV ( Phibro-Israel)

Nobilis IB multi ND EDS
6

IC: serotype A, C (A-221; C2-Modesto)
ND: chủng Clone 30;
IB: chủng M41và chủng D274;

( Inetrvet-Hà Lan)

7

ND: chủng VH;

Gallimune 405 ( Rhone ma – Malaysia)

EDS:chủng BC 14
ND: Ulster 2C ; IB: Mas41;
IC:serotype A, C
ND: chủng Lasota;

8

Cevac Corymune 7K

IB: Massachussetts; EDS: B8/78;
IC: serotype A, B, C;
Salmonella:  chủng Enteritidis

ND: chủng Lasota;

9

Cevac ®ND - IB - IBD - EDS K

IB: chủng Massachusetts; IBD: GP classical;
EDS: chủng B8/78


DỰ ÁN SẢN XUẤT VẮC XIN TỨ GIÁ
Quyết định số 3469/QĐ-BKHCN ngày 07/12/2017 của Bộ trưởng bộ KHCN về việc điều chỉnh Danh mục dự án khoa học công nghệ và các nhiệm vụ
thuộc dự án KH&CN thuộc sản phẩm quốc gia "Sản xuất vắc-xin phòng bệnh cho vật nuôi của Việt Nam"

Dự án KH&CN: Vắc-xin tứ giá phòng 4 loại bệnh ở gia cầm: bệnh Newcastle do vi rút Newcastle (ND), bệnh viêm
phế quản truyền nhiễm do vi rút Infectious bronchitis (IB), bệnh Gumboro do tác nhân vi rút Infectious bursal disease
(IBD), và bệnh sổ mũi truyền nhiễm do vi khuẩn Haemophilus paragallinarum.

Đề tài: Nghiên cứu sản xuất vắc-xin tứ giá quy mô phòng thí nghiệm phòng 4 bệnh ở gia cầm do các chủng vi
rút Newscastle, vi rút Infectious bronchitis, vi rút Infectious bursal disease và vi khuẩn Haemophilus
paragallinarum.


ĐẶC ĐIỂM CƠ BẢN CỦA VI RÚT ND, IB, IBD VÀ VI KHUẨN IC

Tên bệnh

Đối tượng gà

Tỷ lệ nhiễm (%)

Tỷ lệ chết (%)

Mọi lứa tuổi

60-80%

80-100%

Gà < 6 tuần tuổi; Gà đẻ trứng

50-100%

0-25%

100%

20-50%

20-50%

5-20%

Newcastle

Viêm phế quản truyền nhiễm

Gumboro
3-6 tuần tuổi

Viêm mũi truyền nhiễm (Phù đầu
gà)

Mọi lứa tuổi, tăng nặng theo
tuổi gà


Vi rút Newcastle
Family Paramyxoviridae
Genus Avulavirus

9 serotypes
APMV-1 đến APMV-9

NDV thuộc APMV-1:
Lentogenic (Chủng độc lực thấp)
Mesogenic (chủng độc lực vừa)
Velogenic (chủng độc lực cao)
Vi rút Newcastle có 9 Genotype, tuy nhiên, đều cùng thuộc 01 serotype duy nhất


Vi rút Infectious bronchitis

 Họ Coronaviridae.
 Giống Coronavirus
 Nhóm I, II, III
 IBV thuộc nhóm III.
Có rất nhiều serotypes khác nhau được phát hiện, các serotypes không có miễn dịch
chéo cho nhau.

Vi rút Infectious bronchitis

ss(+) RNA vi rút, bao gồm


Vi rút Infectious Laryngotracheitis
- DNA vi rút, genome 150 Kb
- Anphaherpesvirus Gallid herpesvirus 1 (GaHV – 1) , nhóm Herpesviridae.

Herpesviridae, VirolZone 2017


Vi rút Infectious Laryngotracheitis


Vi khuẩn H. paragallinarum

 Gram âm, đa hình thái với dạng trực khuẩn ngắn, cầu trực khuẩn hay dạng sợi, không di
động, hiếu khí.

 Có serogroup A, B, C, và 3 nhóm này không có miễn dịch chéo hoàn toàn cho nhau.
 Vắc xin mang 2 serotype A và C có thể bảo hộ chéo 1 số chủng của serotype B nhưng lại
không có tác dụng đối với 1 số chủng khác.


NHỮNG VẤN ĐỀ CẦN GIẢI QUYẾT

1. Lựa chọn thành phần kháng nguyên

Vắc xin tứ giá phòng bệnh do vi rút

2. Xác định tỷ lệ các loại kháng nguyên

ND, IB, ILT và vi khuẩn IC gây ra

3. Lựa chọn chất bổ trợ

4. Quy trình sản xuất

5. Thiết lập dây chuyền sản xuất thương mại


1. Lựa chọn thành phần kháng nguyên

Vắc xin tứ giá phòng bệnh do vi rút

2. Xác định tỷ lệ các loại kháng nguyên

ND, IB, ILT và vi khuẩn IC gây ra

3. Lựa chọn chất bổ trợ

4. Quy trình sản xuất

5. Thiết lập dây chuyền sản xuất thương mại


MỤC TIÊU

Tạo được giống gốc vắc-xin (Master seed) (ND, IB, ILT, IC) đạt các tiêu chuẩn về ổn
định di truyền, kháng nguyên và tính sinh miễn dịch phù hợp với các chủng phổ biến
đang lưu hành tại Việt Nam đạt tiêu chuẩn dùng sản xuất vắc-xin.

 Tính kháng nguyên ổn định
 Tính sinh miễn dịch phù hợp với các chủng phố biến đang lưu hành tại Việt Nam (có khả năng bảo hộ gia
cầm với các chủng đang lưu hành tại thực địa)

 Ổn định về mặt di truyền.


NỘI DUNG THỰC HIỆN

20


NỘI DUNG 1. NGHIÊN CỨU CHỌN CHỦNG VÀ TẠO CHỦNG GIỐNG SẢN XUẤT VẮC XIN

Mục đích: Thiết lập bộ chủng vi rút ND, IB, IBD và vi khuẩn H.paragallinarum đáp ứng đủ các tiêu chuẩn để sản
xuất vắc xin.

 Bộ chủng vi rút (ND, IB, IBD):
• Tiếp nhận các chủng vi rút từ các trung tâm nghiên cứu;
• Tạo bộ chủng thực địa (Để chuẩn bị cho việc dự phòng và nâng cấp vắc xin tứ giá)
 Tạo chủng vi khuẩn H.paragallinarum
• Tiếp nhận các mẫu bệnh phẩm nghi dương tính, chủng đã phân lập được
• Tạo chủng từ mẫu bệnh phẩm thu thập các ổ dịch tự nhiên thực địa
• Nhập 2 chủng từ ATCC để làm đối chiếu

21

NỘI DUNG 1. NGHIÊN CỨU CHỌN CHỦNG VÀ TẠO CHỦNG GIỐNG SẢN XUẤT VẮC XIN

Bệnh phẩm từ mẫu nghi mắc bệnh tại thực địa
Mẫu dương tính/ nghi dương tính tại các đơn vị phối hợp: Viện Thú y, TTCĐ

Phân lập trên môi trường thích hợp

Giám định

chọn lọc các chủng vi sinh vật đại diện

22


NỘI DUNG 1.2.
NGHIÊN CỨU ĐẶC TÍNH CHỦNG GIỐNG VI RÚT, VI KHUẨN

Nghiên cứu đặc tính kháng nguyên của các chủng vi rút, vi khuẩn

 Nghiên cứu khả năng nhân lên trên môi trường thích hợp
Vi rút ND: Trứng gà có phôi/tế bào
Vi rút IB: Trứng gà có phôi/tế bào
Vi rút IBD: tế bào
Vi khuẩn IC: Thạch sô cô la/chicken meat infusion

 Xác định các chỉ số như hiệu giá vi rút, số lượng vi khuẩn, độc lực, …
 Nghiên cứu đặc tính di truyền
 Nghiên cứu chỉ tiêu an toàn trên động vật thí nghiệm

 Nghiên cứu các chỉ tiêu vô trùng, thuần khiết của giống
 Nghiên cứu đặc tính sinh miễn dịch
 Nghiên cứu điều kiện bảo quản, độ ổn định của giống.
23


NỘI DUNG 2 (tiếp)
2.2. Nghiên cứu đặc tính di truyền
Giải trình tự gene đại diện và so sánh với các trình tự gene đã công bố trên ngân hàng gene
(GenBank)
Loại vsv

Gene

Coding

Độ dài

Số lượng chủng

 Virus Newcastle

F gene

Fusion protein

1,6 Kb

30 chủng

 

Genome

 

15 Kb

5 chủng

 Vi rút IB

S1

Spike protein

1,7 Kb

30 chủng

 

Genome

 

27 Kb

5 chủng

Vi rút ILT (150 Kb)

UL 27

Glycoprotein B

1,6 Kb

30 chủng

 

US 6

Glycoprotein D

2,8 Kb

30 chủng

Vi khuẩn (2.47 Mb)

HMTp210 (region 2)

HA protein

1,6 bp

30 chủng

24


NỘI DUNG 2 (tiếp)
2.3. Chỉ tiêu an toàn của các chủng lựa chọn
Bất hoạt: Formaldehyde, BEI, Beta-propiolaton:
Tiêm kháng nguyên cho gà thí nghiệm với hiệu giá vi rút ít nhất gấp 2 lần so với liều vắc
xin
2.4. Tính sinh miễn dịch

Vi rút vô hoạt

Vi rút ND: HI
Vi rút IB: Elisa/Trung hòa
Vi rút ILT: Elisa/Trung hòa
Vi khuẩn IC: Elisa

Huyết thanh
25