tiểu luận ung thu vú

MỞ ĐẦU
Ung thư vú là một trong những khối u ác tính thường gặp nhất ở phụ nữ. là nguyên
nhân tử vong cao ở phụ nữ trên toàn thế giới.
Ung thư học phân tử bây giờ là một trong các lĩnh vực hứa hẹn nhất có thể góp
phần đáng kể vào chẩn đoán ung thư vú di căn. Nó giải quyết vấn đề lớn với việc
phát hiện sớm, chính xác dàn dựng, và theo dõi bệnh nhân ung thư vú.
Mục tiêu tổng thể của các nghiên cứu khả thi đã góp phần cải thiện chẩn đoán, tiên
lượng và dự báo bệnh ung thư vú thông qua sự phát triển của các chất phản ứng và
các giao thức cho việc sử dụng tiến bộ sinh học phân tử và các đánh giá về tiềm
năng tương đối của các thủ tục chẩn đoán để phát hiện và định lượng nhiều mRNA
cụ thể chỉ điểm khối u. Các công nghệ mới nhất của phân tử như TaqMan định
lượng thời gian thực
Xét nghiệm RT-PCR, phân tích microarray,và sản xuất của "in-house" mảng đã
được bao gồm trong nghiên cứu. Mô, máu và các mẫu tủy xương được lấy từ ca
phẫu thuật của khẳng định và nghi ngờ bệnh nhân ung thư vú.
Xét nghiệm TaqMan được thực hiện trong sáu đánh dấu mRNA: MAGE 3, HER2 /
NEU, MGB 1, CK 20, PSA, và HPR. Mật độ thấp mảng nylon với 265 gen cố định
trong tế bào để tương tác tế bào đã được sử dụng cho phân tích microarray. Ba gen
cao quá mức từ phân tích microarray và điều khiển âm được chọn để tùy chỉnh
đốm trên màng nylon để sản xuất "trong-nhà"mảng. Đó là kết luận rằng xét nghiệm
TaqMan có thể dễ dàng thiết kế và thực hiện cho trình chiếu một số lượng lớn các
mẫu lâm sàng khi bao gồm cả điều khiển lựa chọn cẩn thận, RNA độ tinh khiết cao
từ các mẫu, và một tập hợp các dấu mRNA.
Màng tùy chỉnh có thể được sản xuất kết hợp nhiều dấu mRNA chọn. Nó là đề
nghị kiểm tra ban đầu của các mẫu sinh học có thể được thực hiện bằng microarray
phân tích và mẫu dương tính cá nhân có thể được khẳng định bằng các xét nghiệm
bổ sung sử dụng thời gian thực TaqMan lượng xét nghiệm.
GIỚI THIỆU
Ung thư vú là sự hình thành của một khối u ác tính phát triển từ tế bào trong vú.
Hiện tại Ung thư vú vẫn tiếp tục là một trong những bệnh ung thư phổ biến nhất và
là nguyên nhân chính tử vong ở phụ nữ trên toàn thế giới.

Theo số liệu thống kê hiện hành của Trung tâm Kiểm soát và Phòng ngừa dịch
bệnh Mỹ, ung thư vú là loại ung thư phổ biến nhất ở phụ nữ Hoa Kỳ (không bao
gồm ung thư da) chiếm 32 %của tất cả các loại ung thư ở phụ nữ.
Ung thư vú chiếm 18% các ca tử vong ung thư ở phụ nữ và là thứ hai chỉ sau ung
thư phổi. Viện Ung thư Quốc gia Hoa Kì ước tính rằng cứ 8 phụ nữ thì sẽ có 1 phụ
nữ (khoảng 13,3%) sẽ phát triển ung thư vú trong suốt cuộc đời mình.
Ước tính này dựa trên tỷ lệ ung thư từ năm 1997 đến 1999 . ở Hoa Kỳ ước tính
rằng trong năm 2003 khoảng 211.300 trường hợp mới về ung thư vú sẽ được chẩn
đoán ở phụ nữ tại Hoa Kỳ (3800 những trường hợp sẽ được chẩn đoán ở
Louisiana). Ước tính có khoảng 39.800 phụ nữ sẽ chết vì ung thư vú (700 phụ nữ
sẽ chết ở Louisiana). Người ta ước tính rằng khoảng 1.300 người sẽ được chẩn
đoán và 400 người đàn ông chết vì ung thư vú trong năm 2003 (2).
Các loại ung thư vú
Mỗi vú có15-20 phần được gọi là thùy, trong đó có nhiều phần nhỏ hơn gọi là tiểu
thùy.Các thùy và thùy được nối với nhau bằng ống nhỏ, gọi là ống dẫn (Hình 1).
Các loại phổ biến nhất của ung thư vú là ung thư tuyến vú.Nó được tìm thấy trong
các tế bào của ống dẫn. Ung thư bắt đầu trong thùy hoặc thùy được gọi là ung thư
tiểu thùy. Nó được tìm thấy thường xuyên hơn trong cả hai vú so với các loại ung
thư vú.
Ung thư cũng được phân loại là không xâm lấn (in situ) và xâm lấn (xâm nhập).
Các thuật ngữ trong situ là dạng ung thư không có lây lan qua các khu vực nơi mà
nó ban đầu được phát triển. Ung thư vú xâm lấn có xu hướng lây lan (di căn) tới
các mô khác của vú và / hoặc các khu vực khác của cơ thể. Một ít
Loại phổ biến của bệnh ung thư vú là ung thư vú viêm đặc trưng bởi chung viêm
vú. Loại quý hiếm của ung thư vú là ung thư tuỷ (một ung thư vú xâm lấn tạo một
ranh giới khác biệt giữa mô khối u và bình thường mô), ung thư biểu mô nhầy
(được tạo thành bởi các tế bào ung thư sản xuất chất nhầy), ốngung thư biểu mô,
vv (3).

Hình 1: Cấu trúc của vú nữ

Các yếu tố nguy cơ ung thư vú
Mọi phụ nữ đều có nguy cơ phát triển ung thư vú. Một số nguy cơ tương đối mạnh
các yếu tố đối với ung thư vú có ảnh hưởng đến tỷ lệ lớn dân số nói chung đã được
được biết đến trong một thời gian. Tuy nhiên, đại đa số các trường hợp ung thư vú
xảy ra ở phụ nữ người không có yếu tố nguy cơ mang tính chất khác với giới tính
Các "thành lập" các yếu tố nguy cơ ung thư vú là giới tính nữ, tuổi tác, trước ung
thư vú, bệnh vú lành tính, yếu tố di truyền (sử gia đình bị ung thư vú), tuổi có kinh
nguyệt sớm tại, tuổi muộn vào thời kỳ mãn kinh, tuổi muộn vào thời kỳ mang thai
đủ tháng đầu tiên,béo phì sau mãn kinh, hoạt động thể chất thấp, chủng tộc / dân
tộc và liều cao thuốc tiếp xúc với bức xạ ion hóa sớm trong cuộc sống.
Các "suy đoán" các yếu tố nguy cơ ung thư vú bao gồm không bao giờ có được
mang thai, chỉ có một lần mang thai chứ không phải là nhiều, không cho con bú
sau khi mang thai, sử dụng liệu pháp thay thế estrogen sau mãn kinh hoặc mãn
kinh hormone (estrogen / progestin) liệu pháp thay thế, sử dụng thuốc tránh thai, cụ
thể nhất định cách ăn uống (ăn nhiều chất béo và các cửa lấy thấp của chất xơ, trái
cây và rau quả, thấp lượng phytoestrogen), uống rượu, hút thuốc lá, và phá thai.
Mặc dù người đàn ông có thể và làm phát triển ung thư vú, bệnh này là hơn 100 lần
có thể xảy ra ở một người phụ nữ hơn ở một người đàn ông (10). Phụ nữ có nguy
cơ cao bị ung thư vú bởi vì họ có nhiều hơn nữa các mô vú hơn so với nam giới.
Ngoài ra, estrogen thúc đẩy sự phát triển của ung thư vú.
Nguy cơ ung thư vú là ở phụ nữ trung niên và người già cao hơn so với trẻ phụ nữ
Nguy cơ này tăng lên khi một người phụ nữ lứa tuổi, tăng mạnh sau tuổi 40. ở Hoa
Kỳ, hơn 3/4 tất cả các bệnh ung thư vú xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi 50 hoặc trở
lên.
Một người phụ nữ trước đây đã bị ung thư vú có từ ba đến bốn lần tăng nguy cơ
phát triển ung thư mới ở vú khác.Những phụ nữ có vú lành tính vấn đề này cũng có
nguy cơ cao, nhưng đến một mức độ thấp hơn. Nguy cơ ung thư vú cao hơn ở
những phụ nữ có quan hệ huyết gần (mẹ, chị gái, hay con gái) ngườiđã có bệnh.
Sự gia tăng nguy cơ đặc biệt cao nếu so vú phát triển ung thư trước tuổi 50 hoặc
trong cả hai vú (14). Tuy nhiên, hầu hết những người phụ nữ có vú ung thư

(khoảng 80 %) không có tiền sử gia đình như của bệnh (15). Các ảnh hưởng của
lịch sử gia đình về nguy cơ ung thư vú được cho là do chủ yếu để di truyềnyếu tố.
Càng nhiều càng 5-10 % của tất cả các trường hợp ung thư vú là do cụ thể đột biến
đơn gen di truyền, và nhiều trường hợp khác có một số thành phần di truyền. các
bằng chứng từ các gia đình cá nhân, trong đó ung thư vú xảy ra rất thường xuyên
và từ các nghiên cứu dịch tễ học lớn đã chỉ ra rằng một số phụ nữ có khuynh
hướng gia đình đến ung thư vú.Các bằng chứng bao gồm phả hệ của gia đình
Broca (16). Ông là một Bác sĩ phẫu thuật nổi tiếng của Pháp (1824-1880), và trong
cây gia đình của mình (bao gồm hơn năm thế hệ) 10 trong số 24 phụ nữ chết vì ung
thư vú.
Các nghiên cứu dịch tễ học đã chỉ ra rằng phụ nữ có tiền sử gia đình của mẹ bị ung
thư, nguy cơ ung thư vú tăng từ hai đến ba lần. Các nghiên cứu cũng đã chỉ ra rằng
có gia đình, trong đó có nguy cơ ung thư vú là do di truyền trong một nhiễm sắc
thể thường chiếm ưu thế thời trang ('ung thư vú di truyền'). Gần đây, nó đã được
chứng minh rằng những đột biến dòng mầm trong chiếm các gen BRCA1 và
BRCA2 cho một tỷ lệ lớn các trường hợp vú di truyền ung thư (17). Kết quả mô
bệnh học và khám cẩn thận khám nghiệm tử thi đã đóng vai trò quan trọng trong sự
công nhận của nhiều hội chứng ung thư gia đình (18). Ngoài đột biến ở gen
BRCA1 và BRCA2, có khuyết tật di truyền như chưa xác định được mà hưởng đến
sự phát triển ung thư vú (19), và các nghiên cứu bổ sung có thể giúp đỡ trong xác
định những gen này trong tương lai.
Những người phụ nữ đạt kinh nguyệt ở độ tuổi tương đối sớm (12 tuổi trở xuống)
và những người đã đạt đến thời kỳ mãn kinh ở độ tuổi khá muộn (55 tuổi trở lên) là
hơi nhiều hơn phụ nữ khác để phát triển ung thư vú.Những mối quan hệ được cho
là qua trung gian qua estrogen sản xuất .Trong độ tuổi sinh sản, cơ thể của một
người phụ nữ sản xuất nồng độ estrogen cao. Những người phụ nữ bắt đầu có kinh
ở độ tuổi sớm và / hoặc đạt mãn kinh ở độ tuổi muộn được tiếp xúc với nồng độ
estrogen cao trong nhiều năm hơn là những phụ nữ có một kinh nguyệt trễ hoặc
mãn kinh sớm.
Tuổi tại thời kỳ mang thai đầu tiên cũng ảnh hưởng đến nguy cơ ung thư vú.

Những phụ nữ có thai đủ tháng đầu tiên của họ ở mức tương đối nhỏ có nguy cơ
thấp hơn của bệnh ung thư vú so với những người không bao giờ có con hoặc
những người người có đứa con đầu tiên của họ tương đối muộn trong cuộc sống
(13). Cơ sở sinh học cho mối quan hệ này không phải là hoàn toàn rõ ràng.
Béo phì đã được thống nhất liên quan với tăng nguy cơ ung thư vú ở phụ nữ sau
mãn kinh (21; 22).Mối quan hệ này có thể được trung gian bởi một lần nữa sản
xuất estrogen. Các tế bào mỡ sản xuất một số estrogen và phụ nữ sau mãn kinh bị
béo phì,Do đó, xu hướng có mức độ estrogen trong máu cao hơn so với phụ nữ
gầy.
Các nghiên cứu đã liên tục chỉ ra rằng nguy cơ ung thư vú thấp hơn giữa thể
chất phụ nữ tiền mãn kinh đang hoạt động hơn so với những phụ nữ ít vận động.
hoạt động thể chất trong thời niên thiếu có thể đặc biệt bảo vệ, và hiệu quả của
hoạt động thể chất có thể mạnh nhất trong số những người phụ nữ có ít nhất một
lần mang thai đủ tháng.
Các nghiên cứu về đặc điểm dân tộc / chủng tộc của ung thư vú cho thấy Tây Ban
Nha phụ nữ da trắng, Hawaii, và màu đen có mức cao nhất của nguy cơ ung thư
vú. Khác Đoàn Châu Á / Thái Bình Dương và phụ nữ Tây Ban Nha có mức thấp
hơn rủi ro. Một số mức thấp nhất rủi ro xảy ra ở những phụ nữ Hàn Quốc và Việt
Nam
Những phụ nữ được tiếp xúc với liều cao của bức xạ, đặc biệt là trong tuổi vị thành
niên, có nguy cơ gia tăng ung thư vú. Hiệp hội này đã được quan sát cả những
người sống sót bom nguyên tử và trong số những người phụ nữ đã nhận được bức
xạ liều cao cho mục đích y tế
Parity (có con) và độ tuổi của người phụ nữ khi sinh con đầu lòng là những yếu tố
nội tiết tố nội sinh khác ảnh hưởng đến ung thư vú. Những phụ nữ có không bao
giờ có con có nguy cơ lớn hơn cho sự phát triển của ung thư vú hơn những phụ nữ
đã có con
Cũng có bằng chứng minh mang thai từ trước 30-35 tuổi làm giảm nguy cơ ung
thư vú.nhũng người mang thai nhiều lần có thể ít có khả năng phát triển ung thư vú
so với những người có chỉ một lần mang thai.Những người có con mà ko cho con

bú thì cũng tăng nguy cơ ung thư cao
Các nghiên cứu khác, tuy nhiên, chỉ ra rằng có thể có ít hoặc không có mối quan hệ
giữa cho con bú và nguy cơ ung thư vú. Nếu cho con bú không bảo vệ chống lại
bệnh ung thư vú, nó có thể làm như vậy bằng cách trì hoãn việc nối lại rụng trứng
(có kèm theo các estrogen cao cấp) sau khi mang thai. Dài hạn (hơn năm năm) sử
dụng liệu pháp estrogen sau mãn kinh (ERT) hoặc kết hợp liệu pháp estrogen /
progestin thay thế hormone (HRT) có thể được liên quan với tăng nguy cơ ung thư
vú . Các mối liên hệ giữa việc sử dụng thuốc tránh thai và ung thư vú đã được
nghiên cứu. Nhiều nghiên cứu cố gắng liên kết với các thuốc tránh thai tăng lên vú
ung thư đã không thể kết luận. Nhưng những nghiên cứu này đã chỉ ra rằng thuốc
tránh thai không có một ảnh hưởng lớn đến nguy cơ ung thư vú. Cho dù họ có một
tác động nhỏ về nguy cơ là chưa rõ ràng.
Một mối quan hệ có thể có giữa ung thư vú và chế độ ăn uống đã được đề xuất do
các biến thể của bệnh ung thư vú ở những xã hội có chế độ ăn quốc gia khác nhau
(mức cao trong Các nước công nghiệp phương Tây và lãi suất thấp ở châu Á, Mỹ
Latin và châu Phi). Một so sánh chay so với phụ nữ ăn thịt được sản xuất kết quả
không thuyết phục. không mối quan hệ giữa nguy cơ ung thư vú và chất béo, chất
béo bão hòa, cholesterol hoặc đã được tìm thấy. Một số tác dụng một khi được quy
cho sự hấp thụ chất béo chế độ ăn uống có lẽ là do béo phì (mà thường được liên
kết với lượng chất béo cao) chứ không phải là để hấp thụ chất béo mỗi se. và ảnh
hưởng của chất xơ, trái cây và rau quả giờ đây có vẻ là nhỏ, tốt nhất. Chế độ ăn
nhiều trái cây và rau quả, ít chất béo và calo là lành mạnh vì nhiều lý do, và
họ có thể gián tiếp làm giảm nguy cơ ung thư vú bằng cách giúp ngăn ngừa
bệnh béo phì.Chất thực vật tên là isoflavone (đôi khi được gọi là phytoestrogens)
là thường được tìm thấy trong các sản phẩm đậu nành. Nó đã được suy đoán rằng
những chất này có thể đượcbảo vệ chống lại bệnh ung thư vú .Họ xuất hiện để có
hiệu ứng tương tự như của estrogen trong một số mô trong khi làm mếch lòng các
tác động của estrogen trong các mô khác.
Uốngrượu và hút thuốc lá cũng làm tăng nguy cơ ung thư vú .hút thuốc lá làm
tăng nguy cơ ung thư sẽ tiến triển nhanh hơn. Trong một số nghiên cứu, mang thai

sẽ làm gia tăng nguy cơ ung thư vú vì Trong thời kỳ mang thai không đầy đủ, vú
chỉ được tiếp xúc với nồng độ estrogen cao của đầu thai kỳ và do đó có thể phải
chịu trách nhiệm cho thấy nguy cơ gia tăng ở những phụ nữ này.
Tuy nhiên, một số nghiên cứu khác cho thấy không có mối liên hệ giữa việc phá
thai và làm tăng nguy cơ ung thư vú
Các giai đoạn của ung thư vú
Chuẩn đoán ung thư vú dựa vào kích thước lâm sàng và mức độ xâm lấn của khối
u nguyên phát (T), sự vắng mặt lâm sàng hoặc sự hiện diện của sờ thấy hạch bạch
huyết ở nách và bằng chứng về cuộc xâm lược của địa phương (N), cùng với các
bằng chứng lâm sàng và hình ảnh của di căn xa (M). Điều này sau đó được dịch
sang
Phân loại TNM đã được chia thành giai đoạn 0 được gọi là ung thư biểu mô tại chỗ
(ung thư tiểu thùy tại chỗ (LCIS) và ung thư biểu mô tuyến vú tại chỗ (DCIS) và
bốn rộng loại của Liên minh Quốc tế Trung tâm Ung thư (UICC), trong đó như
sau.
Giai đoạn I - ung thư vú giai đoạn đầu nơi khối u nhỏ hơn 2 cm khác đã không lan
rộng ra khỏi vú.
Giai đoạn II - ung thư vú giai đoạn đầu nơi khối u hoặc là ít hơn 2 cm trên
và đã lan đến các hạch bạch huyết dưới cánh tay; hoặc các khối u là giữa 2 và 5 cm
(với hoặc không lây lan đến các hạch bạch huyết dưới cánh tay); hoặc các khối u
lớn hơn 5 cm và chưa lan rộng ra bên ngoài vú.
Giai đoạn III - ung thư vú tiến triển nơi khối u lớn hơn 5 cm qua và đã lan đến các
hạch bạch huyết dưới cánh tay; hoặc các bệnh ung thư phổ biến trong các các hạch
bạch huyết dưới nách; hoặc ung thư đã lan đến các hạch bạch huyết gần xương ức
hoặc mô khác gần vú.
Giai đoạn IV - ung thư vú di căn, ung thư đã lan ra ngoài vú đến các cơ quan khác
trong cơ thể.
Quá khứ và tương lai của Breast Cancer Detection
Nâng cao nhận thức ,tự kiểm tra giúp phát hiện ung thu vú sớm .
Những cải tiến trong nhũ ảnh thông thường (một kỹ thuật x-ray hình dung cấu trúc

bên trong của vú) như liều lượng bức xạ thấp, tăng cường chất lượng hình ảnh,
phát triển các kỹ thuật thống kê để giải thích máy tính hỗ trợ của hình ảnh, đường
dài, công nghệ truyền hình ảnh điện tử (telemammography / teleradiology) để tham
vấn lâm sàng, cải tiến kỹ thuật hình ảnh hướng dẫn hỗ trợ với sinh thiết vú (loại bỏ
các tế bào hoặc mô để kiểm tra dưới kính hiển vi) tiếp tục giảm tỷ lệ mắc và tỷ lệ
tử vong của ung thư vú. Sự hỗ trợ của nghiên cứu trên công nghệ không sử dụng x-
quang và không được sử dụng cho thói quen tầm soát ung thư vú, chẳng hạn như
hình ảnh cộng hưởng từ (MRI), siêu âm, và cho con cụ thể positron
Chụp cắt lớp phát xạ (PET) có thể đóng một vai trò đáng kể trong việc cải thiện
hơn nữa của ung thư vú phát hiện sớm. Trong hầu hết các trường hợp, các bệnh
ung thư vú được phát hiện sớm, càng tốt tỷ lệ sống.
Ngày nay nhũ ảnh là phương pháp tốt nhất để phát hiện ung thư vú ở giai đoạn
sớm nhất, có thể điều trị nhất của mình - trung bình là 1,7 năm trước khi người phụ
nữ có thể cảm nhận được sự một lần. Nói chung, điều trị có hiệu quả nhất trước khi
bệnh lây lan. Khi vú ung thư được chẩn đoán ở giai đoạn sớm, tỷ lệ sống 5 năm là
hơn 90%. tỷ lệ này giảm xuống còn dưới 50% khi bệnh đã lây lan đến các hạch
bạch huyết và ít hơn 20% khi nó đã lan rộng đến các cơ quan xa.
Phát hiện sớm và điều trị phẫu thuật, tuy nhiên tỷ lệ tử vong do ung thư vú đã thay
đổi rất ít .các tế bào ung thư di căn có thể xảy ra ở giai đoạn đầu của ung thư có thể
hoạt động hoặc nó thường được bỏ qua bởi khối u thông thường. Các sự thành
công của việc tầm soát nhũ ảnh thường xuyên cho bệnh ung thư vú là nó liên quan
đến càng có nhiều bệnh nhân có khối u tiểu học nhỏ trước đây cho rằng có một
tổng thể tiên lượng tốt.
Tuy nhiên, chỉ có khoảng 2/3 trong số những bệnh nhân này được chuẩn đoán
thuận lợi trong khi phần còn lại phát triển bệnh di căn.Như vậy, có bằng chứng mới
rằng các tế bào khối u có thể phổ biến thành các cơ quan trung tại một đầu giai
đoạn phát triển của khối u chính đánh giá cao hơn so với các phân loại rủi ro hiện
tại. đó là một số thách thức cần phải được giải quyết trong một nỗ lực để tiếp tục
giảm tỷ lệ tử vong liên quan đến bệnh này.
Ung thư học phân tử hiện đang là một trong những lĩnh vực hứa hẹn nhất,

trong đó có thể giải quyết những vấn đề lớn với việc phát hiện sớm và dàn chính
xác những phụ nữ có vú ung thư.
Sự xuất hiện của, kỹ thuật phân tử rất nhạy cảm, chẳng hạn như các chuỗi
polymerase, phản ứng (PCR), cho phép phát hiện các tế bào tuần hoàn khối u và di
căn nhỏ ở mức độ phân tử.
Xét nghiệm PCR dựa trên được sử dụng để phát hiện các tế bào khối u trong bạch
huyết nút, cắt bỏ rìa, tủy xương và máu. Các phương pháp để phát hiện di căn và
lưu thông các tế bào khối u ở cấp độ phân tử gồm hai loại: những phát hiện soma
các sự kiện như đột biến điểm hoặc sắp xếp lại nhiễm sắc thể, và những người có
công phát hiện biểu hiện của mRNA cụ thể khối u. Cả hai phương pháp đã được áp
dụng để phát hiện các nhiều loại khối u khác nhau.
Các hạn chế chính của phương pháp đầu tiên là không phải tất cả khối u chứa đột
biến thích hợp cho khuếch đại PCR.Đối với phương pháp thứ hai để làm việc, các
marker phân tử phải được phiên mã tăng trong các tế bào ác tính và không có trong
tế bào hoặc mô xung quanh.
Gene khuếch đại quá mức là một sự kiện thông thường trong tiến trình phát triển
ung thư, qua đó giúp đánh giá và phân tử, chẩn đoán, tiên lượng vàđưa gia hướng
điều trị thích hợp Việc hoàn thành bản đồ gen người cũng như một số lượng lớn
các thông tin về các hoạt động phiên mã trong các tế bào ung thư cho phép lựa
chọn các mốc cụ thể để phát hiện các tế bào ung thư.
Các marker tiên lượng lý tưởng là một trong đó mô tả rõ rang một nhóm tiên lượng
đặc biệt, được cụ thể, có độ nhạy cao, không tốn kém và dễ thực hiện trên một số
lượng nhỏ mô tươi hoặc cố định.Không có dấu hiệu như vậy tồn tại, nhưng một số
dấu hiệu tiên lượng tiềm năng đã được nghiên cứu rộng rãi.
Nhiều protein đã được tìm thấy là đặc biệt quá mức trong một số loại khối u (tức
là Her2neu, PSA, p53, PRB, u ác tính kháng nguyên, vv).Phát hiện và định lượng
các chỉ điểm khối u tiềm năng sử dụng nhạy cảm
Phương pháp phân tử có thể hỗ trợ trong việc chẩn đoán sớm bệnh ung thư cũng
như trong hiệu quả của liệu pháp chống ung thư.
Ứng dụng lâm sàng của marker phân tử trongchẩn đoán, dàn dựng, và quản lý của

bệnh ung thư vú vẫn tiếp tục mở rộng.Các phân tử phát hiện các tế bào khối u và
micrometastases lưu hành có thể giúp phát triển tiên lượng mới đánh dấu. Mở rộng
hoạt động của các nhóm khác nhau đã được thực hiện trên bệnh dư tối thiểu
(ĐBSCL) phát hiện trong máu, tủy xương và các hạch bạch huyết ở bệnh nhân ung
thư có khác nhau giữa các loại ung thư.
Trong10 năm qua, nhiều nhà nghiên cứu đã cố gắng phát hiện các tế bào khối u bí
ẩn trong khối u ác tính bằng cách sử dụng sao chép ngược có độ nhạy cao phản
ứng chuỗi polymerase (RT-PCR) kỹ thuật .
Đây là một kỹ thuật đặc biệt nhạy cảm với mục đích phát hiện các tế bào ung thư
vú huyền bí trong máu, tủy xương, và các hạch bạch huyết của bệnh nhân ung thư
vú.Nó là đơn giản, nhanh chóng, và bán tự động, và là một phương pháp khác để
phát huỳnh quang lai tạo tại chỗ và immunochemistry.RT-PCR đã tạo ra mức độ
nhạy cảm của tế bào khối u trong 1 1.000.000 tế bào bình thường. Nó có thể phát
hiện micrometastases dựa trên sự khuếch đại của mRNA bày tỏ sự độc quyền trong
các bệnh ung thư tế bào tham quan hoặc với số lượng lớn hơn đáng kể so với các tế
bào ung thư không do ung thư địa hoá đến các hạch bạch huyết, cơ quan xa khác
hoặc lưu thông trong máu.
RT-PCR có thể là một công cụ mạnh mẽ cho ngẫu nhiên, thử nghiệm tổ hợp tác
tiềm năng lớn và hỗ trợ tương lai u-marker dựa phương pháp sinh học và trị liệu
bằng gen. thời gian điều tra bệnh lý có thể được giảm thiểu đáng kể hoặc hỗ trợsử
dụng các xét nghiệm RT-PCR tự động.Những xét nghiệm, trong đại đa số, đã được
đạo diễn chống lại các dấu hiệu cụ thể mô. Trong hầu hết các nghiên cứu về ung
thư tuyến tiền liệt, RT-PCR đã có thể cụ thể phát hiện các dấu hiệu cụ thể mô
tuyến tiền liệt trong, tủy xương máu ngoại vi và các hạch bạch huyết của bệnh
nhân với bệnh địa phương hóa và di căn. Melanoma liên quan bảng điểm đã được
phát hiện bởi RT-PCR trong, tủy xương máu ngoại vi và bạch huyết nút của bệnh
nhân có u cục và tiên tiến.
Nhiều tác giả đã chỉ ra một tương quan đáng kể về mặt thống kê giữa dương RT-
PCR và một kết quả kém hơn ở cả khối u ác tính và ung thư tuyến tiền liệt. Trong
ung thư vú, tất cả các dấu hiệu đó đã được thử nghiệm rộng rãi đã được chứng

minh là không cụ thể.
Sự hiện diện hay vắng mặt của nách di căn hạch vẫn là đơn nhất dự báo đáng tin
cậy của các kết quả cuối cùng trong bệnh ung thư vú và các yếu tố quyết định
chính cho các sử dụng các liệu pháp mang tính hệ thống ở bệnh nhân ung thư vú
mới được chẩn đoán.
Mặc dù những bệnh nhân này được coi là có khả năng chữa trị được, một số lượng
đáng kể của họ phát triển ung thư tái phát và tử vong vì căn bệnh của họ trong 5
đến 10 năm, trong đó có gần 30% bệnh nhân có hạch nách âm tính (41). Như đã đề
cập trước đó, huyền bí phổ biến của các tế bào khối u ở bệnh nhân ung thư có thể
hoạt động sau đó có thể dẫn đến hình thành di căn, nhưng nó được bỏ qua bởi dàn
khối u thông thường với mô bệnh học và hóa mô miễn dịch trong các hạch bạch
huyết. Máu và xương tủy hiện không thường xuyên kiểm tra các tế bào khối u ở
những phụ nữ bị ung thư vú.
Tuy nhiên, nó có khả năng, rằng nếu các trang web này cũng thường xuyên được
đánh giá, các tế bào khối u sẽ đượcxác định.Cuối cùng, kiến thức về sự hiện diện
của các tế bào khối u 'trong máu hoặc tuỷ xương có thể ảnh hưởng đến sự sống còn
của bệnh nhân ung thư vú qua phát hiện sớm và bắt đầu điều trị hỗ trợ. Một xét
nghiệm RT-PCR đáng tin cậy đã không được phát triển ung thư vú.Các chỉ điểm
khối u nhắm mục tiêu cho sự phát hiện của RT-PCR ở những bệnh nhân ung thư
vú đã không được xác định là khối u ác tính. Ngoài ra, do tính nhạy cảm cực đoan
củakĩ thuật RT-PCR một giá trị cut-off chấp nhận định nghĩa sự hiện diện của khối
u hay không vẫn chưa được thành lập. Tuy nhiên, nó được chấp nhận rộng rãi rằng
các phát hiện của các dấu hiệu của khối u và mRNA các giao thức thử nghiệm
cũng xác định rất có thể cải thiện độ nhạy, độ đặc hiệu, và độ tin cậy của hệ thống
xét nghiệm RT-PCR.
Các khối u vú bao gồm tập hợp các tế bào khác nhau với mức độ biểu hiện gen
khác nhau. Vì vậy, các loại tế bào chiếm ưu thế hoặc di căn của nó có thể không
thể hiện một dấu ấn đặc biệt.Vì vậy, người ta tin rằng multimarker phương pháp
tiếp cận với một bảng điều khiển của mRNA dấu khối u cụ thể có thể cải thiện độ
nhạy và đặc để phát hiện các tế bào khối u qua các thử nghiệm đánh dấu duy nhất ở

bệnh nhân. Hơn nữa, khối u liên tục phát triển về mặt di truyền theo thời gian để
đáp ứng với tổ chức các áp lực và can thiệp điều trị, điều này cho thấy rằng xét
nghiệm marker đơn không thể có khả năng giám sát có hiệu quả tiến triển ung thư.
Thời gian thực định lượng RT-PCR sẽ cho phép theo dõi chính xác về mức độ
đánh dấu mRNA cũng như chính xác so sánh với các tiêu chuẩn nội bộ mRNA
được biết đến.
Hạch di căn được sự tham gia chia tùy vào vi và macrometastases, thường theo
kích thước của khối u tiền gửi, với các điểm cắt dao động 0,2-2,0 mm .Nối tiếp cắt
Cắt và hóa mô miễn dịch xuất hiện để tăng tỷ lệ phát hiện bởi 9-33%. Một bất lợi
nhất định là tồn tại lưu ý cho bệnh nhân có di căn huyền bí như vậy.Việc sử dụng
của cắt nối tiếp mở rộng và mô miễn dịch trên tất cả các hạch bạch huyết ở nách là
quá tốn kém và nhiều lao động để được thực tế. Sentinel hạch bạch huyết (SLN) là
các hạch bạch huyết đầu tiên ở lưu vực nách để nhận di căn từ ung thư vú chính
nếu họ đã xảy ra.Các khái niệm về SLN đã được giới thiệu bởi Cabanas (46). Các
SLN dự đoán chính xác các bệnh lý của các còn lại lưu vực nách cho phép phân
tích bệnh lý tập trung của nó .Nếu không SLN không chứa khối u, các cơ hội của
khối u ở các hạch bạch huyết ở nách còn lại là ít hơn1%.Vì vậy, bệnh nhân không
có khối u trong SLN có thể tránh không cần thiết nách bạch huyết mổ xẻ nút
(ALND).
Sinh thiết SLN so với một ALND có ít hơn đáng kể bệnh về bạch huyết, tê cánh
tay, và giảm phạm vi của chuyển động.
Việc đánh giá các SLN tại thời điểm chẩn đoán ban đầu của bệnh ung thư vú có thể
cải thiện khi các phân tử phương pháp dàn dựng hiện nay - phân tích nhiều mRNA
marker RT-PCR,mà sẽ xác định các phân nhóm bệnh nhân có di căn trong SLN
nhưng nghĩ đến được miễn phí của bệnh bằng cách kiểm tra bệnh lý thông thường.
Vì vậy, việc phân tích tế bào micrometastatic mở ra một con đường mới mà theo
đó để đánh giá các yếu tố quyết định phân tửphổ biến của cả hai tế bào khối u sớm
và phát triển tự nhiên tiếp theo thành di căn khai.
Phát hiện các tế bào khối u trong tủy xương đang được coi là yếu tố tiên lượng lâm
sàng liên quan đến ung thư vú.Nhiều nghiên cứu cho thấy rằng khối u tế bàođổ đã

xảy ra trong giai đoạn đầu của bệnh ung thư vú và đã chứng minh một tương quan
đáng kể giữa phát hiện tế bào khối u trong tủy xương và giảm bệnh tật và sự sống
còn tổng thể .Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng bệnh nhân ung thư vú có thể nuôi
dưỡng di căn tủy xương một mình hoặc kết hợp với di căn ở nách.Những nghiên
cứu này cho thấy rằng tình trạng khối u tủy xương có thể là một tiên lượng tốt hơn
chỉ số so với tình trạng hạch bạch huyết ở nách . Kể từ khi các khối u vú có thể
chínhlây lan qua cả các bạch huyết và đường đường máu, nó có thể là bệnh nhân
có thể có di căn đến tủy xương và không hạch nách bạch huyết. Đó là bây giờ rõ
ràng rằng xương tủy là một trong những cơ quan phụ nổi bật nhất để nhận được
các tế bào khối u phổ biến và là một yếu tố quyết định quan trọng đối với sự tham
gia của cơ quan micrometastatic do của nó dễ dàng khả năng tiếp cận và sự vắng
mặt sinh lý bình thường của các tế bào biểu mô.
Hút tủy xương có thể dễ dàng thu được từ các bệnh nhân ung thư vú ở thời điểm
phẫu thuật. các kỹ thuật tính khả thi và ý nghĩa tiên lượng tiềm năng của tủy xương
di căn làm cho đánh giá này cho khối u lan rộng về mặt lâm sàng.
Do đó, nhiều marker Xét nghiệm RT-PCR có thể được sử dụng để phát hiện các
giai đoạn phân tử tủy xương micrometastases không xác định có bệnh lý thông
thường.
Tăng độ chính xác trong chuẩn đoán bệnh bệnh nhân ung thư vú giúp can
thiệp điều trị một cách dứt khoát là những hậu quả có lợi của tiến bộ công nghệ.
Xét nghiệm máu cung cấp một phương pháp xâm lấn tối thiểu để đánh giá sự hiện
diện của các tế bào khối u tuần hoàn có thể phục vụ như là chỉ số để đánh giá nguy
cơ tái phát.Kỹ thuật hình ảnh hiện tại được sử dụng để xác định di căn ung thư vú
thường đòi hỏi một khối u lớn cho phát hiện.Hơn nữa, việc phân tích của mô đủ để
xác định chẩn đoán có thể được liên kết với bệnh tật và chi phí đáng kể tùy thuộc
vào kích thước và vị trí của các tổn thương như đã đề cập trước đó. Vì vậy, các tiện
ích phát hiện các tế bào ung thư trong máu có khả năng cung cấp một lựa chọn
thiết thực, an toàn và hiệu quả với các phương pháp truyền thống của chẩn đoán
bệnh tái phát và / hoặc hệ thống lan rộng.
Trong ung thư tuyến tiền liệt và ung thư ruột kết,kháng nguyên tuyến tiền liệt cụ

thể (PSA) và kháng nguyên carcinoembrionic (CEA) được đo trong máu đã phục
vụ như một công cụ to lớn trong việc quản lý các loại bệnh ung thư tương ứng.Cho
đến nay, nổi đặc trưng chỉ điểm khối u phân tử để phát hiện vú huyền bí các tế bào
ung thư trong máu là hạn chế. Không có khối u ung thư vú có thể được đánh dấu
đo trong máu, được sử dụng để sàng lọc, phục vụ chỉ số như tiên lượng, đo lường
phản ứng với điều trị, hay tái phát tín hiệu sớm của bệnh. Ưu điểm của khối u phát
hiện trong máu là nó có thể đo được nối tiếp trong suốt quá trình của bệnh, không
giống như các hạch bạch huyết và sinh thiết tủy xương. Sự phát triển của một
multiple-
xét nghiệm marker RT-PCR để phát hiện micrometastases trong máu một cách
đáng kể sẽ cải thiện dàn dựng tại thời điểm chẩn đoán của bệnh nhân ung thư vú
cho phép tổ chức sớm các phương pháp điều trị có thể dẫn đến cải thiện sự sống
còn ở những bệnh nhân có tái phát bệnh. Một đáng tin cậy khối u marker ung thư
vú có thể được đo trong máu sẽ có khả năng phát hiện bệnh trước khi nó trở nên rõ
ràng trên lâm sàng trên nhũ ảnh tầm soát hoặc sờ thấy trên khám lâm sàng. Mức
tăng của các khối u có thể dẫn đến nhiều
Thường xuyên theo dõi, kiểm tra thêm của bệnh nhân, hoặc sinh thiết trước các tổn
thương nghi ngờ nhìn thấy trên nhũ ảnh.Nó cũng có thể được sử dụng để theo dõi
hậu phẫu, để xác định phản ứng với hóa trị, và để theo dõi sau điều trị kéo dài. sự
phát triển của một đa-marker xét nghiệm RT-PCR mà sẽ có thể phát hiện
micrometastases trong máu lưu thông xác định chỉ điểm khối u sẽ có tiềm năng
được sử dụng trong trên tình huống nêu trên.
Dấu hiệu tiên lượng mới có thể được thử nghiệm theo cách này rất hiệu quả.Nếu
nghiên cứu chứng minh thành công, đánh dấu có thể được áp dụng cho việc sử
dụng thường xuyên hoặc một mình hoặc, có lẽ nhiều hơn, trong kết hợp với đánh
giá lâm sàng chuẩn. Người ta tin rằng một số phân tử đánh dấu sẽ làm cho quá
trình chuyển đổi từ phòng thí nghiệm đến phòng khám trong những thập kỷ tới với
lợi ích cuối cùng là sự dự đoán tốt hơn và điều trị của bệnh nhân ung thư vú.
Markers khối u
Một khối u được định nghĩa là chất hiện tại / quá mức trong hoặc sản xuất bởi một

khối u (khối u xuất phát), hoặc các máy chủ (khối u liên quan), mà có thể được sử
dụng để phân biệt ung thư từ các mô bình thường.Chỉ điểm khối u được tìm thấy
trong các tế bào, các mô, và các dịch cơ thể chẳng hạn như dịch não tủy, huyết
thanh, huyết tương, và sữa.
Các marker lý tưởng sẽ là hữu ích trong chẩn đoán, dàn dựng và tiên lượng của
bệnh ung thư, cung cấp một ước tính của khối u, và phục vụ cho việc giám sát hiệu
quả điều trị, phát hiện tái phát, nội địa hóa của các khối u, và sàng lọc trong quần
thể nói chung
Hầu hết phát hiện khối u không phù hợp.Lý do cho điều này có thể là tương đối
thiếu độ nhạy và độ đặc hiệu của xét nghiệm có sẵn.Hầu như bất kỳ protein hoặc
chất hóa học có khả năng là một dấu hiệu của khối u. Khi các tế bào khối u phát
triển và nhân lên, một số chất của chúng gia tăng mô khối u và / hoặc bị rò rỉ vào
máu hoặc các chất lỏng khác.
Tùy thuộc vào các khối u đánh dấu, nó có thể được đo trong máu, nước tiểu, phân
và mô. Một số khối u được sử dụng rộng rãi dấu hiệu bao gồm: AFP, HER2 / Neu,
beta-HCG, CA 19-9, CA 27,29 (CA 15-3), CA 125, CEA, và PSA.
Một số chỉ điểm khối u có liên quan đến nhiều loại bệnh ung thư; những người
khác,với ít nhất là một.Một số dấu hiệu khối u luôn tăng cao trong các bệnh ung
thư cụ thể; nhất là ít hơn dự đoán.Tuy nhiên, không có dấu hiệu của khối u là cụ
thể cho bệnh ung thư và hầu hết được tìm thấy trong mức thấp ở người khỏe mạnh,
hoặc có thể được kết hợp với các bệnh không ung thư cũng như ung thư.Chỉ điểm
khối u đã được phân loại như các enzyme, đồng enzyme, hormone, cụ thể protein
màng tế bào, kháng nguyên oncofetal và tế bào cụ thể, các epitope carbohydrate,
sản phẩm oncogene, những thay đổi di truyền, vv . Chỉ có một số ít các thiết lập tốt
chỉ điểm khối u đang được sử dụng bởi các bác sĩ.Nhiều dấu hiệu tiềm năng khác
vẫn đang được nghiên cứu.Có rất nhiều nghiên cứu hiện nay đang cố gắng để tìm
thấy các gen mới có liên quan đến phân tử tín hiệu hoặc protein "nói" các tế bào để
sinh sôi nảy nở, xâm nhập hay di căn.
• AFP và CEA: Có hai kháng nguyên oncofetal chung, alpha-fetoprotein
(AFP) và Kháng nguyên CEA (CEA). Các kháng nguyên oncofetal được đặt tên

như vậy vì chúng được sản xuất bình thường trong sự phát triển của phôi thai và
giảm ngay sau khi sinh.
Tế bào ung thư có xu hướng dedifferentiate, hoặc trở lại một mô chưa trưởng thành
nhiều hơn và bắt đầu tạo ra kháng nguyên bào thai một lần nữa.Kháng nguyên
Oncofetal rất không cụ thể và thể hiện bằng một số lượng lớn các loại ung thư.Tuy
nhiên, chúng được sử dụng cả hai để theo dõi tiến triển của bệnh nhân và phản ứng
của họ để xử lý theo thời gian.
CEA là một glycoprotein bề mặt tế bào và nó là một đánh dấu cho trực tràng, dạ
dày, phổi, và ung thư vú.CEA là nhất hữu ích trong việc điều trị theo dõi (như mức
giảm tương quan với khối u) và có tiện ích trong việc phát hiện tái phát của ung
thư đại trực tràng.Mức độ CEA cao trong ung thư vú không tương quan với lớp
của khối u nhưng rất hữu ích để theo dõi điều trị và phát hiện tái phát.AFP là một
dấu hiệu cho tế bào gan và mầm tế bào (nonseminoma) carcinoma.
Đối với ung thư biểu mô tế bào gan (HCC), độ nhạy của AFP là 98% và độ đặc
hiệu là 65%, làm cho nó đánh dấu hữu ích nhất cho HCC (54).
• Kháng nguyên ung thư (CA) 27,29 tăng trong ung thư vú, buồng trứng và ung thư
phổi, trong thai kỳ bình thường ( ba tháng), bệnh vú lành tính, xơ gan và viêm gan
siêu vi . Đối với ung thư vú tái phát, CA 27,29 có độ nhạy ~ 57% và một đặc trưng
~ 87% .Nó thiếu sự nhạy cảm cần thiết và độ đặc hiệu cho thói quen phát hiện ung
thư vú và không phân biệt đối xử với bệnh nhân ung thư sớm .những người có
bệnh vú lành tính. CA 27,29 gắn liền với việc phát hiện sớm tái phát ung thư vú.
• HER-2 / neu là một thụ thể yếu tố tăng trưởng oncogene mã hóa (tương đồng của
.Yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGF) receptor), còn được gọi là c-erbB-2. Nó biểu
hiện quá mức trong Ung thư vú là một kết quả của 2 khuếch đại proto-oncogene
HER. Nó được đo trong mô từ một sinh thiết bằng cách xét nghiệm miễn dịch của
protein hoặc PCR. sự hiện diện của HER-2 / neu thường gắn liền với một sự tăng
trưởng mạnh mẽ hơn và tiên lượng kém vú và ung thư buồng trứng (57; 58). Nó
cũng có thể giúp xác định những lựa chọn điều trị, dự đoán một lợi ích sống còn
tăng cường từ các liệu pháp của cô 2 mục tiêu (xét bởi Horton, 2002 (59),
Herceptin (trastuzumab), một kháng thể đơn dòng có thể ngăn chặn sự thụ protein

và phát triển ung thư giảm.Nó cũng có thể dự đoán khả năng kháng một số phương
pháp điều trị thông thường.
• Prostate specific antigen (PSA) là các khối u có giá trị nhất cho diagnosisand
quản lý của bệnh ung thư tuyến tiền liệt trong các điều khoản về tính đặc thù cao
và tiện ích .nhưng bây giờ nó được chấp nhận rộng rãi rằng PSA cũng có mặt tại
nhiều nguồn nonprostatic.PSA là một serine protease kallikrein giống như mô tả
đầu tiên trong huyết tương tinh và sau được tìm thấy trong các mô tuyến tiền liệt
và đến một mức độ nhỏ trong sữa và chất lỏng amnionic nó là một sản phẩm của
các tế bào biểu mô của tuyến tiền liệt và được bài tiết vào tinh dịch.
Các đo nồng độ PSA kết hợp với kiểm tra trực tràng cho tất cả những người đàn
ông trên 50 tuổi Ngoài việc sử dụng của nó trong việc kiểm tra, PSA được sử dụng
thường xuyên để theo dõi điều trị ung thư tuyến tiền liệt.Các yếu tố khác ảnh
hưởng đến mức độ PSA ngoài ung thư.
Những người đàn ông lớn tuổi có xu hướng có một PSA cao hơn bình
thường.Ngoài ra những người đàn ông có tuyến tiền liệt lành tính phì đại (BPH) có
nồng độ cao hơn.
• Estrogen receptor (ER) và progesterone thụ (PR): Trong cả trước và
phụ nữ sau mãn kinh, nồng độ của các thụ thể steroid ER và PR có thể dự đoán
những phụ nữ có khả năng được hưởng lợi từ điều trị nội tiết tố. Các phép đo của
ER và PR khuyến cáo sử dụng trong chẩn đoán, tiên lượng và lập kế hoạch điều trị
cho phụ nữ có ung thư vú.ER cho một dấu hiệu của sự đáp ứng với điều trị.Mô từ
một sinh thiết là sử dụng để đo các thụ thể estrogen. Hầu hết các bệnh ung thư vú ở
phụ nữ sau mãn kinh là ER dương tính, có nghĩa là họ yêu cầu estrogen để phát
triển.Những ER dương tính bệnh ung thư vú ít hung hăng hơn ER bệnh ung thư vú
âm tính, được tìm thấy thường ở trướcphụ nữ mãn kinh.
• P53 là một gen ức chế khối u đó bị đột biến hoặc thay đổi trong hơn 50% của các
khối u. Nghiên cứu p53 như một khối u đã giúp các nhà nghiên cứu hiểu làm thế
nào các khối u hình thức, nhưng đo mức p53 ở bệnh nhân ung thư đã không được
chứng minh để dự đoán sự khác biệt trong sự tồn tại hay chất lượng cuộc sống. p53
đã được chỉ ra là có trách nhiệm đối với tamoxifen kháng ung thư vú cho thấy rằng

nó có thể can thiệp vào đáp ứng điều trị .
• cathepsin-D: Nồng độ enzyme lysosome này có thể cho thấy vú ung thư. Không
có đủ thông tin để khuyến cáo sử dụng các mức cathepsin-D để làm cho quyết định
điều trị cho bệnh nhân ung thư vú di căn hay tiểu học và đặc biệt là để chẩn đoán
bệnh nhưng các nghiên cứu đã chỉ ra mối liên hệ với giảm bệnh và tồn tại của bệnh
nhân ung thư vú .Các nhà nghiên cứu tiếp tục làm việc trên đường phân tử cụ thể
liên quan oncogenesis, khối u, sự tiến triển của khối u, vv để khám phá marker
phân tử mới rằng có thể có một tiềm năng được sử dụng thường xuyên trong các
hoạt động y tế của bệnh ung thư vú.Kỹ thuật phòng thí nghiệm để nghiên cứu các
mốc tiên lượng tiềm năng đang phát triển nhanh chóng ở cả gene và protein.Hầu
hết các kỹ thuật hiện nay cho phép các phân tích của tươi hoặc mô lưu trữ. Một số
dấu hiệu mới được phát hiện những dấu hiệu liên quan đến chu kỳ tế bào rối loạn
điều hòa (cyclin D1, p16INK4a, p14ARF), sự xâm lấn của khối u (VEGF, yếu tố
VIII kháng nguyên liên quan, Cox-2), mô đệm vú tương tác biểu mô (UPA và liên
quan protein,E-cadherin, integrin b1), vv
Danh sách tài liệu của dấu hiệu ung thư vú là tiềm năng mở rộng mỗi ngày hứa
hẹn những khám phá giá trị của cột mốc mới và sử dụng chúng trong thiết bị lâm
sàng
microarray
Tỷ lệ sống sót của bệnh ung thư vú được cải thiện trong những năm 1900.Họ là
liên tục tăng bây giờ có lẽ là kết quả của việc phát hiện sớm, dàn dựng tốt hơn và
cải thiện điều trị. Người ta cho rằng sự tái phát và tỷ lệ tử vong là tỷ lệ cao do
nghèo đầu kỹ thuật phát hiện.Theo Hiệp hội Ung thư Hoa Kỳ, tỷ lệ tử vong của mẹ
ung thư giảm trong thập kỷ vừa qua với mức giảm lớn nhất ở phụ nữ trẻ hơn.
Những xu hướng này phần nào khích lệ chủ yếu liên quan đến việc sàng lọc kỹ
thuật và sự gia tăng tiếp trong chẩn đoán ở giai đoạn sớm, khi hầu hết các bệnh ung
thư được điều trị thành công nhiều hơn.Hiệu quả Thật không may, hầu hết các
phương pháp điều trị hiện nay đã hạn chế trong chữa bệnh giai đoạn cuối. Do đó,
sẽ tiếp tục có một nhu cầu để phát triển mới phương pháp tiếp cận để chẩn đoán
ung thư vào đầu khóa học lâm sàng, điều trị hiệu quả hơn của nó giai đoạn tiên

tiến, dự đoán phản ứng của khối u để điều trị, và cuối cùng là ngăn ngừa bệnh ung
thư
. Một sự hiểu biết tốt hơn về cách nhất định gen và protein được mã hóa của họ
đóng góp khởi phát bệnh và tiến triển của khối u và làm thế nào chúng ảnh hưởng
đến phản ứng của bệnh nhân phương pháp điều trị sẽ là cách duy nhất để thực hiện
những mục tiêu này. Thời đại của chúng ta về di truyền, sinh học, sinh hóa và đổi
mới cung cấp cho các cơ hội nổi bật để giải quyết các câu hỏi phát hiện cơ sở phân
tử của ung thư. Microarray DNA là một trong những hứa hẹn nhất và
công nghệ mạnh mẽ trong lĩnh vực này trở thành một công cụ quan trọng trong
lĩnh vực y sinh học và tái định hình sinh học phân tử. Dữ liệu trình tự một phần
cho hàng ngàn gen đã được tạo ra do quy mô lớn nỗ lực của dự án giải trình tự bộ
gen của con người Vai trò gen này trong quá trình sinh học khác nhau vẫn chưa
được làm sáng tỏ. Xác định gen biểu hiện, tức là so sánh các mô hình biểu hiện ở
các mô khác nhau và giai đoạn phát triển, tại các tiểu bang bình thường và bệnh tật,
hoặc trong biệt trong điều kiện in vitro, là một bước tiến lớn trong việc hiểu những
vai trò này. RT-PCR, xét nghiệm bảo vệ RNase, và Phân tích southern blot có thể
thực hiện được các mục tiêu nêu trên, nhưng các phương pháp này tập trung trên
chỉ là một vài gen tại một thời điểm.Sử dụng microarray, một thí nghiệm lai duy
nhất có thể tạo ra một hồ sơ cá nhân biểu hiện cho hàng trăm ngàn người của gene.
Khả năng phân tích mức độ biểu hiện của hàng ngàn gen trong các thí nghiệm sử
dụng DNA đơn microarray được thay đổi cách chúng ta làm nghiên cứu
Lịch sử của microarray bắt đầu cách đây 25 năm với Southern blot, mà giới thiệu
các kỹ thuật cơ bản của neo axit nucleic để hỗ trợ vững chắc cho phân tích bởi
lai .Một microarray DNA là một sự sắp xếp có trật tự của DNA đã biết hoặc chưa
biết mẫu gắn liền với một sự hỗ trợ vững chắc.Mỗi chỗ DNA trên microarray
thường ít hơn 200 mM trong đường kính và một mảng toàn bộ thường có chứa
hàng ngàn điểm. Nhiều định dạng thiết kế khác nhau là có thể.Các mẫu gắn liền
với sự hỗ trợ vững chắc có thể được oligonucleotide nhỏ, cDNA hoặc các trình tự
gen. RNA được phân lập từ mẫu,ngược lại phiên âm ra cDNA và dán nhãn.Sau đó,
nó được lai trên microarray và hình dung bằng các kỹ thuật khác nhau.

Phạm vi của các ứng dụng công nghệ microarray là đã rất lớn.Trong khi gene-biểu
hiện profiling hiện là ứng dụng microarray chi phối, microarray cũng là ngày càng
được sử dụng trong chẩn đoán phân tử pharmacogenomics và nghiên cứu. Các phát
triển của microarray DNA (hay "chip ADN") kết hợp với hệ gen của con người
Các nghiên cứu đã hứa sẽ được sử dụng trong sự phát triển của một phân loại mới
về ung thư bao gồm những hiểu biết quan trọng vào nguồn gốc, sự tiến triển, tiên
lượng và đáp ứng với điều trị trên cơ sở biểu hiện gen. Genome biểu hiện của bệnh
profiling trạng thái mở ra một cửa sổ mới để phát hiện ra những dấu hiệu bệnh học
phân tử và lâm sàng theo dõi bệnh nhân.Cải tiến lớn của thư viện DNA công nghệ
cơ bản, PCR và lai tạo đã đến với nhau trong sự phát triển của microarray DNA.
Hiện nay microarray DNA có sẵn được thiết kế cẩn thận để đưa gen đang quan tâm
đến các nhà nghiên cứu trong lĩnh vực ung thư vú.Việc sử dụng các kỹ thuật mảng
DNA tại cho phép phân tích đồng thời của các mức độ biểu hiện mRNA của hàng
ngàn gen trong các dòng tế bào ung thư vú và ung thư vú để giải quyết các khía
cạnh khác nhau liên quan ung thư vú. Sử dụng microarray DNA nhà nghiên cứu đã
cố gắng xác cụm gen không được công nhận bởi các kỹ thuật hiện bệnh lý có sẵn
để làm sáng tỏ mô hình biểu hiện gen và sự sống còn của bệnh nhân ung thư vú để
điều tra DNA biến thể sao chép số lượng các dòng tế bào ung thư vú và ung thư để
kiểm tra in vivo biến đổi phân tử của bệnh ung thư vú , để xác định tác động toàn
cầu của gen bản sao ,biến thể số lượng và tiết lộ những gen mới được khuếch đại
và dự đoán ung thư vú ,đáp ứng điều trị Có rất nhiều nghiên cứu khác sử dụng vi
DNA để tiết lộ những câu hỏi về hiện tượng ung thư vú, nhưng nó là không thể để
chỉ cho họ tất cả trong chương này. Nó đang trở nên rõ ràng rằng tiếp tục tiến bộ
trong các toàn diện.
Phân tích các sản phẩm protein kết hợp với các phương pháp đã được giới hạn về
đo lường của mRNA biểu hiện cuối cùng có thể phát hiện ra cơ sở phân tử của ung
thư khác nhau như cũng như ung thư vú làm sáng tỏ câu hỏi về vấn đề này không
đếm được.
Mục tiêu của dự án
Mục tiêu chung của nghiên cứu này là để góp phần chẩn đoán được cải thiện, tiên

lượng, và kết quả dự đoán của bệnh ung thư vú thông qua việc sử dụng các phân tử
tiến bộ sinh học trong việc phát hiện và định lượng nhiều chỉ điểm khối u mRNA.
Giả thuyết của chúng tôi là sử dụng kỹ thuật PCR phát triển tốt thời gian thực sẽ
cải thiện phát hiện các tế bào ung thư.Ngoài ra, việc sử dụng real-time PCR kết
hợp với profiling phân tử của ung thư thông qua việc sử dụng các hóa DNA nên
cuối cùng cung cấp một bộ đầy đủ các công cụ phân tử để phát hiện cũng như đặc
tính của vú khối u di căn.
Mục tiêu đầu tiên của dự án này là phát triển và đánh giá các xét nghiệm RT-PCR
dựa trên phương pháp TaqMan huỳnh quang để phát hiện sớm và định lượng nhiều
chỉ điểm khối u mRNA trong máu, tủy xương và hạch bạch huyết của bệnh ung thư
vú bệnh nhân.Việc sử dụng tự động, thời gian thực cho phép PCR để phát hiện
cũng như định lượng mức độ tương đối của nhiều mRNA khối u so với invariable.
"Dọn dẹp" mRNA.Công việc này là một sự tiếp nối trực tiếp các công việc trước
đây thực hiện bởi Tiến sĩ Peter Bostick .Trong các nghiên cứu ban đầu, Tiến sĩ
Bostick và đồng nghiệp cho thấy các tiềm năng phát hiện các dấu hiệu mRNA cụ
thể bằng cách thông thường RT-PCR và Southern Blot
phân tích các mẫu ung thư vú được lấy từ các hạch bạch huyết trọng điểm và máu
lúc đầu.Dấu hiệu bao gồm Kháng nguyên CEA (CEA), cytokeratin 19 (CK 19),
CK 20,tiêu hóa khối u liên quan đến kháng nguyên 733,2 (733,2 GA) và mucin-1
(MUC-1). CEA,CK 19, và MUC-1 đã được phát hiện một cách hiệu quả bởi hóa
mô miễn dịch, tuy nhiên, phát hiện của các mRNA không có giá trị chẩn đoán là
dấu mốc mRNA để phát hiện micrometastases bằng xét nghiệm RT-PCR, bởi vì họ
đã bày tỏ trong tương đối lớn
Số tiền trong cả các nút máu và bạch huyết của các cá nhân không bị ung thư. dữ
liệu về CK20 đã không thuyết phục và các thí nghiệm bổ sung được bảo hành để
xác định liệu CK20 có thể được sử dụng như một dấu hiệu của khối u mRNA chẩn
đoán Các mức độ biểu hiện của chỉ điểm khối u mRNA C-Met, beta1 4GalNAc-T,
và P97 cũng được so sánh. Trong khi đó, cả ba chỉ điểm khối u đã được thể hiện
trong 43% các khối u histopathologically sentinel-free.các nút, các mức độ mRNA
cao hơn đáng kể ở những bệnh nhân có gia đình hoặc lịch sử trước ung thư vú, ung

thư biểu mô xâm nhập lobular, estrogen khối u thụ âm, hoặc một cao hơn Bloom-
Richardson điểm. Đó là kết luận rằng nhiều dấu hiệu RT-PCR và Xét nghiệm
Southern blot cải thiện việc phát hiện di căn huyền bí trong các hạch khi so với
thông thường hematoxylin và eosin nhuộm và hóa mô miễn dịch phân tích.Biểu
hiện của tất cả các dấu mRNA 3 khối u ở các hạch tương quan với các yếu tố tiên
lượng bệnh lý clinico-nghèo.
. Trong các nghiên cứu khối u ác tính, Tiến sĩ và Bostick các đồng nghiệp phát
hiện di căn so huyền bí trong các hạch của u ác tính bệnh nhân bằng các
hematoxylin và eosin nhuộm và hóa mô miễn dịch để phát hiện di căn bằng xét
nghiệm nhiều mRNA marker RT-PCR.Các mức MAGE 3, MART-1, và tyrosinase
mRNA phát hiện bằng RT-PCR có tương quan với hematoxylin và eosinnhuộm
hóa mô miễn dịch và xét nghiệm kết quả, yếu tố tiên lượng tiêu chuẩn, và disease-
tồn tại miễn phí. Bệnh nhân có các nút histopathologically melanoma-free sentinel
những người nhiều mRNA marker tích cực tăng nguy cơ bị tái phát, trong khi bệnh
nhân là đa-mRNA marker tích cực với histopathologically chứng di căn trong hạch
có nguy cơ lớn nhất tái phát bệnh, kết luận rằng hematoxylin và eosin nhuộm hóa
mô miễn dịch và đánh giá thấp lệ thực sự của khối u ác tínhdi căn.Nhiều biểu hiện
marker-mRNA trong các hạch chính xác hơn phản ánh micrometastases u ác tính
và cũng là một yếu tố dự báo mạnh mẽ hơn của các bệnh tái phát so với
hematoxylin và eosin nhuộm hóa mô miễn dịch và một mình.
Trong một xét nghiệm RT-PCR đa marker u ác tính, số lượng dấu RT-PCR phát
hiện trong máu là một yếu tố dự báo độc lập của bệnh tái phát đáng kể dự đoán tái
phát bệnh trong 2, 3, và 4 năm theo dõi.Phát hiện phân tử của các tế bào khối u
tuần hoàn, đặc biệt là phương pháp marker đa-mRNA, có ý nghĩa giá trị tiên lượng
trong việc xác định sự tái phát bệnh sớm và có thể có ích cho phân tầng bệnh nhân
để điều trị hỗ trợ.Phương pháp phân tử mới hơn như thời gian thực microarray
lượng TaqMan RT-PCR và cDNA đã được sử dụng trong những tính khả thi
nghiên cứu để đánh giá tiềm năng tương đối của các phương tiện chẩn đoán phát
hiện chỉ điểm khối u ung thư vú trong mRNA mẫu của bệnh nhân.
Các chỉ điểm khối u sau mRNA, một số trong đó cũng được sử dụng bởi

Dr.Bostick, đã được lựa chọn để phân tích đa marker TaqMan: (I) MAGE 3 (kháng
nguyên khối u ác tính; (II) HER2 / NEU (yếu tố tăng trưởng biểu bì nhân thụ 2);
(III) MGB 1(mammoglobin 1); (IV) CK 20 (cytokeratin 20); (V) PSA (kháng
nguyên tuyến tiền liệt cụ thể); và(VI) HPR (heparanase). Tập hợp các dấu hiệu đã
được lựa chọn cho đa marker khảo nghiệm trên cơ sở dữ liệu được xuất bản có sẵn
của biểu và đặc trưng của mỗi điểm đánh dấu trong khối u nguyên phát và di căn
.MAGE (khối u ác tính kháng nguyên) là protein kháng nguyên mô bình thường
compartmentalized trong các tế bào tinh hoàn mà đóng một vai trò quan trọng
trong giai đoạn đầu của sự sinh tinh.Demethylation gây ra các kháng nguyên
MAGE trong các tế bào, cho thấy rằng gen MAGE làquan trọng phát triển thể gen
quy định kiểm soát methyl hóa. Như vậy, di truyềnsự bất ổn trong các tế bào gây ra
mất kiểm soát Methyl hóa này có thể dẫn đến việc ưu đãi biểu hiện của gen MAGE
trong tế bào ung thư. MAGE gen được ưu tiên thể hiện trong nhiều bệnh ung thư
khác nhau và phát hiện ở cả cấp độ mRNA và protein (được công nhận bởi tự thân
tế bào lympho T tiêu tế bào (CTL). MAGE 3 gen là một thành viên của gen
MAGE .gia đình của khối u kháng nguyên thể hiện ở nhiều khối u của nhiều loại,
chẳng hạn như khối u ác tính ,,ung thư biểu mô buồng trứng , ung thư biểu mô tế
bào gan , đầu và cổ có vảy,ung thư biểu mô , ung thư phổi và ung thư vú , nhưng
không phải trong các mô bình thường ngoại trừ tinh hoàn.
Sự kết nối của HER 2 đến kết quả ung thư vú đã được ghi nhận tương đối lâu.Như
đã đề cập trước đó, trong ung thư vú, khuếch đại 2 HER / quá mức tương quan với
tái phát trước đó, là miễn phí cho bệnh ngắn hơn và sự sống còn tổng thể dự đoán
cho một kết quả nghèo lâm sàng .HER 2 được coi là một quan trọng trên lâm sàng
phân tử và thử nghiệm cho HER 2 bất thường đã là một phần của việc đánh giá
bệnh nhân thường xuyên ở nhiều nơi trên thế giới.
Mô miễn dịch (IHC) và huỳnh quang tại chỗ lai (FISH) là phổ biến nhất 2 bài kiểm
tra HER sử dụng và hướng dẫn họ ung thư vú điều trị.Họ cho thấy một mức độ cao
của sự phù hợp, nhưng hiện nay chưa có tiêu chuẩn vàng để thử nghiệm HER
2.Việc xem xét lại bởi Dowsett et al) tóm tắt các thử nghiệm khác nhau được sử
dụng cho thử nghiệm HER2 thảo luận về những thuận lợi và bất lợi của họ. 2

phương pháp thử nghiệm HER dựa trên RT-PCR là rất hứa hẹn cho việc phát hiện
thường xuyên và định lượng này biểu hiện gen gây ung thư để chẩn đoán ung thư
vú di căn tiểu học và cũng như cho Theo dõi bệnh nhân.Một xét nghiệm RT-PCR
phát triển tốt và xác nhận có thể là một yếu tố công cụ cho 2 thử nghiệm HER với
việc xác định giá trị cut-off và các tiêu chuẩn khác để khảo nghiệm.
Mammoglobin (MGB) là một thành viên của gia đình gen uteroglobin.Nó là tương
đồng với một họ protein được tiết ra trong đó bao gồm tiền liệt rat steroid ràng
buộc protein tiểu đơn vị C3, con người Clara tế bào protein 10 kilodalton, và thỏ
uteroglobin.
Mammoglobin là một gen tương đối gần đây phát hiện ra nhưng nó đã thể hiện lời
hứa để phát hiện ung thư vú.Biểu hiện của nó được giới hạn trong biểu mô tuyến
vú và người lớn đó là thường xuyên upregulated trong dòng nhân tế bào ung thư vú
và tiểu học cũng ung thư vú di căn như .Mammoglobin có thể là một dấu hiệu
huyết thanh tiềm năng chẩn đoán ung thư vú vì nó được tiết và cụ thể là các mô vú.
Cytokeratines (CK), trong đó bao gồm một gia đình multigene 20 polypeptide liên
quan, là thành phần của sợi trung gian của các tế bào biểu mô, trong đó họ là thể
hiện trong các kết hợp khác nhau tùy thuộc vào loại biểu mô và mức độ sự khác
biệt.CK 20 về cơ bản được giới hạn trong biểu mô đường tiêu hóa, các urothelium
và các tế bào Merkel của lớp biểu bì.CK thưa thớt 20 tế bào biểu mô tích cực đã
được ghi nhận trong tuyến ức, phế quản, túi mật, và tuyến tiền liệt.CK 20 được thể
hiện trong nội mạc tử cung và ung thư biểu mô tế bào gan khối u nhưng không
phải trong nội mạc tử cung của bệnh nhân bệnh lành tính hoặc trong các tế bào
máu.
Như đã thảo luận trước đó, PSA là một sản phẩm của các tế bào biểu mô của tuyến
tiền liệt tiết thành tinh dịch.Đối với một số thời gian người ta tin rằng PSA được
độc quyền thể hiện trong tuyến tiền liệt và PSA trong lưu thông phải được tuyến
tiền liệt trong xứ. Điều này đã được cơ sở cho việc sử dụng của PSA là một khối u
ung thư tuyến tiền liệt và cho việc phát hiện này ung thư bằng cách đo mức độ lưu
hành PSA. Như đã đề cập trước, sau đó trở nên rõ ràng rằng PSA được thể hiện
trong các mô nonprostatic. Ngoài ra, kể từ khi PSA là ban đầu được xác định trong

tuyến tiền liệt, nó đã từ lâu đã được coi là phụ nữ, thiếu một tuyến tiền liệt, sẽ
không có PSA lưu hành. Tuy nhiên, với sự ra đời của rất nhạy cảm thử nghiệm nó
đã trở nên rõ ràng rằng có những cấp độ thấp nhưng có thể dò PSA trong lưu thông
của phụ nữ . Biểu PSA cũng đã được báo cáo trong một loạt các khối u. nó có được
phát hiện immunocytochemically trong nhiều khối u ác tính di căn và tiểu học ,
trong ung thư biểu mô buồng trứng chính vv Nhiều người trong các nghiên cứu về
PSA extraprostatic là lấy cảm hứng từ các báo cáo rằng PSA có thể được phát hiện
trong các khối u vú và trong huyết thanh của bệnh nhân với ung thư vú.
Heparanase (HPR) là một enzyme được thể hiện bởi các tế bào khác nhau như tiểu
cầu, bạch cầu, tế bào nội mô và các tế bào cơ trơn.Nó là một Endoglycosidase
(heparin sulfate cụ thể endo-beta-D-glucuronidase) mà sẽ tách sunfat heparan
(HS).
Heparan proteoglycans sulfate (HSPGs) đóng một vai trò quan trọng trong các
thuộc tính tự lắp ráp và rào cản của màng tầng hầm và ma trận ngoại bào. Do đó,
sự phân cắt của sulfate heparin (HS) ảnh hưởng đến tính toàn vẹn và chức năng
nhà nước của các mô và do đó cơ bản bình thường và hiện tượng bệnh lý liên quan
đến di cư và phản ứng với những thay đổi tế bào trong
vi môi trường ngoại bào. Các mRNA và protein heparanase là ưu tiên thể hiện
trong các dòng tế bào di căn và mô người khối u nâng cao
biểu hiện heparanase tương quan với cơ hội gia tăng của di căn của khối u với u
tưới máu và tiên lượng xấu của bệnh nhân ung thư
Mục tiêu tiếp theo là tập trung vào việc sử dụng các mảng DNA có mật độ thấp
có chứa gen tương tác tế bào để phát hiện các dấu hiệu của khối u thêm. Phát hiện
phân tử này công nghệ sẽ giúp xác định nhiều khối u liên mRNA quá mức trong
bệnh nhân ung thư vú ở một thời gian ngắn ngược lại với thời gian khác nhau kỹ
thuật.Nó cũng được dự đoán rằng tùy chỉnh được thực microarray có thể được thực
hiện để bao gồm các dấu mốc mới được phát hiện và hứa hẹn. Đối với các nghiên
cứu khả thi ban đầu microarray nó đã được quyết định sử dụng Atlas mảng di động
tương tác của con người từ Clontech, một cDNA nylon mảng với 265 gen cố định
trên đó. Phân tử tương tác di động như kết dính tế bào protein, protein ngoại bào,

protease, vv đóng vai trò quan trọng trong việc làm trung gian tế bào của tế bào, tế
bào mô và các tương tác ma trận ngoại bào và tế bào tham gia vào việc bình
thường quá trình sinh trưởng tế bào, phân chia, sự phân biệt, di cư, cũng như quá
trình apoptosis.
Những gen cũng rất quan trọng trong nhiều bệnh và các quá trình sinh lý bệnh,
bao gồm cả cuộc xâm lược của khối u và di căn, bệnh viêm khớp dạng thấp, rối
loạn tim mạch, vết thương chữa bệnh, viêm, và một số bệnh thần kinh trung ương.
Nghiên cứu đáng kể đã được thực hiện để khám phá vai trò đặc biệt các protein thể
hiện trong các bệnh ung thư .các danh sách các phân tử tương tác tế bào có thể
phục vụ chỉ điểm khối u như tiềm năng cho đầu chẩn đoán các khối u và di căn của
họ đang tiếp tục mở rộng.
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
Mẫu Acquisition, lưu trữ, và nhận dạng